Cell Meter 胞内NADH / NADPH荧光成像分析试剂盒-AAT Bioquest荧光染料

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Cell Meter 胞内NADH / NADPH荧光成像分析试剂盒价格 7092
产品规格

100 Tests

产品货号

Cell Meter 胞内NADH / NADPH荧光成像分析试剂盒

产品参数
Ex (nm) 535 Em (nm) 557
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Cell Meter 胞内NADH / NADPH荧光成像分析试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测NADH/NADPH的试剂盒,细胞内二氢烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NADH及其磷酸酯NADPH的检测对于疾病诊断和发现是重要的。通常,氧化还原偶联NAD / NADH和NADP / NADPH在能量代谢,糖酵解,三羧酸循环和线粒体呼吸中起关键作用。细胞中NAD(P)H水平的增加与细胞内的相关的活性氧(ROS)的异常产生和DNA损伤。然而,由于缺乏敏感的NAD(P)H探针,在生物系统中检测细胞内NAD(P)H具有挑战性。 Cell Meter™细胞内NADH / NADPH荧光成像试剂盒提供了监测活细胞中细胞内NAD(P)H水平的有效方法。 JZL1707 NAD(P)H传感器是一种的荧光探针,用于检测和成像细胞中的NADH / NADPH。探针结合NADH / NADPH以产生具有高灵敏度和特异性的强荧光信号。 JZL1707 NAD(P)H传感器可以很容易地加载到活细胞中,使用Cy3®TRITC过滤器可以方便地监测其荧光信号。该试剂盒针对荧光成像和酶标仪应用进行了优化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 胞内NADH / NADPH荧光成像分析试剂盒。 

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适用仪器


荧光显微镜  
Ex: TRITC 滤波片组
Em: TRITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

实验示例

概述

1.在生长培养基中制备细胞

2.将细胞与测试化合物和JZL1707 NAD(P)H传感器工作溶液在37oC孵育30-60分钟

3.将细胞洗净并保持在测定缓冲液中

4.在Ex / Em = 540/590 nm(截止波长= 570 nm)或使用TRITC滤光片的荧光显微镜下监测荧光强度(底部读取模式)

 

操作步骤

1.刺激NADP / NADPH,用10μL10X试验化合物(96孔板)或5μL5X试验化合物(384孔板)在无血清培养基或所需缓冲液(如PBS或HHBS)中处理细胞)。 对于对照孔(未处理的细胞),加入相应量的培养基或化合物缓冲液。

注意:JZL1707 NAD(P)H传感器对血清敏感,因此建议将细胞保存在无血清培养基或您选择的缓冲液中。或者,可以在常规的全培养基中制备和处理细胞。 与JZL1707 NAD(P)H传感器一起孵育时,更换为您选择的无血清培养基或缓冲液。

2.在细胞板中加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的JZL1707 NAD(P)H传感器工作溶液。 将细胞与测试化合物和JZL1707 NAD(P)H传感器工作溶液在37oC共孵育30-60分钟,避光。

注意:对于NADH / NADPH阳性对照处理:将HeLa细胞与100μMNADH或NADPH在无血清培养基中孵育30分钟,并与JZL1707 NAD(P)H传感器工作溶液在37℃下共孵育30分钟。 详细信息请参见图1。

3.用所需缓冲液洗涤细胞一次。 移除每个孔中的溶液,并添加100μL/孔的测定缓冲液(组分B)用于96孔板或25μL/孔用于384孔板。

4.使用具有底部读取模式的Ex / Em = 540 / 590nm(截止= 570nm)的酶标仪监测荧光增加,或使用荧光显微镜和Cy3过滤器或TRITC过滤器组拍摄图像。

 

参考文献

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产品名称 货号
Cell Meter 细胞内NADH / NADPH荧光成像试剂盒 深红色荧光 Cat#15295