Metal Fluor Zn-520是美国AAT Bioquest生产的 用于检测突触囊泡中存在的较高锌离子浓度的锌离子探针，并响应电刺激或兴奋毒性激动剂（0.05-50μM）释放，干扰钙敏感性小。 Metal Fluor Zn-520在结合锌离子（> 250倍）后显示出很强的荧光增强作用。 该细胞渗透性AM-酯可用于检测细胞内锌离子水平。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的锌离子探针Zn Metal Fluor 520, AM。 

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操作步骤

1.准备HHBS缓冲液
 

2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Metal Fluor Zn-520，AM原液
2.1使用的金属Fluor Zn-520，AM的量：1毫克
2.2所需浓度：2 mM
2.3在合适的容器中，混合1mg的Metal Fluor TM Zn-520，AM和692.89μL的无水DMSO。
 

3.使用10μM金属Fluor Zn-520，AM 2在HHBS中制备2X工作溶液
3.1终孔内浓度为Metal Fluor™Zn-520，AM：5μM
3.2在合适的容器中混合16μL的Metal Fluor Zn-520，AM。接下来，添加HHBS或您选择的缓冲液，
注意：对于大多数细胞系，我们建议使用Metal Fluor Zn-520，AM的终浓度为4至5μM。
 

4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X，并将每种组分的终浓度调节至以下：5μM的Metal Fluor Zn-520，AM
 

5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育30-60分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
 

6.准备HHBS缓冲液（或您选择的缓冲液）。
6.1在合适的容器中加入HHBS或您选择的缓冲液，直至体积为4 mL。
 

7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液，使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先，从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS（或您选择的缓冲液）。
 

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 492/514 nm运行实验。

参考文献

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