ATCC 血管细胞基础培养基介绍

ATCC 血管细胞基础培养基介绍

血管细胞基础培养基是一种无菌、不含酚红的液体组织培养基,旨在用作完整 ATCC 原代细胞解决方案系统中的一个组件。血管细胞基础培养基旨在支持源自正常人大血管的细胞,例如人脐静脉内皮细胞、主动脉内皮细胞或主动脉平滑肌细胞,以及微血管内皮细胞。此外,为了支持血管系统细胞的增殖和铺板效率,血管细胞基础培养基必须补充适当的细胞特异性生长试剂盒。

一般的

  • 具体应用

  • 血管细胞基础培养基是一种无菌、不含酚红的液体组织培养基,旨在用作完整 ATCC® Primary Cell Solutions™ 系统的一个组件。

    该系统旨在支持源自正常人类大血管的细胞,例如人脐静脉内皮细胞、主动脉内皮细胞或主动脉平滑肌细胞,以及微血管内皮细胞。血管细胞基础培养基含有必需和非必需氨基酸、维生素、其他有机化合物、微量矿物质和无机盐。为了支持血管系统细胞的增殖和铺板效率,血管细胞基础培养基必须补充适当的细胞特异性生长试剂盒。

    该系统旨在支持源自人类心血管系统的细胞,包括以下细胞类型:

    源自大血管的内皮细胞

    微血管内皮细胞

    源自大血管的平滑肌细胞

    源自心脏的肌肉细胞


    该系统旨在支持源自正常人类大血管的细胞,例如人脐静脉内皮细胞、主动脉内皮细胞或主动脉平滑肌细胞,以及微血管内皮细胞。血管细胞基础培养基含有必需和非必需氨基酸、维生素、其他有机化合物、微量矿物质和无机盐。为了支持血管系统细胞的增殖和铺板效率,血管细胞基础培养基必须补充适当的细胞特异性生长试剂盒。

    • 原代心肌细胞;正常,人类,ATCC  PCS-120-010

    • 原代主动脉平滑肌细胞;正常,人类,ATCC  PCS-100-012

    • 原发性冠状动脉平滑肌细胞;正常,人类,ATCC  PCS-100-021

    • 原发性肺动脉平滑肌细胞;正常,人类,ATCC  PCS-100-023

    • 原代真皮微血管内皮细胞;正常、人类、新生儿、ATCC  PCS-110-010

    • 原代脐静脉内皮细胞;正常,人类,ATCC  PCS-100-010

    • 原代脐静脉内皮细胞;正常,人类,混合,ATCC  PCS-100-013

    • 原代主动脉内皮细胞;正常,人类,ATCC  PCS-100-011

    • 原代冠状动脉内皮细胞;正常,人类,ATCC  PCS-100-020

    • 原代肺动脉内皮细胞;正常,人类,ATCC  PCS-100-022

    1. 庆大霉素-两性霉素 B 溶液 (ATCC PCS-999-025)

    2. 青霉素-链霉素-两性霉素 B 溶液 ( ATCC PCS-999-002 )

    3. 酚红 ( ATCC PCS-999-001 )

    4. 微血管内皮细胞生长试剂盒-BBE ( ATCC PCS-110-040 )

    5. 微血管内皮细胞生长试剂盒-VEGF ( ATCC PCS-110-041 )

    6. 内皮细胞生长试剂盒-BBE ( ATCC PCS-100-040 )

    7. 内皮细胞生长试剂盒-VEGF ( ATCC PCS-100-041 )

    1. 对于源自大血管的内皮细胞(例如,正常原代人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)、ATCC PCS-100-010、原代脐静脉内皮细胞;正常、人、混合、ATCC PCS-100-013、原代主动脉内皮细胞Cells,ATCC PCS-100-011),用以下试剂盒之一补充血管细胞基础培养基:

    2. 对于源自正常人体组织的微血管内皮细胞(例如,原代真皮微血管内皮细胞;正常、人类、新生儿、ATCC PCS-110-010),用以下试剂盒之一补充血管细胞基础培养基:

    3. 对于源自大血管的平滑肌细胞(例如,原代主动脉平滑肌细胞,ATCC PCS-100-012),用血管平滑肌细胞生长试剂盒(ATCC PCS-100-042)补充血管细胞基础培养基。

    4. 可选媒体补充:

处理信息

  • 处理程序

  • 完整生长培养基的制备

    表 1.如果使用内皮细胞生长试剂盒-BBE (ATCC ® PCS-100-040),请添加每种成分的一定体积: 

    成分

    体积

    最终浓度

    牛脑提取物 (BBE)

    1.0毫升

    0.2%

    重组人EGF

    0.5毫升

    5纳克/毫升

    L-谷氨酰胺

    25.0毫升

    10毫米

    硫酸肝素

    0.5毫升

    0.75 单位/毫升

    氢化可de松半琥珀酸酯

    0.5毫升

    1微克/毫升

    胎牛血清

    10.0毫升

    2%

    抗坏血酸          0.5毫升    50微克/毫升

     

            表 2 . 如果使用内皮细胞生长试剂盒-VEGF (ATCC ® PCS-100-041),请添加每个成分的一定体积:

    成分

    体积

    最终浓度

    重组人VEGF

    0.5毫升

    5纳克/毫升

    重组人EGF

    0.5毫升

    5纳克/毫升

    rh FGF 碱性

    0.5毫升

    5纳克/毫升

    重组人IGF-1

    0.5毫升

    15纳克/毫升

    L-谷氨酰胺

    25.0毫升

    10毫米

    硫酸肝素

    0.5毫升

    0.75 单位/毫升

    氢化可de松半琥珀酸酯

    0.5毫升

    1微克/毫升

    胎牛血清

    10.0毫升

    2%

    抗坏血酸

    0.5毫升

    50微克/毫升

     

           
    表 3
     . 如果使用血管平滑肌生长试剂盒 (ATCC ® PCS-100-042),请添加每个组件的一定体积:

    成分

    体积

    最终浓度

    rh FGF-碱性

    0.5毫升

    5纳克/毫升

    重组人胰岛素

    0.5毫升

    5微克/毫升

    抗坏血酸

    0.5毫升

    50微克/毫升

    L-谷氨酰胺

    25.0毫升

    10毫米

    重组人EGF

    0.5毫升

    5纳克/毫升

    胎牛血清

    25.0毫升

    5%

     

    表 4.如果使用微血管内皮细胞生长试剂盒-BBE (ATCC ® PCS-110-040),请添加每种成分的一定体积: 

    成分

    体积

    最终浓度

    牛脑提取物 (BBE)

    1.0毫升

    0.2%

    重组人EGF

    0.5毫升

    5纳克/毫升

    L-谷氨酰胺

    25.0毫升

    10毫米

    硫酸肝素

    0.5毫升

    0.75 单位/毫升

    氢化可de松半琥珀酸酯

    0.5毫升

    1微克/毫升

    胎牛血清

    25.0毫升

    5%

    抗坏血酸

    0.5毫升

    50微克/毫升

     

           表 5 . 如果使用微血管内皮细胞生长试剂盒-VEGF (ATCC ® PCS-110-041),请添加每种成分的一定体积:

    成分

    体积

    最终浓度

    重组人VEGF

    0.5毫升

    5纳克/毫升

    重组人EGF

    0.5毫升

    5纳克/毫升

    rh FGF 碱性

    0.5毫升

    5纳克/毫升

    重组人IGF-1

    0.5毫升

    15纳克/毫升

    L-谷氨酰胺

    25.0毫升

    10毫米

    硫酸肝素

    0.5毫升

    0.75 单位/毫升

    氢化可de松半琥珀酸酯

    0.5毫升

    1微克/毫升

    胎牛血清

    25.0毫升

    5%

    抗坏血酸

    0.5毫升

    50微克/毫升

     

    表 6.如果使用心肌细胞生长试剂盒 (ATCC ® PCS-120-040),请添加每种成分的一定体积:

    成分

    体积

    最终浓度

    L-谷氨酰胺

    25.0毫升

    10毫米

    胎牛血清

    25.0毫升

    5%

    胎球蛋白

    5.0毫升

    25毫克/毫升

    重组人FGF-b

    0.5毫升

    5纳克/毫升

    重组人胰岛素

    0.5毫升

    5毫克/毫升

    抗坏血酸

    0.5毫升

    50微克/毫升

    重组人EGF/TGF-b1

    0.5毫升

    5 纳克/毫升,30 皮克/毫升

     

    增殖不需要抗菌剂和酚红,但如果需要可以添加。表 7 总结了添加到完整生长培养基中的每种可选组分的建议体积。

    1. 从冰箱中取出一套生长套件;确保所有组件的盖子均已拧紧。

    2. 在将生长套件的组件添加到基础培养基中之前将其解冻。在添加到基础培养基之前,需要在 37°C 水浴中加热 L-谷氨酰胺组分并摇动以溶解任何沉淀物。

    3. 从冷藏处获取一瓶血管细胞基础培养基 (475 mL)。

    4. 用 70% 乙醇喷洒所有生长套件组件小瓶和基础培养基瓶的外表面,以净化它们。

    5. 使用无菌技术并在层流罩或生物安全柜中工作,使用单独的无菌移液器将表 1、2、3、4 或 5 中所示的每个生长套件组件的体积转移到基础培养基瓶中转移。

表 7.添加抗菌剂/抗真菌剂和酚红(可选)

成分

体积

最终浓度

庆大霉素-两性霉素B溶液

0.5毫升

庆大霉素:10 µg/mL

两性霉素 B:0.25 µg/mL

青霉素-链霉素-两性霉素B溶液

0.5毫升

青霉素:10 单位/mL

链霉素:10 µg/mL

两性霉素 B:25 ng/mL

酚红

0.5毫升

33微米

  1. 盖紧生长培养基的瓶子并轻轻旋转内容物以确保溶液均匀。请勿用力摇晃,以免产生泡沫。给瓶子贴上标签并注明日期。

  2. 完整的生长培养基应在 2°C 至 8°C 的黑暗条件下保存(不要冷冻)。在这些条件下储存时,完整培养基可稳定保存 30 天。 

冷冻保存

1. 检查所有容器是否有泄漏或破损。
2. 将基础培养基保存在 2°C 至 8°C 下。不要冻结。避光。使用前加热介质时,温度不要超过 37°C。当在 2°C 至 8°C 的黑暗中储存时,产品在标签上的有效期内保持稳定。

细菌和真菌测试:没有检测到

支原体污染:没有检测到

内毒素:< 0.5 EU/毫升

渗透压:270±10毫渗透压/千克

酸碱度:7.8±0.3

功能测试:增殖率和形态

本产品仅供实验室研究使用。它不适用于任何动物或人类治疗用途、任何人类或动物消费或任何诊断用途。