日度归档：2022年4月26日

DNA双链断裂（DSBs）分析及检测——DNA/RNA损伤分析系列

发表于由

DNA作为细胞生命活动最重要的遗传物质，保持其分子结构的完整性和稳定性对于细胞的存活和正常生理功能的发挥具有重要意义。包括电离辐射、化疗药物及细胞代谢产物在内的多种外源和内源性因素都能引起不同形式的DNA损伤，其中DNA双链断裂(DNA double-strand breaks,DSBs)作为最严重的DNA损伤形式,使细胞正常生命活动的维持乃至生存都受到了严重威胁。同时,细胞也建立了一套复杂而精确的调控机制来应对这些损伤,包括激活细胞周期检查点(checkpoint)、启动修复系统及诱导细胞凋亡等。

针对DNA/RNA损伤的检测，上海金畔生物科技有限公司向您推荐Cell BioLabs完整的DNA/RNA氧化损伤检测方案，其OxiSelect™ Oxidative DNA / RNA Damage ELISA Kits（8-OHdG or 8-OHG Quantitation）提供了快速高效检测核酸中8-OHG或8-OHdG含量的实验方案；OxiSelect™ Comet Assays (Single Cell Gel Electrophoresis)则为您提供多种选择的彗星分析产品；针对DNA损伤中的AP位点检测，Cell Biolabs的OxiSelect™ Oxidative DNA Damage Quantitation Kit (AP Sites)则使用经典的ARP检测方案；DNA双链断裂分析为您提供了快捷的DSB分析试剂。

细胞在电离辐射或其他因素作用下直接诱导或是通过复制压力诱导形成的双链断裂 (DSBs)，以及细胞自身调控的DNA双链断裂（DSBs）分析及检测——DNA/RNA损伤分析系列程序性DSBs和逆转录病毒转染细胞过程中产生的DSBs均可诱导H2AX的磷酸化和簇集。DNA发生双链断裂后最早反应之一是位于断裂点附近的组蛋白H2AX的C末端第139位丝氨酸残基被快速磷酸化形成γ-H2AX。磷酸化的γ-H2AX快速转导DNA损伤信号，导致下游分子磷酸化的激活，引发一系列的生物级联反应和和细胞学反应。γ-H2AX是迄今所研究的最重要的DNA损伤感应分子，也成为目前国内外研究细胞DNA损伤应激反应的热点之一。

Cell Biolabs的OxiSelect™ DNA Double Strand Break Assay（DNA双链断裂分析试剂盒）（货号：STA-321）采用免疫学方法，使用DNA双链断裂的标志物γ-H2AX抗体检测DNA损伤后其表达情况。试剂盒内提供Anti-Phospho-Histone H2A.X (Ser 139) Antibody (100X)一抗以相应二抗，并有DSB诱导物作为试验阳性对照，实验简单快捷，只需3小时，就能通过荧光显色观察结果。能为96孔板样提供100次分析。

产品名称 货号 产品说明（点击查看说明书）
OxiSelect™ DNA Double-Strand Break Staining Kit STA-321 免疫荧光法检测，100次分析

上海金畔生物科技有限公司向您推荐Cell BioLabs完整的DNA/RNA损伤检测方案，其产品覆盖上述最重要的DNA/RNA损伤分析产品，为您提供最优的检测方案。除了常见的AP位点分析以及8-OHdG/8-OHG定量分析，还有基于单细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析等。除了DNA/RNA损伤，还包括脂质过氧化过程中壬烯(HNE)、丙二醛(MDA)以及8-异前列腺素F2a（8-Isoprostane）ELISA分析检测试剂盒；对于蛋白质的羰基化、硝基化以及终末氧化蛋白产物分析等蛋白氧化损伤检测方案；针对活性氧基团和抗氧化剂的活力检测，也由多种试剂和试剂盒供您选择。如果您对以上产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询氧化应激及损伤相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

DNA断裂定量分析（AP位点）——DNA/RNA损伤分析

发表于由

DNA的氧化损伤是由于DNA与活性氧（ROS）尤其是羟自由基之间的相互作用造成的。由超氧阴离子和过氧化氢通过Fenton反应产生的羟自由基在DNA中产生多重修饰。羟自由基对脱氧核糖基团的氧化攻击将导致DNA释放自由碱基，产生链断裂、各种糖修饰以及单个无碱基位点（AP位点）。事实上，AP位点（AP Sites）是由ROS产生的损伤的主要类型。据估计，每个哺乳动物细胞，每天能产生50,000到200,000个AP位点，这些不能及时修复的AP位点会进一步抑制拓扑异构酶活性、DNA的复制以及转录等功能，并导致基因的癌变。

针对DNA/RNA损伤的检测，上海金畔生物科技有限公司向您推荐Cell BioLabs完整的DNA/RNA氧化损伤检测方案，其OxiSelect™ Oxidative DNA / RNA Damage ELISA Kits（8-OHdG or 8-OHG Quantitation）提供了快速高效检测核酸中8-OHG或8-OHdG含量的实验方案；OxiSelect™ Comet Assays (Single Cell Gel Electrophoresis)则为您提DNA断裂定量分析（AP位点）——DNA/RNA损伤分析供多种选择的彗星分析产品；针对DNA损伤中的AP位点检测，Cell Biolabs的OxiSelect™ Oxidative DNA Damage Quantitation Kit (AP Sites)则使用经典的ARP检测方案；DNA双链断裂分析为您提供了快捷的DSB分析试剂。

这些细胞在氧化损伤中发生的DNA嘌呤或者嘧啶碱基直接脱去的反应，并形成核酸中无嘌呤（apurinic）和脱嘧啶（apyrimidinic）位点，统简称AP位点。OxiSelect™ Oxidative DNA Damage Quantitation Kit (AP Sites)（货号：STA-324）则专门为AP位点的高灵敏检测而定制，可用于细胞、组织等多种来源的基因组样品。

由于醛反应性探针（ARP；N’-氨氧甲基羰肼基-D-生物素）特异性地与AP位点的开环上的醛基反应。通过这个反应可以检测到导致醛基形成的DNA修饰。Cell Biolabs的OxiSelect™ Oxidative DNA Damage Quantitation Kit (AP Sites)用过量ARP试剂反应后，DNA上的所有AP位点均用生物素做了标签。可以用亲和素-生物素法，用连接到亲和素上的过氧化物酶或碱性磷酸酶做比色法检测来对这些带有生物素标签的AP位点进行计数。该DNA断裂定量试剂盒（AP位点）包含用于检测每1×10e5个碱基对中4到40个AP位点的所有必需溶液，试剂盒内包括标准对照，针对96孔板分析，能完成至少50次检测。

产品名称 货号 产品说明（点击查看说明书）
OxiSelect™ Oxidative DNA Damage Quantitation Kit (AP Sites) STA-324 通过酶联反应检测，50次分析

上海金畔生物科技有限公司向您推荐Cell BioLabs完整的DNA/RNA损伤检测方案，其产品覆盖上述最重要的DNA/RNA损伤分析产品，为您提供最优的检测方案。除了常见的AP位点分析以及8-OHdG/8-OHG定量分析，还有基于单细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析等。除了DNA/RNA损伤，还包括脂质过氧化过程中壬烯(HNE)、丙二醛(MDA)以及8-异前列腺素F2a（8-Isoprostane）ELISA分析检测试剂盒；对于蛋白质的羰基化、硝基化以及终末氧化蛋白产物分析等蛋白氧化损伤检测方案；针对活性氧基团和抗氧化剂的活力检测，也由多种试剂和试剂盒供您选择。如果您对以上产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询氧化应激及损伤相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

彗星分析法（单细胞凝胶电泳）——DNA/RNA损伤分析

发表于由

人体每天暴露在大量的化学物质当中，为了诊测这些物质对人体DNA的影响，科学家们发明了多种测定方法，然而，多年来人们所使用的这些测试方法却不能准确与快速的辨识出会使人体致癌的物质。为了解决这些问题，单细胞凝胶电泳法（Single Cell Gel Assay）应运而生，通常亦称之彗星分析法（Comet Assay）。

针对DNA/RNA损伤的检测，上海金畔生物科技有限公司向您推荐Cell BioLabs完整的DNA/RNA氧化损伤检测方案，其OxiSelect™ Oxidative DNA / RNA Damage ELISA Kits（8-OHdG or 8-OHG Quantitation）提供了快速高效检测核酸中8-OHG或8-OHdG含量的实验方案；OxiSelect™ Comet Assays (Single Cell Gel Electrophoresis)则为您提供多种选择的彗星分析产品；针对DNA损伤中的AP位点检测，Cell Biolabs的OxiSelect™ Oxidative DNA Damage Quantitation Kit (AP Sites)则使用经典的ARP检测方案；DNA双链断裂分析为您提供了快捷的DSB分析试剂。

它之所以称为彗星分析法是因为被破坏的DNA形似彗星，此方法已被证实是最具敏感性又最具快速性的方法。研究人员使用这种方法可在24小时内获得初步结果，在十天之内能得到结论性的证据。作为单细胞水平上定量检测DNA损伤的灵敏方法，经过不断改进和完善,用该方法检验的基因损伤已成为鉴别遗传毒性物质的敏感标记物,在彗星分析法（单细胞凝胶电泳）——DNA/RNA损伤分析致癌作用机制、环境污染监测评价等研究中，均发挥了重要作用。

彗星分析法是用来判别某种物质是否是致癌物，并衡量其对人体DNA修补的影响程度，这一分析过程是将健康的人体白血球接触于被测试的物质后，然后再用彗星分析法来进行测试，如果被测试的物质是致癌物质，那么DNA将被破坏，而被损坏的DNA将开始游离细胞核，形成彗星形状。

传统的实验室方法步骤繁琐，需要单独配置裂解试剂，需要提前对样品DNA进行处理，且每次检测样品有限，染色过程中需要EB等致癌染料。OxiSelect™ Comet Assays (Single Cell Gel Electrophoresis)克服了上述障碍，彗星分析法（单细胞凝胶电泳）——DNA/RNA损伤分析可以一次进行多个样品的处理，解决了由于处理时间不同而导致的实验结果差异；本Kit提供彗星分析所需的完整试剂，并有3孔板或96孔板样式的载玻片，将处理过的样品点样到该载玻片上后，进行电泳，之后用试剂盒内提供的荧光染料观察彗星分析结果。并且使用一站式试剂盒，简单快捷，直接使用细胞进行实验。

通过OxiSelect™彗星分析试剂盒的观察结果，DNA受到致癌物质的损坏愈大，DNA碎段就愈多，愈小的DNA碎段游离的速度就愈快，也游离愈远，因而形成了彗星的尾部，而较大的一些碎段位置则靠近细胞核，因而形成彗星的头部。DNA碎段的游动的程度不同　使它呈现出彗星状，使研究人员能很容易看清细胞的损害程，彗星的长度与DNA的损害程度有关，此长度是指从细胞核到彗星尾端的距离，也就是说，彗星尾端愈长，细胞的损害程度愈大。

Cell Biolabs的OxiSelect™ Comet Assays (Single Cell Gel Electrophoresis)试剂盒提供多种样式供您选择，有3孔板（货号：STA-350/351/351-5）和96孔板（货号：STA-355/355-5）不同样式。其中OxiSelect™ Comet Assay Kit中，包含彗星分析载玻片、彗星分析用琼脂糖以及其它试剂；另外Cell Biolabs根据您的实验要求，还单独提供彗星分析载玻片，也根据3孔板样式和96孔板样式分为多种样式（货号：STA-352/353/353-5/SAT-356/STA-356-5）。每种彗星分析样式均有多种包装供您选择。另外，还提供单独的彗星分析阳性和阴性细胞作为您的试验对照（货号：STA-354）。

产品名称（4-羟基壬烯醛HNE分析） 货号 产品说明（点击查看说明书）
OxiSelect™ 3-Well Comet Assay Kit STA-350/STA-351/STA-352/STA-353 多种分析样式供您选择，请联系我们问询
OxiSelect™ 96-Well Comet Assay Kit STA-355/STA-356 多种分析样式供您选择，请联系我们问询

上海金畔生物科技有限公司向您推荐Cell BioLabs完整的DNA/RNA损伤检测方案，其产品覆盖上述最重要的DNA/RNA损伤分析产品，为您提供最优的检测方案。除了基于单细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析，还有传统的8-OHdG/8-OHG定量、AP位点分析等。除了DNA/RNA损伤，还包括脂质过氧化过程中壬烯(HNE)、丙二醛(MDA)以及8-异前列腺素F2a（8-Isoprostane）ELISA分析检测试剂盒；对于蛋白质的羰基化、硝基化以及终末氧化蛋白产物分析等蛋白氧化损伤检测方案；针对活性氧基团和抗氧化剂的活力检测，也由多种试剂和试剂盒供您选择。如果您对以上产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询氧化应激及损伤相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

8-羟基-(脱氧)鸟嘌呤定量ELISA分析——DNA/RNA损伤分析

发表于由

活性氧(ROS)自由基可以直接攻击生物大分子DNA/RNA诱发DNA/RNA氧化损伤。DNA分子的损伤类型有多种。UV照射后DNA分子上的两个相邻的胸腺嘧啶 (T)或胞嘧啶(C)之间可以共价键连结形成环丁酰环，这种环式结构称为二聚体。DNA 分子还可以发生个别碱基或核苷酸的变化。例如碱基结构类似物5-溴尿嘧啶等可以取代个别碱基等。

针对DNA/RNA损伤的检测，上海金畔生物科技有限公司向您推荐Cell BioLabs完整的DNA/RNA氧化损伤检测方案，其OxiSelect™ Oxidative DNA / RNA Damage ELISA Kits（8-OHdG or 8-OHG Quantitation）提供了快速高效检测核酸中8-OHG或8-OHdG含量的实验方案；OxiSelect™ Comet Assays (Single Cell Gel Electrophoresis)则为您提供多种选择的彗星分析产品；针对DNA损伤中的AP位点检测，Cell Biolabs的OxiSelect™ Oxidative DNA Damage Quantitation Kit (AP Sites)则使用经典的ARP检测方案；DNA双链断裂分析为您提供了快捷的DSB分析试剂。

在各种氧化损伤中，以鸟嘌呤8位碳原子氧化后形成8-羟基-[脱氧]鸟嘌呤(8-OHdG/8-OHG)最为常见。还有一些嘌呤或者嘧啶碱基直接脱去的反应，这样也就形成了核酸中无嘌呤（apurinic）和脱嘧啶（apyrimidinic）位点，统简称AP位点。除了上述氧化损伤外，DNA双链断裂（DSBs）是细胞内多种类型的DNA损伤中最危险、最8-羟基-(脱氧)鸟嘌呤定量ELISA分析——DNA/RNA损伤分析严重的一种。上海金畔生物科技有限公司向您推荐Cell BioLabs完整的DNA/RNA损伤检测方案，其产品覆盖上述最重要的DNA/RNA损伤分析产品，为您提供最优的检测方案。

其中OxiSelect™ Oxidative DNA / RNA Damage ELISA Kits（8-OHdG or 8-OHG Quantitation）提供了快速高效检测核酸中8-OHG或8-OHdG含量的实验方案。在各种氧化损伤中，以鸟嘌呤8位碳原子氧化后形成8-羟基-脱氧鸟嘌呤（8-OHdG）最为常见8-羟基-脱氧鸟嘌呤（8-OHdG）因此也成为DNA损伤最普遍的标志物。作为DNA损伤的副产物，当有化学致癌物刺激时，会产生更多的8-OHdG。在生物体内核酸外切酶修复损伤DNA时，形成的8-羟基-脱氧鸟嘌呤会被分泌出去而不会进行尿液中进行进一步的代谢。同样的情况也在RNA中发生，只不过是由鸟嘌呤8位碳原子氧化后形成8-羟基-鸟嘌呤（8-OHG），其也被作为RNA损伤的重要检测指标。

Cell Biolabs的OxiSelect™ Oxidative DNA / RNA Damage ELISA Kits试剂盒采用竞争性ELISA方法定量8-OHdG/8-OHG。待测样品和8-OHdG/8-OHG标准样分别加入8-OHdG/8-OHG-BSA联结的EIA板内，孵育一段时间后，加入anti-8-OHdG/anti-8-OHG单抗，然后加入HRP联结的二抗，通过与8-OHdG/8-OHG标准曲线比对获得最终数据。该试剂盒检测灵敏，能有效检测样品中100pg/ml的8-OHdG或300pg/ml的8-OHG含量，每个试剂盒能完成至少96次分析。

产品名称 货号 产品说明（点击查看说明书）
OxiSelect™ Oxidative DNA Damage ELISA Kit (8-OHdG Quantitation) STA-320 ELISA比色法检测，96次分析
STA-320-5 ELISA比色法检测，5×96次分析
OxiSelect™ Oxidative RNA Damage ELISA Kit (8-OHG Quantitation) STA-325 ELISA比色法检测，96次分析
STA-325-5 ELISA比色法检测，5×96次分析

上海金畔生物科技有限公司向您推荐Cell BioLabs完整的DNA/RNA损伤检测方案，其产品覆盖上述最重要的DNA/RNA损伤分析产品，为您提供最优的检测方案。除了传统的8-OHdG/8-OHG定量、AP位点分析等，还有基于单细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析。除了DNA/RNA损伤，还包括脂质过氧化过程中壬烯(HNE)、丙二醛(MDA)以及8-异前列腺素F2a（8-Isoprostane）ELISA分析检测试剂盒；对于蛋白质的羰基化、硝基化以及终末氧化蛋白产物分析等蛋白氧化损伤检测方案；针对活性氧基团和抗氧化剂的活力检测，也由多种试剂和试剂盒供您选择。如果您对以上产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询氧化应激及损伤相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

8-异前列腺素F2a（8-Isoprostane）ELISA分析——脂质过氧化检测

发表于由

在病理条件下,ROS产生过多或抗氧化系统活性下降,可引发脂质过氧化反应损伤细胞膜使细胞受损。脂质过氧化为氧应激增强后发生的ROS氧化生物膜的过程，即ROS与生物膜的磷脂、酶和膜受体相关的多不饱和脂肪酸的侧链8-异前列腺素F2a（8-Isoprostane）ELISA分析——脂质过氧化检测及核酸等大分子物质起脂质过氧化反应形成脂质过氧化产物(lipid peroxide, LPO)如丙二醛 (malonaldehyde, MDA)和4-羟基壬烯酸(4-hydroxynonenal,HNE)。

4-羟基壬烯酸(HNE)和丙二醛 (malonaldehyde, MDA)是判断脂质过氧化的两个重要指标，但是除此之外，8-异前列腺素F2a目前已被作为动脉粥样化形成、风湿性关节炎以及癌变的重要检测指标，并已被作为脂质过氧化的另一个重要检测指标。8-异前列腺素F2α(8-isoprostane F2α)是经自由基催化不饱和脂肪酸脂质过氧化(非酶促反应)后的终末产物，是一个分子量为354.5的小分子脂类物质,是前列腺素F2a的异构体。OxiSelect™ 8-iso-Prostaglandin F2a ELISA Kit (8-isoprostane)（目录号：STA-337）提供了8-异前列腺素F2a的ELISA检测方案。

Cell Biolabs的OxiSelect™ 8-iso-Prostaglandin F2a ELISA Kit (8-isoprostane)试剂盒（目录号：STA-337），通过竞争性ELISA检测胞浆、尿液、血浆以及组织提取液等多种样品内的8-iso-PGF2a含量。该试剂盒中，提供8-iso-PGF2a标准样做标准曲线，并有相应的8-iso-PGF2a抗体和竞争性8-iso-PGF2a-HRP等。样品经ELISA反应后在450 nm (最优620 nm)读取数据并参照标准曲线得出数值。该Kit足够完成96次反应，操作简捷，不到3小时就能获得结果。

产品名称 货号 产品说明（点击查看说明书）
OxiSelect™ 8-iso-Prostaglandin F2α ELISA Kit STA-337 ELISA比色法检测，96次分析

上海金畔生物科技有限公司与美国知名细胞试剂服务商Cell BioLabs共同为您定制最优的细胞生物学解决方案，除了脂质过氧化过程中壬烯(HNE)、丙二醛(MDA)以及8-异前列腺素F2a（8-Isoprostane）ELISA分析检测试剂盒；还为您提供蛋白质的羰基化、硝基化以及终末氧化蛋白产物分析等蛋白氧化损伤检测方案；另外对于核酸DNA、RNA的损伤检测，除了传统的8-OHdG/8-OHG定量、AP位点分析等，还有基于单细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析；针对活性氧基团和抗氧化剂的活力检测，也由多种试剂和试剂盒供您选择。如果您对以上产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询氧化应激及损伤相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

ViraSafe™ 慢病毒表达系统——Cell BioLabs慢病毒表达载体

发表于由

在基因治疗中广泛应用的逆转录病毒载体存在的主要问题，是无法高效转导非分裂期细胞，而腺病毒载体虽然能转导非分裂期细胞，但在体内不能实现目的基因稳定的长期表达，且反复应用容易引起免疫反应。慢病毒载体不但可以感染非分裂期细胞，还具有容纳外源性目的基因片段大、稳定整合持久表达、免疫反应小等优点。市场上的慢病毒是由人类免疫缺陷病毒（HIV），通过去除env、vif、vpr、vpu等毒性基因改造而来。复制缺陷型HIV载体通常用水泡口炎病毒G糖蛋白来代替HIV-1的包膜进行包装，从而更安全，宿主范围更广，还能增加病毒的滴度。

慢病毒载体的发展经历了3个阶段：第一代慢病毒载体系统是以三质粒系统为代表。在构建时把HIV-1基因组中进行包装、逆转绿和整合所需的顺式作用元件与编码反式作用蛋白的序列分离，分别构建在三个独立的质粒表达系统上，即包装质粒（一个强启动子如CMV作用下，控制除env以外所有病毒结构基因的表达）、包膜质粒（包含VSV-G基因）和载体质粒（包含目的基因），用这三种质粒共同转染包装细胞如人胚肾293T细胞，在细胞上清中即可收获只有一次感染能力、而无复制能力的慢病毒颗粒。第二代慢病毒载体系统从安全性角度又删去了HIV的所有附属基因。第三代慢病毒载体又进一步做了些安全方面的改进，如删除了U3区的3′LTR和tat基因。

ViraSafe™ 慢病毒表达系统——Cell BioLabs慢病毒表达载体

安全性始终是大家关心的问题，毕竟是HIV改造过来的，不容许有一点闪失。国内的实验室很多都达不到P2的级别，甚至是一堆人挤在一个房间里做各种各样的实验。Cell BioLabs的新一代慢病毒表达系统对广泛应用的第三代慢病毒进行了改进，将Rev与gag和pol基因分离，这意味着要产生原始的病毒，还需要更多的重组步骤。这样完整的ViraSafe™ 慢病毒表达系统包含5个载体（包括一个对照载体），安全性更高。

慢病毒的表达流程一般如下：将目的基因片段克隆到表达载体上；将重组表达载体，与包装混合物（通常是几个质粒的混合物）共转染293细胞；收集病毒上清，测定滴度；感染目的细胞，瞬时表达目的蛋白或用抗生素筛选稳定细胞株；分析目的蛋白。看上去并不复杂，但中间许多步骤需要不断优化。而且慢病毒有一个软肋，就是病毒滴度不高。你可能还需要纯化或浓缩，才能得到108TU/ml的慢病毒。

与目前市场上流行的新一代慢病毒相比，ViraSafe™ 慢病毒表达系统进行了进一步的优化。如在载体质粒上插入了cPPT（增加基因表达水平）及WPRE（增加感染滴度），在一个包装载体中插入腺病毒VA基因以增加感染滴度；同时在整个系统载体的多个部分做了一些基因的优化或删减和插入以增加病毒的安全性。经过这样的优化，ViraSafe™ 最新一代慢病毒表达系统的包装容量增大到10kb，在应用上更广泛；其感染细胞的滴度及外源基因的表达水平均提高，这也在一定程度上弥补了慢病毒在基因治疗领域内的不足；由于对整个慢病毒系统的多层面改造，降低了载体间的同源率和重组机率，更安全。如果您的实验需要长期稳定的基因表达或沉默，而目的细胞又很难转染，那ViraSafe™ 慢病毒表达系统将是您的最理想选择。

产品名称 货号 产品说明
ViraSafe™ Universal Lentiviral Expression System VPK-211-ECO 通用慢病毒表达系统，MCS位点前无启动子，克隆时可插入特异性启动子序列，分双嗜和多嗜两种
VPK-211-PAN
ViraSafe™ Lentivirus Expression System (Puro) VPK-212-ECO EF-1α真核细胞启动子类型，带有Puro抗性筛选标记，分双嗜和多嗜两种
VPK-212-PAN
ViraSafe™ Lentivirus Expression System (Neo) VPK-213-ECO EF-1α真核细胞启动子类型，带有Neo抗性筛选标记，分双嗜和多嗜两种
VPK-213-PAN
ViraSafe™ Lentivirus Expression System (Hygro) VPK-214-ECO EF-1α真核细胞启动子类型，带有Hygro抗性筛选标记，分双嗜和多嗜两种
VPK-214-PAN

另外，根据您实验的不同需求，ViraSafe™ 设计出不同的启动子类型供您选择。有不含有启动子的通用型慢病毒表达载体，您可以用来表达特异性启动子引导的基因；还有真核基因强力启动子CMV启动子类型以及用于表达shRNA的RNAi以及miRNA的启动子供您选择。

美国著名细胞学试剂专家Cell BioLabs为您提供全套的慢病毒技术解决方案，ViraSafe™ 慢病毒表达系统有多种样式供您选择；专门针对慢病毒滴度低的软肋而专门设计的ViraBind™慢病毒浓缩&纯化试剂盒，能让你获得更高滴度和纯度的慢病毒；还有多种慢病毒快速定量以及感染滴度滴定检测方案；Cell BioLabs还有转为慢病毒载体用的293LTV细胞及高效转染试剂供您选择，如果您对慢病毒产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询慢病毒相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

4-羟基壬烯酸（HNE）ELISA分析试剂盒——脂质过氧化检测

发表于由

生物体内活性氧的生成与清除处于动态平衡状态，当各种因素打破这一平衡而导致活性氧浓度超过生理限度时就会损伤生物大分子，包括脂质过氧化、DNA的氧化损伤、蛋白质的氧化和单糖氧化等。在病理条件下,ROS产生过多或抗氧化系统活性下降,可引发脂质过氧化反应损伤细胞膜使细胞受损。脂质过氧化为氧应激增强后发生的ROS氧化生物膜的过程,即ROS与生物膜的磷脂、酶和膜受体相关的多不饱和脂肪酸的侧链及核酸等大分子物质起脂质过氧化反应形成脂质过氧化产物(lipid peroxide, LPO)如丙二醛 (malonaldehyde, MDA)和4-羟基壬烯酸(4-hydroxynonenal,HNE),从而使细胞膜的流动性和通透性发生改变,最终导致细胞结构和功能的改变。4-羟基壬烯酸（HNE）ELISA分析试剂盒——脂质过氧化检测

针对脂质过氧化的检测，上海金畔生物科技有限公司向您推荐Cell BioLabs完整的脂质过氧化检测方案，其OxiSelect™ HNE-His Adduct ELISA Kit（4-羟基壬烯酸-His加合物ELISA检测试剂盒）专门用于快速检测细胞浆、细胞裂解液以及血清中的4-羟基壬烯酸含量；OxiSelect™ 8-iso-Prostaglandin F2α ELISA Kit (8-isoprostane)（8-异前列腺素F2a ELISA检测试剂盒）为尿液、胞浆等8-异前列腺素F2a含量提供了便捷的解决方案；而OxiSelect™ TBARS Assay Kit (MDA Quantitation)（丙二醛TBARS定量分析试剂盒）以及OxiSelect™ MDA (Malondialdehyde) Assays（丙二醛分析）都能快速检测脂质过氧化产物MDA的含量。

4-羟基壬烯酸(HNE)是两个强毒力的脂质过氧化终产物之一，常常作为判断脂质过氧化的指标。4-羟基壬烯酸(HNE)可促进Cuppfer 细胞与肝细胞释放细胞因子，并共同进一步介导肝细胞死亡、Mallory小体形成、肝星状细胞活化和肝纤维化形成。HNE还具有使中性粒细胞趋化和浸润的功能。Cell BioLabs的4-羟基壬烯酸-His加合物ELISA检测试剂盒（OxiSelect™ HNE-His Adduct ELISA Kit 目录号：STA-334）为你快速测定多种样品类型的4-羟基壬烯酸(HNE)提供了便捷方案。

HNE能够通蛋白结合形成稳定的、加合物状态的晚期脂质过氧化终产物，这种被HNE修饰的蛋白质在细胞内会进一步导致被氧化蛋白在功能和结构上的改变。Cell Biolabs的HNE-His加和物ELISA检测试剂盒（HNE-His Adduct ELISA Kit 目录号：STA-334）是一种基于酶免疫分析的快速、定量检测HNE-His蛋白加合物的试剂方案。试剂盒内提供HNE-BSA作为标准曲线，整个试验程序只需要4小时，能快速检测细胞裂解液、血清及胞浆样品中的HNE含量。

产品名称 货号 产品说明（点击查看说明书）
OxiSelect™ HNE-His Adduct ELISA Kit STA-334 ELISA比色法检测，96次分析
HNE-BSA Control STA-335 100ug，标准曲线阳性对照

上海金畔生物科技有限公司与美国知名细胞试剂服务商Cell BioLabs共同为您定制最优的细胞生物学解决方案，除了脂质过氧化过程中壬烯(HNE)和丙二醛(MDA)检测试剂盒；还为您提供蛋白质的羰基化、硝基化以及终末氧化蛋白产物分析等蛋白氧化损伤检测方案；另外对于核酸DNA、RNA的损伤检测，除了传统的8-OHdG/8-OHG定量、AP位点分析等，还有基于单细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析；针对活性氧基团和抗氧化剂的活力检测，也由多种试剂和试剂盒供您选择。如果您对以上产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询氧化应激及损伤相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

蛋白质氧化硝基化Nitrotyrosine分析——蛋白氧化损伤检测

发表于由

生物体内活性氧的生成与清除处于动态平衡状态，当各种因素打破这一平衡而导致活性氧浓度超过生理限度时就会损伤生物大分子，包括脂质过氧化、DNA的氧化损伤、蛋白质的氧化和单糖氧化等。活性氧对蛋白质的作用包括修饰氨基酸，使肽链断裂，形成蛋白质的交联聚合物，改变构像和免疫原性等五个方面。

目前对于蛋白质氧化损伤的检测指标主要有两个，分别是蛋白羰基生成（羰基化）和二酪氨酸的生成（蛋白质中蛋白质氧化硝基化Nitrotyrosine分析——蛋白氧化损伤检测酪氨酸硝基化）。Cell BioLabs为您提供完整的蛋白质氧化损伤检测方案，其OxiSelect™ Protein Carbonyl Assay Kits（蛋白质羰基化分析试剂盒）专门用于快速检测蛋白质发生氧化应激后，其羰基化程度；OxiSelect™ Protein Nitration (Nitrotyrosine) Assay Kits（蛋白质硝基化分析试剂盒）为检测细胞内蛋白质是否发生硝基化反应提供了便捷的解决方案；而OxiSelect™ AOPP Assay Kits（终末氧化蛋白产物分析试剂盒）则能快速的检测蛋白氧化后的损伤后果。

NO被超氧自由基氧化成（过氧化）亚硝酸离子，能够和蛋白质中的酪氨酸残基发生反应生成3-硝基酪氨酸(Nitrotyrosine)残基，也可以作为蛋白质氧化损伤的指标。但这种指标受到蛋白质样品种类的限制。如牛血清中酪氨酸含量比较多，容易观察到3-硝基酪氨酸的生成；而铜锌超氧化物歧化酶中仅含4个酪氨酸分子，因此一般不易观察到3-硝基酪氨酸的生成。并且，3-硝基酪氨酸的生成有一定的限度。即当3-硝基酪氨酸的生成达到饱和后，继续增加氧化物浓度不再增加3-硝基酪氨酸的量。3-硝基酪氨酸的生成可以用Amado方法，采用325 nm的激发光，415 nm处发射荧光是二酪氨酸的特征。

Cell BioLabs的OxiSelect™ Protein Nitration (Nitrotyrosine) Assay Kits（蛋白质硝基化分析试剂盒），直接检测硝基化蛋白内3-硝基酪氨酸的含量，参照阳性对照硝基化BSA中的3-硝基酪氨酸含量的标准曲线，得到实验数值。该检测方法高效灵敏，对于3-硝基酪氨酸的含量的检测灵敏度达到20nM-8.0μM。试剂盒内包含阳性对照，可完成96次检测。另外，该蛋白质硝基化分析试剂盒为您的蛋白质氧化损伤检测提供了多样选择。您可以根据您的实验要求，选择ELISA（目录号：STA-305/STA-305-5）、免疫印迹（目录号：STA-303）检测方法中的任何一种。

产品名称 货号 说明（点击查看说明书）
Nitrotyrosine ELISA Kit STA-305 ELISA比色法检测，一次96孔板分析
STA-305-5 ELISA比色法检测，五次96孔板分析
Nitrotyrosine Immunoblot Kit STA-303 免疫印迹杂交、ECL显色，10次分析
Protein Tyrosine Nitration Control (Nitrotyrosine-BSA) STA-304 10ug，标准曲线对照

上海金畔生物科技有限公司与美国知名细胞试剂服务商Cell BioLabs共同为您定制最优的细胞生物学解决方案，除了蛋白质的羰基化、硝基化以及终末氧化蛋白产物分析等蛋白氧化损伤检测方案；还为您提供脂质过氧化过程中壬烯(HNE)和丙二醛(MDA)检测试剂盒；另外对于核酸DNA、RNA的损伤检测，除了传统的8-OHdG/8-OHG定量、AP位点分析等，还有基于单细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析；针对活性氧基团和抗氧化剂的活力检测，也由多种试剂和试剂盒供您选择。如果您对以上产品感兴趣，请请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询氧化应激及损伤相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

蛋白质氧化羰基化分析——Cell BioLabs蛋白氧化损伤试剂盒

发表于由

自由基对蛋白质的作用包括蛋白质肽链断裂、蛋白质分子相互间交联聚合、蛋白质氨基酸发生氧化脱氨反应、氧自由基攻击蛋白质还原性基团、脂类氧化裂解所产生的丙二醛与蛋白质上的氨基产生分子间的交联等。目前对于蛋白质氧化损伤的检测指标主要有两个，分别是蛋白羰基生成（羰基化）和二酪氨酸的生成（蛋白质中酪氨酸硝基化）。Cell BioLabs为您提供完整的蛋白质氧化损伤检测方案，其OxiSelect™ Protein Carbonyl Assay Kits（蛋白质羰基化分析试剂盒）专门用于快速检测蛋白质发生氧化应激后，其羰基化程度；OxiSelect™ Protein Nitration (Nitrotyrosine) Assay Kits（蛋白质硝基化分析试剂盒）为检测细胞内蛋白质是否发生硝基化反应提蛋白质氧化羰基化分析——Cell BioLabs蛋白氧化损伤试剂盒供了便捷的解决方案；而OxiSelect™ AOPP Assay Kits（终末氧化蛋白产物分析试剂盒）则能快速的检测蛋白氧化后的损伤后果。

蛋白质羰基化是指氨基酸残基侧链中的氨基或亚氨基受到氧自由基攻击最后转变成醛基,并释放NH3的过程。其在体内的形成主要是通过金属离子催化氧化系统完成。在这个过程中，二价铁离子与蛋白质上的氨基酸残基形成铁(Ⅱ)一蛋白质配位复合物。H202作用于此配位复合物的铁(Ⅱ)上，产生·OH、OH-和铁(Ⅲ)一蛋白质配位复合物。·OH从侧链氨基酸上提出一个氢原子，使侧链氨基酸上的碳上有一个不配对电子。在此不配对电子作用下，铁(Ⅲ)一蛋白质配位复合物又重新变回铁(Ⅱ)一蛋白质配位复合物，随后配位键断开，二价铁离子和NH3与复合物分离，由此在蛋白质侧链形成羰基或羰基衍生物。蛋白质中的赖氨酸、精氨酸、脯氨酸、苏氨酸残基都有可能参与糖基化。

蛋白质氧化损伤羰基化的检测目前主要使用2，4-二硝基苯肼法。传统方法多是采用比色法，虽然操作简单但是误差很大，但不能满足精密的蛋白质糖化测定要求。Buss及其同事采用免疫反应的原理使用DNP抗体检测蛋白质羰基化程度，但是在具体的操作中，用TCA沉淀蛋白的时候会有至少20%的总蛋白损失，导致了其结果的不准确。Cell BioLabs的OxiSelect™ Protein Carbonyl Assay Kits（蛋白质羰基化分析试剂盒）则提供了更优的选择，使用该羰基化检测试剂盒，无需蛋白浓缩沉淀从而降低了中间的损失，而且检测灵敏度也由原来的>4 mg/mL大幅提高到10 μg/mL。

产品名称 货号 说明（点击查看说明书）
OxiSelect™ Protein Carbonyl ELISA Kit STA-310 比色法检测，一次96孔板分析
STA-310-5 比色法检测，五次96孔板分析
OxiSelect™ Protein Carbonyl Spectrophotometric Assay STA-315 分光光度计法检测，40次分析
OxiSelect™ Protein Carbonyl Immunoblot Kit STA-308 免疫印迹杂交、ECL显色，10次标准7.5 cm X 8.5 cm分析
Oxidized Protein Immunoblot Control (Carbonyl-BSA) STA-309 10ug，标准曲线对照

OxiSelect™ 蛋白质羰基化分析试剂盒为您提供多种检测方案，您可以根据您的实验要求，选择ELISA（目录号：STA-310/STA-310-5）、免疫印迹（目录号：STA-308）或者分光光度计（目录号：STA-315）检测方面中的任何一种。

上海金畔生物科技有限公司与美国知名细胞试剂服务商Cell BioLabs共同为您定制最优的细胞生物学解决方案，除了蛋白质的羰基化、硝基化以及终末氧化蛋白产物分析等蛋白氧化损伤检测方案；还为您提供脂质过氧化过程中壬烯(HNE)和丙二醛(MDA)检测试剂盒；另外对于核酸DNA、RNA的损伤检测，除了传统的8-OHdG/8-OHG定量、AP位点分析等，还有基于单细胞水平的彗星分析和DNA双链断裂分析；针对活性氧基团和抗氧化剂的活力检测，也由多种试剂和试剂盒供您选择。如果您对以上产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询氧化应激及损伤相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

慢病毒定量——Cell BioLabs慢病毒快速定量试剂盒

发表于由

在基因治疗中广泛应用的逆转录病毒载体存在的主要问题，是无法高效转导非分裂期细胞，而腺病毒载体虽然能转导非分裂期细胞，但在体内不能实现目的基因稳定的长期表达，且反复应用容易引起免疫反应。慢病毒载体不慢病毒定量——Cell BioLabs慢病毒快速定量试剂盒但可以感染非分裂期细胞，还具有容纳外源性目的基因片段大、免疫反应小等优点，在基因治疗中具有广泛的应用前景。

人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)改造的慢病毒载体(Lentiviral vector)既可感染分裂细胞，也可感染非分裂细胞，如神经细胞、造血干细胞、肝细胞等，还具有整合到宿主细胞基因组、稳定长效转染、感染效率高等优点，是细胞基因功能研究和基因治疗中不可多得的优良载体。目前对于慢病毒的滴度滴定大部分通过检测腺病毒内壳蛋白p24的表达来完成。而在一些商用的腺病毒载体中，由于加入了GFP标记蛋白，因此也可以通过流式细胞仪检测GFP蛋白表达水平来分析病毒滴度，病毒滴度为表达GFP的细胞数乘以相应稀释倍数。另外，还可以通过TaqManPCR检测细胞中病毒拷贝数的方法检测滴度。

上海金畔生物科技有限公司针对慢病毒定量为您推荐美国细胞生物学专业产品制造商Cell BioLabs的QuickTiter™ Lentivirus Rapid Quantitation Kit。该试剂盒较p24蛋白表达以及GFP蛋白检测更简介方便，且成本更低。Cell BioLabs慢病毒快速定量试剂盒的工作原理如右图所示，首先使用核酸酶将病毒悬液内的核酸分子降解，然后用特异性的慢病毒捕获珠子结合慢病毒，从而分离出蛋白核酸复合物，洗脱下慢病毒后进一步降解，然后标记其病毒核酸，通过480/520 nm滤镜荧光仪下读取数据，对照慢病毒RNA标准曲线得出慢病毒含量。

Cell BioLabs慢病毒快速定量试剂盒内包括溶液A、溶液B、溶液C、慢病毒捕获液、Dye染料以及慢病毒RNA标准物。该试剂盒能直接用于慢病毒悬液，定量步骤快捷，可以在45-60min内获得数据。检测灵敏，可以从100ul慢病毒上清中检测出1010VP/ml的慢病毒，足够慢病毒实验中的中、高滴度需求。

产品名称 货号 产品说明（点击查看说明书）
QuickTiter™ Lentivirus Quantitation Kit VPK-112 荧光法检测，20次分析

Cell BioLabs为您提供全套的慢病毒技术解决方案，ViraSafe腺病毒表达系统有多种样式供您选择；多种慢病毒滴度检测和定量试剂为您提供快捷和准确的慢病毒检测方案；ViraBind™慢病毒浓缩和纯化试剂盒采用了专利技术能让你获得更高滴度和纯度的慢病毒，解决了慢病毒低滴度的软肋；Cell BioLabs还有转为慢病毒载体用的293LTV细胞及慢病毒高效转染试剂供您选择，如果您对慢病毒产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询慢病毒相关的实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。