细胞健康分析试剂、试剂盒和工具的简介

细胞健康分析试剂、试剂盒和工具可用于测量细胞培养活力的一般和特异性指标。其中，活力检测可用作测量细胞健康的一般指标，或与细胞毒性检测一起用于评估处理条件的影响。增殖检测通常使用DNA合成和细胞分裂作为特定条件或处理下细胞代谢活性的测量指标。细胞毒性试剂盒可采用生物还原读数来评估代谢活性。

培养物污染是进行有效、可靠细胞培养的常见障碍之一。尽管某些污染物可通过对培养物进行仔细的显微镜检查而检测到，但诸如支原体等污染物无法通过视觉方法检测。因此，应使用能够可靠检测微生物污染物的试剂盒和试剂对培养物进行定期筛查。培养室需要使用能够在污染出现时将其降低或消除的试剂，从而增强无菌技术并形成良好的培养室规范。

细胞活力和增殖检测

可测量细胞增殖和细胞活力的检测常被用于监测用各种刺激物处理后培养物中细胞的应答和健康状况。检测方法的选择取决于所要评估的细胞数、类型以及预期的结果。细胞增殖检测可以监测一段时间内的细胞数、细胞分裂的次数、代谢活性或DNA合成。使用诸如台盼蓝或钙黄绿素-AM等活性染料进行的细胞计数分析可以提供增殖率以及存活细胞的百分比。5（6）-羧基荧光素二乙酸酯N-琥珀酰亚胺酯（CFSE）是测量细胞群所经历的细胞分裂次数的常用方法。进入细胞后，CFSE会被细胞内酯酶裂解形成荧光化合物，而琥珀酰亚胺基酯基会与细胞内蛋白上的伯胺发生共价反应。每次分裂后，每个子细胞的荧光强度都会减半，使得可以通过流式细胞仪而对细胞分裂的代数进行简单的检测。

我们用于测定细胞活力和增殖的全面工具和解决方案利用了多种方法，并包括：

• DNA合成增殖检测

• 代谢增殖检测

• 发光细胞活力检测

• 荧光染料增殖检测

• 用于3D培养的活细胞/死细胞/总细胞三重染色

• 台盼蓝染料排除法活力计数

细胞毒性检测

可测量代谢活性的检测可适用于增殖、活力和细胞毒性的分析。四唑盐（如MTT和XTT）至有色甲䐶化合物的还原反应，或刃天青的生物还原反应，仅发生在代谢活性细胞中。活跃增殖的细胞会提高其代谢活性，而诸如暴露于毒素的受损细胞则会表现出活性的下降。

凋亡分析检测

细胞死亡对于发育和体内稳态过程中的多种正常生理性功能是必需的。肿瘤细胞能够逃避也被称为凋亡的程序性细胞死亡，这种能力是大多数类型癌症的标志。多种细胞蛋白，包括细胞表面受体、接头蛋白、蛋白酶和线粒体成分，可通过细胞凋亡而在细胞存活与死亡之间调节出一种良好的平衡。通过精心选择检测不仅能够帮助分析细胞培养条件和处理条件对细胞健康的影响，还能用于分析它们对细胞健康影响的机制。我们可提供用于早期、中期和晚期凋亡检测的全面检测产品线。

细胞污染检测和消除

维持无污染的细胞培养物是细胞研究的基础条件。支原体污染是普遍的细胞培养问题之一，而支原体是一种形态特征为亚微米大小且不存在细胞壁的细菌，因此难以或无法通过显微镜检出且对多种抗生素具有抗性。尽管支原体通常不会引起细胞死亡，但它们可对培养的细胞造成多种影响，包括代谢异常、增殖减慢和染色体畸变。简而言之，支原体污染降低了相关细胞系的有效性，无法为生命科学研究提供有意义的数据。

我们用于支原体检测和消除的工具包括：支原体检测和消除

• LookOut®支原体PCR检测试剂盒，及其他用于可靠、灵敏检测细胞培养物中支原体的PCR和qPCR试剂盒

• 用于通过支原体培养进行检测的胰蛋白示磷酸盐肉汤和其他试剂

• 用于通过荧光DNA染色法进行支原体检测的DNA染料

• 用于支原体污染消除的LookOut®支原体消除喷雾和试剂

这些常用的标注工具你用过吗？

抗体或蛋白质标记是指将目标物质（酶、荧光素、生物素）与抗体或其他蛋白质共价连接，并与生成测试物质发生特异性反应，形成多重复合物。借助荧光显微镜、射线测量仪、酶标检测仪、电子显微镜、发光免疫分析仪等精密仪器，可通过显微镜直接观察检测结果或在细胞、亚细胞、超微结构、分子水平上自动测定检测结果。对抗原和抗体反应进行定性和定位研究，或应用各种液相和固相免疫分析方法定性和定量测定体液中的半抗原和抗原。现在，抗体标记技术已广泛应用于医学病理学、免疫组织化学、分子生物学、生物制药等领域的分析研究和技术测定。常见的抗体标记技术包括酶标记、生物素化标记和荧光素标记。

常用的抗体/蛋白质标记技术

1. 酶标记

通过合适的方法将酶与抗体或蛋白质共价键合，制成酶标记抗体。然后，通过酶对底物的特异催化作用，生成有色不相容产物或具有一定电子密度的颗粒。这些有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察。也可以用分光光度计来测量。颜色反应表明酶的存在，证明相应的免疫反应已经发生。

蛋白质-蛋白质缀合通常使用双功能接头交联剂进行。交联剂（NHS酯）的一端与氨基酸赖氨酸和N端的胺（-NH2）反应，另一端（马来酰亚胺胺）与硫醇基（-SH）反应存在于氨基酸中。然而，SMCC 修饰的蛋白质极其不稳定，并且通常会发生自身反应。

2. 生物素标记

亲和素和生物素可以与蛋白质（抗原、抗体、酶）、荧光剂和其他分子结合，而不影响后者的生物活性。是一种理想的标记剂。一个抗体分子可与数十个生物素或亲和素分子偶联，亲和素或生物素分子可与酶或荧光素结合形成生物放大系统，显着提高检测的灵敏度。常用的有亲和素-生物素标记法、亲和素-生物素桥法、亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法。

3. 荧光标记

染料与蛋白质的结合需要染料与蛋白质之间形成稳定的共价键，并且这种共价键在大多数情况下都不能断裂。与蛋白质固有的荧光相比，小型有机染料在选择标记位点和增强荧光方面具有更大的灵活性，已广泛应用于蛋白质标记。用适当的荧光染料标记后，蛋白质可以在各种生物过程中可视化，以便可以在生化测定中量化或定位在细胞研究中心。染料-蛋白质缀合物已成为研究酶活性、蛋白质相互作用、构象变化以及调节和观察特定生物过程的非常重要的工具。它们已广泛应用于 ELISA、蛋白质印迹、流式细胞术和细胞成像。

金纳米颗粒特性：转换工具

以下将球形金纳米颗粒和金纳米棒的mg/mL转换为wt %和nps/mL和ppm，wt%转换为mg/mL，nps/mL转换为摩尔浓度， 摩尔消光与摩尔浓度，金纳米棒峰SPR与长宽比，以及长径比与金纳米棒长度。

1） 将纳米棒重量浓度（mg/ml）转换为颗粒浓度（nps/ml）和百万分之一（PPM）

                直径   长度   重量浓度（mg/ml）

尺寸         10       45    0.05     

Nps/毫升     8.06e+11

PPM            23

2） 将球形纳米颗粒尺寸转换为颗粒浓度（nps/ml）、重量浓度（mg/ml）和百万分之一（PPM）

球体直径（nm）30

Nps/毫升   2.04e+11

重量浓度（mg/ml） 4.89e-2

PPM   4.89e+1

3） 将mg/ml转换为wt%

4） 将wt%转换为mg/ml

毫克/毫升 0.05  重量%   0.0050%

Wt %   0.0050%  毫克/毫升   0.05

5） 将nps/ml转换为摩尔浓度

nps/毫升 8.00e+011

摩尔浓度（纳摩尔） 1.33

6） 摩尔灭绝

峰值吸收率（AU）1.

摩尔浓度（纳摩尔）1.34

摩尔消光（M-1cm-1）7.46e+8

7） 将纳米棒峰值SPR（nm）转换为纵横比（AR）

峰值SPR波长（nm）706

纵横比（AR）3

8） 根据7）中的AR计算确定纳米棒的长度

横向直径（nm） 10

纵横比（7）3

纵向长度（nm）30