I-Chem 114-0005 I-Chem 5加仑 LDPE方形瓶,未处理 I-Chem 5 Gallon LDPE Cubitainer Unprocessed General Environment 4 830
月度归档:2024年04月
Azido-Cy5酪胺-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Azido-Cy5酪胺价格 4245
产品规格
产品货号
Ex (nm) | 651 | Em (nm) | 670 |
分子量 | 1030.14 | 溶剂 | DMSO |
存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
Azido-Cy5酪酰胺是美国AAT Bioquest生产的Cy系列产品,对于许多免疫组织化学(IHC)应用,传统的酶促扩增程序足以实现足够的抗原检测。但是,有几个因素限制了这些程序的敏感性和实用性。事实证明,酪胺信号放大(TSA)是一种特别通用且功能强大的酶扩增技术,具有更高的检测灵敏度。 TSA基于HRP在低浓度过氧化氢存在下将含有标记酪胺的底物转化为氧化的高反应性自由基的能力,该自由基可与HRP处或附近的酪氨酸残基共价结合。为了实现大IHC检测,酪胺用荧光团预标记。每个过氧化物酶标记物的多个酪胺底物转换所赋予的信号放大转化了对低丰度靶标的超灵敏检测以及使用较少量的抗体和杂交探针。在免疫组织化学应用中,源自TSA方法的灵敏度增强允许增加一级抗体稀释以减少非特异性背景信号,并且可以克服由次优固定程序或低水平靶表达引起的弱免疫标记。 Azido-Cy5酪胺含有明亮的Cy5,可以使用标准的Cy5滤波片组轻松检测到。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Azido-Cy5酪胺。
适用仪器
荧光显微镜 | |
Ex: | Cy5滤波片组 |
Em: | Cy5滤波片组 |
推荐孔板: | 黑色透明底板 |
滤波片: | Cy5滤波片组 |
样品染色示例
概述
1.固定/透化/封闭细胞或组织
2.在封闭缓冲液中加入一抗
3.加入HRP偶联的二抗
4.准备酪胺工作溶液,在室温下在细胞或组织中施用5-10分钟
操作步骤
在没有额外说明的情况下,所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C,避免反复冻融循环。该方案适用于细胞和组织染色。
1.制备储存溶液
2.制备工作溶液
Tyramide工作溶液(1X):
将1μLTyramide原液加入1 mL含有0.003%H2O2的缓冲液中。
注意:Tris Buffer,pH = 7.4时可用于获得佳性能。
注意:Tyramide工作溶液应立即使用。
3.1在室温下用PBS中的3.7%甲醛或多聚甲醛固定细胞或组织20分钟。
3.2用PBS冲洗细胞或组织两次。
3.3在室温下用0.1%Triton X-100溶液使细胞透化1-5分钟。
3.4用PBS冲洗细胞或组织两次。
注意:组织固定,脱蜡和再水化,根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水。根据需要使用优选的特定溶液/方案进行抗原修复。
4.过氧化物酶标记
4.2可选:如果使用HRP偶联的链霉抗生物素蛋白,建议通过生物素阻断缓冲液阻断内源性生物素。
4.3用优选的封闭溶液(例如含有1%BSA的PBS)在4℃下封闭30分钟。
4.5用PBS洗涤三次,每次5分钟。
4.6向每个样品中加入100μL二抗-HRP工作溶液,在室温下孵育60分钟。
注意孵育时间和浓度可根据信号强度而变化。
4.7用PBS洗涤三次,每次5分钟。
5.酪酰胺标记
注意:如果您观察到非特异性信号,可以缩短酪酰胺的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照样品优化孵育期。或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的酪酰胺。
6.荧光成像
1.根据需要对细胞或组织样本进行计数。AAT提供了一系列细胞核复染试剂,如表1所列。按照试剂提供的说明进行操作。
2.使用具有抗褪色特性的安装介质安装盖玻片。
3.使用适当的过滤器组可视化来自酪酰胺标签的信号。
表1.推荐用于核复染的产品
货号 | 产品名称 | Ex/Em(nm) |
17548 | Nuclear Blue DCS1 | 350/461 |
17550 | Nuclear Green DCS1 | 503/526 |
17551 | Nuclear Orange DCS1 | 528/576 |
17552 | Nuclear Red DCS1 | 642/660 |
试剂应用文献
Antibody-Driven Proximity Labeling in Fixed Tissues
Authors: Bar, Daniel Z and Collins, Francis S
Journal: (2019): 73–81
参考文献
Authors: Faget L, Hnasko TS.
Journal: Methods Mol Biol (2015): 161
Authors: Trang NT, Hirai T, Ngan PH, Lan NT, Fuke N, Toyama K, Yamamoto T, Yamaguchi R.
Journal: J Vet Diagn Invest (2015): 326
Authors: Aydin M, Herzig GP, Jeong KC, Dunigan S, Shah P, Ahn S.
Journal: J Food Prot (2014): 100
Authors: Stack EC, Wang C, Roman KA, Hoyt CC.
Journal: Methods (2014): 46
Authors: Garrigues HJ, Rubinchikova YE, Rose TM.
Journal: Virology (2014): 75
Authors: Lauter G, Soll I, Hauptmann G.
Journal: Methods Mol Biol (2014): 175
Authors: Zhao C, Eisinger B, Gammie SC.
Journal: PLoS One (2013): e73750
Authors: Draberova E, Stegurova L, Sulimenko V, Hajkova Z, Draber P.
Journal: J Immunol Methods (2013): 63
Authors: Horling L, Neuhuber WL, Raab M.
Journal: J Neurosci Methods (2012): 124
Authors: Yuan L, Xu L, Liu S.
Journal: Anal Chem (2012): 10737
Nalgene 2425-0503 易认安全洗瓶,LDPE,白色LDPE或PPCO瓶体;PP或HDPE盖;PPCO填充管,500ml容量,甲醇,绿色瓶盖 WASHBTL RTK METHANL LDPE;500ML
Nalgene 2425-0503 易认安全洗瓶,LDPE,白色LDPE或PPCO瓶体;PP或HDPE盖;PPCO填充管,500ml容量,甲醇,绿色瓶盖 WASHBTL RTK METHANL LDPE;500ML Labware and Bottles 6 24 2925
6-羟基-3,4-二氢-1(2H)-萘酮; 6-Hydroxy-3,4-dihydro-1(2H)-naphthalenone; 别名: 6-羟基-1-四氢萘酮; 品牌:Aldrich
详细描述
含 量:98% | 产品规格:5G | 产品包装:瓶装 |
品 牌:Aldrich | 产 地:原装进口 | 价 格:元/克 |
中文名:6-羟基-3,4-二氢-1(2H)-萘酮
英文名:6-Hydroxy-3,4-dihydro-1(2H)-naphthalenone
别名:6-羟基-1-四氢萘酮
CAS 号:3470-50-6
MDL 号:MFCD00156670
分子式:C10H10O2
分子量:162.19
熔点:154-157 C(lit.)
货号:480576
品牌:Aldrich
包装规格:5G
产品包装:瓶装
产品起订量:1
产地:原装进口
Aldrich一直以来都是全球有机和无机化学领域的领导者。我们通过综合的创新能力和完整的产品线为化学研究、医药研发、材料研究等众多领域提供包括化学结构单元、试剂、先进材料和稳定同位素在内的数以十万计的产品,同时我们也为您的基本实验提供基础试剂和实验室溶剂产品。每年会有超过3000余种全新化合物会出现在我们的目录中。
上海金畔生物科技有限公司
文章号:2376796-2376796
邮箱:sales@jinpanbio.com
订购热线:15221999938
微信:jinpanbio
Cy3 酪胺-AAT Bioquest荧光染料
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Cy3 酪胺价格 1386
产品规格
产品货号
Ex (nm) | 555 | Em (nm) | 569 |
分子量 | 863.96 | 溶剂 | DMSO |
存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
Cy3酪胺是美国AAT Bioquest生产的Cy系列产品,对于许多免疫组织化学(IHC)应用,传统的酶促扩增程序足以实现足够的抗原检测。但是,有几个因素限制了这些程序的敏感性和实用性。事实证明,酪胺信号放大(TSA)是一种特别通用且功能强大的酶扩增技术,具有更高的检测灵敏度。 TSA基于HRP在低浓度过氧化氢存在下将含有标记酪胺的底物转化为氧化的高反应性自由基的能力,该自由基可与HRP处或附近的酪氨酸残基共价结合。为了实现大IHC检测,酪胺用荧光团预标记。每个过氧化物酶标记物的多个酪胺底物转换所赋予的信号放大转化了对低丰度靶标的超灵敏检测以及使用较少量的抗体和杂交探针。在免疫组织化学应用中,源自TSA方法的灵敏度增强允许增加一级抗体稀释以减少非特异性背景信号,并且可以克服由次优固定程序或低水平靶表达引起的弱免疫标记。 金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cy3酪胺。
适用仪器
荧光显微镜 | |
Ex: | Cy3/TRITC滤波片 |
Em: | Cy3/TRITC滤波片 |
推荐孔板: | 黑色透明底板 |
滤波片: | Cy3/TRITC滤波片 |
样品染色示例
概述
1.固定/透化/阻断细胞或组织
2.在封闭缓冲液中加入一抗
3.加入HRP偶联的二抗
4.准备酪胺工作溶液,在室温下在细胞或组织中施用5-10分钟
操作步骤
在没有额外说明的情况下,所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C,避免反复冻融循环。该方案适用于细胞和组织染色。
1.制备储存溶液
2.制备工作溶液
Tyramide工作溶液(1X):
将1μLTyramide原液加入1 mL含有0.003%H2O2的缓冲液中。
注意:Tris Buffer,pH = 7.4时可用于获得佳性能。
注意:Tyramide工作溶液应立即使用。
3.1在室温下用PBS中的3.7%甲醛或多聚甲醛固定细胞或组织20分钟。
3.2用PBS冲洗细胞或组织两次。
3.3在室温下用0.1%Triton X-100溶液使细胞透化1-5分钟。
3.4用PBS冲洗细胞或组织两次。
注意:组织固定,脱蜡和再水化,根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水。根据需要使用优选的特定溶液/方案进行抗原修复。
4.过氧化物酶标记
4.2可选:如果使用HRP偶联的链霉抗生物素蛋白,建议通过生物素阻断缓冲液阻断内源性生物素。
4.3用优选的封闭溶液(例如含有1%BSA的PBS)在4℃下封闭30分钟。
4.5用PBS洗涤三次,每次5分钟。
4.6向每个样品中加入100μL二抗-HRP工作溶液,在室温下孵育60分钟。
注意孵育时间和浓度可根据信号强度而变化。
4.7用PBS洗涤三次,每次5分钟。
5.酪胺标记
注意:如果您观察到非特异性信号,可以缩短酪胺的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照样品优化孵育期。或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的酪胺。
6.荧光成像
1.根据需要对细胞或组织样本进行计数。AAT提供了一系列细胞核复染试剂,如表1所列。按照试剂提供的说明进行操作。
2.使用具有抗褪色特性的安装介质安装盖玻片。
3.使用适当的过滤器组可视化来自酪胺标签的信号。
表1.推荐用于核复染的产品
货号 | 产品名称 | Ex/Em(nm) |
17548 | Nuclear Blue DCS1 | 350/461 |
17550 | Nuclear Green DCS1 | 503/526 |
17551 | Nuclear Orange DCS1 | 528/576 |
17552 | Nuclear Red DCS1 | 642/660 |
参考文献
Authors: Schafer, Johanna M and Pietenpol, Jennifer A
Journal: Bio-protocol (2020): e3677
Authors: Huang, Zhipeng and Lin, Qiuyuan and Yang, Bin and Ye, Xin and Chen, Hui and Weng, Wenhao and Kong, Jilie
Journal: Chemical communications (Cambridge, England) (2020): 12793-12796
Authors: Wang, Herui and Pangilinan, Ryan L and Zhu, Yan
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2020): 89-97
Authors: Mori, Hidetoshi and Bolen, Jennifer and Schuetter, Louis and Massion, Pierre and Hoyt, Clifford C and VandenBerg, Scott and Esserman, Laura and Borowsky, Alexander D and Campbell, Michael J
Journal: Journal of mammary gland biology and neoplasia (2020): 417-432
Authors: Parra, Edwin Roger and Jiang, Mei and Solis, Luisa and Mino, Barbara and Laberiano, Caddie and Hernandez, Sharia and Gite, Swati and Verma, Anuj and Tetzlaff, Michael and Haymaker, Cara and Tamegnon, Auriole and Rodriguez-Canales, Jaime and Hoyd, Clifford and Bernachez, Chantale and Wistuba, Ignacio
Journal: Cancers (2020)
Authors: Lauter, Gilbert and Söll, Iris and Hauptmann, Giselbert
Journal: Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) (2020): 397-409
Authors: Dopie, Joseph and Sweredoski, Michael J and Moradian, Annie and Belmont, Andrew S
Journal: The Journal of cell biology (2020)
Authors: Zhang, Shouping and Hu, Bin and Xia, Xiaojing and Xu, Yanzhao and Hang, Bolin and Jiang, Jinqing and Hu, Jianhe
Journal: Molecules (Basel, Switzerland) (2019)
Authors: Liu, Pei and Li, Chao and Zhang, Ruixuan and Tang, Qing and Wei, Jia and Lu, Yan and Shen, Pingping
Journal: Biosensors & bioelectronics (2019): 543-550
Authors: Zhou, Xiaoyan and Li, Yujian and Wu, Haiping and Huang, Wei and Ju, Huangxian and Ding, Shijia
Journal: Biosensors & bioelectronics (2019): 88-94
康宁corning 8163 SPINX FLTR,2ML,.45UM,CA,NS,BK, SPINX离心过滤器 2ml 0.45um孔径CA(醋酸纤维)膜 未灭菌 25个/包
康宁corning 8163 SPINX FLTR,2ML,.45UM,CA,NS,BK,
SPINX离心过滤器 2ml 0.45um孔径CA(醋酸纤维)膜 未灭菌 25个/包 4包/箱 1377.61
Whatman 滤膜 111106 Nuclepore径迹蚀刻膜 圆型, 47mm 0.2m 100/盒
Whatman 滤膜 111106 Nuclepore径迹蚀刻膜 圆型, 47mm 0.2m 100/盒 NUC PC 47MM 0.2uM 100/PK
康宁corning 3728 PLT,1536W,BLACK FLAT BOTTOM,NB 1536孔板 黑色 平底 NBS(非结合表面)表面 灭菌 10个/包
康宁corning 3728 PLT,1536W,BLACK FLAT BOTTOM,NB
1536孔板 黑色 平底 NBS(非结合表面)表面 灭菌 10个/包 5包/箱 19006.02
Cy5 酪胺-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Cy5 酪胺价格 1386
产品规格
产品货号
Ex (nm) | 651 | Em (nm) | 670 |
分子量 | 890.00 | 溶剂 | DMSO |
存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
Cy5酪酰胺是美国AAT Bioquest生产的Cy系列产品,对于许多免疫组织化学(IHC)应用,传统的酶促扩增程序足以实现足够的抗原检测。但是,有几个因素限制了这些程序的敏感性和实用性。事实证明,酪胺信号放大(TSA)是一种特别通用且功能强大的酶扩增技术,具有更高的检测灵敏度。 TSA基于HRP在低浓度过氧化氢存在下将含有标记酪胺的底物转化为氧化的高反应性自由基的能力,该自由基可与HRP处或附近的酪氨酸残基共价结合。为了实现大IHC检测,酪胺用荧光团预标记。每个过氧化物酶标记物的多个酪胺底物转换所赋予的信号放大转化了对低丰度靶标的超灵敏检测以及使用较少量的抗体和杂交探针。在免疫组织化学应用中,源自TSA方法的灵敏度增强允许增加一级抗体稀释以减少非特异性背景信号,并且可以克服由次优固定程序或低水平靶表达引起的弱免疫标记。 Cy5酪胺含有明亮的Cy5,可以使用标准的Cy5滤波片组轻松检测到。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cy5酪酰胺。
适用仪器
荧光显微镜 | |
Ex: | Cy5滤波片组 |
Em: | Cy5滤波片组 |
推荐孔板: | 黑色透明底板 |
滤波片: | Cy5滤波片组 |
样品染色示例
概述
1.固定/透化/阻断细胞或组织
2.在封闭缓冲液中加入一抗
3.加入HRP偶联的二抗
4.准备酪胺工作溶液,在室温下在细胞或组织中施用5-10分钟
操作步骤
在没有额外说明的情况下,所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C,避免反复冻融循环。该方案适用于细胞和组织染色。
1.制备储存溶液
2.制备工作溶液
Tyramide工作溶液(1X):
将1μLTyramide原液加入1 mL含有0.003%H2O2的缓冲液中。
注意:Tris Buffer,pH = 7.4时可用于获得佳性能。
注意:Tyramide工作溶液应立即使用。
3.1在室温下用PBS中的3.7%甲醛或多聚甲醛固定细胞或组织20分钟。
3.2用PBS冲洗细胞或组织两次。
3.3在室温下用0.1%Triton X-100溶液使细胞透化1-5分钟。
3.4用PBS冲洗细胞或组织两次。
注意:组织固定,脱蜡和再水化,根据标准IHC方案对组织进行脱蜡和脱水。根据需要使用优选的特定溶液/方案进行抗原修复。
4.过氧化物酶标记
4.2可选:如果使用HRP偶联的链霉抗生物素蛋白,建议通过生物素阻断缓冲液阻断内源性生物素。
4.3用优选的封闭溶液(例如含有1%BSA的PBS)在4℃下封闭30分钟。
4.5用PBS洗涤三次,每次5分钟。
4.6向每个样品中加入100μL二抗-HRP工作溶液,在室温下孵育60分钟。
注意孵育时间和浓度可根据信号强度而变化。
4.7用PBS洗涤三次,每次5分钟。
5.酪酰胺标记
注意:如果您观察到非特异性信号,可以缩短酪酰胺的孵育时间。您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照样品优化孵育期。或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的酪酰胺。
6.荧光成像
1.根据需要对细胞或组织样本进行计数。AAT提供了一系列细胞核复染试剂,如表1所列。按照试剂提供的说明进行操作。
2.使用具有抗褪色特性的安装介质安装盖玻片。
3.使用适当的过滤器组可视化来自酪酰胺标签的信号。
表1.推荐用于核复染的产品
货号 | 产品名称 | Ex/Em(nm) |
17548 | Nuclear Blue DCS1 | 350/461 |
17550 | Nuclear Green DCS1 | 503/526 |
17551 | Nuclear Orange DCS1 | 528/576 |
17552 | Nuclear Red DCS1 | 642/660 |
5100-0001-美国NALGENE程序降温盒5100-0001
【简单介绍】
【详细说明】
2-溴-6-(三氟甲基)吡啶 英文名:2-Bromo-6-(trifluoromethyl)pyridine CAS号:189278-27-1 品牌:Aldrich
详细描述
品牌: | Aldrich | 产地: | 原装进口 |
货号: | 661147 | 产品英文名称: | 2-Bromo-6-(trifluoromethyl)pyridine |
CAS编号: | <产品号JPS-31953/">189278-27-1 | 别名: | |
分子式: | C6H3BrF3N | 含量: | 97 % |
产品规格: | 500MG |
中文名:2-溴-6-(三氟甲基)吡啶
英文名:2-Bromo-6-(trifluoromethyl)pyridine
CAS号:189278-27-1
MDL号:MFCD00153087
分子式:C6H3BrF3N
分子量 225.99
含量:97%
产品规格:500MG
品牌:Aldrich
货号:661147
产地:原装进口
Aldrich一直以来都是全球有机和无机化学领域的领导者。我们通过综合的创新能力和完整的产品线为化学研究、医药研发、材料研究等众多领域提供包括化学结构单元、试剂、先进材料和稳定同位素在内的数以十万计的产品,同时我们也为您的基本实验提供基础试剂和实验室溶剂产品。每年会有超过3000余种全新化合物会出现在我们的目录中。
上海金畔生物科技有限公司
文章号:5722293-5722293
邮箱:sales@jinpanbio.com
订购热线:15221999938
微信:jinpanbio
康宁corning 3843 PLT,96WL,WCB,PDL,ASCEPTICALLY MANUFACTURED,W/LID,S,BK,20/100 20个/包
康宁corning 3843 PLT,96WL,WCB,PDL,ASCEPTICALLY MANUFACTURED,W/LID,S,BK,20/100 20个/包 5包/箱 33123.69
AF488 酪胺-AAT Bioquest荧光染料
上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
AF488 酪胺价格 2823
产品规格
产品货号
Ex (nm) | 499 | Em (nm) | 520 |
分子量 | 856.02 | 溶剂 | DMSO |
存储条件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 |
AF488酪胺是美国AAT Bioquest生产的荧光探针,对于许多免疫组织化学(IHC)应用,传统的酶促扩增程序足以实现足够的抗原检测。但是,有几个因素限制了这些程序的敏感性和实用性。事实证明,酪胺信号放大(TSA)是一种特别通用且功能强大的酶扩增技术,具有更高的检测灵敏度。TSA基于HRP在低浓度过氧化氢存在下将含有标记酪胺的底物转化为氧化的高反应性自由基的能力,该自由基可与HRP处或附近的酪氨酸残基共价结合。为了实现大IHC检测,酪胺用荧光团预标记。每个过氧化物酶标记物的多个酪胺底物转换所赋予的信号放大转化了对低丰度靶标的超灵敏检测以及使用较少量的抗体和杂交探针。在免疫组织化学应用中,源自TSA方法的灵敏度增强允许增加一级抗体稀释以减少非特异性背景信号,并且可以克服由次优固定程序或低水平靶表达引起的弱免疫标记。AF488酪胺含有明亮的AlexaFluor®488,可以使用标准FITC滤波片组轻松检测(AlexaFluor®是Fisher的商标)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的AF488酪胺。 注1:200slides:一管试剂足够200个玻片使用; 注2:200slides大约为100ug。
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适用仪器
荧光显微镜 | |
Ex: | FITC滤波片组 |
Em: | FITC滤波片组 |
推荐孔板: | 黑色透明底板 |
滤波片: | FITC滤波片组 |
染色样品示例
概述
1.固定/透化/阻断细胞或组织
2.在封闭缓冲液中加入一抗
3.加入HRP偶联的二抗
4.准备酪胺工作溶液,室温下在细胞或组织中5-10分钟
操作步骤
在没有额外说明的情况下,所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.Tyramide原液(200X):
将100μLDMSO加入小瓶中并充分混合。
注意:未使用的Tyramide原液可以在2-8℃下储存。
2.Tyramide工作溶液(1X):
将100μLTyramide原液加入20 mL含有0.003%H2O2的缓冲液中。
注意:Tris Buffer,pH = 7.4可用于获得佳性能。
注意:Tyramide工作溶液应立即使用。
注意:20 mL溶液适用于200次测试。
3.细胞固定和透化
3.1在室温下用PBS中的3.7%甲醛或多聚甲醛固定细胞或组织20分钟。
3.2用PBS冲洗细胞或组织两次。
3.3在室温下用0.1%Triton X-100溶液使细胞透化1-5分钟。
3.4用PBS冲洗细胞或组织两次。
4.过氧化物酶标记
4.1任选:通过在过氧化物酶猝灭溶液(例如3%过氧化氢)中孵育细胞或组织样品10分钟来淬灭内源性过氧化物酶活性。 在室温下用PBS冲洗两次。
4.2可选:如果使用HRP偶联的链霉抗生物素蛋白,建议通过生物素阻断缓冲液阻断内源性生物素。
4.3用优选的封闭溶液(例如含有1%BSA的PBS)在4℃下封闭30分钟。
4.4取出封闭溶液,加入在推荐抗体稀释液中稀释的一抗在室温下60分钟或在4°C下过夜。
4.5用PBS洗涤三次,每次5分钟。
4.6向每个样品中加入100μL二抗-HRP工作溶液,在室温下孵育60分钟。
注意孵育时间和浓度可根据信号强度而变化。
4.7用PBS洗涤三次,每次5分钟。
5.Tyramide标记
5.1为每个样品准备并应用100μLTyramide工作溶液,并在室温下孵育5-10分钟。
注意:如果您观察到非特异性信号,可以缩短Tyramide的孵育时间。 您应该在不同的孵育时间点使用阳性和阴性对照样品优化孵育期。 或者您可以在工作溶液中使用较低浓度的Tyramide。
5.2用PBS冲洗三次。
6.荧光成像
6.1根据需要对细胞或组织样本进行计数。 AAT提供了一系列细胞核复染试剂,如表1所列。按照试剂提供的说明进行操作。
6.2使用具有抗褪色特性的安装介质安装盖玻片。
6.3使用适当的过滤器组可视化来自Tyramide标签的信号。
表1.推荐用于核复染的产品
货号 | 产品名称 | Ex/Em(nm) |
17548 | Nuclear Blue DCS1 | 350/461 |
17550 | Nuclear Green DCS1 | 503/526 |
17551 | Nuclear Orange DCS1 | 528/576 |
17552 | Nuclear Red DCS1 | 642/660 |
参考文献
A amperometric immunosensor for sensitive detection of circulating tumor cells using a tyramide signal amplification-based signal enhancement system
Authors: X. Zhou
Journal: Biosens Bioelectron (2019): 88-94
An ultrasensitive electrochemical immunosensor for procalcitonin detection based on the gold nanoparticles-enhanced tyramide signal amplification strategy
Authors: P. Liu
Journal: Biosens Bioelectron (2019): 543-550
Gold nanoparticle labeling with tyramide signal amplification for highly sensitive detection of alpha fetoprotein in human serum by ICP-MS
Authors: X. Li
Journal: Talanta (2018): 40-46
High Resolution Fluorescent In Situ Hybridization in Drosophila Embryos and Tissues Using Tyramide Signal Amplification
Authors: A. Jandura
Journal: J Vis Exp (2017): se name=”11070.enl” path=”C:WebsiteReferencesEN Files11070.enl”>11070.enlEndNote3317Jandura, A.Hu, J.Wilk, R.Krause, H. M.The Terrence Donnelly Centre for Cellular and Biomolecular Research, University of Toronto; Department of Molecular Genetics, Uni
Selective Proteomic Proximity Labeling Assay Using Tyramide (SPPLAT): A Quantitative Method for the Proteomic Analysis of Localized Membrane-Bound Protein Clusters
Authors: J. S. Rees
Journal: Curr Protoc Protein Sci (2017): 19 27 1-19 27 18
Droplet-Free Digital Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Based on a Tyramide Signal Amplification System
Authors: K. Akama
Journal: Anal Chem (2016): 7123-9
Selective Proteomic Proximity Labeling Assay Using Tyramide (SPPLAT): A Quantitative Method for the Proteomic Analysis of Localized Membrane-Bound Protein Clusters
Authors: J. S. Rees
Journal: Curr Protoc Protein Sci (2015): 19 27 1-18
Quantum dot-based FRET for sensitive determination of hydrogen peroxide and glucose using tyramide reaction
Authors: X. Huang
Journal: Talanta (2013): 79-84
Gold nanoparticle-enzyme conjugates based FRET for highly sensitive determination of hydrogen peroxide, glucose and uric acid using tyramide reaction
Authors: X. Huang
Journal: Analyst (2012): 3659-66
Filtration-based tyramide amplification technique–a new simple approach for rapid detection of aflatoxin B1
Authors: D. Saha
Journal: Anal Bioanal Chem (2007): 1121-30
Pall颇尔滤膜 MSTG25E3 ACRODISC W/ MUSTANG E MEM PK10
Pall颇尔滤膜 MSTG25E3 ACRODISC W/ MUSTANG E MEM PK10 413 3302
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【简单介绍】
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