什么是生物素化？

生物素化，也称为生物素标记，是将生物素共价连接到蛋白质、核酸或其他分子的过程。生物素化快速、特异，并且由于生物素尺寸小（MW=244.31 g/mol），因此不太可能干扰分子的天然功能。生物素（维生素 H）以高的亲和力、快速的结合速率和高特异性结合链霉亲和素和亲和素，这些相互作用在生物技术的许多领域中用于分离感兴趣的生物素化分子。生物素与链霉亲和素和亲和素的组合可耐受高温、pH 和蛋白水解，这使得在各种环境下捕获生物素化分子成为可能。类似地，多个生物素分子可以与靶蛋白缀合，从而可以组合多个链霉亲和素、亲和素或中性亲和素蛋白分子，提高了检测目的蛋白的灵敏度。有许多生物素化试剂可以利用各种可能的标记方法。由于生物素和链霉亲和素之间的强亲和力，生物素化蛋白质的纯化已广泛用于鉴定蛋白质-蛋白质相互作用和翻译后事件，例如分子生物学中的泛素化。

生物素化试剂和溶解度

生物素化试剂的溶解度极大地影响标记靶蛋白或其他大分子的能力。蛋白质具有基于氨基酸侧链和蛋白质构象的疏水性和亲水性区域，并且这些区域可以基于试剂的溶解度促进或限制生物素化。此外，基于试剂的溶解度，靶蛋白微环境的疏水性可以阻止或允许生物素化。例如，表面生物素化是研究表面分子表达或内体运输的常用方法。它要求生物素化试剂是亲水性的，以防止其穿过疏水性的细胞膜，从而限制生物素标记在细胞表面。所以，合适的生物素化试剂的选择取决于目标氨基酸和蛋白质或大分子的微环境。

生物素化试剂的溶解度基于反应部分、间隔臂或两者的组合的溶解度。一些反应基团本身带电，因此是水溶性的，而不带电的基团则需要进行修饰（例如磺化）。使间隔臂可溶的常见方法是掺入聚乙二醇（PEG），它具有高溶解性和柔韧性。由PEG组成的间隔臂可以使具有不带电反应基团的生物素化试剂变得可溶，或者使具有带电反应基团的生物素化试剂更易溶解。此外，与非生物素化蛋白质相比，含有 PEG 的生物素标签带来的溶解度增加有助于防止生物素化蛋白质在长期储存过程中聚集。

Biochempeg 提供先进的生物素化试剂、用于提高生物稳定性和生物利用度的PEG 生物素、肼化学和点击化学生物素、紫外线可追踪生物素。