cortecnet的大肠杆菌蛋白表达简介

细菌中的蛋白质表达是迄今为止制备稳定同位素富集蛋白质样品的常用方法。大肠杆菌是表达重组蛋白常用的生物体，是一种培养时间短的宿主。大肠杆菌能够使用简单的分子技术进行直接的基因操作，并且细胞对氘表现出良好的耐受性，从而可以使用13 C、 15 N 和2 H

在厌氧条件下，大肠杆菌可以使用葡萄糖、乙酸盐和甘油作为其碳源以及铵盐作为其氮源来合成所有 20 种必需氨基酸。使用标记的基本介质试剂，例如氧化氘、 15 N 铵盐、 13 C 6、D 7或13 C 6 /D 7标记的葡萄糖，可以直接生产均匀标记的蛋白质样品。

使用相应的标记试剂获得均匀的标记

I SOGRO 是一种源自藻类裂解物的复杂粉末状丰富培养基，旨在增强细菌中的蛋白质表达。 ISOGRO 粉末具有13 C、 15 N 和2 H 标记的各种组合，可用作独立培养基或基本培养基的补充，以提高蛋白质产量。

A。 p38 生长的 SDS-PAGE。数据由美国大学化学/生物化学系 Jeffrey W. Peng 博士提供美国印第安纳州圣母院。 b. pLysS 中的心肌肌钙蛋白 cTnC(1-89)。细胞在 37°C 摇瓶中生长。红色曲线是 ISOGRO 补充的最小介质，黑色曲线是单独的最小介质。

如果使用大肠杆菌无法成功进行蛋白质表达，则可以考虑其他选择，例如昆虫细胞、哺乳动物细胞或无细胞表达系统。