蛋白表达是指用模式生物如：细菌、酵母、动物细胞或者植物细胞表达外源基因蛋白的一种分子生物学技术，在基因工程中占据有核心地位。蛋白表达系统主要由宿主，外源基因，载体以及辅助成分构成。其中，宿主及载体的选择在成功表达目的蛋白上起着举足轻重的地位。 美国Lucigen公司成立于1998年，主要从事于生命科学领域相关产品的研发，该公司在分子生物学领域处于领导地位。该公司主要致力于基因克隆，蛋白表达等核心分子生物学试剂产品的研发与生产，并且获得了用户的一致好评。针对蛋白表达系统，Lucigen公司推出了一种新型的克隆表达系统。

该系统的优点主要有：
1.节约时间。该系统为您提供处理好的载体及感受态细胞，无需连接步骤，可供客户直接使用，和传统的克隆相比，很大程度上缩短了实验所需时间。
2.无需连接酶。直接将目的片段和载体混合，通过重组可得到含有目的基因的载体。
3.蛋白表达的精确控制。根据客户自己需求，可以通过诱导系统精确控制N-his或C-his标签蛋白的表达。
4.两个启动子可供选择。该系统具有两种载体，两种启动子供选择，T7和Rhamnose，根据客户实验需要，选择适合的启动子。
5.增加蛋白溶解度。该系统还为您提供一种携带有SUMO标签的质粒，该标签可以增加目的蛋白的溶解度。为了不影响您实验，该SUMO标签是可切割的。

该系统具有的两种启动子载体有各自的感受态细胞。T7启动子所对应的表达载体能够高表达目的蛋白，T7表达系统是一个双宿主表达系统，即包含HI-Control 10G Competent cell和HI-Control BL21 Competent cell两种感受态细胞。该载体的表达主要用于通过IPTG诱导的蛋白高表达。

Rhamnose表达系统是一个单宿主表达系统。即质粒的扩增和蛋白的表达在同一种感受态细胞里可完成。该体统的蛋白表达是可调节的。通过控制rhamnose的浓度来实现目的蛋白的不同水平的表达。但是这个载体系统所对应的蛋白表达水平比T7载体更低，主要用于某些毒性蛋白或者不溶蛋白的过表达。

注：以上产品均包含预处理好的质粒及感受态细胞，以及其他试剂。如有不清楚，欢迎来电咨询。

另外，Lucigen公司的特色产品还包括CloneSmart®平端克隆试剂盒、BigEasy®线性克隆系统、pEZSeq™平端克隆试剂盒、ClonePlex™ AK文库构建试剂盒、DNA Terminator ®末端修复试剂盒、EconoTaq® DNA聚合酶及E.cloni感受态细胞等。上海金畔生物科技有限公司作为Lucigen在中国地区的一级代理，可以为您提供更低的价格，更好的服务。如果你对上述相关产品或技术敢兴趣，可以直接拨打021-50837765 到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的最优产品和解决方案，或索取相关手册和资料。我们会为您做的更多！

目前生物医药研究和生物技术生产的主要方法是利用外源表达系统来表达目的蛋白，常用的外源表达系统有大肠杆菌表达系统，酵母表达系统，哺乳动物表达系统等。要实现目的基因在外源表达系统中的成功表达和尽可能地提高其表达量，可以通过增加目的基因剂量，目的基因密码子优化，改善培养条件等方法实现，其中目的基因密码子优化起到关键的作用。如果目的基因的密码子与表达宿主不匹配，则会降低mRNA的翻译效率和稳定性，甚至会造成mRNA翻译的提前终止。目前可以通过两个途径来解决这个问题：①提高宿主表达系统中低丰度的tRNA；②对目的基因进行密码子改造，使它的密码子是宿主表达系统的高频密码子，也就是通常所说的密码子优化。

Staby^TM Codon T7 kit特别设计的pSCodon1载体可表达6个大肠杆菌稀有密码子tRNA，包括AUA，AGG，AGA，CUA，CCC和GGA。结合T7高效启动子以及Staby特有的无抗生素的ccdAB筛选系统，可以直接用于高效表达含稀有密码子的各类蛋白，不再需要进行密码子改造工作。

试剂盒组份

(1) pSCodon vector DNA,

(2) CYS21 competent bacteria for cloning,

(3) SE1 competent bacteria for expression,

(4) regeneration medium,

(5) sequencing primers,

(6) expression control,

(7) instruction manual.

感受态细胞可以单独购买，均有电转化和化学转化2种类型的产品可以选择，电转效率要明显高于化学转化。

产品优势

(1)具有StabyExpress的所有优点。

(2)对包含有稀有密码子的异源蛋白可以保证高表达量，而不再需要对核酸序列进行定点突变。

(3)不需要额外的质粒。

操作步骤

1. 将目的基因克隆入pSCodon载体

2. 转化CYS21获得正确的构建(不建议直接转化表达菌株，因为表达菌株中T7及目的蛋白的本底表达将显著降低质粒提取效率)

3. 重组质粒转化SE1菌株

4. 诱导表达（IPTG诱导表达，由于StabyExpress^TM系统可显著降低菌体蛋白的表达，对T7 RNA聚合酶或目的蛋白的表达没有任何改变，因此可直接使用原有的T7诱导条件进行表达，或直接使用Delphi提供的Staby^TM Switch medium进行小量表达）

相关产品信息

上海金畔生物科技有限公司作为Delphi中国大陆以及香港和澳门地区的独家代理，全面供应其所有产品，包括StabyCloning™ PCR克隆系统（StabyCloning™ kit）、StabyExpress™ T7蛋白表达系统（StabyExpress™ T7 kit）、Cherry™ 蛋白表达系统（Cherry™ Express/Codon kit）、StabyCodon™ T7蛋白表达系统（StabyCodon™ T7 kit）、GetStaby™ kit以及相关感受态细胞（Competent Cells）。欢迎致电021-50837765或021-63599871了解更多产品信息以及专利相关事宜。

在细菌发酵过程中，质粒的稳定性备受关注。由于目的蛋白的过度表达往往增加了宿主菌的负担，其生长速度显著低于空载菌株。因此绝大多数表达载体中插入了抗生素抗性基因作为筛选标记，发酵过程中通过大量使用抗生素来避免空载菌株的生长。但是蛋白产品中抗生素的残留经常会引起机体过敏反应，而且抗性基因的广泛使用导致环境中越来越多的耐药菌株的出现。在日益增加的监管要求下，生物制药和工业生产领域中的蛋白表，对抗生素的零痕量的要求将越来越高，因此非抗生素筛选系统的使用已成为生物制药企业的必然趋势。

Delphi genetics的Staby™技术是一种毒素-抗毒素系统(toxin-antitoxin system，TA系统)，巧妙地在宿主细胞染色体和表达载体中分别引入毒素基因ccdB和抗毒素基因ccdA。在缺乏抗毒素蛋白ccdA的情况下，细菌染色体上的ccdB基因编码100aa左右的稳定的毒素蛋白ccdB，使细胞内促旋酶中毒，从而干扰DNA的合成，杀伤宿主细胞。而质粒中引入的ccdA基因编码90aa的不稳定的蛋白，可与染色体上ccdB基因启动子结合，从而抑制毒素蛋白的表达。

StabyExpress™技术结合了T7表达元件与Delphi独有的TA系统，可应用于涉及细菌发酵的任何工业级蛋白质生产工艺。该技术符合FDA和EMEA对人/畜用蛋白药物生产工艺必须消除抗生素耐药基因的要求。研究表明，StabyExpress技术可大幅提升重组蛋白质工业级生产的产量。StabyExpress™专利技术已于2009年、2010年分别全球较大的人用疫苗研发与生产企业法国赛诺菲巴斯德（赛诺菲-安万特旗下的疫苗公司）、全球较大的制药集团美国GSK投入使用。

StabyExpress™ T7蛋白表达系统（StabyExpress™ T7 kit）内包含了目的基因的克隆及其在E.coli中表达的所有试剂。其中有两项技术：T7表达元件以及Delphi独有的质粒稳定性控制技术，这样就保证了蛋白产物的高效高产量的表达以及操作的标准化。
使用可实现目的基因的克隆操作以及下游目的蛋白的表达。

试剂盒组份
(1) pStaby vector DNA,
(2) CYS21 competent bacteria for cloning,
(3) SE1 competent bacteria for expression,
(4) regeneration medium,
(5) sequencing primers,
(6) expression control,
(7) instruction manual.
感受态细胞可以单独购买，均有电转化和化学转化2种类型的产品可以选择，电转效率要明显高于化学转化。

产品优势
(1)克服质粒不稳定性。
(2)更高的表达量，3-7倍。
(3)降低目的蛋白之外的蛋白背景。
(4)不需要使用抗生素。
(5)T7启动子，便于替换原T7启动的表达系统。

操作步骤
1. 将目的基因克隆入pStaby1.2载体。 
2. 转化CYS21获得正确的构建(不建议直接转化表达菌株，因为表达菌株中T7及目的蛋白的本底表达将显著降低质粒提取效率)。
3. 重组质粒转化SE1菌株。
4. 诱导表达（IPTG诱导表达，由于StabyExpress™系统可显著降低菌体蛋白的表达，对T7 RNA聚合酶或目的蛋白的表达没有任何改变，因此可直接使用原有的T7诱导条件进行表达，或直接使用Delphi提供的Staby™ Switch medium进行小量表达）

相关产品信息

上海金畔生物科技有限公司作为Delphi中国大陆以及香港和澳门地区的独家代理，全面供应其所有产品，包括StabyCloning™ PCR克隆系统（StabyCloning™ kit）、StabyExpress™ T7蛋白表达系统（StabyExpress™ T7 kit）、Cherry™ 蛋白表达系统（Cherry™ Express/Codon kit）、StabyCodon™ T7蛋白表达系统（StabyCodon™ T7 kit）、GetStaby™ kit以及相关感受态细胞（Competent Cells）。欢迎致电021-50837765或021-63599871了解更多产品信息以及专利相关事宜。

癌细胞游出（尤其癌细胞渗出）是癌转移的重要一环，是细胞和内皮级联反应的最后一步。癌细胞借助于自身的阿米巴运动从被溶解的基底膜缺损处游出。近来发现肿瘤细胞的衍生的细胞激肽，如自分泌移动因子（autocrine motility factor），如肝细胞生长因子和胸腺素β15(thymosin β15)可介导瘤细胞的移动。基质成分（如胶原、蛋白多糖）的降解产物和某些生长因子（如胰岛素样生长因子Ⅰ和Ⅱ）对癌细胞有化学趋向性，还可以促进血管形成和肿瘤生长。癌细胞穿过基底膜后，重复上述步骤进一步溶解间质性的结缔组织，在间质中移动。到达血管壁时，可以以同样方式穿过血管的基底膜进入血管。

Cell Biolabs的CytoSelect™细胞游出分析 (CytoSelect™ Cell Transmigration Assays) 具有强大功能，能够对癌细胞游出以及内皮和癌细胞的相互作用进行精确定量。实验操作简单，仅需简单的添加，培养，最终用荧光发测定485/538 nm 荧光值即可。

试剂盒包含：
1、24孔板，24 个细胞筛 (8 μm）
2、500X CytoTracker? 试剂
3、4X 裂解液
4、TNFα
5、棉棒
6、小镊子

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相关产品信息（白细胞游出分析）

Cell BioLabs为您提供全套的细胞分析检测方案，针对于细胞的克隆形成及细胞转化，除了上述肿瘤细胞的药物敏感性分析外，还有针对细胞转化的软琼脂克隆形成以及克隆性肿瘤细胞分离试剂盒提供。另外，Cell Biolabs还开发出其他多方位的基于细胞功能特征，特别是肿瘤细胞的特性的细胞粘附分析、细胞转移与浸润、细胞吞噬快速分析、细胞活力/死亡/毒性分析、细胞衰老及收缩检测，以及血管生成分析等多种分析试剂盒。如果您对上述细胞分析方案感兴趣，请致电021-50837765,021-63599871/63599872到上海金畔生物科技有限公司垂询细胞研究的相关实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

酶联免疫分析（EIA)用亲和力抗体检测蛋白是一种很特殊的方法。用酶标亲和力抗体和敏感底物一起用免疫组化的方法来检测与膜蛋白绑定的样本。随着蛋白结合在膜上后，用一抗选择性的和蛋白结合。通过特定单抗和血清样本的筛选，相应蛋白会结合到膜上。与碱性磷酸酶相偶联的酶标二抗直接作用于此部位。AP的底物用的是5-bromo-4-chloro-3-indolyl- phosphate/nitroblue tetrazolium (BCIP/NBT)。碱性磷酸酶可以促进BCIP的去磷酸化，从而在抗体作用部位形成不溶于水的紫色沉淀物。当曝光时颜色会有些许衰退。

蛋白免疫印迹检测试剂盒包含酶标记的具有亲和性的纯化抗体来检测小鼠，兔或者血清样本。使用中，酶标二抗（试剂盒提供）还可以在没有中介抗体的情况下直接检测小鼠，兔的膜蛋白。此试剂盒无需其他缓冲液。

随着实验进行，目的蛋白一定会被固定在检测膜上。硝化纤维素，聚乙二烯二氟化物（PDVP)和聚酰胺纤维膜都可以应于于此试剂盒。对斑点印迹实验来说，蛋白以斑点形式出现并被固定到膜上；对免疫印迹实验来说，蛋白通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分来并通过电转仪转移到膜上。

以上产品来自KPL公司，它是美国最早实现亲和素纯化二抗商业化的生物公司，同时也是世界上较大的二抗和底物显色系统生产商。产品有：亲和纯化的抗体，WB、IHC、ELISA 底物及 Kit，蛋白检测和纯化试剂盒，核酸标记和检测等试剂。为全球科研与诊断试剂生产厂商持续提供最优质的产品。

另外上海金畔生物科技有限公司公司还会根据客户的实际需求提供不同类型的生化试剂产品，你所需要都能在上海金畔生物科技有限公司公司找到一个圆满的解决方案。作为一站式服务和生命科学研究解决方案提供者，上海金畔生物科技有限公司还有多种蛋白提取、蛋白电泳、细胞染料以及显色发光底物等试剂。我们能为您提供一站式的产品及实验解决方案。如果您对上述产品感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的最优产品和解决方案，或索取相关手册和资料。我们会为您做的更多！