ProtoGel 样品制备试剂盒信息介绍
目录号： EC-884
尺寸：1 套件
用于 SDS-PAGE 样品制备的系统
去除干扰污染物
浓缩稀释样品
防止凝胶失败
简单又便宜
样品中的污染物（例如高盐或尿素）会导致 SDS-PAGE 中条带模糊或微笑凝胶。使用 ProtoGel 样品制备套件，来自上游应用的干扰物质无法再进入孔中。用简单的方法就可以洗掉污染物。上样的样品仅包含纯蛋白质和上样缓冲液，不存在妨碍高分辨率结果重现的污染物。
除了纯化之外，以前对于 SDS-PAGE 来说太稀释的蛋白质现在可以在电泳前通过简单的方法进行浓缩。 ProtoGel 样品制备试剂盒可将蛋白质浓缩至稀释至 25 ng/100 µl。 ProtoGel 样品制备试剂盒在任何回收系统中都撒下了精细的网，无论身份如何，都能以高产量浓缩所有蛋白质。使用 ProtoGel 样品制备试剂盒，您可以控制 SDS-PAGE 样品的纯度和浓度。
血清与血浆的区别及制备
并非所有科学家都知道血清和血浆之间的区别。那么让我们解释一下。除了红细胞、白细胞和营养物质外，血液还含有纤维蛋白原和凝血因子，当血液暴露在空气中时会导致凝血。这种凝血对于防止受伤后过度出血很重要。使用抗凝剂可以停止这些凝血成分的作用，从而防止形成任何凝块。
血浆和血清是不同的血液制剂，根据采集时的血样中是否添加抗凝剂而产生。添加抗凝剂以防止凝块形成很重要，例如，如果血液用于输血，以及制备用于细胞培养的血清。
血清和血浆是如何制备的？
等离子体
从全血开始，如果在采集后立即添加抗凝剂，则可以防止凝固，并且所有成分都保持悬浮状态。如果您不混合该血液样本，那么所有成分都会沉淀下来。较重的细胞会沉到底部。这会导致顶部出现透明液体。这个透明的上层是血浆，基本上是血液的所有成分减去细胞。在离心作用下，血浆和红细胞之间形成一层称为血沉棕黄层的白细胞。血浆保留纤维蛋白原。
血清
如果我们不添加任何抗凝剂，则凝血因子会促进凝块形成。这些含有纤维蛋白原作为凝血剂的凝块可以有效地从血浆中以固体形式去除红细胞。血清在血液中所占的比例比血浆更大，并且在研究中应用广泛。这至少部分是因为它可以更有效地去除不需要的红细胞，从而产生更多的每单位血液体积。
从血清和血浆中纯化外泌体。
只需通过Exo-spin™ 柱即可从血清和血浆中纯化外泌体。或者，可以在应用柱之前使用沉淀缓冲液处理血清/血浆样品。将样品与该缓冲液混合，然后离心，去除血浆和血清的许多成分，并允许在单个 Exo-spin™ 柱上纯化更多数量的外泌体。更多详细信息可以在我们的 Exo-spin™ 指南（查看各个产品）和外泌体资源页面中找到。
用于点击化学标记和缀合的试剂储备溶液的制备
| 准备 | 将 18 mg 抗坏血酸溶解在 20 mL 蒸馏水中。 |
| 贮存 | 抗坏血酸很容易被空气氧化。该溶液可稳定一天。使用新鲜的制剂进行点击化学。 |
| 准备 | 将 50 mg 五水硫酸铜 (II) 溶解在 10 mL 蒸馏水中。将 116 mg TBTA 配体溶解在 11 mL DMSO 中。混合两种溶液。 |
| 贮存 | 室温保存。该溶液可稳定运行多年。 |
| 准备 | 将 2.78 mL 三乙胺与 1.14 mL 乙酸混合。加水至 10 mL 体积，调节 pH 至 7.0。 |
| 贮存 | 室温保存。该溶液可稳定运行多年。 |
抗体药物制备过程中最需要注意的事项有哪些？
抗体偶联药物是通过连接体将针对特定抗原的单克隆抗体与小分子细胞药物连接而成。它既具有传统小分子化疗的强大杀伤作用，又具有抗体药物的肿瘤靶向特性。自从第一个ADC（Mylotarg）被批准用于治疗CD33阳性急性髓系白血病以来，已经开发了几种用于治疗癌症的ADC。
从选择合适的抗体到最终产品，ADC的整个开发过程是一项艰巨且富有挑战性的任务。临床药理学是药物开发最重要的工具之一。使用该工具有助于找到产品的最佳剂量，从而保持产品在患者群体中的安全性和有效性。与其他小分子或大分子通常仅测量一个部分/代谢物进行药代动力学分析不同，ADC 需要测量多个部分来表征其 PK 特性。因此，深入了解 ADC 的临床药理学对于在患者群体中选择安全有效的剂量至关重要。
药代动力学是临床药理学和现代药物开发重要的一部分。药代动力学研究的主要目的是获得吸收、分布容积、清除率、半衰期、多次给药后的蓄积、各种疾病状态以及年龄、体重和性别对药物药代动力学的影响。信息。这些药代动力学参数可用于为患者设计最佳给药方案。
应该认识到，与小分子和治疗性蛋白（抗体/融合蛋白）不同，ADC 的 PK 非常复杂，因为 ADC 由多种成分组成。不仅要考虑单克隆抗体的PK，还要考虑细胞毒性分子的PK以及结合的物理和化学性质。由于单克隆抗体的分子量占90%以上，ADC不同成分的PK受其PK影响较大。总抗体 (ADC+mAb) 的 PK 特性提供了 ADC 稳定性和完整性的最佳评估。缀合物和偶联位点在维持 ADC 的稳定性和 PK 方面也发挥着重要作用。下表列出了 FDA 批准的 ADC 的特性和 PK。
一般来说，给药后体内会涉及四个过程。这些过程是吸收、分布、分解代谢和清除。
大多数抗体通常通过静脉注射或输注的方式给予，也可以通过皮下途径给予抗体。然而，对于ADC来说，目前的给药途径是静脉注射或输注。由于对细胞毒性有效负载的反应和细胞毒性物质的局部沉积，SC 给药可能不适合 ADC。
药物在体内的分布可以用分布容积来描述。由于其大小和极性，抗体和 ADC 的分布通常仅限于血管和细胞间隙。
ADC的初始分布一般局限于血管内，分布体积一般等于血容量。随后，ADC 可以分布到间隙空间。此外，ADC的分布也会受到靶抗原表达和内吞作用的影响。
ADC在同一组织中的分布和积累可产生不良（毒性）药理作用，这是由于摄入ADC后细胞毒性药物或代谢物的释放。
ADC体内分解或代谢过程包括体内抗体分解代谢和小分子药物代谢。 ADC 在到达肿瘤细胞之前在细胞（不可切割连接体）或循环系统（可切割连接体）中释放效应分子。未结合的抗体和抗体片段沿着抗体的代谢途径，通过酶水解产生氨基酸，并被人体重复利用。
ADC裂解或分解代谢后可能形成的游离小分子药物/带有氨基酸残基的小分子药物/连接体的小分子药物代谢物将进一步经过肝脏CYP450酶代谢，潜在的药物也可能发生相互作用。
除了ADC本身的性质外，抗原表达、受体/细胞密度、FcRn介导的循环、Fcγ相互作用、受体介导的内吞作用、免疫原性等都会影响ADC的分解代谢。
ADC也通过分解代谢和排泄被消除。 ADC通过特定途径进入溶酶体后可被降解，与靶标结合，释放出小分子药物后从体内清除；它也可以通过非特异性胞饮作用被清除，这涉及到 FcRn 的回收过程。
ADC、抗体、分子量较大的肽和氨基酸片段不能通过肾小球过滤和排泄，而是以氨基酸的形式被重新吸收和利用。游离的小分子药物、分子量较小的肽和氨基酸连接的小分子药物、分子量较小的抗体片段等可通过肾小球滤过排出体外。同时，小分子药物和代谢物也可以通过酶代谢消除或通过转运蛋白排泄到粪便中。
ADC有多种成分，要表征这些成分的PK特性，需要几种分析方法，如下所述：
1.ELISA免疫分析测定结合物和总抗体的动力学曲线。
2.TFC-MS/MS，定量游离药物/代谢物。
3.高分辨质谱用于体内药物抗体比分析。
此外，有两种类型的 ELISA 免疫测定用于定量测量 ADC 分析物：第一种类型的分析测量总抗体，即 DAR 大于或等于零的 ADC。第二种分析方法测量药物结合抗体，定义为 DAR 大于或等于 1 的 ADC。
其他分析方法有尺寸排阻色谱法 (SEC) 和疏水相互作用色谱法 (HIC)。 SEC 是常用的液相色谱 (LC) 技术，用于确定聚集抗体的数量。该技术也可用于 ADC。尽管 HIC 是一种用于蛋白质分离、纯化和表征的传统技术，但该技术现在正用于 ADC 表征和分析。
ADC细胞毒性有效负载应具有以下特征：
1.分子的有效负载应该小，缺乏免疫原性，并且可溶于水缓冲液，以便它们可以很容易地偶联。
2.细胞毒有效负载应具有适当的脂溶性。
3.有效负载的目标应位于小区内部。
4.有效负载在血液中应稳定。
目前，常用的细胞毒性药物效应分子有微管抑制剂（auristatins/maytansinoids）、DNA损伤剂（卡利刹霉素/duocarmycins/anthracyclines/吡咯并苯二氮卓二聚体）和DNA转录抑制剂（Amatoxin/Quinolinealkaloid（SN-38））。已批准上市的几款ADC药物总共使用了6种不同的小分子药物，其中3款ADC药物使用MMAE作为结合药物，2种药物使用卡利车霉素作为结合药物。 MMAF、DM1、SN-38、Dxd也被成功使用。
DAR 是指单个单克隆抗体上附着的有效负载分子的平均数量，通常在 2 至 4 个分子之间。在极少数情况下，通过使用亲水连接器有效负载（例如 Enhertus 和 Trodelvys）可以安全地实现高达 8 的 DAR。 DAR对于ADC的疗效判定非常重要，DAR可能影响药物在循环中的稳定性、PK以及ADC的毒性。
研究表明，与DAR值<6的ADC相比，DAR值高（7-14）的ADC具有更快的清除率和较低的体内疗效。 DAR 值及其对稳定性和 PK 的影响还取决于偶联位置和连接子的大小。
通常对赖氨酸或半胱氨酸进行修饰来生产ADC。赖氨酸是连接底物和抗体常用的氨基酸残基之一。赖氨酸通常存在于抗体表面，因此很容易偶联。
其他氨基酸如半胱氨酸、酪氨酸也可以修饰，利用马来酰亚胺修饰半胱氨酸合成ADC如Adcetriss、Polivys、Padcevs、Enhertus、Trodelvys和Blenreps。
Linker是ADC重要的组成部分，决定着ADC的药物释放机制、PK、治疗指标和安全性。早期的 ADC 连接体化学不稳定，例如二硫化物和腙。这些连接体在循环中不稳定，半衰期短，通常为一到两天。最新一代的连接体在体循环中更加稳定，例如肽和葡萄糖醛酸连接体。最常见的两种连接器如下：
裂解接头对细胞内环境敏感，通过细胞内分解代谢和解离的联合作用释放游离的效应分子和抗体，如酸裂解接头和蛋白酶裂解接头。它们通常在血液中稳定，但会在低 pH 值和富含蛋白酶的溶酶体环境中快速裂解，释放效应分子。此外，如果效应分子可以跨膜，则可以通过发挥潜在的旁观者效应来消除肿瘤。
不可切割连接子是新一代连接子。与可裂解接头相比，它具有更好的血浆稳定性。由于不可切割接头可以比可切割接头提供更高的稳定性和耐受性，因此这些接头可以减少脱靶毒性，并提供更大的治疗窗口。
在针对8种ADC的11项临床试验中，ADA的基线发生率在1.4%至8.1%之间，基线后ADA的发生率在0-35.8%之间。这些值在治疗性单克隆抗体的范围内。一般来说，血液肿瘤患者中 ADC 的 ADA 发生率低于实体瘤患者；大多数 ADA 都是针对 ADC 的单克隆抗体结构域。此外，在大多数患者中，这些 ADC 的半抗原样结构不会比治疗性单克隆抗体带来更大的免疫反应风险。
应用模型方法可以整合PK、疗效和安全性数据，满足ADC药物研发不同阶段的需求，如：靶点选择、抗体亲和力、接头稳定性、动物对人的外推、剂量选择和调整、ER由于ADC具有多种清除途径（解离和分解代谢）以及多种分析物复杂的PK特性，其动力学模型也较为复杂。
不同的型号有不同的应用。例如，二室模型和PBPK模型可以用来描述ADC的稳定性特征，参数包括清除率、解离率和代谢率等。目前ADC药代动力学研究主要采用非房室模型、群体药代动力学模型、基于机制的模型、基于生理的模型等。
在ADC药物的研发过程中，临床药理学起着非常重要的作用。通过生物分析技术的不断发展，全面地阐明ADC药物的PK/PD特性，对于推动更多低毒、高效的ADC药物的研发具有重要意义。重要的。 ADC药物也将在肿瘤治疗领域展现出更强大的优势。
简要描述：上海金畔生物科技有限公司专业代理进口品牌实验产品，加拿大Allumiqs（Proteoform）样品制备工具，欲购从速（敬请咨询）Proteoform Scientific Inc. 是一家位于加拿大的开发商和制造商，在不断发展的科学蛋白质组学领域提供创新解决方案和设备。其他实验产品Proteoform样品制备工具
详细介绍
产品咨询
| 品牌 | Proteoform | 供货周期 | 两周 |
|---|---|---|---|
| 应用领域 | 环保,化工,生物产业,能源 |
加拿大Allumiqs（Proteoform）样品制备工具
上海金畔生物代理Proteoform在中国的业务，Proteoform代理，Proteoform代理，Proteoform上海代理，Proteoform华南代理，Proteoform华东代理，Proteoform华西代理，Proteoform华北代理，上海金畔生物科技有限公司专业代理进口品牌实验产品，*，欲购从速（敬请咨询）产品目录（略），Proteoform Scientific Inc. 是一家位于加拿大的开发商和制造商，在不断发展的科学蛋白质组学领域提供创新解决方案和设备。
Proteoform成立于 2018 年，拥有一支精心挑选的科学和商业专家团队，旨在将我们的旗舰产品 ProTrap XG 带入生活。今天，重点仍然是为更好的科学创造更好的工具。
上海金畔生物科技有限公司，1.国内试剂耗材经销代理2.国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。3。提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。4.进出口货物代理服务。5.公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式，为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源，加强网络建设，提高公司内部运作效率，为客户提供方便、快捷的服务。
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如何为 ELISA 试剂盒制备细胞或组织裂解物。
与 RayBio ® ELISA 试剂盒一起使用的细胞或组织裂解液可以使用大多数常规方法来制备，例如在RayBio® 裂解缓冲液中匀浆细胞或组织。您还可以使用自己的裂解缓冲液，例如 RIPA 或其他针对免疫沉淀优化的配方。
避免使用 >0.1% SDS 或其他强变性洗涤剂。一般来说，非离子型去污剂（如 Triton X-100 或 NP-40）是好的，但两性离子型去污剂（如 CHAPS）或温和的离子型去污剂（如脱氧胆酸钠）也可以。
总洗涤剂用量不超过 2% v/v
避免使用叠氮hua钠
避免使用 >10 mM 还原剂，例如二硫苏糖醇或巯基乙醇
我们强烈建议在均质化之前向裂解缓冲液中添加蛋白酶抑制剂混合物。大多数通用生化供应公司（包括 Roche、Sigma-Aldrich、Pierce 和 Calbiochem）都备有多种此类产品。由于对蛋白水解的敏感性和裂解液中存在的蛋白酶类型各不相同，因此我们不推荐特定的产品。相反，您选择使用哪种蛋白酶抑制剂组合应基于对您感兴趣的蛋白质和/或组织或细胞类型的文献检索。可以使用磷酸酶抑制剂，但不是必需的，除非试剂盒中使用的抗体特异性识别蛋白质的磷酸化形式。
裂解和匀浆方法的选择包括玻璃珠“粉碎”、粉碎、冻融、超声处理和用研钵和杵粉碎冷冻组织，甚至这些方法的组合。没有适用于所有样本类型的最佳方法；您应该在简要搜索文献后选择方法，以了解在以前的调查中如何准备与您相似的样本。
均质化后，离心裂解物以去除细胞/组织碎片（5 分钟 @ 10,000 xg 或 10 分钟 @ 5,000 xg）并保存上清液。除非新鲜测试，否则裂解物应尽快冷冻并储存在 -20°C（或 -80°C，如果可能）下。在进行任何免疫测定孵育之前再次离心。接下来，使用不受去垢剂抑制的总蛋白测定（例如二辛可宁酸 (BCA) 测定）确定裂解物的蛋白质浓度，并标准化每个样品的体积，以便为每个测定提供相同量的总蛋白。
注意：不建议使用 Bradford 测定法，因为它可能会因洗涤剂的存在而受到抑制。
由于不同的细胞和组织可能含有不同量的蛋白质，作为起点，我们建议每 1×10 6 个细胞或 10 mg 组织使用 500 µL 裂解缓冲液。您可能需要根据您的结果进行调整。匀浆的目标总蛋白浓度应至少为 1,000 µg/mL，但 2,000 µg/mL 或更高会更好。
无论您拥有哪种样品类型，强烈建议您在制备后对所有样品进行分装，以大程度地减少多次冻融循环造成的蛋白质降解。这也确保了进一步实验的样品的可用性。
如何为 ELISA 试剂盒制备尿液样本
收集尿液而不添加稳定剂。
用力离心样品（例如 10,000 xg 1 分钟或 5,000 xg 2 分钟）。
等分，在干冰/甲醇浴中快速冷冻，并储存在-80°C直至使用。
注意：无论您拥有哪种样品类型，强烈建议您在制备后对所有样品进行分装，以大程度地减少多次冻融循环造成的蛋白质降解。这也确保了进一步实验的样品的可用性。
RayBiotech 成立于 2001 年，旨在将黄若攀医学博士开发的抗体阵列技术商业化。RayBiotech 生产 1,000 多种经过高度验证、符合 GMP 的ELISA 试剂盒。开发了自己的多重蛋白质分析工具——蛋白质阵列,Quantibody 多重 ELISA 阵列等产品，欢迎咨询
金脂质体的制备
以下论文发表在美国显微镜学会第五十四届年会论文集上； GW Bailey、JM Corbett、RVW Dimlich、JR Michael 和 NJ, Zaluzec（编辑）。旧金山出版社，加利福尼亚州旧金山，第 898-899 页（1996 年）。
脂质是一类重要的分子，存在于膜、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白和其他天然结构中，在结构中发挥重要作用，并具有多种功能，例如区室化和运输。合成脂质体还广泛用作药物、化妆品和其他化学品的递送和释放载体；肥皂是由脂质制成的。脂质可以形成双层或多层囊泡、胶束、片、管和其他结构。脂质分子可以与蛋白质、碳水化合物或其他部分连接。由于缺乏在不进行广泛改变的情况下可视化脂质的直接方法，对这种生命必需成分的电镜研究已经滞后。氧化锇4与膜磷脂中的双键反应，形成交叉桥。到目前为止，这一直是固定和染色膜的选择方法。早期的工作描述了使用连接到脂质部分的钨酸盐簇（W 11 ）来形成脂质结构和脂质探针。 1
随着金簇的发展，现在可以将致密的金球2与脂质分子共价且特异性地连接；例如，使单-N-羟基琥珀酰亚胺纳米金簇与磷脂酰乙醇胺上的氨基反应。金脂肪酸和金磷脂的例子如图 1 所示。
二棕榈酰磷脂酰乙醇胺-Nanogold (DPPE-Nanogold，图 1B)，具有 C 16疏水尾链，获自 Nanoprobes, Inc.，3并制成囊泡。将干燥的 DPPE-Nanogold (10 nmole) 重新悬浮于 0.5 mL 甲醇中。将20微升转移至试管中并用氮气流干燥。添加 50 ml 水，并将管在室温下在浴装置中超声处理 10 分钟。将一滴液滴滴到由 EM 网格上的多孔薄膜支撑的薄碳上。 1分钟后，对溶液进行毛细作用，用20mM醋酸铵冲洗数次，毛细作用，并在液氮泥浆中快速冷冻。然后将样品冷冻干燥过夜，恢复至室温，在真空下转移至 EM，并插入冷却至 -130°C 的样品台中。在高分辨率 Brookhaven 扫描透射 EM (STEM) 中观察样品在暗场模式下操作。4
观察到几种有趣的脂质形式，包括小胶束（图 2）和明显破裂的双层囊泡，从而显示出单层和双层（图 3）。由于没有使用其他未标记的脂质，并且标记实际上是定量的，因此几乎每个脂质分子都出现金簇。在这些规则阵列中观察到六方密堆积，间距约为 2.5 nm。这大约是金簇的直径，其核心为 1.4 nm，有机壳总直径为 2.7 nm。然而，这比天然双层中磷脂之间的典型间距（约 1.3 nm）稍大。5
这些方法提供了一种生产规则金球单层或其他脂质结构的方法。对于生物学来说，它们可以插入膜中以跟随膜运动，或用于重建膜蛋白结构以研究脂质分布。它们还提供了一种通过银增强直接可视化脂质体的方法，甚至在光学显微镜水平上也是如此。6
为什么 pH 调整对于样品制备方法很重要？
酸解离常数 (pKa) 如何影响样品制备方法的开发？了解和了解化合物的 pKa 可以告诉您该化合物是否可以电离以及在什么条件下电离，因此您可以利用此特性来开发更好的样品制备方法。
酸解离常数pKa 是分析物 50% 离子化和 50% 非离子化时的 pH 值。图 1 显示了 pKa 为 8 的酸和碱在 pH 范围内的电离。对于酸，当 pH 值升高到高于其 pKa 时，分析物会电离；而当 pH 值降低到低于其 pKa 时，分析物不会电离。电离或非电离发生在 pKa 上方或下方 2 个单位处。对于碱，化合物在高于 pKa 时非电离，在低于 pKa 时电离。
当我需要开发新的样品提取方法时，我会查找测定中分析物的logP和 pKa，并考虑可能的干扰化合物。
图 1. pH 对 pKa 为 8 的酸和碱电离的影响。
如果感兴趣的化合物可以电离，则可以使用强阳离子或阴离子 交换 SPE 以保留您的化合物。这些产品通常是键合二氧化硅或具有强阳离子交换（通常是磺酸根）或阴离子交换（通常是季铵）基团的聚合物相，如离子交换 HPLC 柱。由于任一样品制备柱的主链都是反相键合硅胶或聚合物，因此它们也具有反相特性，因此可以使用单个 SPE 柱进行离子交换或反相保留。这就是术语“混合模式 SPE”的由来。离子交换是一种非常强大的保留机制。带负电荷高于其 pKa 的酸性化合物可以承受高 pH 水洗和强有机洗涤，然后用酸化（通常使用甲酸或乙酸）洗脱溶剂进行洗脱。带正电荷低于其 pKa 的碱性化合物可以耐受酸性洗涤、强有机洗涤，并用添加碱（通常是氢氧化铵）的有机溶液洗脱。
对于含有酸性、碱性和中性化合物的大型尿液药物组，单次测定，混合模式聚合物反相强离子交换 SPE 可能是您的选择。如果您可以用酸（对于碱）或碱（对于酸性化合物）处理样品并将其离子化，则可以通过离子交换保留离子化的分析物，并通过反相保留非离子化的化合物。大多数药物都是碱性的，因此电离碱性药物并通过反相保留中性和酸性是一种常见的策略。使用这些方法时必须小心有机洗涤，因为反相保留的非离子化化合物可能会在强有机洗涤中被洗脱。您需要知道化合物的 logP 和 pKa，这样您就知道哪些化合物被反相保留，哪些化合物被离子交换保留，以及反相机制保留非离子化化合物的强度。根据离子交换机制（阴离子交换为酸性，阳离子交换为碱性），用酸性或碱性有机溶剂完成洗脱。有机溶剂还洗脱反相保留的化合物。选择正确的有机溶剂进行洗涤和洗脱对于优化样品清洁度非常重要。对于此类具有不同性质和保留特性的大量化合物的方法来说，样品清洁度和某些分析物的回收率会受到影响。有机溶剂还洗脱反相保留的化合物。选择正确的有机溶剂进行洗涤和洗脱对于优化样品清洁度非常重要。对于此类具有不同性质和保留特性的大量化合物的方法来说，样品清洁度和某些分析物的回收率会受到影响。有机溶剂还洗脱反相保留的化合物。选择正确的有机溶剂进行洗涤和洗脱对于优化样品清洁度非常重要。对于此类具有不同性质和保留特性的大量化合物的方法来说，样品清洁度和某些分析物的回收率会受到影响。
使用 PROTRAP 进行自上而下的样品制备
准备注意事项
ProTrap XG 设备经过优化，可处理 50 μg 蛋白质。
对于可重现和最大的蛋白质沉淀，沉淀过程中样品中的最大SDS含量应为1%。如果您的提取或裂解缓冲液含有超过 1% SDS，请使用最大离子强度为 300 mM 的缓冲液稀释。
离心速度基于带 24 x 1.5/2.0 mL 转子的标准台式微量离心机。
提供的时间仅供参考。
如果过滤滤芯中残留的液体超过几微升，请将其返回到离心机并重复旋转，或考虑提高旋转速度。建议在后续旋转中使用 3000 ×g （6000 rpm），ProTrap XG 已经过高达 9000 ×g （10，000 rpm） 的测试。
所需材料
所有化学品和试剂应为ACS级/HPLC级或更高。
丙酮
5 M 氯化钠水溶液
80%甲酸水溶液（冷却至–20°C）
冷冻水
自上而下的样品制备方案
对于可重现和最大的蛋白质沉淀，沉淀过程中样品中的最大SDS含量应为1%。如果您的提取或裂解缓冲液含有超过 1% SDS，请使用最大离子强度为 300 mM 的缓冲液稀释。 为获得最佳体验，样品应至少含有 50 mM NaCl。 如果需要添加氯化钠，请使用 5 M 氯化钠溶液。
不要让过滤滤芯中的膜在步骤之间变干。
将塞子拧到滤芯的底座上。
将 100 μL 稀释的样品蛋白转移到堵塞的过滤柱中。
加入 400 μL 室温丙酮。
盖上过滤滤芯并轻轻摇晃，倾斜不超过 45°，以混合溶剂。
将过滤柱插入微量离心管中，等待 30 分钟，使蛋白质在室温下聚集。
连接塞子后，以 2500 × g （5000 rpm） 离心×2 分钟。
从微量离心管中取出过滤盒，倒置并拧下塞子。
将带盖的过滤柱放回微量离心管中，并以 500 × （2000 rpm） 离心×3 分钟。 丢弃通过溶剂的流量。 如果过滤滤芯中残留任何溶剂，请以 3000 ×g （6000 rpm） 的速度重新旋转装置 2-5 分钟。
用 400 μL 丙酮清洗蛋白质颗粒。立即以 500 × g (2000 rpm) × 2 分钟离心。丢弃流过洗涤溶剂的流。
更换插头。在 –20°C 下将过滤筒中的沉淀物冷却 10 分钟。
在水中加入 50 µL 冷 (-20°C) 80% 甲酸。盖上滤芯，放入冰箱 10 分钟，然后超声处理 1 分钟。
加入 450 µL 冷冻水；盖并涡旋以混合溶剂。
完整的蛋白质可以在干净的微量离心管中直接回收，以 350 × g (2000 rpm) × 5 分钟的速度离心。
如果需要进一步的蛋白质净化，再溶解的蛋白质也可以使用提供的可选 SPE 小柱和 SPE蛋白质/肽净化方案进行 SPE 。
产品货号: TM12S05-2510WT(旧产品型号A-123) 产品名称: YMC-Pack TMS 半制备色谱柱 产品品牌: YMC（日本）
详细介绍 上海金畔生物代理YMC-Pack TMS 半制备色谱柱，货号TM12S05-2510WT(旧产品型号A-123),颗粒径S-5μm,微孔径12nm，内径×长度10 X 250mm。疏水性*小的反相色谱柱YMC-Pack TMS 在疏水性的相互作用上与其他填料相比，是一款保留很弱的色谱柱，适用于短时间内洗脱出疏水性大的化合物分离。另外，对于亲水性的化合物，有些时候能达到比其他反相色谱柱更好的保留和分离效果。上海金畔生物供应YMC-Pack TMS 半制备色谱柱，同时还有其它YMC-Pack TMS 色谱柱供应。更多YMC-Pack TMS 色谱柱相关的YMC-Pack TMS 半制备色谱柱，请联系咨询上海金畔生物。上海金畔生物Lubex是华南地区的**色谱耗材代理商，自成立以来，代理了Ecosil、Lubex、Waters、*******、******、岛津、GL Sciences、Merck、Daicel、HiCHROM、ACE、资生堂、Sigma-Aldrich、************、**、PerkinElmer、TOSOH、Bio-rad、Across、IKA、ASONE、OHSUS、ELGA、memmert等国内外知名品牌。若有其他品牌的产品采购需要，请联系咨询我们。
产品货号: PH12S05-2510WT（旧产品型号：A-423） 产品名称: YMC-Pack Ph 半制备色谱柱 产品品牌: YMC（日本）
详细介绍 上海金畔生物代理YMC-Pack Ph 半制备色谱柱，货号PH12S05-1510WT（旧产品型号：A-422），颗粒径S-5μm,微孔径12nm，内径×长度10 X 150mm。不同于ODS的选择性色谱柱YMC-Pack Ph 是一款具有苯基官能团由来的π电子的色谱柱。对于诸如芳香族化合物的分离，由于除了疏水性相互作用以外，还有固定相和溶质之间π-π电子间相互作用的帮助，因此显示出不同于包含ODS在内的烷基硅胶基质固定相的分离特性。上海金畔生物供应YMC-Pack Ph 半制备色谱柱，同时还有其它YMC-Pack Ph 色谱柱供应。更多YMC-Pack Ph 色谱柱相关的YMC-Pack Ph 半制备色谱柱，请联系咨询上海金畔生物。上海金畔生物Lubex是华南地区的**色谱耗材代理商，自成立以来，代理了Ecosil、Lubex、Waters、*******、******、岛津、GL Sciences、Merck、Daicel、HiCHROM、ACE、资生堂、Sigma-Aldrich、************、**、PerkinElmer、TOSOH、Bio-rad、Across、IKA、ASONE、OHSUS、ELGA、memmert等国内外知名品牌。若有其他品牌的产品采购需要，请联系咨询我们。
产品货号: CN12S11-3010WT(旧产品型号A-524-10) 产品名称: YMC-Pack CN半制备色谱柱 产品品牌: YMC（日本）
详细介绍 上海金畔生物代理YMC-Pack CN半制备色谱柱，货号CN12S11-3010WT(旧产品型号A-524-10)，颗粒径S-10μm,微孔径12nm，内径×长度10 X 300mm。可用于正相和反相两种模式的色谱柱YMC-Pack CN 的固定相上化学键合了中性的氰丙基功能团，因此既可用于正相，也可用于反相分离模式。使用正己烷等低极性的流动相时，即为正相分离模式；使用甲醇和水等高极性流动相的情况，即为反相分离模式。作为反相填料来说其疏水性较小，并且通过氰基由来的π电子显示出不同于ODS的选择性。对某些在ODS上保留时间太长希望缩短分析时间及优化分离困难的情况有效果。上海金畔生物供应YMC-Pack CN半制备色谱柱，同时还有其它YMC-Pack CN色谱柱供应。更多YMCbasic 色谱柱相关的YMC-Pack CN半制备色谱柱，请联系咨询上海金畔生物。上海金畔生物Lubex是华南地区的**色谱耗材代理商，自成立以来，代理了Ecosil、Lubex、Waters、*******、******、岛津、GL Sciences、Merck、Daicel、HiCHROM、ACE、资生堂、Sigma-Aldrich、************、**、PerkinElmer、TOSOH、Bio-rad、Across、IKA、ASONE、OHSUS、ELGA、memmert等国内外知名品牌。若有其他品牌的产品采购需要，请联系咨询我们。
制备用于生物应用的树枝状大分子
由内核和外围壳组成的树枝状大分子是精心设计的分支结构，具有丰富的末端基团。因此，对树枝状结构的高度控制使树枝状大分子成为生物医学应用中的理想载体。此外，树枝状大分子的毒性主要来自于周围的高阳离子电荷密度，电荷与生物细胞膜相互作用，进而导致细胞膜破裂。已使用两种策略来最小化树枝状大分子的毒性：首先，选择中性或阴离子生物相容的树枝状大分子，其次，通过化学修饰掩蔽外围电荷。然后本章的重点转移到生物相容性树枝状大分子的生物医学应用，包括树枝状大分子的药物递送系统，通过树枝状大分子靶向递送，
上海金畔生物科技有限公司，1.国内试剂耗材经销代理2.国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。3。提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。4.进出口货物代理服务。5.公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式，为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源，加强网络建设，提高公司内部运作效率，为客户提供方便、快捷的服务。
产品货号: BU12S11-3010WT(旧产品型号A-824-10) 产品名称: YMC-Pack C4 半制备色谱柱 产品品牌: YMC（日本）
详细介绍 上海金畔生物代理的YMC-Pack C4 半制备色谱柱是烷基链较短的反相色谱柱,货号BU12S11-3010WT(旧产品型号A-824-10),颗粒径S-10μm,微孔径12nm，内径×长度10 X 300mm。YMC-Pack C4 固定相表面的疏水性低于ODS和C8，因此样品的保留时间也较ODS和C8更短。YMC-Pack C4 的分离特性不同于ODS， 对于某些样品来说，可能其分离效果更优于ODS。上海金畔生物供应YMC-Pack C4 半制备色谱柱，同时还有其它YMC-Pack C4 色谱柱供应。更多YMC-Pack C4 色谱柱相关的YMC-Pack C4 半制备色谱柱，请联系咨询上海金畔生物。上海金畔生物Lubex是华南地区的**色谱耗材代理商，自成立以来，代理了Ecosil、Lubex、Waters、*******、******、岛津、GL Sciences、Merck、Daicel、HiCHROM、ACE、资生堂、Sigma-Aldrich、************、**、PerkinElmer、TOSOH、Bio-rad、Across、IKA、ASONE、OHSUS、ELGA、memmert等国内外知名品牌。若有其他品牌的产品采购需要，请联系咨询我们。