VITROGEL 水凝胶的多种细胞培养方法
XENO-FREE 生物功能 VitroGel 水凝胶系统适用于许多 3D 细胞培养和应用。选择“即用型”水凝胶系统来优化配方和简单的操作过程,或者选择高浓度水凝胶系统,通过“混合与匹配”和水凝胶的调整来创建定制的微环境。有多种方法可以使用我们的水凝胶系统来满足许多研究需求。为了展示我们的水凝胶的灵活性,我们列出了五种可以使用我们的水凝胶进行的常规细胞培养方法:3D 细胞培养、2D 水凝胶涂层、静态悬浮培养、水凝胶细胞珠以及作为可注射载体。这五种培养方法适用于我们所有即用型 VitroGel 和高浓度 VitroGel 系统。用这些方法培养的细胞可以很容易地收获VitroGel® 细胞恢复解决方案用于下游分析或传代培养。
3D 细胞培养
VitroGel 系统是 3D 细胞培养的理想选择。只需在室温下将 VitroGel 溶液与细胞悬浮液混合,转移到培养板并添加顶部培养基,细胞就可以进行孵育。这种 3D 培养方法实现了完整的细胞封装,从而增强了细胞与水凝胶基质的相互作用。许多下游分析,如药物筛选、免疫荧光分析和细胞毒性测定,可以直接在水凝胶中进行。
二维水凝胶涂层
2D 水凝胶涂层方法非常适合在传统 2D 培养和 3D 细胞封装培养之间架起桥梁。通过在室温下将 VitroGel 溶液与细胞培养基混合并转移至培养板,可以将 VitroGel 作为厚层水凝胶涂覆在培养板的底部。细胞可以直接添加到水凝胶的顶部。 2D 水凝胶涂层方法允许细胞与功能性水凝胶物质相互作用/浸入其中,并保持将表面暴露于顶部介质的性能。当细胞在水凝胶表面迁移/聚集时,会发生快速细胞球体形成。 2D 水凝胶涂层方法可作为与 3D 细胞培养方法结合的替代共培养方法:将一种细胞类型封装在水凝胶中进行 3D 培养,然后在水凝胶顶部添加另一种类型的细胞作为 2D 涂层培养。 2D 涂层 VitroGel 还可以成为研究细胞侵袭、血管生成测定和逐层共培养的强大系统。除了 2D 厚凝胶涂层外,VitroGel 还可以稀释用于薄凝胶涂层方法。
静态悬浮培养
3D静态悬浮培养方案是VitroGel水凝胶系统的培养方法。通过简单地将 VitroGel 溶液和细胞混合形成软水凝胶,研究人员可以进一步直接将水凝胶-细胞混合物与额外的培养基混合,制成水凝胶-细胞悬浮液。水凝胶基质分散在细胞培养基中可以增加整个混合物的粘度,并帮助细胞在不需要强烈搅拌的情况下保持悬浮状态。 3D静态悬浮培养物易于制备,并且通过简单地改变水凝胶和细胞培养基的混合比例,可以灵活地调整各种细胞类型和接种密度的最终粘度。例如,研究人员可以使用固定的2:1(水凝胶溶液:细胞,v/v)来制备水凝胶-细胞混合物,然后将其与细胞培养基以1:1至1:10的比例混合,以获得不同粘度的水凝胶-细胞混合物。最终的水凝胶细胞悬浮液。这种培养方法可轻松用于实验室规模或大型工业规模的细胞培养规模扩大。研究实验室不需要花哨的生物反应器或昂贵的培养容器。我们将其用于干细胞球体和HEK293 球体的生成。该方法还适用于我们所有即用型 VitroGel 和高浓度 VitroGel 系统。 VitroGel 静态悬浮培养产生的细胞可以通过离心轻松收获。
水凝胶细胞珠
作为一种可注射水凝胶系统,VitroGel 具有剪切稀化和快速恢复流变特性。水凝胶溶液可以与细胞混合形成软水凝胶,然后可以将其作为液滴添加到细胞培养基中以形成水凝胶-细胞珠。这种培养方法不仅将细胞封装在水凝胶基质内以增强细胞与基质的相互作用,而且还允许整个水凝胶-细胞珠悬浮在细胞培养基中以获得最佳的培养基渗透。研究人员可以通过改变添加到培养基中的液滴的体积来调整水凝胶珠的大小。对于需要牢固附着才能生长的细胞,如间充质干细胞 (MSC),这种水凝胶细胞珠培养方法是替代微载体进行 3D 细胞放大的方法。由于具有优良的介质和氧气渗透性,在水凝胶珠中培养的细胞可以在长期培养中保持高细胞活力。该方法适用于我们所有即用型 VitroGel 和高浓度 VitroGel 系统。 VitroGel 水凝胶细胞珠培养物产生的细胞可以通过 VitroGel 细胞回收溶液收获。
可注射载体
VitroGel 是一种出色的动物注射用注射载体。在机械剪切力(例如通过注射器注射)的作用下,水凝胶发生凝胶-溶胶转变并变成自由流动状态。然而,一旦剪切力停止,水凝胶的机械强度可以通过溶胶-凝胶转变迅速恢复并再次变成水凝胶状态。凭借这种可注射特性,VitroGel 可用于 体内细胞/药物递送,以进行细胞治疗或控释。只需在室温下将水凝胶溶液与细胞/化合物混合,水凝胶即可在 20 分钟内准备好注射。除了即用型 VitroGel 之外,研究人员还可以使用 VitroGel 高浓度水凝胶来获得不同水凝胶强度的可注射水凝胶。