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biozyme 基质金属蛋白酶底物

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biozyme 基质金属蛋白酶底物

简要描述：biozyme 基质金属蛋白酶底物：MMP 底物（荧光） – PEPDAB008

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biozyme 基质金属蛋白酶底物

该 mmp 底物可用于评估 MMP 家族中酶的活性。这种 mmp 底物已用于酶促和细胞检测中，以评估 MMP 的活性，因为它对该金属蛋白酶家族具有特异性。它与 Bickett 等人在下面的出版物 4 中描述的底物相同，只是它具有 Dabcyl/Fam 作为荧光团对，因此更敏感。它最初被描述为 MMP9 底物和 MMP1 底物。它对所有这些酶表现出相当强的活性，特异性常数 k cat /K m (M -1 s -1 ) 范围约为 10 3至 10 6。请参阅我们的产品表其底物特异性概况。通常，将肽溶解在 DMSO 中，制成浓度约为 10mM 的储备溶液。当用于体外测定时，底物通常以约10uM浓度使用。请记住将最终反应中的 DMSO 浓度保持在 1% 或以下，以避免 DMSO 对反应产生影响，并记住背景孔中应有同等百分比的 DMSO。为了与 MMP 一起使用，缓冲液应含有 50 mM Tris、pH 7.5、150 mM NaCl、2 mM CaCl 2、5 µM ZnSO 4和 0.01% Brij-35。激发和发射波长分别为 485 和 530 nm。

分子量：

1388.3克/摩尔

纯度：

通过 HPLC 和质谱评估，大于 95%。

溶解度：

1 mg/ml 溶于 10% 甲酸的水中

外貌：

红色冻干粉

船运

肽粉末在室温下运输。

贮存：

收到后，肽应保存在-70 o C 下。避免重复冻融循环。如果溶解在液体（例如 DMSO）中，请等分到单独的管中，以尽量减少冻融循环次数。

稳定：

样品对光敏感，在 -70 o C下可稳定保存长达 6 个月。

biozyme 基质金属蛋白酶底物

biozyme-inc 荧光基质PEPDAB005m005

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biozyme-inc 荧光基质

简要描述：biozyme-inc 荧光基质Fluorescent Substrate Dabcyl-LAQAPhe(homo)RSK(5FAM)-NH2
ADAM17,12,10,8, and MMP Substrate

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ADAM17,12,10,8, and MMP Substrate

biozyme-inc 荧光基质Fluorescent Substrate Dabcyl-LAQAPhe(homo)RSK(5FAM)-NH2

biozyme-inc 荧光基质 Fluorescent Substrate Dabcyl-LAQAPhe(homo)RSK(5FAM)-NH2  

这种荧光肽底物可用于评估ADAM家族。它展示了相当强大的对抗所有这些酶，具有特异性常数，kcat/Km（M-1s-1)，范围约为4x 103至4 x 105通常，将肽溶解在DMSO中以制备原液浓度约为10mM的溶液。当用于体外测定时基质通常在10左右使用M浓度。用于ADAM10和17，缓冲液应由25mM Tris、pH 8和6 x 10-4组成Brij清洁剂。如果在使用人ADAM8或ADAM12的情况下，向上述物质中添加足够的CaCl2缓冲液以达到10mM的浓度。激发和发射波长分别为485和530nm。

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  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌

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人干扰素α ELISA 血浆基质研究

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人干扰素α ELISA 血浆基质研究

通过酶联免疫吸附测定 (ELISA) 准确检测血清或血浆样品中的干扰素 (IFN) 会受到血清或血浆中成分（如异嗜性抗体和凝血因子）的干扰。来自这些不同成分的干扰被称为基质效应。在这种情况下，为了评估 ELISA 试剂盒的性能，将已知浓度的 IFN 添加到无 IFN 的血浆中，并确定 ELISA 检测到的浓度与实际量之间的百分比差异。这被称为尖峰恢复。在这项研究中，我们描述了使用在不同抗凝剂中纯混合血浆中制备的参考标准曲线的相容性研究。本技术说明中还报告了我们使用不同批次的人血浆对人 IFN α 加标回收的结果。

介绍

ELISA 测定基于靶分子（分析物/抗原）与特异性识别靶标的抗体的结合。使用二抗酶联抗体检测抗原-抗体复合物的存在。通过添加产生可量化信号的底物获得检测。通过使用不同的样品稀释剂对已知浓度的分析物进行系列稀释来制备标准曲线。然后使用曲线的非线性 4 参数拟合来计算相似稀释剂中未知样品的浓度。待测分析物可存在于不同的稀释剂中，例如含血清的组织培养基、纯血清、纯血浆和盐缓冲液。在待测分析物存在于血清或血浆中的情况下，由于血清蛋白、异嗜性抗体和/或凝血因子的存在，可能会干扰测定。这可能会导致检测到误报、漏报或高背景。在这项研究中，我们展示了通过使用 PBL 的 VeriKine Human Alpha 多亚型血清 ELISA 试剂盒 41110平均大于 70% 的低浓度人干扰素 (IFN) α 实际浓度，可在人血浆中检测到。我们还表明，未发现低浓度 IFN 的假阳性和假阴性，并且不存在空白的高信号。此外，我们证明标准曲线 (500-12.5 pg/ml) 在样品稀释剂中预稀释至 50% 的混合血浆中制备，或在样品制备后稀释的纯混合血浆中制备 2 X 标准曲线 (1000-25 pg/ml)稀释至 500-12.5 pg/ml 没有显着差异。

 

方法与分析

标准曲线是从 1000 pg/ml-25 pg/ml 的样品稀释液、3 批不同抗凝剂（柠檬酸钠、EDTA 钠和肝素钠）中的正常人血浆和三批混合液中制备的。此外，在两个不同批次的正常人血浆中制备了低 (30 pg/ml)、中 (300 pg/ml) 和高 (800 pg/ml) 加标物。这两个地段不是来自游泳池中使用的地段。在此之后，将 50 μl 标准品添加到产品41110-1中提供的板上的 50 μl 样品稀释液中  人干扰素α血清样品多亚型 ELISA 试剂盒。ELISA 的其余步骤按照试剂盒方案进行。在单独的测定中，比较了 1000-25 pg/ml 混合人血浆的标准曲线和 500-12.5 pg/ml 50% 混合人血浆稀释于样品稀释剂中的标准曲线。在此测定中，将混合人血浆中的 50 μl 标准品 (1000-25 pg/ml) 添加到板上的 50 μl 样品稀释剂中，如果是 50% 混合血浆中的标准品 (500-12.5 pg/ml)将 100 μl 直接加载到板上。每次测定完成后，在Vmax上以 450 nm 读取板 酶标仪（Molecular Devices Corporation，CA）。针对每条曲线绘制 Y 轴上的平均 OD @ 450nm 与 X 轴上以 pg/ml 为单位的实际浓度。使用非线性 4 参数拟合生成曲线（图 1-5）。

 

基于数据点的曲线拟合方程和平均 OD 值，确定每个数据点的外推浓度（反拟合浓度）。使用 SoftMax Pro 版本 5 (Molecular Devices Corporation, CA) 分析所有数据。

 

图 1-3： 样品稀释液中 1000-25 pg/ml 的标准曲线，3 个不同批次的纯血浆和使用 3 个不同批次和不同抗凝剂的纯混合血浆

 

人干扰素α ELISA 血浆基质研究

 

人干扰素α ELISA 血浆基质研究人干扰素α ELISA 血浆基质研究

 

图 4-5： 在样品稀释液中制备的 500-12.5 pg/ml 和 50% 混合血浆的标准曲线与在样品稀释剂中稀释至 500-12.5 pg/ml 的纯混合血浆中的 1000-25 pg/ml 的标准曲线相比较

 

人干扰素α ELISA 血浆基质研究

 

人干扰素α ELISA 血浆基质研究

 

 

表 1：不同抗凝剂中人血浆中人 IFN α A2a 的加标回收率百分比

% 加标回收率
> 矩阵 30皮克/毫升 300皮克/毫升 800皮克/毫升
含柠檬酸钠的 Lot D 61.2% 102.2% 91.5%
含柠檬酸钠的 Lot E 79.1% 122.5% 127.5%
含有 Na-EDTA 的批次 D 60.6% 84.7% 76.81%
含 Na-EDTA 的 Lot E 58.6% 86.96% 91.23%
Lot D 与肝素钠 91.88% 107.68% 94.88%
Lot E 与肝素钠 98.76% 105.32% 106.53%
平均的 75% 101.56% 98.1%

 

从图 1-3 可以看出，Na-EDTA 人血浆中的信号低于 Na-Citrate 和 Na-Heparin 人血浆中的信号。这种效应在混合血浆中也很明显。肝素钠血浆中的信号在三种抗凝剂中比较强。与样品稀释液中的信号相比，由于血浆中的成分，人血浆中的信号也很明显受到抑制。从图 4-5 中可以看出，根据平板上相应最终浓度的 IFN Alpha 的 OD，在未稀释的混合血浆中制备了 1000-25 pg/ml 的标准曲线，其中添加了 50 μl 曲线无论使用何种抗凝血剂，50 μl 样品稀释液在平板上类似于在 50% 混合血浆中制备的 500-12.5 pg/ml 的标准曲线。然而，由于来自不同供体的血浆中成分的数量和差异不同，两条曲线之间的相似程度可能因血浆批次而异。从表 1 中可以看出，低浓度加标 IFN Alpha A 2a (30 pg/ml) 的加标回收率在含 EDTA 钠的血浆中较小，在含肝素钠的血浆中最高。总体而言，平均加标回收率在可接受的行业标准范围内。

 

结论

为了准确测定血浆中人干扰素α的浓度，未知血浆样品必须在样品稀释液中按 1:2 稀释。1:2 稀释之前的所有预稀释都应在含有相同抗凝剂的正常人血浆中进行。样品的未知浓度必须从标准曲线 (1000-25 pg/ml) 中推断出来，该标准曲线是在具有不可检测量的内源性 IFN α 的正常人血浆中制备的，或者是一组不含内源性 IFN α 的血浆批次，并且 50 μl 曲线必须添加到板上的 50 μl 样品稀释液中。使用产品 41110 从人血浆中回收的加标回收率确实因血浆批次而异。为获得最准确的结果，加标回收率应根据在含有相同抗凝剂的混合血浆中绘制的标准曲线推断得出。产品性能 41110 在以 Na-Heparin 作为抗凝剂的血浆样品中最好，在以 Na-EDTA 作为抗凝剂的血浆中最差。

具有生物活性pDNA多链体的静电纺明胶基质

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具有生物活性pDNA多链体的静电纺明胶基质

静电纺丝的最新进展正在产生用于再生医学的复杂支架。探索制造具有功能性的生物活性支架的可能性 基因表达系统，探索了带有质粒DNA（pDNA）多链体的静电纺明胶垫。pDNA首先与脂质修饰的聚乙烯亚胺（PEI）缩合以产生包含聚天冬氨酸（pAsp）添加剂的聚链物，然后在明胶溶液中混合聚链物后静电纺丝。pDNA多链体尺寸为82 nm，ζ电位为+20 mV，均匀地包埋在纤维直径范围在~150至~350nm之间的垫子中。与pAsp的添加剂配合物在溶液中表现出显着更高的转染活性，在电纺垫中被截留后也保留了这种活性，基于以下 GFP 表达到人肌母细胞（C2C12）和小鼠成骨细胞（MC3T3-E1）。由于pDNA捕获率增加（~71%），用聚乙二醇静电纺丝明胶可提高转染效率。为了进一步验证基因激活的垫子，编码BMP-2的pDNA显示出稳健的 碱性磷酸酶 （ALP） 感应 C2C12 MC3T3-E1细胞作为成骨分化的标志物。我们得出的结论是，用生物活性pDNA多丛物制造明胶纤维垫是可行的，这种垫子可以帮助各种组织的再生修复。

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  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

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胶原蛋白，让细胞突破空间局限

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胶原蛋白（Collagen）是结缔组织和内脏器官外基质的主要成分，胶原蛋白种类很多，常见类型包括I型、II型、III型、IV型等等。其中，I型胶原蛋白（Collagen，TypeI）因广泛分布于皮肤、骨骼、肌腱及其他纤维结缔组织中而常常被应用于细胞的体外培养。当用做凝胶基质时，胶原蛋白有助于增强细胞形态特异性和维持细胞功能，促进细胞贴壁等作用，同时还是一种天然粘附剂。

传统细胞培养方式主要是让细胞生长在玻璃或塑料平面上，细胞只能沿二维平面延伸，这种培养方式称为2D培养。由于某些原代细胞如神经细胞以及干细胞等难以在常规平面附着，需要包被胶原作为促进细胞贴壁的基质，所以胶原包被常常在原代细胞和干细胞2D培养中发挥着重要作用。

与之相比，由胶原蛋白配置的3D固体凝胶形成的三维立体网状结构，能更真实地模拟体内组织结构及微环境，满足复杂细胞组织间相互作用，为细胞提供更好的生长和分化条件。因此，细胞3D培养比传统2D培养的应用前景更为广泛，3D培养主要用于以下几个方面：

ü 肿瘤研究应用 3D培养能更好地代表组织结构和细胞微环境，三维癌症模型主要目标是缩小二维细胞系、动物模型和临床研究之间的差距，能够更加真实的模拟体内肿瘤微环境。

ü 药物药理研究应用 3D细胞培养在早期药物发现中将有广泛应用，如疾病建模、目标识别和验证、筛选、药物疗效和安全评估等。

 

ü 干细胞研究应用 三维生物系统可以提高人类胚胎干细胞衍生的多能干细胞和成人成体干细胞植入体内后的生存率和再生能力，使干细胞分化在疾病建模和再生医学中的潜力得以发挥。

Advanced BioMatrix（以下简称ABM）是美国知名的胶原蛋白生产公司，拥有25年的研发和制造经验，为满足研究人员不断发展的需求，致力于为组织工程、细胞分析及细胞增殖等研究领域提供优质稳定的产品。

 

ABM热销的三款I型胶原蛋白纯度都达到95%以上，且均通过无菌检验，非常适用于细胞培养器皿包被和制备3D凝胶。

胶原蛋白，让细胞突破空间局限