上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Amplite 荧光法L-丙氨酸检测试剂盒价格 4245
产品规格
产品货号
| Ex (nm) | – | Em (nm) | – |
| 分子量 | – | 溶剂 | – |
| 存储条件 | – |
Amplite 荧光法L-丙氨酸检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测丙氨酸的试剂盒，L-丙氨酸（L-Ala）作为重要蛋白质的构建块起着至关重要的作用。 L-丙氨酸主要由来自乳酸的肌肉细胞合成并通过肝脏吸收到血液中。 它被谷氨酸丙酮酸转氨酶转化为丙酮酸，进入代谢主流。 L-Ala对葡萄糖的产生和血糖管理至关重要，并在免疫系统和预防肾结石方面发挥重要作用。 L-丙氨酸的缺乏通常是营养不良，低蛋白饮食和压力的标志。 AAT Bioquest的Amplite 荧光L-丙氨酸测定试剂盒提供了一种灵敏的荧光测定方法，用于量化生物样品中的L-丙氨酸。 它利用一种酶偶合反应释放过氧化氢，Quest Fluor L-丙氨酸传感器在Ex / Em = 540/590 nm处使用荧光酶标仪进行检测。检测限：~3uM，任何带有-SH基团的物质，如DTT、半胱氨酸，都会干扰测定。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 荧光法L-丙氨酸检测试剂盒。
适用仪器
| 荧光酶标仪 | |
| Ex: | 540nm |
| Em: | 590nm |
| Cutoff: | 570nm |
| 推荐孔板: | 纯黑色孔板 |
样品实验方案
简要概述
1.准备测试样品以及连续稀释的L-丙氨酸标准品（50 µL）
2.加入等体积的L-丙氨酸工作溶液（50 µL）
3.在37°C下孵育30分钟至1小时
4.监测Ex / Em = 540/590 nm的荧光强度
溶液制备
1.储备溶液
所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样，并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 Quest Fluor L-丙氨酸传感器储备溶液（200X）：
将55 µL DMSO（组分E）添加到Quest Fluor L-丙氨酸传感器（组分A）中，制成200X Quest Fluor L-丙氨酸传感器储备溶液。
1.2 L-丙氨酸标准溶液（1 mM）：
将10 µL 100 mM L-丙氨酸（组分D）加到990 µL PBS（pH 7.0）中，得到1 mM L-丙氨酸溶液。
2.标准溶液
L-丙氨酸标准
向900 µL PBS中加入100 µL 1 mM L-丙氨酸标准溶液，制成100 µM L-丙氨酸溶液（AS7）。进行1：2连续稀释以获得连续稀释的L-丙氨酸标准品（AS6-AS1）。
3.工作溶液
3.1 将5 mL测定缓冲液（组分C）加入一瓶酶混合1瓶（组分B1）中，并充分混合。
3.2 将100μLddH2O加入一个酶混合物2小瓶（组分B2）中并充分混合。
3.3 将整个小瓶（100μL）的Enzyme Mix 2和25 uL的200X L-丙氨酸传感器储备溶液转移到Enzyme Mix 1瓶中； 混合均匀。 注意：工作解决方案不稳定。 立即使用，避免直接暴露在光线下。
样品操作及实验分析
表1.黑色96孔微孔板中L-丙氨酸标准品和测试样品的布局。 AS = L-丙氨酸标准品（AS1-AS7，1.5至100 µM）； BL =空白对照； TS =测试样品。
| BL | BL | TS | TS |
| AS1 | AS1 | … | … |
| AS2 | AS2 | … | … |
| AS3 | AS3 | ||
| AS4 | AS4 | ||
| AS5 | AS5 | ||
| AS6 | AS6 | ||
| AS7 | AS7 |
表2.每个孔的试剂组成
| 孔 | 容积 | 试剂 |
| AS1-AS7 | 50ul | 连续稀释（1.5至100 µM） |
| BL | 50ul | 1X PBS缓冲液 |
| TS | 50ul | 测试样品 |
1.根据表1和表2提供的布局，准备L-丙氨酸标准品（AS），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25 µL试剂代替50 µL。
2.将50 µL L-丙氨酸工作溶液添加到L-Alanine标准品，空白对照和测试样品的每个孔中，以使L-Alanine测定的总体积为100 µL /孔。 对于384孔板，将25 µL L-丙氨酸工作溶液添加到每个孔中，总体积为50 µL /孔。 注意：在pH 6.5至7.0下运行L-丙氨酸测定。
3.将反应混合物在37°C孵育30分钟至1小时。
4.使用荧光板读数器在Ex / Em = 540/590 nm（截止：570 nm）下监测荧光的增加。
参考文献
Reactivity of beta-methylamino-L-alanine in complex sample matrixes complicating detection and quantification by mass spectrometry
Authors: Glover WB, Liberto CM, McNeil WS, Banack SA, Shipley PR, Murch SJ.
Journal: Anal Chem (2012): 7946
Synthesis and characterization of silver/alanine nanocomposites for radiation detection in medical applications: the influence of particle size on the detection properties
Authors: Guidelli EJ, Ramos AP, Zaniquelli ME, Nicolucci P, Baffa O.
Journal: Nanoscale (2012): 2884
Detection of farnesyltransferase interface hot spots through computational alanine scanning mutagenesis
Authors: Perez MA, Sousa SF, Oliveira EF, Fernandes PA, Ramos MJ.
Journal: J Phys Chem B (2011): 15339
Molecular beacon based bioassay for highly sensitive and selective detection of nicotinamide adenine dinucleotide and the activity of alanine aminotransferase
Authors: Tang Z, Liu P, Ma C, Yang X, Wang K, Tan W, Lv X.
Journal: Anal Chem (2011): 2505
Highly specific substrates of proteinase 3 containing 3-(2-benzoxazol-5-yl)-l-alanine and their application for detection of this enzyme in human serum
Authors: Wysocka M, Lesner A, Guzow K, Kulczycka J, Legowska A, Wiczk W, Rolka K.
Journal: Anal Chem (2010): 3883
In-capillary derivatization and stacking electrophoretic analysis of gamma-aminobutyric acid and alanine in tea samples to redeem the detection after dilution to decrease matrix interference
Authors: Su YS, Lin YP, Cheng FC, Jen JF.
Journal: J Agric Food Chem (2010): 120
SAFETY study: alanine aminotransferase cutoff values are set too high for reliable detection of pediatric chronic liver disease
Authors: Schwimmer JB, Dunn W, Norman GJ, Pardee PE, Middleton MS, Kerkar N, Sirlin CB.
Journal: Gastroenterology (2010): 1357
[Rapid detection of alanine aminotransferase with near-infrared spectroscopy]
Authors: Huang FR, Zhang J, Luo YH, Li SP, Zheng SF, Chen XD.
Journal: Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi (2010): 2620
An electrochemical biosensor array for rapid detection of alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase
Authors: Song MJ, Yun DH, Hong SI.
Journal: Biosci Biotechnol Biochem (2009): 474
Detection of the mitochondrial and catalytically active alanine aminotransferase in human tissues and plasma
Authors: Glinghammar B, Rafter I, Lindstrom AK, Hedberg JJ, Andersson HB, Lindblom P, Berg AL, Cotgreave I.
Journal: Int J Mol Med (2009): 621
相关产品
| 产品名称 | 货号 |
| Amplite 荧光法L-乳酸检测试剂盒 | Cat#13814 |
| Amplite 比色法L-丙氨酸检测试剂盒 | Cat#13826 |
| Amplite 荧光测定黑色素测定试剂盒 | Cat#11310 |