一 细胞增殖检测的意义
细胞增殖是生物体的重要生命特征,是生物体生长、发育、繁殖以及遗传的基础。监测细胞群的生长对细胞的状态研究很有必要。科研工作者们经常需要检测细胞增殖情况,比如验证抗肿瘤药物的药效时,监测细胞增殖及存活情况;研究肿瘤侵袭与转移模型时,分析细胞转移或侵袭的路径;分析创伤的修复或组织的重建时,检测细胞生长情况等等。检测细胞增殖及活性变化则可以很好的反映细胞的生长状况。
二 细胞增殖的研究方法
细胞增殖的研究方法有很多种,根据检测原理不同,主要分为DNA合成检测法、代谢活性检测法、细胞增殖标志物检测法等。本文重点介绍DNA合成检测之Brdu检测法,传统DNA合成检测方法使用胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入DNA,然后通过放射自显影或闪烁计数对DNA进行定量,该方法由于存在放射性物质、实验周期长、操作繁琐,且需要昂贵的设备,目前已被BrdU(5-Bromo-2-deoxyuridine,5-溴脱氧尿嘧啶核苷)检测方法取代,BrdU作为一种胸苷类似物,可选择性地掺入增殖细胞的DNA中,而且可稳定存在,并带到子代细胞中,细胞经过固定和变性处理后,可用免疫学方法检测DNA中BrdU的含量,从而判断细胞的增殖能力。
BrdU分子结构
小编整理汇总了常见细胞增殖检测方法,详见下表。
细胞增殖检测方法汇总
方法分类
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检测方法
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检测原理
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DNA合成检测
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Brdu检测法
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BrdU是胸腺嘧啶核苷的类似物,能够在细胞增殖时期代替胸苷掺入增殖细胞的DNA中,而后利用免疫学方法检测DNA中BrdU的含量,从而判断细胞增殖能力
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DNA合成检测
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胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)渗入法
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用同位素3H标记TdR作为DNA合成前体掺入DNA合成代谢过程,通过测定放射性强度,反应细胞DNA代谢及增殖情况
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代谢活性检测
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MTT比色法
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在活细胞生长和增殖过程中,线粒体内的脱氢酶可将黄色的MTT分解成蓝紫色的Formazan结晶,再利用酶标仪测定,以反映出活细胞数目,间接反应细胞增殖情况
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细胞增殖标志物检测
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Ki67,PCNA,MCM-2等相关抗原检测
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通过观察增殖细胞中表达但非增殖细胞中不存在的特定蛋白质,来反映细增殖情况
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荧光染料检测
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羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)检测法
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CFSE是一种荧光染料,脂溶性高,进入细胞,可以与胞内氨基酸发生不可逆的结合,在细胞的分裂过程中能进入子代细胞,同时荧光强度减半,再用流式细胞仪或荧光显微镜进行分析
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实时动态电极阻抗检测
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RTCA实时无标记细胞分析技术
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将微电极列阵整合在细胞培养板孔底部,构建实时、动态、定量跟踪细胞形态和增殖分化改变的细胞阻抗检测传感系统。当微电极表面的细胞引起贴壁电极界面阻抗的改变时,这种改变与细胞的实时功能状态改变呈相关性
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三 Exalpha Biologicals品牌BrdU检测试剂盒
因组织细胞内无内源性BrdU存在,可利用BrdU相关抗体来检测和定位掺入活跃增殖细胞新合成DNA的BrdU,Exalpha Biologicals 品牌BrdU检测试剂盒的优势在于使用细胞层作为固相,将BrdU试剂掺入微孔板中的细胞,除了对细胞增殖情况进行评估外,还可以从单个培养物中分析细胞数量、形态和细胞抗原等信息。同时Exalpha Biologicals 品牌BrdU检测试剂盒可通过试剂盒自带的固定/变性溶液一步完成细胞固定、透化和DNA变性等实验流程,大大缩短了实验时间。Exalpha Biologicals 品牌BrdU检测试剂盒中包含检测细胞增殖活性所需的所有组分、操作简便、无放射性、广泛的样本适用性,已得到众多科研工作者的青睐。
四 Exalpha Biologicals品牌BrdU检测试剂盒试剂盒优势
简便:提供预稀释的滴管瓶,现用现配
安全:无放射性成分
完整:包含缓冲液、酶、阳性对照玻片和染色参考玻片
灵活:可用于任何物种组织样本
灵敏:极低的背景干扰
经济:成本低,高通量,多种规格
经BrdU处理的小鼠小肠免疫组织化学染色图
其他上海金畔生物科技有限公司热卖BrdU相关产品列表
品牌
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货号
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产品类型
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产品名称
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应用
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Exalpha
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X1327K1
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试剂试剂盒
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BrdU Cell Proliferation Assay Kit
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ELISA
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Exalpha
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X1623K1
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试剂试剂盒
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BrdU Chemiluminescent Cell Proliferation Assay Kit
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ELISA
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Exalpha
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X1545K
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免疫组化试剂盒
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BrdU Immunohistochemistry Kit
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ICC IHC (frozen & paraffin)
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Cell Biolabs
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CBA-251
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试剂试剂盒
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CytoSelect™ BrdU Cell Proliferation ELISA Kit
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ELISA
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Exalpha
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X1028
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BrdU单抗
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Mouse anti BrdU (bromodeoxyuridine)
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FC、IHC
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Exalpha
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MUB0200P
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BrdU抗体
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Mouse anti Bromodeoxyuridine / BrdU
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FC、ICC、IHC(frozen & paraffin)
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Exalpha
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A205P
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BrdU多抗
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Sheep anti BrdU (bromodeoxyuridine)
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FC、IHC(frozen & paraffin)、IP、WB
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Exalpha
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X1543M
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BrdU单抗 FITC标记
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Mouse anti BrdU (bromodeoxyuridine), conjugated with FITC
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FC、IHC
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Agrisera
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AS16 3995
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BrdU多抗
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Bromodeoxyuridine
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IHC、IP、WB
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Agrisera
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AS16 3998
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BrdU单抗
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Bromodeoxyuridine (monoclonal, clone MoBU)
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determined by the investigator
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Exalpha
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X2834
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BrdU试剂
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Bromodeoxyuridine (BrdU)
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IHC
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上海金畔生物科技有限公司代理的Exalpha Biologicals成立于1998年,是一家位于美国波士顿的生命科学公司,专门提供尖端抗体、试剂、试剂盒和定制IgY服务等。2016年5月Exalpha Biologicals与Nordic-MUbio达成长期销售协议,Exalpha Biologicals产品可通过Nordic-MUbio直接销售给世界各地的客户。Nordic-MUbio是一家总部位于荷兰发展迅猛的抗体试剂公司,Nordic-MUbio提供单克隆抗体、生物标志物、即用型流式细胞术抗体等产品组合。2022年4月Absolute Biotech将包括Absolute antibody、LSBio、Kerafast、Exalpha、Nordic-MUbio和Everest在内多个生命科学品牌联合成一个新公司,为世界各地的科研人员提供独特抗体、细胞系、其他试剂及产品定制服务。欲了解更多产品信息,请访问http://www.absolutebiotech.com。
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参考文献
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- Gray, J. (Ed), Special Issue: Monoclonal antibodies against bromodeoxyuridine Cytometry 1985, Vol. 6(6)