Vero细胞系特性和应用

Vero细胞系特性和应用

Vero细胞系是一种源自非洲绿猴肾上皮细胞的永生化哺乳动物细胞模型,站在病毒学、微生物学以及细胞和分子生物学研究的前沿。它们的广泛应用涵盖疫苗开发、药物筛选以及病毒和寄生虫生物学、肿瘤免疫学和免疫治疗策略的探索。

Vero细胞系的建立可以追溯到1962年,起源于非洲绿猴的肾上皮细胞。

Vero细胞克隆及其性质

来自Vero细胞系的不同克隆显示出区别于原始细胞系的特征。其中,两个著名的Vero细胞克隆是:

  • Vero E6细胞系:该克隆也称为Vero C1008,来自Vero 76细胞,1979年由P.J. Price在微量滴定板上使用稀释技术分离。Vero E6细胞特别适合培养复制缓慢的病毒。

  • Vero 76细胞:这些细胞起源于1968年的一只非洲绿猴的肾脏,保持了Vero细胞的上皮形态特征。

这些Vero细胞变体与亲代细胞系一起,继续有助于推进病毒学研究和医学干预措施的发展,标志着它们在科学界的重要性。

培养猴细胞系Vero细胞需要熟悉特定的参数,如倍增时间、接种密度和合适的生长培养基。

  • 人口倍增时间:Vero细胞的倍增时间约为24小时。

  • 坚持性:Vero细胞粘附在表面上,培养时通常形成单层。

  • 播种密度:建议从1倍10^4 cells/cm^2.的播种密度开始为了培养粘附的Vero细胞,用PBS清洗它们并用Accutase处理它们以分离它们。分离后,离心细胞,将其重新悬浮在新鲜培养基中,并将其转移到新的培养瓶中。

  • 生长培养基:哈姆的F12和DMEM都是培养Vero细胞的合适培养基。这些应补充2.5mM L-谷氨酰胺和5%胎牛血清(FBS)以支持最佳生长。培养基应该每周更新两到三次。

  • 生长条件:Vero细胞在37°C的温度和5% CO2的潮湿环境中生长旺盛。

  • 存储:对于长期储存,Vero电池应保持在低于-150°C的温度下,要么放在超低温冰箱中,要么放在液氮的蒸汽相中。

  • 冷冻过程和介质:对于冷冻保存,使用CM-1或CM-ACF或含有FBS和DMSO的生长培养基作为冷冻培养基。采用缓慢冷冻技术,每分钟逐渐降低1°C的温度。

  • 解冻过程:将容器浸入37°C水浴中并轻轻搅动40-60秒,解冻Vero细胞。然后,在新鲜培养基中稀释细胞,离心去除冷冻保护剂,重新悬浮在新鲜生长培养基中,并将其置于新的烧瓶中以恢复和生长。

  • 生物安全等级:Vero细胞应在符合1级生物安全要求的实验室中处理。

Vero细胞系在研究中的应用

Vero细胞系在细胞生物学和病毒学领域有许多研究应用。在这里,我们讨论了一些具体的问题。

病毒研究和疫苗生产中的Vero细胞

源自非洲绿猴肾细胞的Vero细胞已成为多种病毒疫苗生物过程开发中的主要成分,包括脊髓灰质炎病毒和日本脑炎病毒。它们在贴壁和悬浮培养中的适应性及其广泛的病毒支持能力,包括对小反刍兽疫病毒等病原体的支持能力,突出了它们在病毒分离和疫苗开发中的重要性。

许多研究利用Vero细胞生产人类疫苗。例如,2019年发表的一项引人注目的研究证明了在黄热病病毒灭活疫苗的开发中使用Vero细胞【2】。

Vero细胞通常用于病毒感染研究。

Vero细胞在组织工程和上游生物过程开发中的作用

除了疫苗生产,Vero细胞还有助于组织工程和更广泛的生物过程开发领域,这强调了对其特性和应用进行持续研究的必要性。选择合适的Vero细胞亚系是最大限度地发挥其在生物技术和制药工业中的潜力的关键。

Vero细胞在药物疗效和安全性测试中的应用

Vero细胞经常用于药物测试,以评估药物化合物的有效性和安全性。在研究各种药物和治疗剂的细胞毒性作用时,这些细胞通常被认为是正常肾细胞的标准模型。例如,研究比较了白骨壤植物根提取物对肝癌细胞系HepG2和猴肾上皮细胞Vero细胞的影响,发现提取物对癌细胞的损害比对正常细胞的损害更大。

Vero细胞的局限性

尽管vero细胞被广泛使用,但它们也有其局限性,例如Vero毒素的产生和基因组的改变可能会影响某些应用。了解Vero细胞(包括Vero谱系F6)的特定亚系和基因组特征对于优化其在各种生物过程中的应用至关重要。

改进的 CaP 纳米颗粒的应用

改进的 CaP 纳米颗粒的应用

改进的 CaP 纳米颗粒用于将核酸和蛋白质递送至神经原代培养物和干细胞

将外源物质有效地输送到原代神经元和神经干细胞(NSC)中一直是神经生物学中的一个挑战。现有的方法一直面临复杂的方案、不可靠的重现性、高免疫原性和细胞毒性等问题,造成了巨大的难题并阻碍了深入分析。在这里,我们建立了一种转染原代神经元和 NSC 的方法,称为远程转染,通过两步过程来增强生物相容性磷酸钙 (CaP) 纳米粒子的形成。远程转染能够将核酸和蛋白质转染到原代神经元和神经干细胞中,从而无需专门的技能和设备。通过调节孵育时间和纳米粒子数量,可以轻松微调转染效率,满足各种实验要求。远程转染'其多功能性允许将不同的货物同时或顺序输送到同一细胞培养物中。这种灵活性对于长期研究来说是无价的,可以监测神经发育和突触可塑性。此外,远程转染可确保所传递基因的一致和稳健表达,从而促进分子和生化研究。远程转染代表了神经生物学的重大进步,有望超越当前基因传递方法的局限性。它为研究人员提供了一种用户友好、经济有效且可重复的方法,有可能改变我们对大脑功能和发育的理解。这种灵活性对于长期研究来说是无价的,可以监测神经发育和突触可塑性。此外,远程转染可确保所传递基因的一致和稳健表达,从而促进分子和生化研究。远程转染代表了神经生物学的重大进步,有望超越当前基因传递方法的局限性。它为研究人员提供了一种用户友好、经济有效且可重复的方法,有可能改变我们对大脑功能和发育的理解。这种灵活性对于长期研究来说是无价的,可以监测神经发育和突触可塑性。此外,远程转染可确保所传递基因的一致和稳健表达,从而促进分子和生化研究。远程转染代表了神经生物学的重大进步,有望超越当前基因传递方法的局限性。它为研究人员提供了一种用户友好、经济有效且可重复的方法,有可能改变我们对大脑功能和发育的理解。远程转染代表了神经生物学的重大进步,有望超越当前基因传递方法的局限性。它为研究人员提供了一种用户友好、经济有效且可重复的方法,有可能改变我们对大脑功能和发育的理解。远程转染代表了神经生物学的重大进步,有望超越当前基因传递方法的局限性。它为研究人员提供了一种用户友好、经济有效且可重复的方法,有可能改变我们对大脑功能和发育的理解。

formedium超纯琼脂糖的特点和应用

formedium超纯琼脂糖的特点和应用

琼脂糖是一种从海藻石花菜属物种中分离出来的高度纯化的线性半乳聚糖亲水胶体,可在低浓度下形成高强度的坚固凝胶基质,使其成为 DNA 和 RNA 等生物聚合物扩散和电动运动的理想选择。我们的琼脂糖超纯建议用于 > 1000 bp 的核酸电泳。它的制造和质量控制是专门为了满足与核酸应用相关的严格要求。

特点——生物技术和分子生物学

琼脂糖形成超螺旋束螺旋琼脂糖分子的 3D 凝胶基质。每个束都由氢键固定,具有分子能够迁移的通道和孔隙。凝胶结构包含均匀的孔径,允许根据生物分子的大小、电荷或亲和力进行分离。这使得琼脂糖成为凝胶电泳中的重要组成部分,用于根据 DNA、RNA 和蛋白质的大小和电荷来分离和分析它们。

琼脂糖凝胶外观透明,允许在凝胶电泳中对分离的分子进行视觉分析,无需染色或额外处理。即使在相对较高的温度下,凝胶也能保持其结构,使其适合涉及热量的应用,例如短合成 DNA 片段的 PCR(聚合酶链式反应)分析。

琼脂糖还与活细胞具有生物相容性,使其适合生物应用,例如组织工程,在组织工程中充当细胞生长的支架。它们的生物相容性和模仿细胞外基质某些方面的能力使它们可用于在三维环境中生长细胞,从而有助于组织再生研究。

其他行业和应用

琼脂糖具有几个关键特性,使其在各种研究应用中具有很高的价值,并在微生物学、制药和组织工程等其他广泛行业中得到广泛应用。由于其增稠特性,它也用于食品和化妆品行业。

微生物学

琼脂糖是制作琼脂平板的主要成分,为细菌、真菌和病毒等微生物的培养提供固体培养基。用琼脂糖固化的营养丰富的琼脂培养基为微生物生长和分离提供了表面。这些板是细菌或真菌生长的基础,对于微生物研究至关重要,包括抗生素敏感性测试和病原体鉴定。

药品

在药物研究和生产中,琼脂糖在层析过程中起着至关重要的作用。它可用于蛋白质、抗体、酶和其他生物分子的纯化,因为它能够创建多孔基质,有利于根据大小、电荷或亲和力进行分离。

组织工程

在组织工程中,琼脂糖水凝胶用作细胞培养的支架。它们的生物相容性和模仿细胞外基质某些方面的能力使它们可用于在三维环境中生长细胞,有助于组织再生研究和生物材料的开发。

食品工业

在食品工业中,琼脂糖被用作胶凝剂,因为它源自海藻,是明胶的合适素食替代品。其质地、稳定性和透明特性使其非常适合用于甜点、糖果、果酱和果冻或注重视觉吸引力的场合。

化妆品和药品

琼脂糖也存在于化妆品和药物配方中。它常用于乳液、面霜和凝胶等护肤产品中,赋予光滑的质地。它的生物相容性和稳定特性意味着产品可以在皮肤上安全使用,并有助于保持产品稳定性,防止成分分离。

洁净室中的超细纤维应用

洁净室中的超细纤维应用

聚酯针织材料以其清洁度而闻名。聚酯材料具有长而连续的长丝结构,脱落率非常低,这对于需要原始环境的洁净室至关重要。

无纺材料,例如聚酯纤维素和聚丙烯是非常经济的选择。然而,它们的水刺、热熔或化学粘合结构可能会导致大量脱落或在清洁后留下残留物。

虽然这些材料很常用,但每种材料都有显着的性能缺陷。聚酯针织材料容易沾染油性残留物并留下模糊的表面,并且难以涂抹或吸收液体。非织造材料通常会留下纤维污染物,并且在不平坦的表面上效果不佳。使用的耐用性通常是一个问题。

机织超细纤维材料在洁净室环境中越来越受欢迎,原因有很多:

  • 与聚酯和非织造材料相比,机织超细纤维擦拭巾具有很好的微污染物去除能力。各种研究和比较擦拭测试表明,超细纤维在去除残留物方面非常有效。

  • 聚酯的连续长丝强度使其成为清洁粗糙和不平坦表面的选择。

  • 超细纤维的尼龙成分赋予材料灵活性和一致性,这对于清洁狭小角落、缝隙和其他难以清洁的区域和边缘非常有用。

  • 与价格更高的聚酯相比,超细纤维具有更好的吸收性,是一种更具成本效益的擦拭解决方案。

  • 织物的柔软性使超细纤维成为清洁光学器件和镜头等高度敏感表面的选择。

超细纤维在各行业的应用

超细纤维为许多行业的广泛应用提供了更具成本效益的解决方案。我们详细介绍了微纤维在生命科学、制药、医疗器械和半导体领域的一些最佳用途:


用于制药和生命科学应用的超细纤维

  • 适用于压片和注射操作、生物安全柜和 QA/QC 实验室

    • 单程微污染物去除能力

    • 重量轻且耐用,可有效擦拭不规则表面和缝隙

    • 针织超细纤维非常耐用,非常适合大面积微污染物去除和溢出控制

用于医疗器械和生物技术应用的超细纤维

  • 适合微电子设备制造、关键部件组装以及金属加工、涂层和 3D 打印

    • 去除烘烤过程中的副产品和污染物

    • 使用强清洁溶剂

    • 适用于粗糙、磨损表面的高抗撕裂/脱落性能

    • 清洁传感器和光学器件

    • 清洁各种复杂的材料表面,例如环氧树脂和硅胶

    • 最后擦拭导丝和导管

用于半导体应用的超细纤维

  • 适用于实验室和工具维护区域

    • 增强擦洗性能,尤其是内部工具

    • 防止纹理表面和粗糙设备边缘脱落

    • 高效截留异物和残留物

单克隆抗体应用

单克隆抗体应用

抗体是免疫系统中有价值的蛋白质成分,其对目标物质的特异性将其用途扩展到诊断和治疗领域。尽管单克隆和多克隆抗体处于科学创新的前沿,但它们有许多优点和缺点,使它们更适合某些应用而不是其他应用。

在医学进步中,单克隆抗体已成为“个性化治疗”方面的明星。早在 1796 年,著名的爱德华·詹纳 (Edward Jenner) 博士就开始使用间接抗体疗法,从天花病变处取出脓疱液并接种到健康个体,以产生免疫反应。科学家已进一步利用这种自然免疫机制用于治疗和诊断目的。

可以人工制造针对患者体内任何所需疾病病原体或分子的特异性抗体。 1975 年,Kohler 博士和 Milstein 博士确立了 mAb 在人类中的应用,使用杂交细胞(由脾 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞组成)产生大量单一抗体克隆,其特异性已预先选择。

单克隆抗体现已广泛应用于医学、疫苗以及用于输血等目的的血型和组织检测。当用作研究探针时,它们有利于癌症、神经系统和自身免疫性疾病的病理学诊断和研究。它们甚至被用于治疗与年龄相关的黄斑变性、多发性硬化症、哮喘和骨质疏松症。希望通过进一步的研究,单克隆抗体可能在治疗阿尔茨海默病、偏头痛和糖尿病方面发挥重要作用。

在研究、诊断和治疗中使用 mAb 最有利的是,它们与单个表位结合,比 pAb 提供更高的特异性和更高的亲和力。这使得它们在调查或针对翻译后修饰等细节时成为一种资产。此外,它们的批次重现性使它们更适合需要监管批准的科学领域。另一方面,单克隆抗体的设计和制造成本高昂、耗时,并且需要高水平的专业知识。尽管如此,它们在医学中的积极作用也许可以克服这些缺点。

单克隆抗体在肿瘤学中的应用

可以说,单克隆抗体通过在抗体药物缀合物中的使用而改变了肿瘤学领域,其中它们通常与生物活性剂缀合。单克隆抗体的特异性意味着它们可以直接将药物分子或在癌症情况下将细胞毒剂递送至受感染细胞的靶点。抗体-药物偶联物已成功地提供了癌症治疗的替代方案,例如甲氨蝶呤等小分子化疗药物,其目标是健康细胞和癌细胞。目前,许多 ADC 正处于临床试验阶段,其中许多已获得 FDA 批准,例如用于治疗霍奇金淋巴瘤和间变性大细胞淋巴瘤的 Brentuximab vedotin (Adcetris®) 和针对 HER2 的曲妥珠单抗 emtansine (Kadcyla®)。阳性转移性乳腺癌。Biosynth 提供了一种新颖的连接技术,称为 CTAT™技术,用于生产此类抗体-药物缀合物。

我们的连接技术 CTAT™ 使用 CTAT™ 酶将选定的有效负载分子连接到抗体、抗体片段或蛋白质上的特定位点。该有效负载分子可以是治疗药物分子,如珠子、基质或染料。 使用表达质粒将 3-4 个氨基酸的特定序列插入抗体中。然后该序列被 CTAT™ 酶识别并“切割”,最终将该分子与选定的抗体或蛋白质共价连接。

单克隆抗体应用

脂肪酶的应用

脂肪酶的应用

食物:脂肪酶在食品工业中占有重要地位。它们用于生产瘦肉、增强乳制品的风味、改性植物油、加工含脂肪食品以及制造果汁、烘焙食品和发酵食品。特别是脂肪酶提供了一种将食品中不需要的脂质转化为高价值脂肪的绿色方法。脂肪酶通过改变甘油酯中脂肪酸链的位置来实现这一点。它们还催化油和脂肪的酯交换、水解和酯化。低热量三酰甘油 (TAG) 具有重要的营养价值,它是使用来自低品质油的脂肪酶合成的。在乳制品工业中,微生物脂肪酶水解乳脂,从而改变脂肪酸链长度。这使得奶酪的风味得到改善,甚至可以制成软奶酪。 

洗涤剂和纺织品:洗涤剂行业依靠脂肪酶来分解和去除织物上的脂基污渍,而纺织行业则利用这些酶作为脱脂剂,在加工过程中去除织物上的脂肪和油。去除脂肪的替代方法是使用清洁剂。该方法的问题在于它可能成为环境污染物并且需要大量的有机溶剂。因此,优选使用脂肪酶来对织物进行脱脂。 

诊断:脂肪酶可用作医学诊断中的脂质生物传感器,并用于评估患者的脂质异常。特别是在血液胆固醇样本、甘油三酯的分析和胰腺炎的诊断中。基于脂肪酶的检测的精确度和灵敏度使其成为医学实验室中宝贵的工具。 

化妆品: 脂肪酶有潜力用作润肤酯生产中的生物催化剂,也可用作活性成分。

生物技术:通过催化甘油三酯与甲醇或乙醇的酯交换反应,脂肪酶在生物柴油的生产中发挥着关键作用。

制药和精细化工行业:脂肪酶用于不对称合成,以生产在制药和精细化工行业中重要的手性分子。

环境应用:在环境科学中,脂肪酶通过消除生态系统中的农药、石油、化肥和杀虫剂等有害成分,为生物修复做出贡献。研究表明,当 假单胞菌 sp.是从受石油污染的地区提取的,这种生物体产生的脂肪酶可以分解受石油污染的土壤(Lesny,2022)。因此,脂肪酶在溢油清理中的潜力 强调了它们在减轻环境灾难方面的重要性。也有可能是细菌和真菌,例如 圆柱念珠菌、 铜绿假单胞菌、 简单青霉和荧光假单胞菌产生的脂肪酶可以降解微纳米塑料(MNP),这被认为会产生严重的健康后果。

脂肪酶的应用

脂肪酶关键应用总结

显然,脂肪酶在多种工艺和应用中都是重要的酶。作为应对当前能源生产和医疗保健挑战的自然可持续解决方案,它们对环境产生积极影响,是可持续未来和健康地球发展的资产。因此,加深对脂肪酶功能的理解非常重要,这样研究人员才能提高这些新颖应用和工程策略的效率。为此,科学家需要可靠且灵活的脂肪酶供应。这就是 Biosynth 可以提供帮助的地方。

关于铜 MOF 纳米粒子 定义、性质和应用

关于铜 MOF 纳米粒子 定义、性质和应用

铜金属有机骨架(Cu-MOF)纳米颗粒因其在各个领域的广泛应用而受到广泛关注。这些纳米粒子因其在药物输送、催化、传感和电化学应用中的潜力而被广泛研究。 Cu-MOF 纳米粒子可调表面化学、高孔隙率和生物相容性,使其可以广泛应用。

在药物输送领域,Cu-MOF 纳米粒子在增强药物输送系统方面显示出前景。这些纳米粒子的尺寸、形状和表面化学性质可以定制,以提高药物渗透到目标组织中,而不影响负载药物的活性。此外,MOF 中铜的存在已被确定有利于生物应用,包括药物输送。此外,人们还探索了使用 Cu-MOF 纳米粒子作为布洛芬等药物的载体,证明了这些纳米粒子在制药应用中的潜力

在催化应用中,Cu-MOF 纳米颗粒的电催化性能已得到研究。例如,嵌入 MOF 中的小尺寸铜纳米颗粒已被用作电催化析氢反应的催化剂,突显了它们在能源相关应用中的潜力。此外,Cu-MOF纳米颗粒已被用作二氧化碳还原的电催化剂,证明了它们在催化重要化学反应方面的能力

Cu-MOF 纳米颗粒在传感应用中的潜力也得到了探索。据观察,2D MOF 中铜位点的存在对于氨传感至关重要,这表明导电 MOF 的功能特性可以通过合理设计和合成进行调节

此外,还研究了 Cu-MOF 纳米粒子在电化学应用中的使用。这些纳米粒子已被用于生成用于 CO2 到 C2+ 电转化的富含晶界的铜纳米催化剂,展示了它们在电化学过程中的潜力。此外,封装在 MOF 衍生多孔碳中的叠氮化铜纳米粒子已被制备用于高性能起爆膜,展示了 Cu-MOF 纳米粒子在含能材料中的多种应用

总之,Cu-MOF 纳米粒子表现出广泛的应用,包括药物输送、催化、传感和电化学应用。它们的可调特性、高孔隙率和生物相容性使它们成为各种技术进步的有希望的候选者。

可电离脂质的应用——RNA 递送

可电离脂质的应用——RNA 递送

可电离脂质是一类有机脂质分子,在生理 pH 值下呈中性,在酸性 pH 值下呈质子化 (+)。可电离的脂质与磷脂、胆固醇和聚乙二醇化脂质一起构成脂质纳米颗粒 (LNP) 的结构

可电离脂质在 LNP 中发挥作用,可保护 RNA 免受水解、核酸酶、pH 突然变化和氧化损伤的降解,以促进其胞质转运(图 1)。本质上,可电离脂质有助于促进 RNA 递送至靶细胞。

可电离脂质的应用——RNA 递送

图 1:LNP 复合物中的可电离脂质发挥作用,促进 mRNA 胞质转运至靶细胞中。

从结构上看,目前有五种主要的可电离脂质类型广泛用于 RNA 递送;不饱和、多尾、聚合、可生物降解和支化尾(表 1)。

不饱和可电离脂质通过增加双层脂质形成非双层相的倾向来增强膜破坏,以及随后的有效负载释放。双层脂质的这种转变趋势是尾部饱和度从 0 个顺式双键增加到 2 个顺式双键的结果。例如,MC3(表 1,第 1 行)的每个尾部都有两个顺式双键,MC3证明了不饱和可电离脂质能够增强 LNP 将 RNA 递送至靶细胞的能力,从而重新点燃了治疗学中 RNA 递送的热情,特别是 mRNA 疫苗。

多尾可电离脂质通过产生增加尾部区域横截面积的锥形 LNP 结构来增强内体破坏以及随后的 RNA 递送。因此,在使用此类脂质的同时优化 LNP 结构可以提高 RNA 效力。例如,C12-200(表 1,第 2 行)是一种多尾离子化脂质,与标准制剂相比,mRNA 表达量增加了 7 倍。这种使用多尾可电离脂质的优化配方被用于各种 mRNA 递送目的,特别是产前蛋白质替代疗法。

聚合可电离脂质通过疏水聚集增强颗粒形成,从而增强 RNA 递送。这种通过疏水聚集的增强是通过将游离胺取代到具有烷基尾部的阳离子聚合物上来实现的。例如,G0-C14(表 1,第 3 行)通过赋予肿瘤中各种 RNA 治疗剂的高积累/效力和有效转染,证明了 LNP 在癌症治疗中的前景。

可电离脂质的应用——RNA 递送

可生物降解的电离脂质可减少细胞内 RNA 成功递送后的持续积累和毒性。这对于需要重复给药的 RNA 疗法尤其重要。这种降低的毒性是通过包含酯键来实现的,因为它们在生理pH下稳定,但在组织和细胞内会水解。例如,L319(表 1,第 4 行)是通过用酯键替换每个MC3尾部中的一个双键而制成的。这保持了 RNA 有效负载的效力,同时显示出宿主更好的耐受性。

支尾可电离脂质通过增强内体逃逸和增加脂质尾部的横截面积来增加 RNA 递送效力。由于 RNA 递送的多方面增强,支尾可电离脂质可有效递送大型 mRNA 构建体,用于蛋白质补充和碱基编辑疗法等。例如,FTT5(表 1,第 5 行)展示了具有酯链的支尾可电离脂质如何比其线性类似物具有更高的转染效率。与直链尾巴相比,支链尾巴的这种较高效率可能是由于支链可电离脂质上存在的仲酯的降解速率较慢。

作为脂质供应商,BroadPharm提供多种可电离脂质,例如ALC-0315类似物、SM-102类似物、MC3C12-200等,为我们的客户在纳米颗粒药物输送方面的高级研究提供支持。

乙二醇核酸(GNA)及其应用

乙二醇核酸(GNA)及其应用

乙二醇核酸 (GNA),有时也称为甘油核酸,是一种非天然核酸类似物,基于乙二醇单体单元,具有无环三碳糖磷酸主链,每个重复单元包含一个立体中心。立体异构化合物或分子中心由一个中心原子和四个可区分的配体组成。这些配体中任何两个的互换都会产生立体异构体。立体异构体仅在其原子的空间排列上有所不同。

乙二醇核酸 (GNA) 是一种异种核酸 (XNA),具有 3'-2' 连接的乙二醇磷酸骨架。 GNA 分子包含与核碱基融合的 3 个碳单元。

GNA 的聚合物结构与 DNA 和 RNA 相似,但其糖-磷酸二酯主链的组成不同。与DNA和RNA相比,GNA主链缩短了一个原子。 GNA 单元是一种简单的基于磷酸二酯的低聚物构建块。DNA 和 RNA 具有脱氧核糖和核糖主链,而 GNA 则包含通过磷酸二酯键连接的重复二醇单元。



乙二醇核酸结构

乙二醇核酸(GNA)及其应用

图 1:GNA、DNA 和 RNA 的化学结构。 GNA 双链体的几种晶体结构已在 0.97 至 1.83 Å 分辨率之间确定(Schlegel 等人和 Johnson 等人)。

Ueda和Imoto小组于1971年和1972年合成了外消旋GNA核苷。Holy小组于1974年合成了对映体纯的化合物,Cook等人于1974年合成了对映体纯的化合物。 Wengel 小组于 1995 年和 1999 年合成了第一个 GNA 亚磷酰胺和含有 GNA 的寡核苷酸。几年后,在 2006 年和 2009 年,Meggers 及其同事发表了改进和简化的方法。


为了进一步减少 GNA 亚磷酰胺的合成步骤总数并实现公斤级合成,Alnylam 小组开发了一种程序,允许使用受保护的嘌呤核碱基对映体纯 DMT-缩水甘油进行开环。


与天然对应物不同,GNA 化学性质稳定,且不知道其天然存在。

GNA 可能具有广泛的应用前景,包括:

  • 反义疗法:GNA 与 RNA 形成稳定双链体的能力使其成为设计反义寡核苷酸以抑制特定基因表达的有前途的候选者。

  • 适配体的开发:GNA适配体可以以高亲和力和特异性结合特定靶标。可能的应用包括分子诊断、治疗和生物传感器。

  • 基因治疗:GNA 可以将基因传递到细胞中以达到治疗目的。

  • 人工分子的设计:GNA 可以创建合成 DNA 或 RNA 分子。

  • siRNA:施莱格尔等人。 (2020) 观察到,在引导链的第 6 位具有单个 GNA 取代的 siRNA 双链体设计,并且在序列或化学上没有任何进一步的变化,可以最大限度地减少脱靶失调,而不影响靶点活性。

GNA 非常适合稳定性至关重要的应用,例如反义治疗和适体开发。 反义疗法



反义疗法使用核酸来抑制特定基因的表达。 GNA 是合成用于反义治疗的反义寡核苷酸的有前途的候选者,因为它可以与 RNA 形成稳定的双链体,从而防止靶向 RNA 被翻译成蛋白质。 GNA寡核苷酸可以在体外和体内抑制多种基因的表达。

适体

适体以高亲和力和特异性识别并结合特定靶标。 GNA 适体特别有吸引力,因为它们比天然核酸适体更稳定。因此,GNA 非常适合开发诊断、治疗和生物传感器。 GNA 适体可以结合各种靶标,包括蛋白质、细胞和病毒。

基因治疗

基因疗法使用核酸将基因传递到细胞中以达到治疗目的。 GNA 可以将基因传递到细胞中,因为它很稳定并且可以进行修改以纳入靶向序列。

siRNA

siRNA 双链体设计在引导链的位置 6 处具有单个 GNA 取代,可最大限度地减少脱靶效应,而不影响靶点活性。其他应用



除了上述应用之外,GNA 还可用于各种其他应用,包括:

  • 纳米技术:使用 GNA 可以创建自组装纳米结构。

  • 生物催化:GNA 可以开发具有改进催化活性的新酶。

  • 成像:GNA 可用于开发新的成像探针。

GNA 是具有广泛潜在应用的多功能分子。随着 GNA 研究的继续,科学家可能会发现这些分子的更多应用。

水凝胶在细胞治疗中的应用

水凝胶在细胞治疗中的应用

生物相容性是细胞治疗的关键,因为它涉及植入细胞在体内 发挥作用而不引起体内有害反应的能力 。在某些情况下,身体的免疫系统可以攻击植入的细胞,导致它们被排斥,或者移植的细胞可以攻击身体现有的细胞。

水凝胶能够控制具有功能和结构完整性的细胞和分子附着,使它们能够用于创造支持移植细胞的环境。这使得这些细胞能够替代或恢复因疾病或损伤而丧失的组织功能。水凝胶还可用作治疗基因的递送载体,可用于指导或增强移植细胞的功能。

我们提供各种即用型全合成肽水凝胶,它们具有生物学相关性,其配方可满足您细胞的需求。我们的 PeptiGels 具有剪切稀化和生物相容性,这意味着它们可以通过施加剪切应力(注射过程中)进行注射,并且在去除剪切力后会快速自愈。因此,我们的 PeptiGels 可用于在注射过程中输送生物细胞和分子。

PeptiGels 可用于细胞治疗的其他重要方面是它们是非动物源性基质并且缺乏免疫原性。

关于BIOSAFE在食品接触应用中的应用

关于BIOSAFE在食品接触应用中的应用

BIOSAFE的基石产品HM4100抗菌剂,已注册用于食品接触应用,符合 EPA 和 FDA 标准,并通过了 NSF 51 认证。生物安全HE4005型和HE4001型根据美国 EPA 和 FDA 法规,抗菌产品也被批准用作抗菌防腐剂,用于保存物品,包括与成品直接接触的物品。BIOSAFE使材料具有固有的抗菌性。有机硅技术比银基添加剂更具成本效益和更快起效,避免变色,并且不会浸出。HM4100型与主体聚合物系统形成互穿网络。这HM4100型聚合物抗菌剂与主体聚合物形成氢键,并与主体缠结,使得抗菌剂与塑料树脂或涂层形成互穿网络,使抗菌剂不会浸出。BIOSAFE技术提供了一种环境可持续的方法,使食品接触产品具有抑菌、抑菌和抑藻能力。BIOSAFE满足了食品制备、食品服务以及消费者食品和饮料市场日益增长的需求,即提高其接触的食品表面的卫生清洁度,如塑料、涂料和活性炭的抗菌性能,而不会迁移,BIOSAFE消除了与浸出抗菌剂相关的安全问题,同时实际上降低了保护成品的成本。BIOSAFE保护产品不含挥发性有机化合物(VOC)、砷等重金属或多氯酚。毒性测试表明,BIOSAFE产品不会在皮肤接触时或皮肤接触时引起刺激或致敏。BIOSAFE的化学成分已通过FDA和EPA的审查和批准,并在EPA注册为:注册号:HM4100抗菌ji83019-1。


安全的作用方式:

抗菌成分HM4100型通过有效地刺穿和破坏生物体的细胞壁来杀死微生物。相比之下,传统的抗菌剂通过浸入细胞来杀死细胞,在那里它们被代谢并干扰关键的生命过程。这种常规作用方式已被证明会导致微生物发生突变和适应,从而对抗菌剂产生耐药性。BIOSAFE产品避免了这个问题。

BIOSAFE可保护各种消费和工业应用中使用的材料,在这些应用中,微生物会导致染色、点蚀、变质或恶臭。BIOSAFE解决了以下食品接触最终用途中的微生物问题:

一、食物制备表面:BIOSAFE可保护厨房和食品制备环境中的表面,这些表面可以掺入树脂、食品接触层压层中,也可以作为涂层的一部分涂覆在表面上。BIOSAFE的最大使用水平为树脂、层压板或涂层的1重量百分比。

二、饮料管:饮料管中的水分和营养物质是微生物繁殖的主要场所。这可能导致霉菌染色、细菌气味和难闻的饮料。BIOSAFE可保护管道并延长其使用寿命,保持其新鲜和清洁。

三、活性炭:我的滤水器里有细菌生长?——直到最近,我们才想太多。晚间新闻的头条新闻引起了人们对一个日益严重的问题的关注。从手持式过滤罐和水龙头过滤器到在线水处理系统,各种产品都证明了公众越来越关注。BIOSAFE被添加到椰壳活性炭中,用于饮用水过滤市场。


四、不含甲醇:生物安全HE4005型和HE4001型根据美国 EPA 和 FDA 法规,抗菌产品已被批准用作抗菌防腐剂,用于保存物品,包括与成品直接接触的物品。生物安全HE4005 型和HE4001型是注册的硅烷季铵盐(硅烷季铵盐)抗菌剂,采用无甲醇工艺制造。

与传统的季铵盐(季铵盐)一样,硅烷季铵盐通过物理破坏微生物的细胞膜并在接触时破坏微生物来有效对抗多种微生物。与传统的季铵盐不同,硅烷季铵盐可以与各种表面结合,因此可以提供持久的保护,防止微生物定植。

市场上有几种EPA批准的硅烷季铵盐抗菌产品,它们都是由含有甲醇的原材料制成的。因此,成品中含有多达 0.5 份甲醇,用于一份硅烷季铵盐。如果甲醇含量低于 1%,供应商无需在安全数据表 (SDS) 上报告甲醇含量。

BIOSAFE抗菌剂HE4005型和HE4001型在水中的活性分别为 5 wt% 和 0.75 wt%。BIOSAFE抗菌剂广泛用于EPA批准的应用,包括用于医疗制服的Careismatic Certainty SmartBoost™洗衣添加剂,以及用于餐厅和自助餐厅的National Wiper Alliance Quat Keeper Foodservice Towels。BIOSAFE抗菌剂用于防止引起污渍和异味的细菌、真菌、霉菌和霉菌的生长,从而保存处理过的物品。

鸡多克隆抗体在全球流行病方面的应用

鸡多克隆抗体在全球流行病方面的应用

Klemperer 于 1983 年报道了蛋黄中存在免疫球蛋白 Y (IgY),自 1992 年以来,从鸡蛋中提取多克隆 IgY 已成为从动物放血中获取免疫球蛋白 (IgG) 抗体的一种有吸引力的替代方法。在鸡蛋发育过程中,IgY 被主动转运到蛋黄中,因此到产蛋时,蛋黄中存在高达 200 毫克的 IgY。将现有家禽业的基础设施与蛋黄的高效分离和纯化相结合,可实现大规模、经济的抗体生产。

与哺乳动物 IgG 相比,IgY 具有多种优势:

  • 鸟类和哺乳动物之间存在巨大的进化距离。结果是 IgY 将与哺乳动物抗原上的更多表位发生反应。此外,IgY 不与哺乳动物补体蛋白、类风湿因子、抗小鼠或抗人 IgG 抗体和 Fc 受体结合,这使得 IgY 成为人类健康生物分析应用的理想选择。

  • IgY不需要动物放血,母鸡免疫后即可简单收集鸡蛋,饲养家禽相比哺乳动物具有更大的成本效益比。

IgY 在诊断病毒学中的应用

已经进行的多项研究证明了 IgY 在诊断病毒学中的适用性,其中 IgY 可用作免疫测定中的生物输入。在爆发 SARS-CoV 时,开发了一种免疫拭子检测方法来检测病毒的 SARS-CoV 核衣壳蛋白,并将 IgG 单克隆抗体 (mAb) 与鸡 IgY 抗体的使用进行了比较。在猪鼻咽抽吸物中,使用 IgY 抗体的检测限 (10 pg/mL) 明显低于 mAb IgG (20 – 200 pg/mL)。1 

IgY 预防和治疗呼吸道感染的潜在疗法

此外,IgY 已被测试为预防和治疗呼吸道感染的潜在疗法。值得注意的是,抗假单胞菌IgY 抗体已成功用于预防几种动物模型中铜绿假单胞菌的定植,目前正在进行针对囊性纤维化患者的临床试验。2在第一次 SARS 爆发中,抗 SARS-IgY 被评估为潜在的治疗方法,我们现在同样可以将 IgY 视为 SARS-CoV-2 免疫治疗大规模生产的良好候选药物。3 

凭借低成本和高产量,利用 IgY 作为诊断工具和候选治疗药物,可以帮助解决当前的危机,并使世界更好地为下一场危机做好准备。

Nanoprobes 产品应用

Nanoprobes 产品应用

大型共价连接荧光和金纳米粒子免疫探针

FluoroNanogold™ 探针含有荧光标记和与靶向分子共价连接的Nanogold®簇,已成功用于相关荧光和电子显微镜 (EM) [1]。然而,纳米金很小(1.4 nm),需要银或金增强才能可视化[2]。与较大的胶体金制剂相比,这会产生更大的尺寸变异性。银增强可能会导致非特异性背景;银可以通过四氧hua锇 (OsO 4 ) 固定进行化学蚀刻,导致信号丢失[2]我们已经制备了用于相关显微镜的共价连接组合荧光探针和较大的金纳米颗粒探针,可以通过电镜直接观察,无需自动金相增强。使用自组装涂层对直径为 2 nm 至 40 nm 的金纳米颗粒进行稳定和功能化,该涂层包含疏水性螯合硫醇结构域,用于将金表面与水介质密封,以及亲水性末端官能团(聚乙二醇,PEG),使金纳米颗粒具有生物相容性。金纳米粒子并实现位点特异性共价探针缀合。这提供了高稳定性以及表面特性和共轭反应的广泛选择。

5 nm 金纳米颗粒的制备方法是,在增溶性非官能化硫醇和受保护的胺官能化硫醇的混合物存在下,用硼氢hua钠直接还原金 (III) 盐水溶液,然后使用蔗糖密度梯度 (10-30%) 进行纯化超速离心(Ti-41 转子,26,000 rpm,45 分钟,5 ℃;距离顶部约 4 厘米的强烈红色带包含 5 nm 金)。通过在盐酸甲醇中脱保护制备胺功能化的金颗粒。通过与商业 N-羟基琥珀酰亚胺基-(NHS) Cy-5.5 荧光染料反应证明了特异性反应性。该缀合物通过 Superose-12 尺寸排阻色谱进一步纯化(图 1)。这种尺寸的不稳定颗粒会被 0.1 M 氯化钠沉淀,但即使在 1.0 M 氯化钠溶液中,涂覆的颗粒仍保持分散和悬浮状态。将它们反复离心并全重悬,不留下任何固体沉淀;对常规蛋白质或大分子稳定的胶体金缀合物进行相同的处理总是会导致部分组分损失,形成无法重悬的不溶性沉淀。

通过将 NHS 和马来酰亚胺活化的 5 nm 金颗粒分别与二抗分子 IgG 和 F(ab') 共价连接来制备组合 5 nm 金-二抗 -Alexa Fluor 594 缀合物。然后,NHS 修饰的 Alexa Fluor 594 染料与缀合物发生反应。使用蔗糖密度梯度超速离心纯化产物,然后如上所述进行凝胶过滤。使用抗兔-F(ab')缀合物作为针对多克隆兔抗红细胞抗体的二级探针来标记悬浮液中的绵羊红细胞,并使用 Nikon G-2A 滤光片组通过荧光显微镜观察标记情况(图2)。抗小鼠 IgG 缀合物用作二级探针,与小鼠抗人 AE1/AE3 初级探针一起使用,在人扁桃体组织中产生清晰的细胞角蛋白染色(图 3 。荧光金缀合物的相对量子产率为相应商业染料标记二抗的 22-35%。

Nanoprobes 产品应用

Nanoprobes 产品应用

Nanoprobes 产品应用

荧光染料标记法的应用

荧光染料标记法的应用

荧光染料标记是生物学、生物化学和药理学等各个领域广泛使用的技术。它是可视化和量化生物分子和结构的强大工具。荧光染料标记用于标记核酸、蛋白质或其他生物分子。荧光染料通常是小的有机分子,它们吸收某一波长的光并发射更长波长的光。这一特性使得荧光染料能够以多种方式用于检测、定量和可视化分子。

历史
荧光染料标记自 20 世纪 50 年代以来一直被使用。最初,它被用作标记蛋白质的方法,以研究细胞中蛋白质的结构和功能。从那时起,它就被用来研究各种生物分子和过程。 20 世纪 70 年代,荧光染料标记被用于研究 DNA,使研究人员能够可视化和量化细胞中的遗传物质。 20世纪80年代,荧光染料标记被用来研究细胞中蛋白质的结构和功能。 20世纪90年代,荧光染料标记被用于研究多种生物过程,如细胞周期调控、信号转导和基因表达。

应用
荧光染料标记可用于多种领域来研究生物分子和过程。它用于研究蛋白质、DNA 和其他生物分子的结构和功能。它还用于临床诊断,以检测和量化致病因子,例如细菌和病毒。此外,荧光染料标记用于药物发现中,以识别和量化药物靶点。(您可能想了解更多有关荧光染料应用的信息)

蛋白质标记
荧光染料标记用于研究蛋白质的结构和功能。研究人员使用荧光染料来标记蛋白质,以便可视化和量化它们。这可以直接或间接完成。直接标记涉及将荧光染料直接附着到感兴趣的蛋白质上。间接标记涉及将荧光染料附着到与目标蛋白质结合的特定抗体或其他分子上。这使得研究人员能够专门标记感兴趣的蛋白质。荧光染料标记可用于研究蛋白质的结构和功能,以及研究蛋白质-蛋白质相互作用。 (您可能还需要荧光染料清单

DNA 标记
荧光染料标记也用于研究 DNA 的结构和功能。研究人员使用荧光染料来标记 DNA,以便对其进行可视化和量化。这可以直接或间接完成。直接标记涉及将荧光染料直接附着到感兴趣的 DNA 上。间接标记涉及将荧光染料附着到特定抗体或其他与目标 DNA 结合的分子上。这使得研究人员能够专门标记感兴趣的 DNA。荧光染料标记可用于研究 DNA 的结构和功能,以及研究 DNA-蛋白质相互作用。

细胞成像
荧光染料标记也用于研究中以可视化和量化细胞。这可以直接或间接完成。直接标记涉及将荧光染料直接附着到感兴趣的细胞上。间接标记涉及将荧光染料附着到与感兴趣的细胞结合的特定抗体或其他分子上。这使得研究人员能够专门标记感兴趣的细胞。荧光染料标记可用于研究细胞的结构和功能,以及研究细胞与细胞的相互作用。

临床诊断
荧光染料标记也用于临床诊断,以检测和量化致病因子,例如细菌和病毒。这可以直接或间接完成。直接标记涉及将荧光染料直接附着到感兴趣的致病因子上。间接标记涉及将荧光染料附着到与感兴趣的致病因子结合的特定抗体或其他分子上。这使得研究人员能够专门标记感兴趣的致病因子。荧光染料标记可用于检测和量化致病因子,以及研究它们的结构和功能。

药物发现
荧光染料标记也用于药物发现,以识别和量化药物靶点。这可以直接或间接完成。直接标记涉及将荧光染料直接附着到感兴趣的药物靶标上。间接标记涉及将荧光染料附着到与感兴趣的药物靶标结合的特定抗体或其他分子上。这使得研究人员能够专门标记感兴趣的药物靶点。荧光染料标记可用于识别和量化药物靶标,以及研究其结构和功能。

结论
荧光染料标记技术在生物学、生物化学和药理学等多个领域得到广泛应用。它是可视化和量化生物分子和结构的强大工具。荧光染料标记用于标记核酸、蛋白质或其他生物分子。它用于研究蛋白质、DNA 和其他生物分子的结构和功能。它还用于临床诊断,以检测和量化致病因子,例如细菌和病毒。此外,荧光染料标记在药物发现中用于识别和量化药物靶标。

化学发光免疫分析(CLIA)技术的原理及应用

化学发光免疫分析(CLIA)技术的原理及应用

化学发光免疫分析法(CLIA)诞生于1977年,根据放射免疫分析的基本原理,将高灵敏度的化学发光技术与高特异性的免疫反应相结合而建立的化学发光免疫分析法。 CLIA具有灵敏度高、特异性强、线性范围宽、操作简单、不需要非常昂贵的设备等特点。

化学发光免疫分析是高灵敏度化学发光分析技术与高特异性免疫反应的结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物的检测和分析。 。它是继放射免疫分析、酶免疫分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的最新免疫分析技术。

CLIA的应用范围很广,不仅可以检测不同分子大小的抗原、半抗原和抗体,还可以用于核酸探针的检测。与放射免疫分析(RIA)、荧光免疫分析(IFA)和酶免疫分析(EIA)相比,CLIA具有无辐射、标记物有效期长、全自动化等优点。 CLIA 为兽医、医学和食品分析测试和科学研究提供痕量或超痕量非同位素免疫分析。

一、化学发光免疫分析技术的基本原理

化学发光免疫分析包含免疫分析和化学发光分析两个系统。免疫分析系统采用化学发光物质或酶作为标记物,直接标记在抗原或抗体上,通过抗原与抗体反应形成抗原抗体免疫复合物。化学发光分析系统是在免疫反应后添加氧化剂或酶的发光底物。化学发光物质被氧化剂氧化后,形成处于激发态的中间体,该中间体发射光子释放能量回到稳定的基态。发光强度可以使用发光信号测量仪来检测。根据化学发光标记与发光强度的关系,可以使用标准曲线计算分析物的含量。

2. 化学发光免疫分析的类型

化学发光免疫分析根据标记物的不同可分为三类,即化学发光免疫分析、化学发光酶免疫分析和电化学发光免疫分析。

2.1 化学发光免疫分析

化学发光免疫测定是一类用化学发光剂直接标记抗体或抗原的免疫测定。目前常见的标记物主要是鲁米诺和吖啶酯化学发光剂。

2.1.1 鲁米诺标记化学发光免疫分析

鲁米诺物质的发光是氧化反应发光。在碱性溶液中,鲁米诺可被多种氧化剂氧化,其中常用的是H2o2。由于发光反应速度慢,需要添加一些酶或无机催化剂。酶主要是辣根过氧化物酶(HRP),无机类有O3、卤素和Fe3、Cu2、Co2及其复合物。

早期主要用于无机和有机生物小分子的测定,因标记后发光强度下降而导致灵敏度降低。研究发现,在发光体系中添加一些酚类及其衍生物、胺类及其衍生物、苯基硼酸衍生物,可以显着增强体系的发光能力,发光强度可提高1000倍,“背景”发光明显降低,发光时间也延长。这些增强剂的使用使得化学发光免疫测定法能够广泛应用于蛋白质和核酸分析领域。

2.1.2吖啶酯标记的化学发光免疫分析:吖啶酯由于热稳定性差而用于CLIA,通过研究合成了更稳定的吖啶酯衍生物。在H2o2和OH的条件下,吖啶酯类化合物可以快速发光,并且量子产率很高。例如吖啶芳基酯的量子产率可以达到0.05。采用吖啶酯作为免疫分析的标记物,发光系统简单。 、速度快、无需添加催化剂、标记效率高、背景低。这些特点引起了广大分析诊断工作者的极大兴趣。

2.2 化学发光酶联免疫分析

化学发光酶免疫分析(cLEIA)是酶免疫分析的一种,只不过酶促反应的底物是发光剂。然后酶作用于发光底物,在信号试剂的作用下发光,用发光信号分析仪进行发光测量。

常用的标记酶有辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(ALP),它们都有各自的发光底物。

常用的 HRP 发光底物是鲁米诺及其衍生物。在CLEIA中,使用过氧化物酶标记的抗体,进行免疫反应后,以鲁米诺作为发光底物,鲁米诺在过氧化物酶和起始发光试剂(NaOH和H2o2)的作用下发光,酶免疫反应中酶的浓度该物质决定化学发光的强度。这种传统的化学发光体系(HRP-H2O2-LUMINOL)在几秒内瞬时闪光,存在发光强度低、测量困难的缺点。后来在发光系统中添加了增强型发光剂,增强发光信号并保持较长时间的稳定,以利于重复测量,从而提高分析灵敏度和准确性。

碱性磷酸酶(ALP)已广泛应用于酶联免疫分析和核酸杂交分析。碱性磷酸酶和1,2。由二氧杂环丁烷组成的发光体系是目前化学发光体系中最重要、灵敏的一类。此类系统的代表是ALP-AMPPD发光系统。 AMPPD在溶液中的磷酸键非常稳定,非酶水解非常缓慢。在pH12的0.05mol/L碳酸钠缓冲溶液中,分解半衰期可达74年,且几乎不存在试剂本身的发光背景。 AMPPD是磷酸酶的直接发光底物,可用于检测碱性磷酸酶或抗体、核酸探针和其他配体的缀合物。 ALP-AMPPD发光系统具有非常高的灵敏度,标记物ALP的检出限达到10-21mol,是灵敏的免疫分析方法之一。对AMPPD进行改进,得到反应动力学更好、灵敏度更高的新一代产品:CSPD、CDP-Star。这些系统已广泛应用于各种基因和病原体DNA的鉴定。

2.3 电化学发光免疫分析

电化学发光(ECL)是指由电化学反应引起的化学发光过程。 ECL反应在电极表面进行,发光底物为三联吡啶钌[Ru(byp)2+3],三丙胺(TPA)用于激发光反应。在阳极表面,两种物质同时失去电子。在电极板上,Ru(byp)2+3 被氧化为 Ru(byp)3+3,TPA 也被氧化为阳离子自由基(TPA+#),TPA+# 自发释放质子,成为不稳定分子(TPA * ) ,将电子传递给 Ru(byp)3+3,形成激发态 Ru(byp)2+3。 Ru(byp)3+3在衰变时发射出波长为620NM的光子,并返回到基态Ru(byp)2+3。这个过程在电极表面重复进行,产生高效稳定的连续发光,并不断增强。

ECL的突出优点是:

①标记物分子小,可实现多重标记,且标记物非常稳定;

②发光时间长、灵敏度高;

③光信号线性好,动态范围宽,超过6个数量级;

④ 可重复测量,重现性好;

⑤ 可实现多重检测和均相免疫分析;

⑥速度快,通常只需18分钟即可完成一个样品的分析;

⑦全自动化。电化学发光免疫分析由于其优越性,是一种很有前景的免疫分析方法,越来越受到人们的重视。它已广泛应用于抗原、半抗原和抗体的免疫检测。

3. 申请

化学发光免疫分析(CLIA)和发光酶免疫分析(CLEIA)是化学发光免疫分析中常用的两种免疫分析方法。底物是发光剂的基础。根据仪器的检测自动化程度,仪器可分为自动和半自动两种。目前国内临床市场的全自动产品大部分都是进口产品;根据分离技术,仪器分为磁珠分离和塑料孔板分离两种。

化学发光免疫分析技术在检验医学中有很多应用,包括肿瘤标志物、心脏标志物、甲状腺功能、胰岛素和C肽以及糖尿病、传染病、骨代谢、细胞因子、激素、生长激素系统、贫血诊断和鉴别诊断、过敏反应等和监测治疗药物浓度。