FDG β半乳糖苷酶检测 荧光绿 CAS 17817-20-8-AAT Bioquest荧光染料

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FDG β半乳糖苷酶检测 荧光绿 CAS 17817-20-8价格 2111
产品规格

5 mg

产品货号

FDG β半乳糖苷酶检测 荧光绿 CAS 17817-20-8

产品参数
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 656.58 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:FDG β半乳糖苷酶检测 荧光绿

CAS:17817-20-8

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:656.58   

溶剂:DMSO

激发波长(nm):490

发射波长(nm):514

 

产品介绍

FDG β半乳糖苷酶检测 荧光绿是美国AAT Bioquest生产的用于检测β半乳糖苷酶的试剂,β-半乳糖苷酶活性的显色测定(即X-Gal)已被广泛使用,并且荧光仪器的新进展使荧光底物(如FDG和MUG)的灵敏度提高了几个数量级。 FDG被认为是可用于检测β-半乳糖苷酶的敏感的荧光底物之一。无色和非荧光FDG水解成高荧光荧光素,具有出色的光谱特性(Ex / Em = 492/520 nm),与大多数荧光仪器的佳检测窗口相匹配。半乳糖苷酶催化的FDG水解之后可以在520nm附近荧光增加。或者,FDG也可用于以发色模式检测β-半乳糖苷酶,因为酶产物(荧光素)表现出大的消光系数(接近100,000cm-1mol-1)。FDG已被广泛用于荧光显微镜和流式细胞术鉴定LacZ阳性细胞。它还用于检测活细胞中β-半乳糖苷酶的表达。据报道,使用FDG的基于荧光的测定比基于放射性同位素的ELISA更敏感100至1000倍。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的FDG β半乳糖苷酶检测试剂。 

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参考文献

Gfi1b regulates the level of Wnt/β-catenin signaling in hematopoietic stem cells and megakaryocytes
Authors: Peiman Shooshtarizadeh, Anne Helness, Charles Vadnais, Nelleke Brouwer, Hugues Beauchemin, Riyan Chen, Halil Bagci, Frank JT Staal, Jean-Frančois Coté, Tarik Möröy
Journal: Nature communications (2019): 1270

BZLF1 Attenuates Transmission of Inflammatory Paracrine Senescence in Epstein-Barr Virus-Infected Cells by Downregulating Tumor Necrosis Factor Alpha
Authors: Xubing Long, Yuqing Li, Mengtian Yang, Lu Huang, Weijie Gong, Ersheng Kuang
Journal: Journal of Virology (2016): 7880–7893

MUG β半乳糖苷酶检测 荧光蓝 CAS 6160-78-7-AAT Bioquest荧光染料

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MUG β半乳糖苷酶检测 荧光蓝 CAS 6160-78-7价格 1095
产品规格

25 mg

产品货号

MUG β半乳糖苷酶检测 荧光蓝 CAS 6160-78-7

产品参数
Ex (nm) 341 Em (nm) 441
分子量 338.32 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:MUG β半乳糖苷酶检测 荧光蓝

CAS:6160-78-7

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:338.32    

溶剂:DMSO

激发波长(nm):360

发射波长(nm):449

 

产品介绍

MUG β半乳糖苷酶检测 荧光蓝是美国AAT Bioquest生产的用于检测β半乳糖苷酶的试剂,MUG是荧光MU底物,用于使用荧光酶标仪或荧光计检测细胞提取物和纯化的酶制剂中的半乳糖苷酶。 7-羟基-4-甲基香豆素(4-甲基伞形酮,MU)的有机和无机酯和糖苷是常用的荧光底物。 这些底物产生水溶性蓝色荧光香豆素荧光团。 MU在pH 10以上产生大荧光。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的MUG β半乳糖苷酶检测试剂。 

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参考文献

Intraperitoneal linear polyethylenimine (L-PEI)-mediated gene delivery to ovarian carcinoma nodes in mice
Authors: Louis MH, Dutoit S, Denoux Y, Erbacher P, Deslandes E, Behr JP, Gauduchon P, Poulain L.
Journal: Cancer Gene Ther (2006): 367

Catheter-based antegrade intracoronary viral gene delivery with coronary venous blockade
Authors: Hayase M, Del Monte F, Kawase Y, Macneill BD, McGregor J, Yoneyama R, Hoshino K, Tsuji T, De Grand AM, Gwathmey JK, Frangioni JV, Hajjar RJ.
Journal: Am J Physiol Heart Circ Physiol (2005): H2995

Characterization of an unusual cold-active beta-glucosidase belonging to family 3 of the glycoside hydrolases from the psychrophilic isolate Paenibacillus sp. strain C7
Authors: Shipkowski S, Brenchley JE.
Journal: Appl Environ Microbiol (2005): 4225

A novel synthetic peptide derivative from lactoferrin exhibiting antimicrobial activity
Authors: Ramesh CV, Kamini NR, Puvanakrishnan R.
Journal: Biotechnol Appl Biochem (2004): 271

Neuronal Nitric Oxide Synthase Activity in the Paraventricular Nucleus Buffers Central Endothelin-1- induced Pressor Response and Vasopressin Secretion
Authors: Rossi NF, Black SM, Telemaque-Potts S, Chen H.
Journal: J Cardiovasc Pharmacol (2004): S283

Construction of transcriptional and translational lacZ gene reporter plasmids for use in Streptococcus mutans
Authors: Honeyman AL, Cote CK, Curtiss R, 3rd.
Journal: J Microbiol Methods (2002): 163

Optimisation of an enzymatic method for beta-galactosidase
Authors: McGuire JB, James TJ, Imber CJ, St Peter SD, Friend PJ, Taylor RP.
Journal: Clin Chim Acta (2002): 123

Fluorogenic substrates based on fluorinated umbelliferones for continuous assays of phosphatases and beta-galactosidases
Authors: Gee KR, Sun WC, Bhalgat MK, Upson RH, Klaubert DH, Latham KA, Haugland RP.
Journal: Anal Biochem (1999): 41

Adenoviral gene transfer to spinal-cord neurons: intrathecal vs. intraparenchymal administration
Authors: Mannes AJ, Caudle RM, O’Connell BC, Iadarola MJ.
Journal: Brain Res (1998): 1

Comparative performance of Colisure
Authors: McFeters GA, Broadaway SC, Pyle BH, Pickett M, Egozy Y.
Journal: J Am Water Works Assoc (1997): 112

MUGlcU β半乳糖苷酶检测 荧光蓝 CAS 881005-91-0-AAT Bioquest荧光染料

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MUGlcU β半乳糖苷酶检测 荧光蓝 CAS 881005-91-0价格 1095
产品规格

5 mg

产品货号

MUGlcU β半乳糖苷酶检测 荧光蓝 CAS 881005-91-0

产品参数
Ex (nm) 341 Em (nm) 441
分子量 352.29 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:MUGlcU β半乳糖苷酶检测 荧光蓝

CAS:881005-91-0

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:352.29

溶剂:DMSO

激发波长(nm):360

发射波长(nm):449

 

产品介绍

MUGlcU β半乳糖苷酶检测 荧光蓝是美国AAT Bioquest生产的用于检测β半乳糖苷酶的试剂,MUGlcU是MU的一种荧光底物,可通过荧光酶标仪或荧光光度计读取,用来检测细胞抽提物和纯化酶制剂中的半乳糖苷酶。有机、无机脂类和7-羟基-4-甲基香豆素(4-methylumbelliferone, MU)中的糖苷都是使用的普通的荧光底物。这些底物产生水溶性的蓝色荧光香豆素荧光团。MU在pH 10以上有大荧光。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的MUGlcU β半乳糖苷酶检测 荧光蓝。 

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参考文献

Coumarin Schiff-bases: as antioxidant and possibly anti-inflammatory agents
Authors: Gacche RN, Gond DS, Dhole NA, Dawane BS.
Journal: J Enzyme Inhib Med Chem (2006): 157

Examination of lectins, polysaccharopeptide, polysaccharide, alkaloid, coumarin and trypsin inhibitors for inhibitory activity against human immunodeficiency virus reverse transcriptase and glycohydrolases
Authors: Wang HX, Ng TB.
Journal: Planta Med (2001): 669

Induction of indoleamine 2,3-dioxygenase in alveolar interstitial cells of mouse lung by bacterial lipopolysaccharide
Authors: Urade Y, Yoshida R, Kitamura H, Hayaishi O.
Journal: J Biol Chem (1983): 6621

Determination of dicumarol metabolites in bile of rats
Authors: Conway WD, Lee FH, Neufeld L.
Journal: J Pharm Sci (1975): 1158

FCB β半乳糖苷酶检测 荧光橙-AAT Bioquest荧光染料

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FCB β半乳糖苷酶检测 荧光橙价格 4245
产品规格

1 mg

产品货号

FCB β半乳糖苷酶检测 荧光橙

产品参数
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 980.87 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:FCB β半乳糖苷酶检测 荧光橙

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:980.87  

溶剂:DMSO

激发波长(nm):490

发射波长(nm):514

 

产品介绍

FCB β半乳糖苷酶检测 荧光橙是美国AAT Bioquest生产的用于检测β半乳糖苷酶的试剂,这种非荧光荧光素底物产生具有Ex / Em = 492 / 514nm的明亮荧光素产物,并且可以用FITC滤光片组容易地检测。通常,荧光素底物比香豆素或硝基酚基底物更敏感。该荧光素底物用于监测纤维素酶活性。纤维素酶是一类含有β-葡萄糖苷酶的酶,内切葡聚糖酶和外切葡聚糖酶。这些酶切割连接包含纤维素的葡萄糖单元的β-1,4-D-糖苷键。除了由植物产生外,还在许多真菌和细菌中发现纤维素酶活性,包括一些植物病原体。大多数动物细胞不知道产生纤维素酶,其中纤维素分解活性通常通过共生体进行。纤维素酶活性的研究在植物分子生物学,农业和制造业中有许多应用。纤维素酶在替代燃料来源的开发中变得重要,因为从纤维素水解获得的葡萄糖易于发酵成乙醇。使用这种敏感的荧光素纤维二糖苷可以方便地监测大多数纤维素酶的活性。在切割后,释放荧光化合物荧光素,并且在基于微量滴定板的测定形式中容易地获得活性测量。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的FCB β半乳糖苷酶检测试剂。 

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参考文献

In vitro flow cytometry-based screening platform for cellulase engineering
Authors: Georgette Körfer, Christian Pitzler, Ljubica Vojcic, Ronny Martinez, Ulrich Schwaneberg
Journal: Scientific reports (2016)

Amplite 比色法β-半乳糖苷酶检测试剂盒-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 比色法β-半乳糖苷酶检测试剂盒 价格 4245
产品规格

200 Tests

产品货号

Amplite 比色法β-半乳糖苷酶检测试剂盒

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Amplite 比色法β-半乳糖苷酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于β-半乳糖苷酶的试剂盒,大肠杆菌β-半乳糖苷酶是464kD四聚体。每个单位的β-半乳糖苷酶由五个结构域组成,其中第三个是活性位点。它是细胞中必不可少的酶。这种酶的缺乏可导致半乳糖醛酸病或Morquio B综合征。在大肠杆菌中,β-半乳糖苷酶是由LacZ操纵子的活化产生的。 LacZ表达的检测已经成为每个细胞检测少至5个拷贝的β-半乳糖苷酶的常规方法。该试剂盒使用发色半乳糖苷酶底物,可以灵敏地区分LacZ +和LacZ-细胞。淡黄色底物在与半乳糖苷酶反应时产生强紫色产物。它可用于检测ELISA型测定系统中的半乳糖苷酶缀合物或用于监测细胞中LacZ基因的表达。 Amplite 比色β-半乳糖苷酶检测试剂盒配备了所有必需成分和优化的检测方案。它可用于筛选半乳糖苷酶抑制剂或诱导剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 比色法β-半乳糖苷酶检测试剂盒。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 580/460nm
推荐孔板: 透明孔板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.用LacZ基因制备稳定或瞬时转染的细胞
2.用测试化合物孵育细胞(样品)
3.裂解细胞
4.将裂解液转移至微量滴定板
5.添加β-Gal工作液
6.根据细胞类型,在室温或37°C孵育至少10分钟
7.添加停止反应试剂
8.监测Ex / Em = 540/590 nm的荧光强度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 β-半乳糖苷酶底物储备液(200X):
将50 µL DMSO(组分E)添加到试卤灵β-半乳糖苷酶(组分A)的小瓶中,制成200Xβ-半乳糖苷酶底物原液。 注意:25 µLβ-半乳糖苷酶底物储备液足以容纳1个板,避光。

 

2.标准溶液

β-半乳糖苷酶标准品
可选(如果需要标准曲线):用0.3%β-巯基乙醇测定缓冲液制备一系列β-半乳糖苷酶(大肠杆菌)标准品的稀释液。 将标准曲线上每个点的等分试样50 µL转移至平板的对照孔中。 β-半乳糖苷酶的高推荐量为200 mU / mL(200-400 ng)。建议按1:3的比例稀释由8个点组成的标准曲线。 注意:调整标准曲线以适合特定的实验条件,例如细胞类型,数量,转染效率和培养板的大小。 每次进行测定时,必须新鲜制备标准曲线的稀释液。

 

3.工作溶液

1.1 0.3%β-巯基乙醇测定缓冲液:
将30 µLβ-巯基乙醇(组分F)添加到10 mL反应缓冲液(组分B)中,并充分混合。 注意:制备酶稀释缓冲液需要额外的缓冲液,用于生成标准曲线。

1.2 β-Gal工作液:
将25 µLβ-半乳糖苷酶底物储备液(200X)加入5 mL的0.3%β-巯基乙醇测定缓冲液中。 注意:β-Gal工作溶液足以用于一块96孔板。

1.3 裂解缓冲液工作液:
使用前,将5 µLβ-巯基乙醇(组分F)加入5 mL裂解缓冲液(组分D)中。 注意:在裂解细胞之前,将0.1%β-巯基乙醇添加到裂解缓冲液中。

 

样品操作及分析

表1.细胞培养板推荐的Lysis Buffer工作溶液体积

培养板类型 裂解缓冲液工作溶液(µL /孔)
96孔板 50
24孔板 250
12孔板 500
6孔板 1000
60毫米板 2000
100毫米板 4000

1.从哺乳动物细胞制备细胞提取物

1.1用测试化合物处理含有LacZ基因的细胞所需的时间。

1.2用1X PBS洗涤细胞两次。不要移动细胞。

1.3用Lysis Buffer工作溶液相应地裂解细胞。

1.3.1对于贴壁细胞:将Lysis Buffer工作溶液添加至培养板。有关建议的数量,请参见表1。

1.3.2对于非贴壁细胞:将细胞沉淀到离心管中,并向管中加入50-2000 µL Lysis Buffer工作溶液(取决于细胞沉淀的大小)。

1.4将上一步的细胞在室温下孵育10-15分钟,然后轻轻旋转平板或试管数次以确保完全裂解。

1.5继续进行β-半乳糖苷酶测定,或将样品在-80°C下冷冻直至使用。注意:通过快速的冻融循环(在-20°C到-80°C冷冻1-2小时,然后在室温解冻)也可以获得良好的裂解。或者,将细胞裂解液离心2-3分钟以沉淀不溶物,然后测定上清液。

 

2.运行ß-半乳糖苷酶测定

2.1如果需要,在室温下解冻裂解细胞管或板。如果细胞接种在96孔板上,则直接在96孔板上进行测定。

2.2在96孔板的每个孔中加入50 µL细胞提取物。如果需要标准曲线,请为标准曲线保存一些对照孔(50 uL /孔)。注意:如有必要,当转染效率很高时,可在裂解缓冲液工作溶液中稀释裂解液,或在转染效率低时减少裂解液的体积。如果在96孔板上进行转染,或将稳定的细胞系接种到96孔板上,请直接在板上进行测定。对于内源性β-半乳糖苷酶活性控制,请添加50 µL非转染细胞的细胞裂解液。对于空白对照,添加50 µL Lysis Buffer工作溶液。

2.3向每个孔中加入50 µL的ResorufinβDG工作溶液。根据细胞类型,将板在室温或37°C下孵育大约10分钟至4小时。

2.4向每个孔中添加50 µL终止缓冲液(组分C)。

2.5使用吸光度酶标仪测量在580 nm至460 nm(Ab580 / Ab460)波长下的OD比,监测吸光度的增加。

 

参考文献

BZLF1 Attenuates Transmission of Inflammatory Paracrine Senescence in Epstein-Barr Virus-Infected Cells by Downregulating Tumor Necrosis Factor Alpha
Authors: Xubing Long, Yuqing Li, Mengtian Yang, Lu Huang, Weijie Gong, Ersheng Kuang
Journal: Journal of Virology (2016): 7880–7893

 

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