Immundiagnostik抗体药血药浓度与药效检测试剂盒

抗体药是一类相对新型的生物制剂，检测抗体药水平及其耐药抗体水平在治疗和个性化用药上具有重要意义。

为什么要检测药物水平和ADAs?

• 生物治疗药的免疫性会影响产品的药效和安全性。尤其是耐药抗体（ADAs）通过影响药物到达预期靶向的能力来影响药物暴露，改变药物动力学，引起潜在严重的副作用 ；
• 使用生物制药患者的临床效果，免疫易变，从无效到对患者健康产生严重的副作用（诸如过敏性反应，细胞因子释放综合征，内源性蛋白介导关键功能交叉中和反应） ，
• 耐药抗体应答会造成治疗药物无效或者增加不良反应风险（输液反应，过敏反应免疫复合物介导的疾病

为了确认这些可能性，管理机构要求评估生物制药的免疫原性，以及要求对有关诱导临床结果的特点进行检测，这一要求是生物制药获得批准过程的一部分。

Immundiagnostik（IDK）公司（德国）成立于1986年，是一个全球性的诊断试剂与服务供应商，为临床疾病研究提供了包括心血管疾病、骨骼系统疾病、氧化应激、肿瘤等一系列体外诊断试剂盒,可适用于不同的样品基质（如血液、尿液、粪便、组织培养上清液等）和物种（如人、小鼠，大鼠等）的检测；其中，药物水平检测系列是该品牌中的特色产品。

产品优势：

• 低样品量(10-25 µl)，即使小样品量也能满足检测要求
• 所有所需液体和试剂都在试剂盒中提供
• 节省时间，孵育时间短（1h左右）。
• 价格实惠

产品展示：

抗体药物水平检测试剂盒

抗药物抗体（ADAs）检测试剂盒

上海金畔生物科技有限公司是IDK品牌的中国指定代理，如您对以上产品感兴趣欢迎拨打上海金畔生物科技有限公司全国客服热线021-50837765，或者登陆官方网址www.jinpanbio.cn查询产品详细信息。

一、免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)
免疫组织化学是利用抗原抗体的特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究。免疫组织化学染色技术不仅有较高的敏感性和特异性，其特点是将形态学改变与功能、代谢变化结合起来，直接在组织切片，细胞涂片或培养细胞爬片上定位一些蛋白质和多肽类物质的存在，并可精确到亚细胞结构水平，结合电子计算机图像分析系统或激光扫描共聚集显微术等技术，对被检物质进行定量分析。
免疫组化实验所用的组织和细胞标本有哪些？
实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类，前者包括石蜡切片（病理大片和组织芯片）和冰冻切片，后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法，对于组织形态保存好，且能作连续切片，有利于各种染色对照观察；还能长期存档，供回顾性研究；石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响，但可进行抗原修复，是免疫组化中首选的组织标本制作方法。
石蜡切片为什么要做抗原修复？有哪些方法？
石蜡切片标本均用甲醛固定，使得细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。所以要求在进行IHC染色时，需要先进行抗原修复或暴露，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，而恢复抗原的原有空间形态。
常用的抗原修复方法有微波修复法，高压加热法，酶消化法，水煮加热法等，常用的修复液是pH6.0的0.01 mol/L的柠檬酸盐缓冲液。

二、免疫组化实验用抗体的选择
1、一抗选择要点
(1)选择单克隆还是多克隆抗体。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体，单克隆抗体能目标明确地与单一特异抗原决定簇结合，就象导弹精确地命中目标一样。另一方面，即使是同一个抗原决定簇，在机体内也可以由好几种克隆产生抗体，形成好几种单克隆抗体混杂物，称为多克隆抗体。在抗原抗体反应中，一般单克隆抗体特异性强，但亲和力相对小，检测抗原灵敏度相对较低；而多克隆抗体特异性稍弱，抗体的亲和力强，灵敏度高，但易出现非特异性染色(可以通过封闭等有所避免)。
(2)种属来源。一般家兔来源的抗体多是多克隆；而小鼠来源的抗体多是单克隆，但也有另外。这条主要要与后面的二抗来源相匹配。
(3)实验目的是检测什么种属的抗原，即species reactivity。这一点很重要，一般说明书上都有注明，如小鼠Ms、大鼠Rat、人Hum等等。
(4)能否做免疫组化。一般一抗说明书都会注明做WB、IHC、ICC、IF等，建议最好选择注明的抗体，因为一般都是经过文章证明。
(5)检测标本类型。用于检测石蜡切片还是冰冻切片，一般能做石蜡切片的抗体，可能都可以用来检测冰冻切片，但能做冰冻切片的抗体，不一定能检测石蜡切片中的抗原。
(6)生产厂家。国外著名抗体生产商原装抗体质量一般没问题，尤其是美国Lifespan公司生产的IHCPlusAntibodies系列抗体，全部经过病理组织切片检测验证，100%质量保证，国内上海金畔生物科技有限公司有售，就是价格有点贵；而国内分装厂家用的一抗工作液，价格便宜，但有时结果的稳定性和重复性稍差，不同批次重复性较差。
(7)价格与质量的矛盾。我个人认为一抗原装质量可能会好点，因为许多一抗避免反复冻融，且在稀释液中稳定性较差(若时间长)，但价格较贵。

2、二抗选择要点
(1)种属来源。主要根据一抗种属来源来决定购买二抗来源，如一抗是小鼠来源，那二抗就买抗小鼠的即可(羊、兔等均可)。
(2)标记物的选择。有HRP、Biotin、荧光素等标记物。一般SP三步法二抗选择Biotin标记的二抗，以与后面的SP结合反应；而免疫荧光染色就需要购买不同荧光素标记的二抗，如罗丹明、FITC、Cy3等常用荧光素。这主要与后面有无三抗和三抗种类有关。
(3)选择IgM还是IgG。一般一抗是IgM，那么二抗就选择IgM；反之，一抗是IgG，则二抗选择IgG。
(4)生产厂家。一般SP三步法我们实验室选择中杉金桥的二抗染色试剂盒，内含有工作液的二抗，故试验中只需摸索一抗的浓度即可，效果还可以；而免疫荧光的二抗我一般选择KPL公司，效果还不错。

三、免疫组化常用的染色方法有哪些
根据标记物的不同分为免疫荧光法，免疫酶标法，亲和组织化学法，后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高，有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平的定位，其中生物素——抗生物素染色法最常用。
免疫组织化学染色方法 IHC染色方法有很多种，按部标记物的性质可分为荧光法(荧光素标记)，酶法(辣根过氧化物酶，碱性磷酸酶)，免疫金银及铁标记技术等;按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步，三步或多步法);按结合方式可分为抗原-抗体结合，如PAP法和标记的葡聚糖聚合物(labeled dextran polymer,LDP)法，以及亲和连接，如ABC法、标记的链亲和素-生物素(labeled streptoavidin-biotin ,LSAB)法等，其中LSAB是最常用的使用方法。
影响免疫组化染色质量的因素很多，在实验中应注意组织的取材和固定，选择质量好的商品化抗体，恰当的选择和使用封闭和抗原修复手段，严格的技术操作和对照等。由于组织内待测抗原已被分解破坏，或抗原含量过低、或固定剂的使用不当及抗体质量不佳和稀释度不当等可出现假阴性反应;反之，由于抗体与非待检抗原发生交叉反应，或组织对抗体的非特异性吸附及内源性过氧化酶(endogenousperoxidase)没有被阻断等还可出现假阳性结果。这些可造成判断的失误。

植物组培广泛应用于植物科研：如模式植物，作物育种等；工厂化生产：如观赏花卉植物，中药材生产，园林园艺等，但是组培过程中种苗的污染，尤其是真菌和内生菌的污染是广大工作者十分头疼的问题。美国Plant CellTechnology(简称PCT)专门为植物组织培养而研发的专利产品——Plant Preservative Mixture(简称PPM™,专利号5750402），可以有效抑制由于空气、灭菌不彻底、交叉污染、外植体消毒等各种原因导致的植物组培苗的细菌、真菌和农杆菌污染。

产品特点：

1. 无毒性——PPM是一种热稳定的抗菌剂，用于植物组织培养中植物的微生物污染防治与清除。在合理的使用剂量下，不会对植物的生长（如种子萌发，愈伤增殖、再生等）产生任何影响，可视为培养基标准配方成份；

2. 作用效果好——PPM 主要用于预防和消除来自空气、水源或者人体接触等外界因素导致的植物组培过程中的微生物污染，同时，对于植物内生菌也同样具有非常好的抑制效果；

3. 适用物种广泛——PPM广泛适用于绝大多数被子植物和裸子植物；

4. 使用方便——PPM具有热稳定性，能直接加入培养基高温灭菌而不会影响使用效果，使用更加方便；

5. 性价比高——PPM相对于常规抗生素而言，用量低，性价比更高。

相对抗生素的优势：

1. PPM 能广泛抑制和清除细菌和真菌的污染，并防止真菌孢子的萌发；

2. PPM 是通过抑制多种酶的活性而达到抑菌效果，从而能避免耐药突变体的发生；

3. PPM 具有热稳定性，无需过滤灭菌，能直接加入培养基高温灭菌而不会影响使用效果，使用更加方便；

4. PPM 性价比更高，可更加广泛的应用于更多的科学研究、作物育种、组培苗工厂化生产中。

使用方法：

以下使用指南是针对大多数情况下的常规使用说明，特殊情况可做适当调整。

*说明：MS 盐溶液是泛指，如样本的培养基盐溶液不是MS 盐，以具体适用的培养基盐溶液为准；

产品订购信息：

二抗广义上是指专门和一抗进行特异性反应和结合的抗体，在免疫学反应中，经常需要针对试验选择不同的二抗，上海金畔生物科技有限公司能为您的科研工作提供最适合和最全面的二抗产品。检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择，同时在后继试验中也会有不同的检测方案，因此在选择二抗的时候要综合考虑一抗的类型及后继检测方案的要求，一般来说，选择合适的二抗需要需要从下面几个方面考虑：

【一抗的种属来源】

二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源，例如：如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体，二抗则选抗小鼠的二抗（山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可）；如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体，则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。即根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。上海金畔生物科技有限公司能为您提供最全的抗不同种属的原装进口二抗，包括抗小鼠、大鼠、兔、山羊、绵羊、人、豚鼠、猪、马、牛、鸡、鸭等二抗。

【一抗的类别亚型】

二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体。其中单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述，如果你的一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM。如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么你可以选择抗IgG1的二抗，此种抗体在双标记实验中尤其适合。在不清楚一抗为何种类/亚类的情况下，可以选用抗相应物种IgG。上海金畔生物科技有限公司能为您提供通用的IgG(H+L)二抗，或者特异性只结合IgM的Anti IgM (mu) Antibody、IgA的Anti IgA (alpha) Antibody、IgE的Anti IgE (epsilon) Antibody等。

【二抗的种属来源】

一般来说，不同的种属来源与二抗的质量没有必然的联系，来源于山羊的二抗与来源于驴的二抗在一般的实验里没有太多的差别。然而在一些特殊的实验里，如双标实验里，如果其中一个一抗是山羊来源的，一个是小鼠来源的，则相应的二抗分别要抗山羊和抗小鼠的二抗，这时候，二抗就不能选择山羊或者小鼠来源的。上海金畔生物科技有限公司有相应的驴来源的二抗，非常适合做类似双标的免疫实验。

【二抗的耦联标记】

一般来讲，耦联到二抗上的探针主要有酶（辣根过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP或其衍生物APAAP，PAP），荧光基团（FITC、Rhodamine、Texas Red、PE、Rhodamine、Dylight等）、生物素、金颗粒。选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验。对于Western Blot和ELISA，最常用的二抗是酶标二抗；而细胞或组织标记实验（细胞免疫化学，组织免疫化学，流式细胞术）中通常使用荧光基团标记的二抗，免疫组化中也可以使用辣根过氧化酶或碱性磷酸酶标记的二抗。如果想要更大程度的放大检测信号，可以使用Biotin/Avidin检测系统。在一些荧光检测方案中，则需要选择不同的荧光标记；而金颗粒标记的二抗则更多的应用于免疫电镜中。上海金畔生物科技有限公司能为您提供上述所有不同类型标记的二抗。

【是否经过血清吸附过的二抗】

为减少二抗与样本的非特异性结合，上海金畔生物科技有限公司还能为您提供不同血清吸附的原装进口二抗。如您的检测样本是人源的蛋白，一抗是小鼠源的单克隆抗体，二抗就需要选择抗小鼠源的二抗，如果您对实验的特异性要求很高，那上海金畔生物科技有限公司向您推荐经过人血清吸附过的抗小鼠源的二抗，这种二抗由于经过人血清吸附而排除了与人源组织（如IgG等）可能发生非特异性反应的IgG，因此将非特异性结合降低到最低。如KPL的HRP Labled Anti-Rabbit IgG (H+L) Antibody, Human Serum Adsorbed二抗就是经过人血清吸附过的。而Anti-Mouse IgG (H+L), Extra Serum Adsorbed, Peroxidase-labele二抗则是经过多种血清吸附过的二抗。

【Anti-IgG还是Anti-IgG, F(ab’)2 fragment】

在一些如胸腺、脾脏、血液的组织以及造血细胞、淋巴细胞、B细胞等细胞内，通常含有较多的Fc受体，这时候选择二抗时最好选择Anti-IgG, F(ab’)2 fragment这样的特异性二抗，这样就消除了由于Fc部分与IgG的非特异性结合。常规的Anti-IgG (H+L)二抗与IgG的重链和轻链都有结合反应，即与IgG的Fc的F(ab’)2片段都能结合；由于IgG、IgM、IgA都有保守的轻链结构域，因此Anti-IgG (H+L)与它们都有交叉反应。而Anti-IgG, F(ab’)2 fragment经过了IgG Fc片段的吸附，因此只与IgG的F(ab’)2片段结合，然而IgG、IgM、IgA都有保守的轻链结构域，因此与它们也有交叉反应。

【Anti-IgG(H+L)、Anti-IgG (gamma)、Anti-IgM (mu)、Anti-IgA (alpha)】

在一些特殊的实验里，只需要检测样本里的IgG或者IgM，常规的Anti-IgG (H+L)由于与IgG的重链和轻链都有结合反应，而IgG、IgM、IgA都有保守的轻链结构域，因此不能特异性的检测某种类型的IgG或者IgM。这时候就需要针对特殊类型Ig分子的二抗。如KPL的Anti-IgG (gamma)二抗是由Anti-IgG(H+L)与IgM、IgA等吸附后的二抗，消除了能与后者结合的部分。

上海金畔生物科技有限公司备有全面的二抗现货产品并能提供最完整的二抗产品线。主要二抗品牌为全球较大的二抗和底物生产厂商KPL以及前沿抗体生产商 ProteinTech。按照标记分，有HRP、AP、生物素等标记二抗，FITC、TRITC、Rhodamine、Cy3/5、Dylight等荧光二抗；按照检测物种分，有抗人、大鼠、小鼠、猪、驴、绵羊、山羊、小鸡、马、兔、仓鼠、狗、牛，以及多种细菌类二抗；另外，还有IgG、IgA、IgM以及IgG(Fc)、IgG(ab’)2等不同类型抗体。

如果你对上述二抗产品及相关技术信息感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询相关的最优产品和解决方案，或索取相关手册和资料。我们会为您做的更多！