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Amplite 比色法L-丙氨酸检测试剂盒价格 4245
产品规格
产品货号
| Ex (nm) | – | Em (nm) | – |
| 分子量 | – | 溶剂 | – |
| 存储条件 | – |
Amplite 比色法L-丙氨酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测丙氨酸的试剂盒，L-丙氨酸（L-Ala）作为重要蛋白质的构建块起着至关重要的作用。 L-丙氨酸主要由来自乳酸的肌肉细胞合成并通过肝脏吸收到血液中。 它被谷氨酸丙酮酸转氨酶转化为丙酮酸，进入代谢主流。 L-Ala对葡萄糖的产生和血糖管理至关重要，并且对免疫系统和肾结石的预防起着重要作用。 L-丙氨酸缺乏通常表示营养不良，低蛋白饮食和压力。 AAT Bioquest的Amplite 比色法L-丙氨酸测定试剂盒提供了一种灵敏的比色测定方法，用于量化生物样品中的L-丙氨酸。 它利用释放过氧化氢的酶偶联反应，可在575 nm的吸光度酶标仪上通过Quest Fluor L-丙氨酸传感器检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 比色法L-丙氨酸检测试剂盒。
适用仪器
| 光吸收酶标仪 | |
| 吸收: | 575nm |
| 推荐孔板: | 透明底板 |
样品实验方案
简要概述
1.准备L-丙氨酸工作溶液（50 µL）
2.添加L-丙氨酸标准品或测试样品（50 µL）
3.在37°C下孵育30分钟至1小时
4.检测575 nm处的吸光度
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Quest Fluor L-丙氨酸探针储备溶液（200X）：
将55 µL DMSO（组分E）添加到Quest Fluor L-丙氨酸探针（组分A）中，制成200X Quest Fluor L-丙氨酸探针储备溶液。
1.2 L-丙氨酸标准溶液（1 mM）：
将10 µL 100 mM L-丙氨酸标准溶液（组分D）加到990 µL PBS（pH 7.0）中，得到1 mM L-丙氨酸标准溶液。
2.标准溶液
L-丙氨酸标准
向900 µL PBS中加入100 µL 1 mM L-丙氨酸标准溶液，制成100 µM L-丙氨酸标准溶液（AS7）。取100 µM L-丙氨酸标准溶液（AS7），并在PBS中进行1：2连续稀释，以得到连续稀释的L-丙氨酸标准溶液（AS6-AS1）。
3.工作溶液
3.1 将5 mL测定缓冲液（组分C）添加到一个Enzyme Mix1瓶（组分B1）中，并充分混合。
3.2 将100μLddH2O加入一个Enzyme Mix2小瓶（组分B2）中并充分混合。
3.3 将整个小瓶（100μL）的Enzyme Mix2和25 uL的200X L-丙氨酸探针储备溶液转移到Enzyme Mix1瓶中，并充分混合以制成L-丙氨酸工作溶液。 注意：L-丙氨酸工作溶液不稳定-请立即使用，并避免直接暴露在光线下。
样品操作及实验分析
表1.白色透明96孔微孔板中L-丙氨酸标准品和测试样品的布局。 AS = L-丙氨酸标准品（AS1-AS7，1.563至100 µM），BL =空白对照，TS =测试样品。
| BL | BL | TS | TS |
| AS1 | AS1 | … | … |
| AS2 | AS2 | … | … |
| AS3 | AS3 | ||
| AS4 | AS4 | ||
| AS5 | AS5 | ||
| AS6 | AS6 | ||
| AS7 | AS7 |
表2.每个孔的试剂组成
| 孔 | 容积 | 试剂 |
| AS1-AS7 | 50ul | 连续稀释液（1.563至100 µM） |
| BL | 50ul | PBS |
| TS | 50ul | 测试样品 |
1.根据表1和表2提供的布局，准备L-丙氨酸标准品（AS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂代替50 µL。
2.将50 µL L-丙氨酸工作溶液添加到L-Alanine标准品，空白对照和测试样品的每个孔中，以使L-Alanine测定的总体积为100 µL /孔。 对于384孔板，将25 µL L-丙氨酸工作溶液添加到每个孔中，总体积为50 µL /孔。 注意：在pH 6.5至7.0下运行L-丙氨酸测定。
3.将反应液在37°C孵育30分钟至1小时。
4.使用酶标仪在575 nm处监测吸光度的增加。
参考文献
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