EvaGreen® 基于染料的 qPCR 预混液 介绍
特征：
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EvaGreen® Dye – 信号比 SYBR® Green 更好，更安全、更环保
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Cheetah™ Hotstart Taq – 在 95°C 下两分钟后全激活，以实现快速循环方案
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配备 2 色跟踪系统，有助于发现移液错误，节省时间、试剂、DNA 样本和 $$$
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可以不使用 ROX 被动染料，使用单独的 ROX 管，或与 ROX 预混合（高浓度或低浓度）
我们的Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR 主混合物是热启动 EvaGreen® 基于染料的主混合物，用于实时 PCR 应用和 DNA 熔解曲线分析。这些预混液可代替任何 SYBR® Green 染料基预混液。 Forget-Me-Not™ EvaGreen® qPCR 主混合物含有低浓度的惰性蓝色染料，使您可以轻松看到含有主混合物的孔。
主混合物可不含 ROX 被动染料，带有单独的 ROX 管，或与 ROX 预混合（高浓度或低浓度）。试剂盒配有 2 色跟踪系统，其中包括 DNA 模板缓冲液（一种深蓝色染料），当与模板混合时，添加模板后会将反应从浅蓝色变为深蓝色（图 1，左）。 2 色跟踪系统可以防止移液错误，避免浪费时间、试剂和珍贵的 DNA 样本。
EvaGreen® 染料
一种 DNA 结合染料，具有非常适合 qPCR 和高分辨率 Melting® (HRM) 分析*的功能。 EvaGreen® 染料通过新颖的“按需释放”机制与 dsDNA 结合，允许在 qPCR 中使用相对较高的染料浓度，而不会产生 PCR 抑制（Mao, et al. 2007. BMC Biotech. 7, 76-91） 。
EvaGreen® 染料的其安全性非常好。 DNA 结合染料本质上是危险的，因为它们有可能引起突变。考虑到这一点，Biotium 的科学家设计了 EvaGreen® 染料，使其无法穿过细胞膜，从而防止染料与活细胞中的基因组 DNA 接触。所有其他商业 PCR 染料只需几分钟即可进入细胞。例如，SYBR® Green I 已被证明比溴化乙锭（一种的诱变剂）具有更大的环境毒性（Ohta, et al. 2001. Mut. Res. 492, 91-97）。独立实验室已证实 EvaGreen 染料不会导致突变、无细胞毒性，并且对水生生物来说是安全的，可以直接丢弃在排水沟中。
基于 EvaGreen® 的预混液的另一个好处是，您可以通过凝胶电泳分析 PCR 产物，而无需在上样缓冲液或凝胶中添加另一种 DNA 结合染料。主混合物中的 EvaGreen® 染料可充当 DNA 预染色剂，允许在电泳后直接观察 DNA 带。
Cheetah™ HotStart Taq
Cheetah™ HotStart Taq DNA 聚合酶是 Biotium 专有的化学修饰热启动 DNA 聚合酶。 Cheetah™ Taq 在室温下全失活，在 95°C 2 分钟后全激活，使其特别适合快速循环 PCR 方案。
qPCR 预混液
Forget-Me-Not™ 通用探针 qPCR Master Mix 是一款高性能产品，适用于基于荧光探针的 PCR 应用，包括定量和 SNP 基因分型。该试剂盒适用于所有基于荧光探针的技术，包括水解探针（例如 TaqMan® 和双标记 BHQ® 探针）和位移探针（例如分子信标）。 Forget-Me-Not™ 通用探针 qPCR Master Mix 在单重和多重反应中显示出出色的结果一致性，具有广泛的仪器兼容性，并且可用于标准和快速方案。如果您的仪器需要 ROX 参考染料，ROX 还提供单独的套件。
该套件包括 40X Forget-Me-Not™ 跟踪缓冲液，其中含有惰性蓝色染料。您可以选择将跟踪缓冲液添加到预混液、DNA 模板中，或者在反应中不使用跟踪缓冲液。在主混合物中添加跟踪缓冲液可以让您轻松区分含有反应混合物的孔和空孔。另一方面，将跟踪缓冲液添加到 DNA 模板样品中可让您在设置 PCR 反应时跟踪已添加模板的反应。
