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Phire® 热启动II DNA聚合酶的性能超越了市场上所有的Taq热启动聚合酶。它反应速度更快,性能更强劲,可以对长片段进行高产量的PCR扩增。这些优点均来源于先进的蛋白质工程技术的改造。Phire热启动II DNA聚合酶带有一个独特的双链DNA结合域,这个结合域可以极大的提高酶与DNA的结合效率,从而缩短延伸时间 (10-15s /kb),增进产量,且与Taq DNA聚合酶相比,保真度提高了2倍。此外,独特的热启动技术使该酶在标准循环温度下即可完全激活,无需额外处理,实现“零时间”激活。这些优点使Phire热启动II DNA聚合酶成为常规和高通量PCR的理想选择。Phire在多种PCR仪上均显示了卓越的性能,包括传统的热循环仪,以及如Piko热循环仪这样的快速PCR仪。优点:
■ 快速热启动:无需额外激活步骤
■ 快速酶反应:扩增速度是热启动Taq酶的4倍
■ 性能强劲:对抑制剂的耐受程度高,最大程度减少了优化步骤
■ 高产量:高效带来高产量
■ 更长的PCR产物:与任何热启动Taq酶相比,可以扩增更长的DNA片段应用:
■ 热启动PCR
■ 常规PCR
■ 非高保真PCR
■ 快速PCR
■ 高通量PCR
完整的PCR实验方案耗时少于传统反应的一半(图1)
将来自五个厂家的热启动DNA聚合酶分别用于扩增一段600bp的人类基因组DNA片段。与化学修饰或使用抗体热启动技术的Taq DNA聚合酶(供应商A-D)相比,使用Phire热启动II DNA聚合酶,PCR实验最多可以快四倍。
更短时间内获得超高产量(图2)
将来自五个厂家的热启动DNA聚合酶用于扩增1.5kb的人类cathepsin K基因。仅用29分钟,Phire热启动II DNA聚合酶即可扩增得到大量的目标PCR产物。相比之下,其他四个重要厂家提供的热启动Taq DNA聚合酶(A-D)不仅耗时长,而且产量偏低。几种高性能酶对比:对比项目 Phusion高保真DNA聚合酶 Phusion热启动II高保真DNA聚合酶 Phusion Flash高保真DNA聚合酶 Phire热启动IIDNA聚合酶 特点 平端或3’A端 平端 平端 平端 平端 目标片段长度 ≤ 20 kb ≤ 20 kb ≤ 20 kb ≤ 7.5 kb 热启动 否 是 是 是 推荐延伸时间 15-30 s/kb 15-30 s/kb 15 s/kb 10-15 s/kb 校正功能 是 是 是 一般 保真度 vs. Taq 52x 52x 25x 2x 形式 单酶 1 √ √ – √ Master mix 2 √ – √ – 试剂盒 3 √ – – – 1. 单酶: DNA聚合酶,缓冲液,DMSO和MgCl2
2. Master Mix:2X master mix
3. 试剂盒:所有必需的PCR反应成分包括对照模板和引物订购信息:
货号 产品名称 规格 F-122S Phire热启动II DNA聚合酶 200 x 50μl rxns (或 500 x 20μl rxns) F-122L Phire热启动II DNA聚合酶 1000 x 50μl rxns (或 2500 x 20μl rxns) 说明书下载
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