细胞分选试剂的配置有几种

细胞分选试剂的配置有几种

  细胞分选试剂配置涉及到一系列用于细胞分选和分离的试剂和缓冲液,包括常用的试剂和其配制方法。
  缓冲液的配制:
  磷酸盐缓冲液(PBS):
  配方:137 mM NaCl、2.7 mM KCl、10 mM Na2HPO4、1.8 mM KH2PO4。
  将上述化合物按照配方称取后,加入适量的去离子水溶解,并用盐酸或氢氧化钠调节 pH 值至7.4,最后用去离子水定容至适量。
  细胞培养基:
  细胞培养基的配方视实验需求而定,可以选择 DMEM、RPMI-1640、MEM 等常用培养基。根据厂家提供的配方,按比例混合培养基粉末与适量的去离子水,并用 pH 调节剂调节 pH 值至适宜范围,最后用去离子水定容至适量。
  标记抗体的配制:
  标记抗体通常需要进行稀释或标记染料。具体的配制方法会根据抗体或染料的性质有所不同。大多数情况下,抗体或染料会附带说明书,其中包含了建议的稀释比例和基本的标记方法。根据说明书的建议进行稀释和标记即可。
  细胞溶解液和洗涤缓冲液的配制:
  细胞溶解液:
  细胞溶解液的配制方法因实验目的而异。常见的细胞裂解液包括 RIPA 缓冲液、NP-40 缓冲液、细胞裂解液等。可以根据实验要求和相关文献提供的方法进行配制。
  洗涤缓冲液:
  洗涤缓冲液用于洗涤分选后的细胞,以去除残留的细胞培养基、血清等。常用的洗涤缓冲液是 PBS 或 TBS 缓冲液。也可以根据实验要求和相关文献提供的方法进行配制。
  紧密联结试剂配制:
  紧密联结试剂(例如 DAPI)用于染色并识别细胞核。具体的配制方法会根据试剂的性质有所不同,通常会附带说明书,其中包含了建议的稀释比例和使用方法。根据说明书的建议进行稀释即可。

MACS分选柱产品介绍

MACS分选柱产品介绍

1、为什么MACS磁珠分选要使用分选柱?


• 磁珠可以更小:美天旎磁珠直径只有50nm,普通真核细胞直径一般大于10um,结合在细胞上的磁珠大小可以忽略不计,因此:1、携带的磁珠不影响细胞大小——可以直接上流式检测,不影响FSC数据收集;2、细胞功能不受影响——分选过程中,磁珠的结合不会引起细胞的活化及其它生理状态的改变,可以保持细胞的原始生理和功能状态,尤其在Naive免疫细胞的分选中尤为重要。


• 抗原表位的占据更少:因为磁场可以被分选柱放大1000-10000倍,所以不需要太多的磁珠结合即可分离不同细胞。约20%-30%的抗原表位被偶联了磁珠的抗体结合即可将细胞滞留在磁场中,这就为后续实验预留了足够的抗原表位,因此,对于表达水平不低的抗原来说,MACS磁珠分选后的细胞可以直接进行相关荧光抗体标记,进而进行流式检测。


• 细胞活力更好:通过分选柱引起的间接磁场放大,使得细胞在磁场中所承受的直接压力小,让细胞受力均匀;同时,通过分选柱放大的磁场可以瞬时变大、离开磁场后磁力又瞬间消失,这些都保证了细胞所受机械力小,损伤小,得到的细胞活力高。


• 细胞纯度更高:通过去除分选柱,可以更好的进行去除分选,提高目的细胞的纯度。


2、是不是所有细胞都要从分选柱上重新获取?


不是。


若使用阳性分选策略,目的细胞是磁性标记的,在分选器和分选柱产生的磁场中滞留后,当分选柱移出分选器,磁场瞬间消失,此时用活塞用力将分选柱中滞留的细胞推出,从而收集到目的细胞;


反之,若使用去除分选策略,此时目的细胞是非磁性标记的,可直接从洗脱液中获得。


3、MACS分选柱有哪几种,如何选择合适的分选柱?


MACS分选柱根据其细胞容量、用途可以分为几种:


MS、LS、LD、大细胞分选柱、全血分选柱、autoMACS分选柱以及用于生物大分子分离的u柱等,选择分选柱时要根据您的实验目的、实验策略和注重的实验效果来取舍,我们在之前的一期微信“如何选择恰当的分选柱”中有详细的说明。


 


4、MACS分选柱能否重复使用?


普通的MACS分选柱不建议重复使用,但autoMACS分选柱分可以重复使用。


重复使用不能保证无菌,MACS分选柱都是独立、无菌包装的,保证分选下来的细胞无污染;


分选柱内填充了经亲水包被层处理的铁珠,如果通过浸泡、洗涤等过程重复使用,那么,铁珠表面得亲水层被破坏,裸露的铁珠与细胞接触会对流经的细胞产生损失,影响细胞活力和分选效果。


5、那为什么autoMACS分选柱可以重复使用呢?


autoMACS分选柱可以在两周之内使用,且最多用100次。


autoMACS分选柱一旦安装到全自动分选仪上,须保存在液体中,防止分选柱中的填充基质被氧化无法使用。


每次使用后应该按照推荐程序进行冲洗和消毒,以便更好的保存和下一次使用。


6、全血分选柱与普通分选柱有何不同?


全血分选柱有两层特殊的基质,非磁性层和磁性层;普通细胞分选柱中填充的是均一的亲水包被层处理的铁珠;


全血分选柱柱容量为15ml的全血;


全血分选柱可用于直接从全血中分选细胞,无需进行红细胞裂解或者密度梯度离心的过程,无需先制备PBMC。

细胞分选-细胞分选详情


miltenyibiotec细胞分选试剂

简要描述:miltenyibiotec细胞分选试剂 CD8a + T 细胞分离试剂盒,用于从小鼠脾脏或淋巴结的单细胞悬浮液中原封不动地分离 CD8a + T 细胞。上海金畔生物科技有限公司 是一家专注于分子生物学、细胞生物学、细菌学、遗传学、免疫学、生物化学、蛋白质学、细胞治疗、临床应用等领域,以销售为主的生物技术公司。

详细介绍

产品咨询

品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,生物产业

miltenyibiotec细胞分选试剂


CD8a + T 细胞分离试剂盒规格,小鼠


概述

开发CD8a + T 细胞分离试剂盒,用于从小鼠脾脏或淋巴结的单细胞悬浮液中原封不动地分离 CD8a + T 细胞。由于在耗尽混合物中添加了 TCRγ/δ 抗体,该试剂盒的发布提高了纯度。


该试剂盒使用新的快速小鼠方案并取代 CD8a + T 细胞分离试剂盒 II (# 130-095-236)。


详细的产品信息

背景资料

该试剂盒基于针对 CD4、CD11b、CD11c、CD19、CD45R (B220)、CD49b (DX5)、CD105、Anti-MHC-class II、Ter-119 和 TCRγ/δ 的生物素偶联抗体混合物。T 细胞的分离是通过去除磁性标记的细胞来实现的。


下游应用

未接触的 T 细胞用于功能研究,其中应排除表面分子的交联。分离的 T 细胞也可以进一步磁分离成 T 细胞亚群。


CD8a + T 细胞分离试剂盒已用于以下应用:过继转移实验1,2、T 细胞增殖测定2,3、树突状细胞共培养2和细胞因子分析实验。


LS 或 autoMACS ®色谱柱。


CD8a + T 细胞分离试剂盒,小鼠的产品数据和图片

图1

使用程序 m_spleen_01.01 在 gentleMACS™ Dissociator 上制备来自小鼠脾脏的单细胞悬液。使用CD8a + T 细胞分离试剂盒、LS 柱和 MidiMACS™ 分离器从该单细胞悬液中分离出 CD8a + T 细胞。使用 MC CD8a T 细胞混合物 (# 130-092-915) 对细胞进行荧光染色,并使用 MACSQuant® 分析仪通过流式细胞术进行分析。基于散射信号和碘化丙锭荧光,细胞碎片和死细胞被排除在分析之外。

细胞分选-细胞分选详情

上海金畔生物科技有限公司 是一家专注于分子生物学、细胞生物学、细菌学、遗传学、免疫学、生物化学、蛋白质学、细胞治疗、临床应用等领域,以销售为主的生物技术公司。销售的产品涉及,细胞株和菌株、胎牛血清、生化试剂、ELISA试剂盒、抗体和抗原、细胞因子、技术服务、实验耗材和消耗品、仪器设备等。客户遍布大学、研究所、医院、卫生防疫、商品检验检疫、制药公司、生物技术公司和食品工业等单位。公司与国内外生物试剂供应商保持着密切的合作关系,有着非常好的货源渠道, 可以在为用户提供前沿和完备的产品和物流服务。

公司的目标成为中国生命科学和生物技术等领域坚强的后盾,为这些领域的发展提供服务。以“质量是企业的生命,诚信是经营的资本”为警醒 ,严把所售出商品的质量关,不做任何有损顾客利益的事情。公司代理国内外众多生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品,公司坚持“一站式”服务模式,为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合与国内资源,加强网络建设,提高公司内部运作效率,为客户提供方便、快捷的服务。公司突出创新思维,提高工作效能,减低运作成本,为客户提供优惠的价格 miltenyibiotec细胞分选试剂