在重组蛋白的纯化过程中，常常利用各种亲和标签来纯化所表达的融合蛋白，以满足各种下游实验的需求。在众多标签中，His标签是专门设计用于重组蛋白质的纯化，与其他标签相比有很多明显优势，是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。His标签专为重组蛋白纯化设计，与其它标签相比具有很多优势，如表达方便，分子小基本不影响蛋白的活性等。

通常对His标签重组蛋白的检测都会用特异的一抗或标签抗体来进行。使用特异一抗检测较为灵敏，但是当His标签的重组蛋白非常多时，购买相应的一抗做检测，就其各自的成本及实验优化时间来说都不是最优的方案。常规的标签抗体步骤是使用抗His标签的一抗，然后用酶标的二抗结合，之后使用相应的显色试剂或底物完成Western Blot检测。以上常规的检测方案都需要涉及到完整的一抗、二抗及底物显色步骤，在时间及经济节约上都有一定的缺陷。

KPL利用Ni-NTA可与His组氨酸残基特异性结合的特性，开发了一系列针对His标签蛋白的检测产品以替代现有的His标签抗体及相应的检测方案。在Ni-NTA的镍上标记有HRP或AP，可直接催化底物显色或发光。采用这样的酶标Ni-NTA可以直接与His标签蛋白结合，然后直接显色，省去了一抗及二抗结合洗脱的时间，而且大大提高了检测灵敏度，为His标签蛋白检测提供了一个最优的分析方案。

与传统的His标签抗体检测手段相比，HisDetector™ 具有以下的优势：

• HRP/AP-Ni与His结合，不再需要标签抗体和二抗；
• 可检测4~10个组氨酸不等的His标签且不区分N-或C-端；
• 操作简便更省时，全过程可节省2小时；
• 镍与组氨酸的结合，特异性更强；
• 高灵敏度，可检测pg级蛋白。

HisDetector™ Western Blot Kit试剂盒分AP底物显色试剂盒、HRP底物显色及化学发光试剂盒共三种，试剂盒内提供了酶标记的HisDetector™ Ni-NTA以及WB所需的封闭液、洗脱液以及底物。还有单独的酶标HisDetector™ Ni-NTA提供，分别为HRP及AP标记的Ni-NTA。

作为美国最早实现亲和素纯化二抗商业化的生物公司，同时也是世界上最大的二抗和底物显色系统的生产商。 KPL一直提供高质量的用于分子生物学、免疫学、细胞生物学和体外诊断试剂及用于蛋白和核酸检测的试剂盒。针对于His重组蛋白的检测，KPL有HRP及AP标记的镍-NTA结合物，还有完整的HisDetector 标签蛋白Wester Blot检测试剂盒提供。另外还有多种化学发光和显色底物及相关产品，以及全系列针对不同种属的各种标记的现货二抗。如果您对KPL的产品感兴趣，请致电021-50837765 到上海金畔生物科技有限公司免费索取相关产品资料，或者问询您所感兴趣的产品类型。