胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物 FITC-C6-LEHD-FMK 绿是美国AAT Bioquest生产的荧光底物，的caspases在凋亡中占有主导地位，FITC-C6-LEHD-FMK能提供简便灵敏的方法对活细胞中对的caspase-9进行检测。FITC-C6-LEVD-FMK在凋亡细胞中具有通透性，性和不可逆结合的caspase-9的特点，是带有FITC标记的特异性Caspase 9抑制剂。FITC标记能直接通过荧光显微镜，流式细胞仪或者荧光酶标仪测定的Caspase 9。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的胱天蛋白酶Caspase 9荧光底物 FITC-C6-LEHD-FMK 绿。

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操作方法

以下协议仅提供指导，应根据您的特定需求进行修改。

使用AMC，AFC，pNA，R110和ProRed底物的常规解决方案胱天蛋白酶测定

1.在DMSO中准备10 mM的储备溶液。

2.如下准备2X半胱天冬酶底物（50 µM）分析溶液：50 µL底物原液，100 µL DTT（1M），400 µL EDTA（100 mM），10 mL Tris Buffer（20 mM），pH = 7.4。

3.将等体积的半胱天冬酶标准品或样品与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合，并在室温下孵育至少1小时。

4.使用荧光酶标仪监测荧光，或使用酶标仪监测吸光度。

使用细胞渗透性FMK Caspase探针的细胞Caspase测定

1.在DMSO中准备2-5 mM的储备溶液。

2.根据需要处理细胞。

3.通过用20 mM Hepes缓冲液（HHBS）在Hanks中稀释DMSO储备溶液（来自步骤2.1），制备2X渗透性半胱天冬酶底物（20 µM）分析溶液。

4.将等体积的处理过的细胞与2X半胱天冬酶底物测定溶液混合（来自步骤2.3），并在37°C，5％CO2的培养箱中孵育细胞至少1小时。

5.用HHBS清洗细胞至少一次。

6.通过流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

使用细胞渗透性FMK Caspase探针进行细胞半胱天冬酶测定（仅适用于＃13470-13476）

1.通过向小瓶中加入50 µL DMSO制备250X储备液。

2.根据需要处理细胞。

3.以1：250的比例将250 X DMSO储备溶液添加到细胞溶液中（例如2 µL至500 µL细胞），并将细胞在37°C，5％CO2的培养箱中孵育1小时。

4.用HHBS清洗细胞至少一次。

5.通过流式细胞仪，荧光显微镜或荧光酶标仪监测荧光强度。

参考文献

Endoplasmic reticulum stress and trophic factor withdrawal activate distinct signaling cascades that induce glycogen synthase kinase-3 beta and a caspase-9-dependent apoptosis in cerebellar granule neurons
Authors: Brewster JL, Linseman DA, Bouchard RJ, Loucks FA, Precht TA, Esch EA, Heidenreich KA.
Journal: Mol Cell Neurosci (2006): 242

Enhanced 15-HPETE production during oxidant stress induces apoptosis of endothelial cells
Authors: Sordillo LM, Weaver JA, Cao YZ, Corl C, Sylte MJ, Mullarky IK.
Journal: Prostaglandins Other Lipid Mediat (2005): 19

P2X7 receptor-mediated apoptosis of human cervical epithelial cells
Authors: Wang Q, Wang L, Feng YH, Li X, Zeng R, Gorodeski GI.
Journal: Am J Physiol Cell Physiol (2004): C1349

Caspase activation during Haemophilus somnus lipooligosaccharide-mediated apoptosis of bovine endothelial cells
Authors: Sylte MJ, Leite FP, Kuckleburg CJ, Inzana TJ, Czuprynski CJ.
Journal: Microb Pathog (2003): 285

Induction of apoptosis by apicidin, a histone deacetylase inhibitor, via the activation of mitochondria-dependent caspase cascades in human Bcr-Abl-positive leukemia cells
Authors: Cheong JW, Chong SY, Kim JY, Eom JI, Jeung HK, Maeng HY, Lee ST, Min YH.
Journal: Clin Cancer Res (2003): 5018

Protein kinase Cdelta amplifies ceramide formation via mitochondrial signaling in prostate cancer cells
Authors: Sumitomo M, Ohba M, Asakuma J, Asano T, Kuroki T, Hayakawa M.
Journal: J Clin Invest (2002): 827

3-m-bromoacetylamino benzoic acid ethyl ester: a new cancericidal agent that activates the apoptotic pathway through caspase-9
Authors: Schlesinger M, Jiang JD, Roboz JP, Denner L, Ling YH, Holland JF, Bekesi JG.
Journal: Biochem Pharmacol (2000): 1693

Human malignant glioma therapy using anti-alpha(v)beta3 integrin agents
Authors: Chatterjee S, Matsumura A, Schradermeier J, Gillespie GY.
Journal: J Neurooncol (2000): 135

Phenylephrine protects neonatal rat cardiomyocytes from hypoxia and serum deprivation-induced apoptosis
Authors: Zhu H, McElwee-Witmer S, Perrone M, Clark KL, Zilberstein A.
Journal: Cell Death Differ (2000): 773

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