Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的细胞凋亡检测试剂盒，我们的Cell Meter 检测试剂盒是一套用于检测细胞生存力的工具。有多种参数可用于检测细胞活力。该特定试剂盒旨在通过测量磷脂酰丝氨酸（PS）的转运来监测细胞凋亡。在凋亡中，PS转移到质膜的外部小叶。磷脂酰丝氨酸在细胞表面的出现是细胞凋亡初始/中间阶段的普遍指标，可以在观察到形态变化之前进行检测。该试剂盒使用与PS特异性结合的荧光膜联蛋白V。已经证明膜联蛋白V缀合物选择性结合PS，使用带有FITC通道的流式细胞仪（绿色荧光）优化了此特定的检测试剂盒，以检测细胞凋亡。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter Annexin V凋亡检测试剂盒。

点击查看光谱 

样品实验方案

简要概述

用测试化合物（200μL/样品）制备细胞
添加Annexin V-iFluor 488原液
在室温下孵育30-60分钟
使用FL1通道的流式细胞仪分析细胞（Ex / Em = 490/525 nm）

操作步骤

1.用测试化合物处理细胞一段时间（用喜树碱处理的Jurkat细胞4-6小时）以诱导细胞凋亡。注意：膜粘附细胞的膜联蛋白V流式细胞术分析未经常检测，因为在细胞分离或收获期间可能发生特定的膜损伤。然而，Casiola-Rosen等人先前报道了利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法。和van Engelend等人。

2.离心细胞，得到1-5×10⁵个细胞/管。

3.将细胞重悬于200μL测定缓冲液（组分B）中。

4.将2μL膜联蛋白V-iFluor 488（组分A）加入细胞中。

5.可选：加入2μL100X碘化丙啶（成分C）用于坏死细胞。

6.在室温下孵育30至60分钟，避光。

7.可选：在使用流式细胞仪分析细胞之前，添加200至300μL的测定缓冲液（组分B）以增加体积。

8.使用具有FL1通道的流式细胞仪（Ex / Em = 490 / 525nm）监测膜联蛋白V-iFluor 488的荧光强度。当碘化丙啶加入细胞时，使用FL2通道测量细胞活力。

数据分析

        在活的非凋亡细胞中，膜联蛋白V-iFluor 488检测非诱导细胞中的先天性细胞凋亡，其通常为所有细胞的2-6％。 在凋亡细胞中，膜联蛋白V-iFluor 488与磷脂酰丝氨酸结合，磷脂酰丝氨酸位于细胞膜的外部小叶上，因此导致染色强度增加。

参考文献

Combined Treatments of Magnetic Intra-Lysosomal Hyperthermia with Doxorubicin Promotes Synergistic Anti-Tumoral Activity.
Authors: D Hajj Diab El, P Clerc, N Serhan, D Fourmy, V Gigoux
Journal: Nanomaterials (Basel, Switzerland) (2018)

In situ polymerizable hydrogel incorporated with specific pathogen-free porcine platelet-rich plasma for the reconstruction of the corneal endothelium
Authors: Yung-Kai Lin, Ruchi Sharma, Hsu Ma, Wen-Shyan Chen, Chao-Ling Yao
Journal: Journal of the Taiwan Institute of Chemical Engineers (2017)

Novel regulations of MEF2-A, MEF2-D, and CACNA1S in the functional incompetence of adipose-derived mesenchymal stem cells by induced indoxyl sulfate in chronic kidney disease
Authors: Duyen Thi Do, Nam Nhut Phan, Chih-Yang Wang, Zhengda Sun, Yen-Chang Lin
Journal: Cytotechnology (2016): 2589–2604

Shear stress-induced alteration of epithelial organization in human renal tubular cells
Authors: Damien Maggiorani, Romain Dissard, Marcy Belloy, Jean-Sébastien Saulnier-Blache, Audrey Casemayou, Laure Ducasse, Sandra Grès, Julie Bellière, Cécile Caubet, Jean-Loup Bascands
Journal: PloS one (2015): e0131416

Targeting a G-protein-coupled receptor overexpressed in endocrine tumors by magnetic nanoparticles to induce cell death
Authors: Claire Sanchez, Darine El Hajj Diab, Vincent Connord, Pascal Clerc, Etienne Meunier, Bernard Pipy, Bruno Payré, Reasmey P Tan, Michel Gougeon, Julian Carrey
Journal: Acs Nano (2014): 1350–1363

相关产品