转染昆虫细胞——口服应用
以细胞转染为目的的核酸口服递送是一种令人兴奋的新递送方法,可以改善DNA 疫苗接种和基因治疗的结果。它作为一种非侵入性应用,使加药过程成倍地容易。然而,这种方法受到基因传递载体在消化系统恶劣环境属性下生存能力的限制。从酸性 pH 值到降解酶,载体必须能够运输其有效载荷,同时保护其完整性,以在所需位置实现细胞摄取。
分支双亲肽胶囊 (BAPC) 已被证明可以通过口服应用成功地用 dsRNA 转染昆虫细胞。该研究试图沉默豌豆蚜虫 (Acyrthosiphon pisum) 和红面粉甲虫 (Tribolium castaneum) 中的基因,从而导致致命结果。摄入 BAPC 复合的 dsRNA 后,豌豆蚜虫在 4-5 天内死亡。在没有 BAPC 的情况下喂食相同数量的 dsRNA 的蚜虫需要 11-12 天才能死亡。对于红色面粉甲虫,大约 75% 通过 BAPC 提供的 dsRNA 被杀死。仅喂养 dsRNA 导致死亡率低于 30%。这些结果表明 BAPC 显着提高了 dsRNA 口服递送的有效性。
当 dsRNA 添加到 BAPC 时,它们围绕胶囊的阳离子表面形成紧凑的簇。 BAPC 可稳定添加的 dsRNA 并防止任何降解,同时增强肠道上皮细胞对它们的吸收。与 BAPC 复合的 dsRNA 不仅能够逃脱肠道,组织分析还表明它能够在全身其他部位积聚。这些结果表明有望进一步改进其他昆虫物种的 RNAi 敲除实验,尤其是那些对于显微注射而言太小的昆虫。