逆转录（也成为反转录病毒，Retrovirus）病毒载体是常用的病毒载体之一。转入宿主的细胞后，反转录病毒载体随即整合到宿主细胞基因组内，这种整合的位点是随机的。反转录病毒载体就可利用这些外壳蛋白包装成病毒颗粒在辅助细胞系内大量扩增。反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10 kb左右，以很高的转染率感染宿主细胞，特别是分裂中的细胞。

逆转录病毒通过整合进目的细胞基因组，能实现持久的表达，而且几乎没有免疫原性，因此很受欢迎。特别是和腺病毒相比，其能整合进基因组的优势导致逆转录病毒也被广泛应用，然后逆转录病毒系统也存在一定的缺陷，首先是安全性比较低，因为所有包装所需的基因都放到一个载体上，还有就是基因能整合进目的细胞也可能会导致细胞基因组的紊乱，而且其滴度比较低。由于逆转录病毒表达系统的特殊性，其包装细胞的种类较多，表达载体的种类也较多，因此需要根据不同的实际来选择合适的表达系统。Cell Biolabs的逆转录病毒表达产品包括包装细胞系、表达系统（同时包括了包装细胞和表达质粒载体）、逆转录病毒表达质粒以及插入了目的基因的重组逆转录病毒表达质粒。

Cell Biolabs提供三种铂金版逆转录病毒包装细胞系：单嗜性（Ecotropic）Plat-E包装细胞系、双嗜性（Amphotropic）Plat-A包装细胞系及泛嗜性（Pantropic）Plat-GP包装细胞系。它们对不同的细胞具有不同的侵染性。

Plat-E包装细胞系（Ecotropic）是一种来源于人胚肾(Human Embryonic Kidney, HEK)293细胞系,主要用于快速、短暂地产生高滴度逆转录病毒，同时也能用于稳定地产生逆转录病毒。由Plat-E包装细胞系产生的病毒表达一种单嗜性的被膜，因而只能感染小鼠和大鼠细胞。Plat-GP包装细胞系（Pantropic）也来源于HEK293，但却是一种泛嗜性的包装细胞系，其包装产生的逆转录病毒颗粒既能感染哺乳动物细胞，也能感染非哺乳动物细胞。在使用过程中, Plat-GP细胞需要用逆转录病毒载体和pVSV-G来共转染。VSV-G是泡状口炎病毒(Vesicular Stomatitis Virus) 的被膜糖蛋白，能通过脂质结合及质膜融合来介导病毒进入细胞。因此在使用Plat-GP细胞系时，还需要额外的使用pVSV-G完成包装。Plat-A包装细胞系（Amphotropic）也是一种来源于HEK293细胞的细胞，在将病毒env 基因导入该细胞时利用嘌呤霉素作为选择标记，因而对于一些使用嘌呤霉素作为筛选标记的载体无法使用。

一般来说，Plat-E是最常用的逆转录病毒包装细胞；Plat-GP则是适用性最广的逆转录包装细胞（但是需要多增加一个表达载体pVSV-G Packaging Vector提供外壳蛋白VSV-G，该外壳蛋白宿主范围非常广）；Plat-A用的比较少，但是其宿主范围比Plat-E要多一些，比如可应用于人、猴、狗来源的细胞等。

美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为逆转录病毒研究人员提供完备的重组逆转录病毒表达系统及其相关产品和服务，产品包括逆转录病毒的最新一代表达系统，针对逆转录病毒滴度低的软肋而专门设计的逆转录病毒浓缩纯化试剂盒，逆转录病毒的快速定量，以及逆转录病毒高效转染试剂和用于包装重组逆转录病毒的包装细胞系等，几乎覆盖反转录病毒研究中的所有技术环节。如果您对上述逆转录病毒包装细胞系感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

慢病毒载体与其他表达载体相比，较大的优势是它们能感染分裂和非分裂的细胞。这对于众多干细胞和难转染细胞的研究者而言，可谓是一根及时的救命稻草，能解决令人头疼的转染效率低的问题。然而慢病毒本身的转染效率也不是很高。对于一些特殊的细胞类型，一般的转导方法效率是比较低的，甚至于无法实现成功转导。比如干细胞、原代培养细胞等等。由于这样的细胞很难获得，或者非常珍贵，因此在进行基因转导的时候，高效的病毒转导是最优的选择。

在慢病毒转染细胞的过程中最重要的一步是融合，只有一小部分慢病毒载体才能转导进细胞，因此，病毒颗粒的吸附是慢病毒转染的限速步骤。在慢病毒的转染试验中，多聚阳离子，如聚凝胺®（Polybrene®）由于被发现能促进转染的效率被应用于慢病毒的转染，其作用机理可能是通过中和细胞与病毒颗粒之间的静电排斥而促进它们之间的贴附。然而即使采用聚凝胺®（Polybrene®）作为慢病毒转染试剂，在一些细胞类型中的转染效率也不甚理想。

美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为慢病毒研究人员提供完备的重组慢病毒表达系统及其相关产品和服务，产品包括慢病毒的最新一代表达系统，针对慢病毒滴度低的软肋而专门设计的慢病毒浓缩纯化试剂盒，慢病毒的滴度滴定及定量，以及慢病毒高效转染试剂和慢病毒宿主细胞等，几乎覆盖慢病毒研究中的所有技术环节。其ViraDuctin™ 慢病毒高效转染试剂（ViraDuctin™ Lentivirus Transduction Kit）能大大提高慢病毒转染效率，比Polybrene（聚凝胺）效率提高2-6倍，对于难转染的细胞，如原代细胞和干细胞效果良好。

该慢病毒转染试剂分40和200次两种包装规格（以24孔板内一个孔为一次），独有的慢病毒高效转染技术，使用了Cocktail的组合试剂能有效的去除慢转录病毒上清中降低转染效率的抑制物。能有效的提高转染效率，适用于原代细胞和干细胞。该Kit也能应用于逆转录病毒的转染。

美国著名细胞学试剂专家Cell BioLabs为您提供全套的慢病毒技术解决方案，ViraSafe™ 最新一代慢病毒表达系统有多种样式供您选择，ViraBind™ 慢病毒浓缩&纯化试剂盒采用了专利技术能让你获得更高滴度和纯度的慢病毒，QuickTiter™ 慢病毒系列提供传统和专利技术的p24不同ELISA检测方法，同时还有采用OD260方法快速定量慢病毒的方案；Cell BioLabs还有专为慢病毒载体用的293LTV细胞及高效转染试剂供您选择，如果您对慢病毒产品感兴趣，请请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询慢病毒相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

慢病毒源于反转录病毒，但又有所不同。在感染能力方面比反转录病毒还强，可有效感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、干细胞等多中类型的细胞，又很少引发基因的免疫反应。在基因治疗中广泛应用的逆转录病毒载体存在的主要问题，是无法高效转导非分裂期细胞。慢病毒载体不但可以感染非分裂期细胞，还具有容纳外源性目的基因片段大、稳定整合持久表达、免疫反应小等优点。

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当通过纯化获得重组慢病毒颗粒后，需要对慢病毒液的浓度或感染活性进行定量检测。一般来说，对于病毒颗粒进行定量主要是通过检测纯化的病毒液中DNA的OD260来检测其病毒含量（Quantitation）；而对于病毒颗粒的滴度检测（Titer），则需要通过传统的克隆成斑试验或者对病毒特异蛋白的免疫反应试验等检测。Cell Biolabs为慢病毒的定量及滴度提供了全套QuickTiter™系列方案。其中涉及到通过DNA/RNA的OD值检测从而对慢病毒进行定量，详情查看“慢病毒定量——Cell BioLabs慢病毒快速定量试剂盒”；而针对滴度检测，还提供了慢病毒外壳蛋白p24的免疫学ELISA方案。

p24蛋白是慢病毒外壳中含量较大的标志性蛋白。Cell Biolabs提供的基于慢病毒p24蛋白的ELISA分析分两种，一种称为传统的p24蛋白ELISA检测（Quantitation Kit (Traditional HIV p24 ELISA)）。能检测所有p24蛋白，从而实现对病毒滴度的定量。分为一次96孔板分析和五次96孔板分析，采用ELISA方法，反应灵敏，可检测1 ng/mL HIV p24蛋白，最后分光光度计读取数据。

由于病毒颗粒的外壳蛋白p24蛋白是由包装细胞系提供的，因此在使用检测的时候不可避免的会将病毒颗粒本身的p24蛋白与包装细胞系产生的p24蛋白一起检测，造成实验的误差，Cell Biolabs的慢病毒滴度检测Kit解决了这个问题，其QuickTiter™ Lentivirus Titer Kit(Lentivirus-Associated HIV p24)能分离出包装细胞产生的游离p24蛋白，只检测病毒颗粒表面的p24，因此实验数据更真实准确。分为一次96孔板分析和五次96孔板分析，采用ELISA方法，反应灵敏，可检测1 ng /mL HIV p24蛋白，最后分光光度计读取数据。

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近年来，改进的重组腺病毒载体在基因治疗上迅速流行，因为他们没有免疫原性，宿主范围光，并可实现长期的转基因表达。在宿主细胞扩增之后的腺病毒纯化是一个关键的步骤。当表达载体在辅助载体的帮助下去感染包装细胞系，并产生重组的腺病毒颗粒后，一些病毒颗粒会裂解细胞并释放到培养液上清中，还有一些仍然会保留在细胞里，因此需要对上清及细胞进行处理和纯化以获得纯的感染性腺病毒颗粒。

常规的腺病毒纯化一般采用CsCl超速密度离心法（利用不同大分子，如DNA、蛋白、病毒颗粒、细胞碎片等具有不同的密度进行梯度离心而分离出来的原理）分离病毒颗粒，但是耗时耗力。Cell Biolabs的大部分纯化试剂盒都采用了新颖的专利ViraBind™技术，力求使用最前沿的技术为客户提供最完美的解决方案。Cell Biolabs为腺病毒纯化提供了两种不同的纯化方案，一种使用离心柱，一种是注射器样的透析柱（注：腺病毒纯化均未采用Matrix胶吸附，而是采用了新型的纯化装置，因此操作时间上只需要30分钟），常规离心即可。

其中小提（Miniprep）试剂盒，即离心柱式纯化如下，Kit包括以下4个组分：收集管收集柱、Loading缓冲液、洗液、洗脱液。无需超速离心，只通过一般实验室的常规离心（2000g）小提腺病毒。超过90%的回收率，但是只需要30min即可完成，一次可以提纯T75培养瓶或10cm培养皿内的感染细胞，最多可获得1×10¹¹个病毒颗粒，可进行10次提取。

还有一种是注射器式滤器纯化，又可分为中提和大提系列，每次分别可以用来纯化获得2.5×10¹²和2.5×10¹³病毒颗粒（大概相当于40和400个T75培养瓶的感染细胞），分别能进行10次和1次纯化；回收效率很高，超过90%。Kit内包括纯化滤器、洗液、洗脱液、再生液共4样组分，该Kit与上述Miniprep小提Kit基本类似，只不过是使用了注射器样的滤器装置用于更快速和大量的纯化，无需离心。整个操作只需要30分钟，无需离心设备。

美国著名细胞学试剂专家Cell BioLabs为您提供全套的腺病毒技术解决方案，RAPAD®腺病毒表达系统有多种样式供您选择，还有预装有多种重组基因的腺病毒供您直接使用，ViraBind™腺病毒小提及中提大提试剂盒采用了专利技术能让你获得更高滴度和纯度的腺病毒，Cell BioLabs还有转为腺病毒载体用的293AD细胞及高效转染试剂供您选择，如果您对腺病毒产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询腺病毒相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

安全高效的将目的基因导入人体靶细胞是成功进行基因治疗的关键之一。经典的基因导入方式（如显微注射、电穿孔、磷酸钙转染等）虽然曾在科研中起了一定的作用，但由于不能很好的解决转染率、靶向性等问题而限制了它们的应用。随着病毒学等相关学科的发展，目前基因打靶已广泛使用各种病毒为载体，AAV载体是最近几十年发展起来的一类新型载体。作为病毒载体的重要一员，AAV不具有明显的细胞毒性效应并且不会像其他病毒载体那样引起细胞强烈的免疫反应等特性，因为其在基因治疗中的应用潜力引起了人们越来越多的兴趣和关注。

由于AAV是天然的缺陷性病毒，需要提供多个因素才能导致转染发生，因此也被认为是最安全的病毒载体。同时腺相关病毒能感染分裂型和非分裂型细胞，甚至S期静止细胞，这使腺相关病毒成为很有前途和吸引力的基因治疗载体。腺相关病毒的转导过程包括病毒结合、进入细胞以及进入后的作用、核内转移和病毒第二条DNA链的合成。在这过程中，最后一步，也就是AAV第二条DNA链的合成是腺相关病毒载体转染的限速步骤。

Cell BioLabs针对腺相关病毒转染过程中的主要问题，开发出ViraDuctin™腺相关病毒转染试剂（ViraDuctin™ AAV Transduction Kit 目录号：AAV-200/AAV-201）。该试剂盒能高效提高腺相关病毒在多种细胞内的转染效率，包括传统转染方法转导较低的细胞非分裂细胞，如原代培养细胞和干细胞。该转染试剂使用便捷，只需2小时，是AAV转染非分裂细胞的首选。该试剂盒按照可转染次数分两种包装，AAV-200能进行10次6孔板或者35mm细胞培养皿的转染，货号为AAV-201的则能进行50次转染。

美国著名细胞学试剂专家Cell BioLabs为您提供高效简便的重组腺相关病毒相关产品和服务，产品包括腺相关病毒的纯化、定量和高效转染试剂。ViraBind™腺相关病毒纯化试剂盒采用特殊的纯化Matrix技术，无需超速离心，在大大减少试验时间的同时还保证了AAV的纯度。QuickTiter™腺相关病毒定量试剂盒通过检测腺相关病毒DNA含量来测定其病毒含量，只需2小时。ViraDuction™腺相关病毒转导试剂能极大的增加腺相关病毒在多种细胞内的转导效率，包括传统转染方法转导效率低的非分裂细胞，如原代培养细胞和干细胞。如果您对腺相关病毒产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询腺相关病毒相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

在氧化应激效应的检测中，虽然通过分析ROS诱导的氧化损伤作用被广泛作为分析指标，但是对于生物体内、细胞以及提取液内细胞抗氧化能力的水平检测也很重要。在细胞分子水平上检测细胞内生物大分子的抗氧化能力，可由ORAC指标（氧基抗氧化能力）和HORAC指标（羟基抗氧化能力）反应出来。

一般来说，在细胞氧化损伤的研究中，对于细胞内活性氧基团和抗氧化剂的检测常常是一个非常重要的指标，因其直接反应细胞的状态。上海金畔生物科技有限公司向您推荐美国著名细胞试剂专家Cell Biolabs的相关产品，对于抗氧化酶和抗氧化剂的检测，其OxiSelect™ Superoxide Dismutase Activity Assay（过氧化物歧化酶活性分析）和OxiSelect™ Catalase Activity Assay Kit（过氧化氢酶活性分析）试剂盒为氧化应激研究中，细胞内两种重要的过氧化物酶的检测提供了快捷的检测方案。另外，在细胞分子水平上检测细胞内生物大分子的抗氧化能力，可由OxiSelect™ ORAC and HORAC Activity Assay Kits通过ORAC指标（氧基抗氧化能力）和HORAC指标（羟基抗氧化能力）反应出来。

氧基抗氧化能力（Oxygen Radical Absorbance Capacity, ORAC）和羟基抗氧化能力（Hydroxyl Radical Antioxidant Capacity, HORAC），是两个经典的检测多种生物样品里生物分子抗氧化能力的指标。其检测手段是通过过氧化氢自由基通过氢原子转移反应氧化荧光探针。在组织细胞、过氧化氢自由基是其它起始自由基氧化产生的。检测时，当待测样品中的抗氧化物阻抑过氧化氢自由基对荧光探针的氧化作用直到其抗氧化能力丧失。这样剩余的过氧化氢自由基会继续进行氧化反应，并破坏荧光探针的荧光效果，直到抗氧化剂的抑制时间和自由基损伤的阻抑达到平衡。因此待测样品的抗氧化能力与荧光衰变曲线相关。具体在衰变曲线中，常使用AUC区域表示，即曲线下方的区域。AUC作为最终指标，即是样品中所有过氧化氢自由基抗氧化能力与抗氧化剂维生素E的类似物Trolox™（或五倍子酸）所做标准曲线的计算对比值。

Cell Biolabs的ORAC活性分析（OxiSelect™ ORAC Activity Assay）（货号：STA-345）及HORAC活性分析（OxiSelect™ HORAC Activity Assay）（货号：STA-346）是可信赖的快速检测氧基抗氧化能力以及羟基抗氧化能力的检测试剂盒。试用于细胞裂解液、胞浆、血清和组织匀浆以及食品提取物中抗氧化能力的检测分析。每个试剂盒均能完成192次分析，试剂盒内包括空白对照、抗氧化剂标准对照，最终的数值能在普通微孔板中以高通量形式并在2小时内获得。操作便捷，由于试剂盒内提供对照，因此能获得定量结果。

上海金畔生物科技有限公司向您推荐Cell BioLabs完整的细胞氧化损伤检测方案，其产品覆盖上述最重要的DNA/RNA损伤分析产品，为您提供最优的检测方案。除了常见的AP位点分析以及8-OHdG/8-OHG定量分析，还有基于单细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析等。除了DNA/RNA损伤，还包括脂质过氧化过程中壬烯(HNE)、丙二醛(MDA)以及8-异前列腺素F2a（8-Isoprostane）ELISA分析检测试剂盒；对于蛋白质的羰基化、硝基化以及终末氧化蛋白产物分析等蛋白氧化损伤检测方案；针对活性氧基团和抗氧化剂的活力检测，也有多种试剂和试剂盒供您选择。如果您对以上产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询氧化应激及损伤相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

在细胞由于自由基非常活泼，化学反应性极强，参与一系列的连锁反应，能引起细胞生物膜上的脂质过氧化，破坏了膜的结构和功能。它能引起蛋白质变性和交联，使体内的许多酶及激素失去生物活性，同时还能破坏核酸结构和导致整个机体代谢失常等，最终使机体发生病变。虽然自由基会对机体产生诸多危害，但是在一般的条件下人体细胞内也存在着清除自由基、抑制自由基反应的体系，它们有的属于抗氧化酶类，有的属于抗氧化剂。如超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase, SOD）、过氧化氢酶（Catalase, CAT）等。

在细胞氧化损伤的研究中，对于细胞内活性氧基团和抗氧化剂的检测常常是一个非常重要的指标，因其直接反应细胞的状态。上海金畔生物科技有限公司向您推荐美国著名细胞试剂专家Cell Biolabs的相关产品，对于抗氧化酶和抗氧化剂的检测，其OxiSelect™ Superoxide Dismutase Activity Assay（过氧化物歧化酶活性分析）和OxiSelect™ Catalase Activity Assay Kit（过氧化氢酶活性分析）试剂盒为氧化应激研究中，细胞内两种重要的过氧化物酶的检测提供了快捷的检测方案。另外，在细胞分子水平上检测细胞内生物大分子的抗氧化能力，可由OxiSelect™ ORAC and HORAC Activity Assay Kits通过ORAC指标（氧基抗氧化能力）和HORAC指标（羟基抗氧化能力）反应出来。

超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase, SOD）又称过氧化物歧化酶。SOD属于金属酶，按照结合金属离子种类不同，该酶有以下三种：含铜与锌超氧化物歧化酶（CUZNSOD）、含锰超氧化物歧化酶（MN—SOD）和含铁超氧化物歧化酶（Fe—SOD）。SOD主要存在于胞液和线粒体基质中，是防御生物体氧化损伤的一种十分重要的酶。它的作用底物是超氧阴离子自由基O₂-·，可将其催化歧化为氧气和过氧化氢。这种酶在保护生物细胞免受超氧自由基和由其形成的活性氧类（例如H₂O₂,·OH）的毒害方面起着重要作用。

该超氧化物歧化酶（SOD）活性分析试剂盒（货号：STA-340）通过使用黄嘌呤（Xanthine）/黄嘌呤氧化酶（XOD）体系生成超氧化物阴离子。加入发色基团，发色基团可被由上述体系产生的氧化物阴离子还原成为水溶性的黄色甲染料，这样SOD活性通过抑制发生基团的还原来测定。OxiSelect™ Superoxide Dismutase Activity Assay超氧化物歧化酶活性分析试剂盒（货号：STA-340）通过一个可信的方案快速检测，细胞裂解液、血浆、血清以及组织匀浆中的SOD活性。每个试剂盒内包含空白样、SOD标准对照，能完成100次检测。

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