什么是中空玻璃,谁需要它?

什么是中空玻璃,谁需要它?

“灯丝”指的是一根~160微米的玻璃棒,即  退火到油管内壁。管内的玻璃棒就像灯芯一样  创造毛细管作用,使溶液容易回流到移液管头端  和锥度。当回填贴片移液管时,针尖和大部分锥度会向内填充  30 – 60秒。当回填尖而长的微电极或微注射剂时  移液器,头端和大部分锥度将在2-3分钟内填充  。

当你的毛细管玻璃被加热并在你的Sutter微移液器上拉出时  制作一个微电极或微注射移液管,玻璃的内径和这个  长丝的尺寸会逐渐减小。如果你做一个移液器,有0.5µm的头端ID,这  玻璃内部的棒(又名灯丝)最终将在头端达到80纳米左右。  

任何时候,您正在制作一个微移液器,有一个头端在3微米或以下,根据需要时  执行显微注射或电生理应用,最好购买长丝  玻璃。没有灯丝,回填移液管会变得困难甚至不可能  这通常会导致填充不良,并在溶液中引入气泡  吸管。  如果Sutter项目编号为硼硅酸盐,铝硅酸盐或  石英玻璃以BF、AF或QF开始。例如,BF150-86-10表示  以下:硼硅玻璃带长丝,外径1.5mm,内径0.86mm  直径和长度为10厘米。

什么是标准曲线,为什么我需要标准曲线?

什么是标准曲线,为什么我需要标准曲线?

什么是标准曲线?为什么我需要一个? 为了将Periotron和Sialo读数转换成微升(ml)和微米(mm)的标准曲线。这是通过使用汉密尔顿注射器将固定体积的血清或唾液输送到试

纸条上,记录Periotron读数,并将读数绘制为体积的函数来完成的。在建立标准曲线时,每个体积应至少测试3次,并对该体积的读数取平均值。Periotron Professional 3.0与

Periotron 8000型一起提供,允许将数据输入计算机,以自动拟合数据点的四阶多项式。该程序有助于将Periotron读数自动转换为微升体积。          

一旦你建立了你的校准曲线,它应该在几个月内保持相对不变。每个Periotron 8000在出厂时设置为读数约为100±0.5 m1升的液体,大约100升m流涎管刻度为1升。您可以通过用

干条设置零点来检查Periotron仪器的工作情况,例如,查看0.5的读数是否约为100 ml如果在PerioPaper等级上。你可以用唾液和血清(牛血清也可以)来达到这个目的。蒸馏水也

可以使用,但在刻度不太准确。唾液可以通过咀嚼做成团的蜡纸并吐到试管或小烧杯中来收集。

什么是灭菌?

什么是灭菌?

灭菌是一种破坏或消除物品表面或液体中所有微生物生命的过程,以防止与使用该物品相关的疾病传播。 

为什么灭菌如此重要?灭菌对于确保有害和传染性微生物或病原体不会传播到与该物品接触的任何物体至关重要。无论我们是否知道,绝育在我们的生活中发挥着重要作用。医疗器械、手术或牙科工具、针头、注射器和缝合线都是消毒物品的一些例子。虽然灭菌对于医疗行业至关重要,但对于实验室也至关重要。

世界各地的实验室每天都利用灭菌来进行成功的研究和实验。实验室中一些最常见的灭菌物品是:

  • 烧杯

  • 烧瓶

  • 刻度量筒

  • 细胞生长培养基

  • 移液器吸头

  • 玻璃移液器

  • 琼脂

  • 培养皿

  • 玻璃试管

  • 塑料管(离心管、锥形管)

如果这些物品没有正确灭菌和灭菌,实验过程中收集的数据可能会出现偏差和不准确,从而导致得出不正确的结论。

有几种不同的灭菌方法,包括:

什么是灭菌?

但蒸汽灭菌是有效、且安全且廉价的解决方案之一。蒸汽灭菌器,也称为高压灭菌器,将每个负载物品在所需的温度和压力下直接与蒸汽接触一定的时间。消毒时间根据待消毒的物品(塑料、液体、金属、服装等)和其他因素(例如物品是否包装)而有所不同。蒸汽灭菌最常见的温度是 121°C 和 134°C。这些温度必须保持适当的时间才能成功灭菌。

最常见的高压灭菌器类型

两种最常见的高压灭菌器类型是重力位移高压灭菌器和预真空高压灭菌器,范围从水平台式设备到立式设备再到大型工业设备。这些装置可以手动或电子控制。对于手动高压灭菌器,灭菌周期的每个阶段均由用户手动控制。使用电子高压灭菌器,灭菌周期的每个步骤都通过设备的控制系统进行控制和自动化。为了成功灭菌,排除室内的空气很重要,因为空气会阻止蒸汽渗透。重力位移和预真空高压灭菌器都可以做到这一点,但方式不同。 

重力位移高压灭菌器

在重力置换高压釜中,蒸汽进入高压釜室。由于蒸汽比空气轻,因此它可以通过排气阀排出室内的空气,从而成功灭菌。重力位移高压灭菌器主要用于介质或液体、包装或未包装的物品、可高压灭菌的塑料、实验室废物和玻璃器皿。 

预真空高压灭菌器 

预真空高压釜利用真空系统在蒸汽引入腔室之前去除高压釜中的所有环境空气,从而缩短循环时间。因此,它们可用于多孔负载,例如衣服、管道、手套、注射器、纺织品以及任何可能难以去除空气的具有小开口的物品。

液体灭菌

多年来,实验室高压灭菌器用户仅限于使用专为医疗和牙科诊所应用而设计的高压灭菌器,例如前面提到的那些(手术和牙科工具、医疗设备、注射器等)。其有限的功能使实验室高压灭菌器用户无法满足日常不断增长的实验室需求。不断增长的需求之一是能够正确对液体进行消毒。液体灭菌是实验室高压灭菌器用户最常见的应用之一。对液体进行灭菌时,必须直接监测液体的温度,以确保其在适当的时间内达到正确的灭菌温度。高压灭菌器必须有温度监控装置,例如温度探头,才能实现这一点。可以将该探针放入液体中以在整个灭菌周期中监测和控制其温度。如果没有此功能,该装置将监测腔室的温度而不是液体本身。由于液体的加热速度比腔室慢,因此可能无法对其进行适当的灭菌。 

什么是 Hybloc™ DNA?

什么是 Hybloc™ DNA?

Hybloc™ DNA 是 AGL 专有的 COT DNA 封闭试剂。它由基因组 DNA 的重复序列部分组成。 Hybloc™ DNA 可有效替代荧光原位杂交 (FISH)、Southern 印迹、阵列比较基因组杂交(阵列 CGH)、杂交捕获和任何其他需要竞争以防止重复 DNA 与靶标结合的方案中的任何其他竞争对手 DNA 。与 Hybloc™ DNA 杂交显示信号强度显着增加,与重复 DNA 相关的背景噪音量显着减少。 Hybloc™ DNA 适用于下列每个物种。

Hybloc™ DNA 的供应量为 500 µg,浓度为 1 mg/mL,溶于 TE。可根据要求提供此处未列出的其他浓度和物种。

 小鼠 Hybloc™ DNA   

人类 Hybloc™ DNA   

大鼠 Hybloc™ DNA   

牛 Hybloc™ DNA   

绵羊 Hybloc™ DNA   

猪 Hybloc™ DNA   

鸡 Hybloc™ DNA   

犬 Hybloc™ DNA   

鲑鱼 Hybloc™ DNA   

中国仓鼠 Hybloc™ DNA   

马 Hybloc™ DNA  

 恒河猴 Hybloc™ DNA

什么是 ALC-0315?

什么是 ALC-0315?

脂质纳米粒子 (LNP) 在 mRNA 疫苗的研发和批准中发挥了重要作用。

ALC-0315 是一种氨基脂质,其叔胺通过酯键与支链尾部相连。叔胺允许脂质形成两性离子脂质。 ALC-0315是一种无色油状化合物,分子量为766.3,CAS号为2036272-55-4 IUPAC名称为[(4-羟基丁基)氮烷二基]二(己烷-6,1-二基)双(2-己基癸酸酯) )。

ALC-0315可以通过如图1所示的路线合成。

什么是 ALC-0315?

ALC-0315由于其快速清除率、耐受性、免疫原性和蛋白质表达,是一种理想的药物载体。虽然 ALC-0315 可溶于有机溶剂,但悬浮在极性溶剂中时会形成膜。叔胺与 mRNA 形成离子键,从而实现 mRNA 有效负载的理想封装。 ALC-0315 在生理 pH 值下保持中性,在酸性环境中带正电荷。这种在生理 pH 值下保持中性的特性使得脂质与血细胞阴离子膜的相互作用较少。 ALC-0315 带正电荷的能力在细胞摄取后发挥着重要作用。当 ALC-0315 与酸性内体相互作用时,叔胺被质子化并形成锥形离子对,驱动从双层到倒六边形相的转变。该阶段促进内体逃逸并将 mRNA 释放到细胞质中。一旦 mRNA 被释放,ALC-0315 将通过两个连续的酯水解反应进行代谢,首先产生单酯代谢物,然后产生双重脱酯代谢物。两个水解反应的产物是6-己基癸酸。剩余的脂肪族头基通过胆汁和肾脏清除被消除。

“总有机碳”到底是什么意思?

“总有机碳”到底是什么意思?

任何化学家都可以告诉你,在元素周期表上的所有元素中,碳是特殊的。碳是可以形成几乎无限数量的化合物的元素,因为每个碳原子可以与其他原子形成四个化学键,而且碳原子的大小正好适合非常大的分子的部分。
由于这种能力,18世纪早期的化学家意识到非生物(岩石、矿物、气体等)的化学相对简单;然而,生物的化学成分要复杂得多(参见下图,与血红蛋白相比,简单的无机分子水、氨和二氧化碳)。因此,当指代源自生物体的化学时,应用术语“有机”化学。碳的化学是如此庞大和复杂,以至于在 化学学科中 ,碳的研究有自己的分支,称为 有机化学

Veritaqua 为制药制造商、市政饮用水和废水以及发电厂提供专注于总有机碳 (TOC) 测量的仪器消耗品、更换零件和咨询服务。  Veritaqua 是一家私营独立公司。我们响应客户的要求并提供技术支持和深入的应用专业知识。  TOC 分析仪有许多不同型号,并且有许多不同的应用。

什么是多糖?

什么是多糖?

什么是多糖?

多糖是由通过糖苷键连接的单糖组成的长链碳水化合物分子,这些链可以是线性的或支化的。多糖是高分子量分子,主要由碳、氢和氧组成。它们通常是固体,通常不溶于水并且具有非结晶性质。

多糖在自然界中具有多种功能,包括淀粉和糖原等能量储存分子,而其他多糖是结构分子,例如在某些外骨骼中发现的几丁质和纤维素(通常是植物细胞壁的组成部分),其他仍然存在于微生物的分泌物中。

人类在广泛的应用中利用天然多糖及其衍生物。医疗应用,例如肝素作为抗凝剂,用于化妆品,例如护肤霜中的透明质酸,其他多糖用于食品工业,包括果胶、角叉菜胶和凝乳胶。

Dextra 提供多种植物、微生物和动物来源的酸性和中性多糖。

什么是核苷和核苷酸?

什么是核苷和核苷酸?

天然存在的核苷是由通过β-糖苷键与核碱基结合的5-碳核糖或2-脱氧核糖组成的糖基胺。核苷是 DNA 和 RNA 的核苷酸构件的前体,可根据其核碱基亚基细分为两类:嘧啶(胞苷、胸苷和尿苷)和嘌呤(鸟苷和腺苷)。

核苷酸由核碱基、核糖或脱氧核糖以及一个或多个磷酸基团组成。除了作为 DNA 和 RNA 的基本组成部分的作用之外,核苷酸还在细胞代谢(如核苷三磷酸 ATP、GTP、CTP 和 UTP)和细胞信号传导(cGMP 和 cAMP)中发挥关键作用。

合成核苷和核苷酸

合成核苷和核苷酸类似物已成功用于治疗多种临床适应症。例子包括治疗 HIV 的叠氮胸苷 (AZT) 和阿巴卡韦以及治疗一系列病毒性疾病的利巴韦林。临床上使用核苷类似物的其他适应症包括癌症、水痘带状疱疹和单纯疱疹。

dextrauk我们的核苷和核苷酸系列包括与单糖和磷酸化二糖偶联的各种核碱基。这些可以用作探测复制途径的工具,并且可能具有阻止病原体复制的活性。

什么是可电离脂质?

什么是可电离脂质?

可电离脂质是一类脂质分子,在生理 pH 值下保持中性,但在低 pH 值下质子化,使它们带正电荷,ALC-0315(图 1)是一个例子,其胺位点可在低 pH 值下质子化。


图1: ALC-0315的结构


什么是可电离脂质?

可电离脂质是可电离脂质纳米颗粒 (LNP) 的关键成分之一,已广泛用于 RNA 治疗药物的全身递送。LNPs中的其他脂质分子包括辅助脂质、胆固醇、PEG脂质等。


LNP 制剂中常见的可电离脂质材料包括 C12-200、cKK-E12 和 DLin-MC3-DMA。这些 LNP 在 0.002 mg siRNA/kg 的剂量水平下在肝脏中显示出有效的基因沉默。


为什么使用可电离脂质?

可电离脂质的 pH 敏感性有利于体内 mRNA 的传递,因为中性脂质与血细胞阴离子膜的相互作用较少,从而提高了脂质纳米颗粒的生物相容性。被捕获在内体中,其中的pH值低于细胞外环境的pH值,可电离的脂质被质子化并带正电,这可能促进膜不稳定并促进纳米颗粒的内体逃逸。可电离脂质促进内体逃逸并降低脂质纳米颗粒 (LNP) 的毒性。


脂质供应商和客户综合

作为生化供应商,BroadPharm为全球客户提供各种脂质分子,例如可电离脂质、阳离子脂质、辅助脂质、PEG 脂质。

什么是单糖?

什么是单糖?

什么是单糖?

单糖通常被认为是单糖,是碳水化合物的基本组成部分。它们通常是水溶性结晶固体,通式为 C n H 2n O n。它们可以根据所含碳原子的数量进行分类,戊糖(5个碳)和己糖(6个碳)。

自然界中常见的这些结构单元的例子包括木糖(植物细胞壁)、核糖(RNA)、葡萄糖(细胞能源)、甘露糖(植物细胞壁)和果糖(蔗糖的成分)。

单糖通过糖苷键的形成形成更复杂的糖。例如,D-葡萄糖和 D-半乳糖结合形成二糖乳糖,常见于牛奶中,而 D-葡萄糖和 D-果糖结合形成蔗糖(食糖)。

dextra单糖系列包括广泛的磷酸化糖、硫酸化糖、卤化糖、亚氨基糖、受保护的中间体和不常见的内酯,可用作构建块和基础研究工具。

什么是转染?

什么是转染?

转染是通过非病毒方式将任何核酸分子引入培养的真核细胞中。过去,它通常仅用于指代 DNA,但随着 RNAi 和最近 CRISPR 等应用的开发,这种情况发生了变化。尽管将基因传递到细胞的方法有很多,但目前研究人员使用三种高度认可的方法:化学试剂、电穿孔(基因电转移)和病毒转导。最终目标是将核酸输送到细胞中,通过外源基因的表达或内源基因的敲低来研究基因功能。基因表达操控是药物开发、癌症研究、基因治疗和组织工程等研究领域的核心技术。

什么是转染?

真核细胞的化学转染

试剂与核酸结合形成带正电荷的复合物。 2) 将复合物添加到细胞中,并通过静电相互作用与带负电的细胞表面结合。 3) 细胞通过内吞作用将复合物内化到称为内体的膜囊泡中。 4) 试剂使内体膜不稳定 5) 复合物从内体中逸出并释放细胞质中的核酸货物(siRNA、miRNA 或大 RNA 通常在细胞质中活跃)。 6) DNA 必须定位于细胞核,基因表达盒在细胞核中进行转录。 

化学转染

使用化学转染试剂的转染依赖于静电相互作用来与核酸结合并靶向细胞膜。这可以通过磷酸钙、聚阳离子和脂质体等化合物或阳离子脂质、聚合物、树枝状聚合物和纳米颗粒等更先进的技术来实现。

使用磷酸钙进行递送是将核酸引入细胞的最古老且便宜的方法。该技术在一些易于转染的细胞系中效果良好,但无法传递到更具耐药性的细胞,需要大量 DNA,并且通常缺乏重现性。

为什么转染很重要?

将外源核酸输送到细胞中的能力使研究人员能够研究基因表达(包括 CRISPR/Cas9)、RNAi 基因沉默并生成稳定的细胞系。或者,生产细胞可用于病毒生产、抗体/蛋白质生产和基因治疗。

成功转染的基础知识

核酸的成功递送受到几个常见因素的影响,包括细胞传代次数、细胞汇合度、DNA 质量、DNA:试剂比例、复合物形成时间和转染后孵育时间。

什么是蛋白质结构分析

什么是蛋白质结构分析

蛋白质的功能直接取决于其结构、与其他蛋白质的相互作用以及在细胞、组织和器官中的位置。蛋白质组学对蛋白质的结构和功能进行了大规模研究,这些研究能识别与特定疾病状态相关的蛋白生物标志物,为治疗提供了潜在靶点。通过了解蛋白质结构以及对蛋白质位置、表达水平和相互作用作图得到了有意义的信息,可用于推断蛋白质功能。 

蛋白质结构

蛋白质结构取决于组成蛋白质的氨基酸序列以及蛋白质如何折叠成更复杂的形状。

  • 一级结构由组成蛋白质的氨基酸序列决定。

  • 二级结构由多肽片段的局部间相互作用决定,即通过氢键结合作用形成α-螺旋和β-折叠。

  • 三级结构定义蛋白质的整体三维结构。

  • 四级结构定义多个蛋白质亚基如何相互作用形成更大的复合物。

蛋白质结构测定

在原子分辨率下确定蛋白质三维结构对于阐明蛋白质功能、基于结构的药物设计和分子对接十分有用。

  • NMR:核磁共振(NMR)光谱用于获取有关蛋白质结构和动力学的信息。NMR中,原子的空间位置取决于其化学位移。对于蛋白质NMR,通常用稳定的同位素 (15N,13C,2H)标记蛋白质,增强其灵敏性,便于计算结构去卷积。通常蛋白质表达过程在生长培养基中进行,通过使用同位素标记的营养物引入同位素标记。

  • X射线晶体学:蛋白质的X射线晶体学通过X射线衍射结晶蛋白质可获得蛋白质的三维结构。提高溶液中蛋白质浓度,促进沉淀使晶体生长,并在合适的条件下形成有序的蛋白质晶体。将X射线对准蛋白质晶体,蛋白质晶体将X射线散射到电子检测器或胶片上。旋转晶体捕获三维衍射,可以通过傅立叶变换计算出结晶分子中每个原子的位置。

蛋白质作图

蛋白质在特定细胞、组织和器官中的位置和表达水平的定位有助于蛋白质组学的功能研究。蛋白质的空间结构是决定蛋白质功能的关键,不恰当的定位或表达会触发各种疾病状态。诸如人类蛋白质图谱之类的作图研究项目为发现蛋白质标记物提供了蛋白质组学资源,有助于理解疾病病理学。相互作用组作图有助于定义细胞水平上发生的分子相互作用,有助于理解蛋白质功能,为治疗疾病提供有价值的潜在药物靶点。

什么是无菌测试?

什么是无菌测试?

无菌测试是一项GMP微生物测试要求,在产品放行和患者使用以前验证无菌产品确实不含活微生物。无菌测试必须尽可能准确,因为其对医疗设备、药物产品和配方、组织材料和其他标称无菌或不含活微生物的产品非常重要。 

无菌测试规程可用于多个行业的产品,包括食品和饮料生产商,但是主要应用行业是制药和医疗行业,在这些行业中产品的无菌测试是微生物学家一项重要的常规工作任务。

生物安全性检测服务

 检测单抗、细胞基因治疗和疫苗材料,确保它们不含外源物质或造成意外影响,导致下游工艺或患者治疗的灾难性后果。检测项目包括:无菌测试。

制药无菌测试方法

药物产品无菌测试的药典方法要求在两种独立的培养基中培养样品。在无菌测试中,测试者使用两种不同的培养基来促进残留厌氧菌、好氧菌和真菌的生长。巯基乙酸盐液体培养基(FTM)通常用于培养厌氧菌和一些好氧菌,大豆胰蛋白酶肉汤(SCDM)通常用于培养真菌和好氧菌。在测定以前样品分别在32.5 °C和22.5 °C下温育14天。培养基出现浑浊说明可能有微生物生长,必须进行调查。药品的无菌测试可以用两种推荐方法:膜过滤和直接接种。

膜过滤无菌试验

膜过滤无菌测试是美国药典<71>、欧洲药典 < 2.6.1>和日本药典<4.06>规定的针对可过滤药物产品的管理用分析方法。将样品通过过滤筒中的一层0.45 µm 过滤膜,然后添加培养基进行温育。这种无菌测试方法的灵敏度比其他方法更高,因为整个样品或复合样品都通过了一个过滤器。过滤也让我们有机会清洗掉样品中可能导致浑浊或抑制微生物生长的成分,如抗生素或防腐剂。

直接接种无菌测试

在直接接种中,测试者采用无菌操作从样品中移取少量样品,然后直接接种在合适体积的生长培养基中,再进行温育。这种测试方法尽管简单,但具有明显的局限性。只有少量产品可以接种在培养基中,这限制了测试的灵敏度。如果接种后样品浑浊,则在接种阶段结束时很难检测微生物生长造成的浑浊。此外,如果产品具有抗微生物性质,则必须对样品进行中和,从而使微生物生长不受抑制。

医疗设备无菌测试方法

医疗设备的无菌测试建议采用直接转移无菌测试。在整个温育阶段将待测设备直接接触测试培养基,在此期间设备内部或表面上的任何微生物都将生长并增殖。此外,对于带有中空管的产品,例如其液体通路标记为无菌的输血和输液用具,选择方法是产品冲洗无菌测试。用清洗液冲洗产品内腔,将洗脱液进行膜过滤,再放置在合适的培养基中进行温育。

什么是 SteamBead?

什么是 SteamBead?

StemBeads 是一种革命性的控释生长因子技术。 StemBeads 产品目前在全球 100 多个科学实验室中用于改进细胞培养。   缓释蛋白细胞培养 神经干细胞研究所的科学家发现,生长因子半衰期短是人类多能干细胞培养物自发分化的原因。半衰期短会导致生长因子水平变化、需要每日喂养以及细胞生长质量低下。  为了解决这些问题,我们开发了一种利用生物相容性 StemBeads 控制蛋白质释放的方法。  StemBeads 技术将生长因子封装在 PLGA 水凝胶中,可稳定蛋白质并在几天内稳定释放。随着生长因子水平稳定,自发分化减少,多能性增加,喂养时间减少至每周 2-3 次。  将 StemBeads 添加到您的培养基中,以实现所需的生长因子释放,并持续数天。接下来,将珠子从培养物中洗掉,更换培养基,并根据需要重复该过程。  五种不同的生长因子  StemCultures 目前提供适用于 5 种不同生长因子(FGF2、EGF、GDNF、BDNF 和 Activin A)的 StemBeads。我们产品最常见的应用是人类多能干细胞培养,但任何依赖这些生长因子的细胞系都将受益于 StemBeads。我们还生产定制珠子 以满足您的特定需求。

什么是蛋白质印迹?

什么是蛋白质印迹?

蛋白质印迹是研究蛋白质结构和功能的常用技术。通常,蛋白质样品在 SDS 凝胶上进行电泳,然后转移到固相支持物(硝基纤维素或 PVDF 膜)上,以便随后用特异性抗体进行探测。与 RNA/DNA 印迹技术的进步不同,剥离抗原/抗体并重复使用印迹是很困难的。


印迹的回收具有许多优点:

  • 有效利用数量有限的样品。

  • 比较在同一印迹中使用不同抗体获得的图像。

  • 使用相同或不同的抗体确认结果。

  • 重复使用印迹更加经济且耗时更少。

重复使用蛋白质印迹的想法源于这样的事实:抗原-抗体复合物(例如,免疫亲和柱)可以被破坏并且免疫亲和柱可以多次重复使用。然而,免疫亲和技术中常用的洗脱条件(低或高 pH、使用离液剂)并不能有效地从蛋白质印迹中剥离抗体。

ADI 现在开发了专门配制的解决方案,可以在温和的条件下有效且几乎定量地剥离抗体。它具有以下优点:新型抗体条解决方案的优点

  1. 1. 室温剥离抗体(无需加热)。
  2. 2.无刺激性气味,巯基乙醇。
  3. 3. Strip 溶液为 10X 溶液,可立即使用。只需将印迹浸泡在溶液中 10-15 分钟即可。
  4. 4. 在封闭缓冲液(试剂盒中提供)中短暂孵育后,印迹可在 15-60 分钟内重复使用。