Detector™RNA体外转录探针标记试剂盒-KPL生物素探针标记

RNA探针是指带有标记的能与组织内相对应的核苷酸序列互补结合的一段单链cDNA或cRNA分子。在RNA原位杂Detector™RNA体外转录探针标记试剂盒-KPL生物素探针标记交中,不仅要选择适当的探针,而且还要使探针得到有效的标记。近年来非同位素标记探针已有了极大的近步,常用于RNA的非同位素标记技术有生物素、地高辛、碱性磷酸酶、辣根过氧化酶和荧光素。

 

体外转录法制备RNA探针是一种制备与克隆片段序列相同的单链RNA探针的方法。进行体外转录时,先将靶核苷酸序列克隆到含噬菌体转录启动子的载体中,然后在RNA聚合酶的作用下,以DNA为模板,以含有标记的三磷酸苷为原料,对SP6/T7/T3等启动子下游的序列进行转录,而启动子本身并不被转录。将目的DNA插入转录启动子的下游,由于转录反应的特征,会在短期内制备出大量拷贝的RNA。该转录物可通过在转录合成时掺入标记的核苷酸biotin-21-UTP完成。制备成的RNA探针可保存至少1年。

 

单链RNA探针杂交比DNA探针更有效,这是因为单链RNA不存在自我杂交的问题。而且与DNA探针相比,RNA探针更敏感,这是因为RNA-RNA或RNA-DNA杂合物比DNA-DNA更稳定。Detector™RNA体外转录探针标记试剂盒包括了两个对照:人beta-Actin模板DNA(检测完整性),还有生物素化的定量标准样。

 

经Detector™RNA体外转录探针标记试剂盒制备的探针可以用以下方法检测:制备后的生物素化探针电泳并被转移到膜上,然后使用无探针的酶标链霉亲和素,加入底物后显色发光。 

 

Detector™RNA体外转录探针标记试剂盒制备的标记探针可应用于Southern杂交、Northern杂交, mRNA原位杂交等。

中英文品名 货号 规格 详情
Detector™ RNA Biotinylation Kit 60-01-02 20 reactions 产品说明书

作为美国最早实现亲和素纯化二抗商业化的生物公司,同时也是世界上较大的二抗和底物显色系统的生产商。KPL一直提供高质量的用于分子生物学、免疫学、细胞生物学和体外诊断试剂及用于蛋白和核酸检测的试剂盒。针对核酸DNA探针标记,KPL有三种生物素标记试剂盒供您选择,分别为随机引物DNA探针标记、PCR DNA探针标记以及反转录RNA探针标记。另外还有多种杂交显色底物及相关产品。如果您对KPL的产品感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司免费索取相关产品资料,或者问询您所感兴趣的产品类型。

Detector™PCR探针标记试剂盒-KPL DNA生物素标记

生物素与亲和素的结合只需要生物素的脲基环部分。因此可将其戊酸侧链通过酰胺键与核酸分子相连,构成生物素标记的核酸标记探针,与固定在滤膜上或固定在组织细胞或染色体原位的核酸分子的同源序列互补杂交。KPL的PCR探针标记生物素试剂盒(Detector™ PCR DNA Biotinylation Kit)通过PCR反应,使用随机掺入生物素标记的biotin-N4-dCTP分子嵌入DNA分子探针中,制备成用于核酸杂交的DNA标记探针。Detector™PCR探针标记试剂盒-KPL DNA生物素标记

PCR探针标记生物素试剂盒(Detector™ PCR DNA Biotinylation Kit)制备的生物素标记探针具有很高的敏感性,能检测低拷贝的序列。该探针标记试剂盒由于使用了PCR方法,与随机引物探针标记试剂盒相比,能实现特异标记,并能扩增任何感兴趣的序列甚至包括DNA粗样,其适用性更大。试剂盒内的biotin-N4-dCTP与未标记的dCTP比率被优化,能够较大的掺入生物素,并能检测低拷贝或微量的mRNA、质粒、基因组DNA等。

PCR探针标记生物素试剂盒内包括预标记的标准样(用于检测在标记反应中DNA的合成量)。该探针标记方案的最优DNA模板大小为100-1100bp大小。所需模板量分别为基因组DNA(1-100 ng)、质粒(10pg-1ng)。在进行PCR探针标记之前,需要提前进行PCR的预试验。同时试剂盒内还提供对照引物和模板DNA,以检测PCR反应的完整性。采用该试剂盒进行探针的生物素标记,最快1小时内即能完成,制备好的标记探针能保存1年以上。

经PCR探针标记生物素试剂盒制备的探针可以用以下方法检测:制备后的生物素化探针电泳并被转移到膜上,然后使用无探针的酶标链霉亲和素,加入底物后显色发光。制备的标记探针可应用于Southern杂交、Northern杂交, 克隆或成斑杂交、点杂交及原位杂交等。

中英文品名 货号 规格 详情
Detector™ PCR DNA Biotinylation Kit 60-01-01 30 reactions 产品说明书

作为美国最早实现亲和素纯化二抗商业化的生物公司,同时也是世界上较大的二抗和底物显色系统的生产商。KPL一直提供高质量的用于分子生物学、免疫学、细胞生物学和体外诊断试剂及用于蛋白和核酸检测的试剂盒。针对核酸DNA探针标记,KPL有三种生物素标记试剂盒供您选择,分别为随机引物DNA探针标记、PCR DNA探针标记以及反转录RNA探针标记。另外还有多种杂交显色底物及相关产品。如果您对KPL的产品感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司免费索取相关产品资料,或者问询您所感兴趣的产品类型。

Detector™随机引物探针标记试剂盒-KPL DNA生物素标记

生物素与亲和素的结合只需要生物素的脲基环部分。因此可将其戊酸侧链通过酰胺键与核酸分子相连,构成生物素标记的核酸探针、标记探针与固定在滤膜(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上或固定在组织细胞或染色体原位的核Detector™随机引物探针标记试剂盒-KPL DNA生物素标记酸分子的同源序列互补杂交。探针和待测核酸在杂交前若为双链,应先变性成单链,然后用偶联有酶或荧光物质的亲和素的探针与待测核酸的片段互补杂交,使杂交部位显色(加入相应的酶底物)或产生荧光。

随机引物DNA生物素标记试剂盒(Detector™ Random Primer DNA Biotinylation Kit)通过DNA复制的延伸反应,以6碱基的随机序列作为引物,用缺乏5′-3′外切活性的Klenow大片段(有5′-3′聚合活性和3′-5′外切校正活性)作为DNA延伸聚合酶,催化掺入生物素标记的biotin-N4-dCTP分子的dNTP进行延伸反应,最终使生物素标记的dCTP分子嵌入进DNA分子探针中。

Detector™随机引物探针标记试剂盒内的组分均被优化设计,能高效扩增,并且检测灵敏。适合该检测方案的模板大小为300bp-1000bp大小(对于大于1000bp的模板,建议首先使用限制性内切酶酶切成300-1000bp大小;对于低于300bp的模板进行探针标记,建议使用KPL的PCR DNA生物素标记试剂盒)。产生的探针片段可以到100-1000个碱基,平均大小在300bp。该探针标记试剂盒制备探针最快只需1小时,制备的DNA探针在-20°C下可保存1年。

Detector™随机引物探针标记试剂盒内包括预标记的标准样(用于检测在标记反应中DNA的合成量),经过系列稀释的标准样和新标记的探针,固定在膜上,并使用酶标的链霉亲和素蛋白,通过底物或化学发光检测,以最终确定标记探针的量。为获得最高的敏感性和最低的背景,探针的应用浓度需要经过试验优化。

Detector™随机引物探针标记试剂盒制备的标记探针可应用于Southern杂交、Northern杂交, 克隆或成斑杂交、点杂交及原位杂交等。

中英文品名 货号 规格 详情
Detector Random Primer DNA Biotinylation Kit 60-01-00 30 reactions 产品说明书

作为美国最早实现亲和素纯化二抗商业化的生物公司,同时也是世界上较大的二抗和底物显色系统的生产商。KPL一直提供高质量的用于分子生物学、免疫学、细胞生物学和体外诊断试剂及用于蛋白和核酸检测的试剂盒。针对核酸DNA探针标记,KPL有三种标记试剂盒供您选择,分别为随机引物DNA探针标记、PCR DNA探针标记以及反转录RNA探针标记。另外还有多种杂交显色底物及相关产品。如果您对KPL的产品感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司免费索取相关产品资料,或者问询您所感兴趣的产品类型。

DNA-ExitusPlus™ DNA污染清除试剂

DNA扩增技术是目前实验室最常用的技术之一。但是由于在PCR过程中出现的DNA污染却是令人很头痛的事情,目前主要有2种方法来预防DNA的污染:

1. 通过加入DNA酶或者化学方法修饰降解DNA;
2. 通过对DNA碱基进行修饰,保证DNA完整性以阻止DNA聚合酶的序列读取;DNA-ExitusPlus™ DNA污染清除试剂

然而经DNA双链断裂分析(multiBIND biotec GmbH,德国)结果显示,目前市场上的大多数DNA清除试剂均不能完全的降解DNA!针对上述产品的不足,德国Applichem公司推出了最新的DNA-ExitusPlus™系列DNA清除试剂。该试剂在已有产品的基础上做了进一步的改良,DNA-ExitusPlus™能同时对DNA链进行双链断裂和降解。其DNA清除效果非常明显,当合适的应用于工作区域时,能完全的消除由于非目标DNA导致的假性扩增。参见右图,C为未处理对照,X1-X4为传统商业化DNA清除试剂,D+为DNA-ExitusPlus™系列DNA清除试剂。

DNA-ExitusPlus™是一种非碱性,没有腐蚀性,没有致癌影响的DNA污染去除溶液。它可以使用在实验室的所有地方。据最新的一项测试表明,传统商业化的DNA去除剂往往含有有潜在腐蚀性危险的化学成分。Applichem的DNA-ExitusPlus™则表现完美,没有对金属板产生任何损伤。对实验室其他类型的仪器表面也进行了腐蚀性检测,DNA-ExitusPlus™不会对塑料、橡胶等仪器的表面产生任何损伤。

货号 品名 包装Size 货期 备注
A7089,0100 DNA-ExitusPlus™ 100ml 常备现货

DNA-ExitusPlus™ DNA污染清除试剂

点击查看产品详情:DNA-ExitusPlus™

A7089,0250 DNA-ExitusPlus™ 250ml 常备现货
A7089,0500 DNA-ExitusPlus™ 500ml 常备现货
A7089,1000 DNA-ExitusPlus™ 1L 常备现货
A7089,1000RF DNA-ExitusPlus™ 1L 常备现货
A7089,2500RF DNA-ExitusPlus™ 2.5L 常备现货

DNA-ExitusPlus™ DNA污染清除试剂使用方法:

清理实验室台面:直接喷洒,反应10-15分钟后,用无菌水湿纸擦拭后风干即可,无需用无菌水冲洗
清理实验室器材:浸湿纸巾后擦拭仪器设备表面,再用干净的纸巾擦干;对于小型器材设备,直接浸润后擦干;
清理塑料玻璃设备:通过涡旋将试剂覆盖到完整设备表面,无菌水冲洗后风干;
清理移液器:按说明拆卸移液器后将轴浸润到试剂1分钟,无菌水冲洗后风干。

DNA-ExitusPlus™ DNA污染清除试剂特点:

  1. 可去除实验室仪器及操作场所表面DNA和RNA的污染;
  2. 可清洁实验室内PCR工作场所和仪器装置,防止假性扩增;
  3. 可用于清洁电泳设备、移液器、离心管、离心柱等装置;
  4. 简单,试剂以可反复使用的喷雾装置存放并喷洒使用;
  5. 快捷,只需10分钟,喷洒后擦拭后即可;
  6. 高效,采用接触催化及协同作用非酶性降解DNA和RNA;
  7. 安全,所有的组分均可降解,不会残留在表面对人体和机器造成伤害;
  8. 无毒,不含有腐蚀性的酸碱物质。

上海金畔生物科技有限公司为您的提供最优的生物实验室解决方案,我们向您推荐德国著名生化试剂品牌Applichem的全套核酸污染清除ExitusPlus™系列。其DNA-ExitusPlus™专用于DNA以及RNA污染的清理、RNase-ExitusPlus™则能有效去除RNase酶污染。如果您对上述预防清除产品感兴趣,请请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的实验解决方案,或索取最新的Applichem产品资料。

逆转录病毒克隆载体-重组反转录病毒表达载体

逆转录(也成为反转录病毒,Retrovirus)病毒载体是常用的病毒载体之一。反转录病毒载体在构建时,删去了pol、env基因和gag基因的3′端,但保留了病毒颗粒所需的ψ+序列。其目的是在于提高载体的安全性,防止反转录病毒进入宿主细胞后进行增殖并包装成病毒颗粒对宿主细胞造成可能的伤害。这样,反转录病毒载体就可利

Vector Names Catalog Number
pBABEhygro RTV-001-HYGRO
pBABEneo RTV-001-NEO
pBABEpuro RTV-001-PURO
pMCs-IRES-GFP RTV-040
pMCs-Puro RTV-041
pMXs RTV-010
pMXs-IRES-Blasticidin RTV-016
pMXs-IRES-GFP RTV-013
pMXs-IRES-Neo RTV-015
pMXs-IRES-Puro RTV-014
pMXs-Neo RTV-011
pMXs-Puro RTV-012
pMYs RTV-020
pMYs-IRES-GFP RTV-021
pMYs-IRES-Neo RTV-023
pMYs-IRES-Puro RTV-022
pMYs-Puro RTV-024
pMZs RTV-030

用这些外壳蛋白包装成病毒颗粒在辅助细胞系内大量扩增。反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10 kb左右,以很高的转染率感染宿主细胞,特别是分裂中的细胞。转入宿主的细胞后,反转录病毒载体随机整合到宿主细胞基因组内,这种载体还在不断改进之中。

逆转录表达载体种类较多,根据其基本载体骨架分为pBABE、pMCs、pMXs、pMYx等,又有不同筛选标记,hygro(潮霉素)、neo(新霉素)、puro(嘌呤霉素)、Blasticidin(杀稻瘟素)等。很多逆转录病逆转录病毒克隆载体-重组反转录病毒表达载体毒载体包括pBABE和pMXs都是基于莫洛尼鼠白血病病毒 (MMLV),这种逆转录病毒载体在一些非成熟细胞里面被沉默表达,如胚胎瘤细胞、胚胎干细胞和造血干细胞,因此适应面受到限制。而骨髓瘤病毒(MPSV)和PCC4细胞来源的骨髓瘤病毒(PCMV)是MMLV的变种,能很好的在上述非成熟细胞内稳定表达。

Cell Biolabs的pMCs 、pMYs和pMZs都在MMLV启动子的基础上又加上了PCMV或MPSV启动子,后者能使逆转录病毒在EC肿瘤干细胞和ES胚胎干细胞内更稳定表达。特别的,pMYs系统更适合于造血干细胞中的外源基因表达,pMC则更适合在EC和ES细胞内使用。

美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为逆转录病毒研究人员提供完备的重组逆转录病毒表达系统及其相关产品和服务,产品包括逆转录病毒的最新一代表达系统,针对逆转录病毒滴度低的软肋而专门设计的逆转录病毒浓缩纯化试剂盒,逆转录病毒的快速定量,以及逆转录病毒高效转染试剂和用于包装重组逆转录病毒的包装细胞系等,几乎覆盖反转录病毒研究中的所有技术环节。如果您对上述逆转录病毒包装细胞系感兴趣,请请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的实验解决方案,或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

DMEM培养基系列产品

DMEM培养基是一种在MEM培养基的基础上研制的,含各种氨基酸和葡萄糖的细胞培养基。与MEM相比,增加了各种成分用量,同时根据其D(+)-葡萄糖的含量又分为高糖型(低于4.5g/L)和低糖型(低于1.0g/L)。高糖型有利于细DMEM培养基系列产品胞停泊于一个位置生长,适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。克隆培养用高糖效果较好,常用于杂交瘤的骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞培养。DMEM培养基广泛应用于疫苗生产和各种初代病毒宿主细胞的细胞培养及单一细胞培养;如A9、3T6、BALB/3T3、COS-1、COS-3、COS-7、L6、WEHI-3b等细胞系的培养。

上海金畔生物科技有限公司为您提供多种德国AppliChem原装进口的DMEM培养基。根据培养基内是否添加葡萄糖(Glucose)、谷氨酰胺(Glutamine)、丙酮酸钠(Sodium Pyruvate)、碳酸氢钠(Sodium Hydrogen Carbonate)、酚红(Phenol Red)以及HEPES分为不同包装,每种包装又有1L、5L、10L、50L不同规格。均为粉末状,便于运输和长期保存。

货号 葡萄糖 谷氨酰胺 丙酮酸钠 碳酸氢钠 酚红 HEPES
A1924 1.0g/L +    
A1314 1.0g/L + +    
A0826 1.0g/L +  
A3134 1.0g/L + + +  
A1925 1.0g/L +    
A1315 1.0g/L + +   +
A1926 4.5g/L    
A1316 4.5g/L +    
A1985 4.5g/L +    
A1986 4.5g/L + + –     
A3137 4.5g/L +
A3139 4.5g/L + +
A1950 4.5g/L +
A1965 4.5g/L +
A1979 4.5g/L + +
A1951 4.5g/L + + +

上述每种货号又有1L、5L、10L、50L不同规格,您可以根据您的实验选择合适的DMEM培养基,更详细的产品信息请点击:DMEM培养基详细产品列表信息。

DMEM培养基相关的一些附加成分:

1. 谷氨酰胺:几乎所有的细胞对谷氨酰胺有较高的要求,细胞需要谷氨酰胺合成蛋白质,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。因为脱掉氨基后,L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。所以,各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。但是谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置-20℃冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4℃冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷氨酰胺。 

 2. 丙酮酸钠:丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源。尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是,如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢丙酮酸钠。

3. 酚红:酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不使用加有酚红的培养基。

AppliChem产品有上万种之多,产品覆盖了生物化学、分子生物学、细胞生物学、微生物学、免疫学、蛋白组学、植物学、基础化学、制药与诊断试剂研发生产等领域,已经成为多家世界著名品牌试剂的供应商。作为AppliChem的中国一级代理,上海金畔生物科技有限公司将一如既往的为您提供最优质的生化试剂和德国品质的产品技术服务。如果您对AppliChem的产品感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司免费索取最新的艾普力(Applichem)目录,或者问询您所感兴趣的产品类型。

逆转录病毒转染—ViraDuctin™逆转录病毒高效转染试剂

逆转录病毒载体是常用的病毒载体之一。反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10kb左右,以很高的转染率感染宿主细胞,特别是分裂中的细胞,如干细胞等。由于逆转录病毒滴度较低,因此其在某些细胞里的转导效率不是很理想。在逆转录病毒转染细胞的过程中最重要的一步是融合,只有一小部分的逆转录病毒载体才能转导进细胞,因此,逆转录病毒颗粒的吸附是其转导的限速步骤。

在逆转录病毒的转染试验中,多聚阳离子,如聚凝胺®(Polybrene®)由于被发现能促进转染的效率被应用于逆转录病毒逆转录病毒转染—ViraDuctin™逆转录病毒高效转染试剂的转导,其作用机理可能是通过中和细胞与病毒颗粒之间的静电排斥而促进它们之间的贴附。然而在一些特殊类型的细胞里,作为逆转录病毒的转导介质,聚凝胺®(Polybrene®)的表现也不是很理想。逆转录病毒转染—ViraDuctin™逆转录病毒高效转染试剂逆转录病毒转染—ViraDuctin™逆转录病毒高效转染试剂逆转录病毒转染—ViraDuctin™逆转录病毒高效转染试剂

Cell BioLabs针对上述逆转录相关病毒转导过程中的主要问题,开发出ViraDuctin™ 逆转录病毒高效转导试剂(ViraDuctin™ Retrovirus Transduction Kit)。该试剂盒能高效提高逆转录病毒在多种细胞内的转导效率,包括传统转导方法转导较低的细胞非分裂细胞。该转导试剂使用便捷,只需2小时。与Polybrene(聚凝胺)相比,转导效率提高2-6倍,对于难转导的细胞,如原代细胞和干细胞也有非常好的效果。

产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
ViraDuctin™ Retrovirus Transduction Kit RV-200 40次逆转录病毒转染
RV-201 200次逆转录病毒转染

ViraDuctin™ 独有的逆转录病毒高效转导试剂,使用了Cocktail的组合试剂能有效的去除逆转录病毒上清中降低转染效率的抑制物。能有效的提高转染效率,适用于原代细胞和干细胞。该转导试剂分40和200次两种包装规格(以24孔板内一个孔为一次)。

美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为逆转录病毒研究人员提供完备的重组逆转录病毒表达系统及其相关产品和服务,产品包括逆转录病毒的最新一代表达系统,针对逆转录病毒滴度低的软肋而专门设计的逆转录病毒浓缩纯化试剂盒,逆转录病毒的快速定量,以及逆转录病毒高效转染试剂和用于包装重组逆转录病毒的包装细胞系等,几乎覆盖反转录病毒研究中的所有技术环节。如果您对上述逆转录病毒包装细胞系感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的实验解决方案,或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

逆转录病毒定量—QuickTiter™逆转录病毒快速定量试剂盒

逆转录病毒载体是常用的病毒载体之一。转入宿主的细胞后,反转录病毒载体随即整合到宿主细胞基因组内,这种整合的位点是随机的。逆转录病毒载体就可利用这些外壳蛋白包装成病毒颗粒在辅助细胞系内大量扩增。当通过纯化提取获得重组逆转录病毒颗粒后,需要对病毒液的浓度或感染活性进行定量检测。

一般来说,对于病毒颗粒进行定量主要是通过检测纯化的病毒液中DNA的OD260来检测其病毒含量(Quantitation);而对于病毒颗粒的滴度检测(Titer),则需要通过传统的克隆成斑试验或者对病毒特异蛋白的免疫反应试验等检测。Cell Biolabs为逆转录病毒的定量提供了QuickTiter™快速检测方案。

QuickTiter™逆转录病毒快速定量试剂盒采用了专利的捕获胶技术,能专门结合逆转录病毒颗粒,从而大大缩减试验时间,并提高定量的准确度。其定量试剂盒都能对已经纯化的和未纯化的病毒液进行检测。基本的试验大概程序如下:收集病毒上清,使用核酸酶裂解其中的DNA和RNA杂质,剩下的为病毒颗粒、蛋白及蛋白复合物,然后使用捕获胶吸附上病毒颗粒从而分离出来,洗脱下来后,对逆转录病毒颗粒变性分别获得病毒蛋白及病毒核酸,使用荧光染料标记核酸后进行定量分析。

产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
QuickTiter™ Retrovirus Quantitation Kit VPK-120 荧光法定量,20次分析

Cell Biolabs独有的QuickTiter™ 逆转录病毒快速定量试剂盒通过检测逆转录病毒DNA含量来测定其滴度,可以快速定量已纯化或未纯化的逆转录病毒,通过480/520 nm滤镜荧光仪下读取数据,对照腺标准曲线得出滴度。可以在45-60min内获得数据,检测灵敏,能有效检测1.5 X 109 Viral Particles (VP)/mL浓度内的逆转录病毒,可做20次。

美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为逆转录病毒研究人员提供完备的重组逆转录病毒表达系统及其相关产品和服务,产品包括逆转录病毒的最新一代表达系统,针对逆转录病毒滴度低的软肋而专门设计的逆转录病毒浓缩纯化试剂盒,逆转录病毒的快速定量,以及逆转录病毒高效转染试剂和用于包装重组逆转录病毒的包装细胞系等,几乎覆盖反转录病毒研究中的所有技术环节。如果您对上述逆转录病毒包装细胞系感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的实验解决方案,或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

逆转录病毒纯化&浓缩——ViraBind™逆转录病毒浓缩纯化试剂盒

逆转录病毒载体是常用的病毒载体之一。反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10kb左右,以很高的转染率感染宿主细胞,特别是分裂中的细胞,如干细胞等。反转录病载体多半用于基因治疗,由于病毒载体在宿主细胞基因组上随机插入,人们担心会引起不安全的后果,这种载体还在不断改进之中。

常规的逆转录病毒纯化一般采用超速密度离心法(利用不同大分子,如DNA、蛋白、病毒颗粒、细胞碎片等具有不同的密度进行梯度离心而分离出来的原理)分离病毒颗粒,但是耗时耗力。而且,逆转录病毒的低滴度一直是其软肋。Cell Biolabs为此研制出的拥有专利技术的ViraBind™ 逆转录病毒纯化试剂,再结合新型的纯化装置,能在4-6小时内,每次能将100ml病毒上清纯化500-1000倍,从而获得109-1010TU/ml感染滴度的逆转录病毒颗粒。采用该Kit纯化获得的逆转录病毒液,不含有游离的包装蛋白以及转导抑制物,因此非常有利于后继的逆转录病毒操作。

Cell Biolabs提供两种逆转录病毒纯化方案,一种是用纯化柱装置,另一种是PLUS的采用透析柱装置。前者纯化过程快速,只需3小时;后者采用了透析柱装置,时间上要过夜透析,但是纯度很高。具体纯化步骤及大概区别如下图所示:

逆转录病毒纯化&浓缩试剂盒(离心柱) 逆转录病毒纯化&浓缩试剂盒PLUS(透析柱)

逆转录病毒纯化&浓缩——ViraBind™逆转录病毒浓缩纯化试剂盒

逆转录病毒纯化&浓缩——ViraBind™逆转录病毒浓缩纯化试剂盒

采用专利的ViraBind™试剂,使用离心柱,只需3小时 采用专利的ViraBind™试剂,使用透析柱,需要过夜,但纯度高
   
产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
ViraBind™ Retrovirus Concentration and Purification Kit (100 ml/prep) VPK-130 每次100ml病毒液,2次离心浓缩纯化
VPK-131 每次100ml病毒液,5次离心浓缩纯化
VPK-131-5 每次100ml病毒液,25次离心浓缩纯化
产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
ViraBind™ PLUS Retrovirus Concentration and Purification Kit (50 ml/prep) VPK-135 每次50ml病毒液,2次透析浓缩纯化
ViraBind™ PLUS Retrovirus Concentration and Purification Mega Kit (500 ml/prep) VPK-136 每次500ml病毒液,2次透析浓缩纯化
VPK-136-5 每次500ml病毒液,10次透析浓缩纯化

Cell Biolabs逆转录病毒浓缩纯化试剂盒中普通纯化逆转录病毒Kit每次纯化100ml,分2次/5次/25次三种规格;PLUS纯化Kit分中提(50ml每次)和大提(500ml每次),中提包装可使用2次,大提又分为2次和10次。每次能将100ml病毒上清纯化500-1000倍,从而获得109-1010TU/ml感染滴度的逆转录病毒颗粒。采用该Kit纯化获得的逆转录病毒液,不含有游离的包装蛋白以及转导抑制物,因此非常有利于后继的逆转录病毒操作。

美国著名细胞产品公司Cell BioLabs为逆转录病毒研究人员提供完备的重组逆转录病毒表达系统及其相关产品和服务,产品包括逆转录病毒的最新一代表达系统,针对逆转录病毒滴度低的软肋而专门设计的逆转录病毒浓缩纯化试剂盒,逆转录病毒的快速定量,以及逆转录病毒高效转染试剂和用于包装重组逆转录病毒的包装细胞系等,几乎覆盖反转录病毒研究中的所有技术环节。如果您对上述逆转录病毒包装细胞系感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的实验解决方案,或索取最新的Cell BioLabs产品资料。