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甲氧基PEG戊二酸NHSPG1-SGA-5k

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甲氧基PEG戊二酸NHS

简要描述：甲氧基PEG戊二酸NHS，产品型号：PG1-SGA-5k。
贮存： 储存在-20℃。干燥。NHS PEG 容易因水分而水解。避免频繁解冻和冷冻。

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

甲氧基PEG戊二酸NHS，产品型号：PG1-SGA-5k。

甲氧基PEG戊二酸NHS，贮存： 储存在-20℃。干燥。NHS PEG 容易因水分而水解。避免频繁解冻和冷冻。

描述：

N-羟基琥珀酰亚胺 (NHS) 功能化聚乙二醇 (PEG-NHS) 是一种氨基 (-NH 2 ) 反应性 PEG 衍生物，可用于修饰蛋白质、肽或任何其他具有可用氨基的表面。NHS 酯与伯胺基团在 pH 7~8.5 下反应形成稳定的酰胺键。与其他 PEG NHS 酯衍生物相比，我们的琥珀酰亚胺碳酸酯 (SC) 官能化 mPEG-NHS 在水溶液中具有出色的反应性和更高的稳定性。NHS 酯与去质子化伯胺反应，因此，反应需要中性至碱性 pH 值才能进行。伯胺通过亲核攻击与 NHS 酯反应，NHS 作为副产物释放。NHS 酯的水解与水溶液中的反应竞争，并随着 pH 值的增加而增加。

物理性质：

    • 灰白色/白色固体或粘稠液体取决于分子量；

    • 溶于普通水溶液和大多数有机溶剂；

反应程序：

通常，NHS PEG 超过含胺材料量的 10 至 50 倍摩尔过量会导致充分缀合。

所需材料：

  • 偶联缓冲液：碳酸氢钠 100 mM 缓冲液，pH 8.5 或其他无胺缓冲液，pH 7-8.5。

  • PEG NHS 储备溶液：100 mg 在 1 mL 结合缓冲液中。

  • 洗涤液：蒸馏水或任何水性缓冲液。

反应步骤：

将目标材料溶解在偶联缓冲液中。估计目标材料上伯胺基团的浓度。将 NHS PEG 库存溶液添加到目标共轭材料中，最终浓度保持至少 10 mg/mL。最佳偶联需要 10~50 摩尔过量的 PEG NHS；让混合物在室温下搅拌 30~60 分钟，或在 4 0 C 下搅拌 2 小时。缀合物可以通过尺寸排阻色谱或透析进行纯化。



上海金畔生物科技有限公司

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Amplite 比色法α-酮戊二酸定量试剂盒-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Amplite 比色法α-酮戊二酸定量试剂盒价格 5670
产品规格

200 Tests

产品货号

Amplite 比色法α-酮戊二酸定量试剂盒

产品参数
Ex (nm) – Em (nm) –
分子量 – 溶剂 –
存储条件 –
产品概述

Amplite 比色法α-酮戊二酸定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。α-酮戊二酸（α-酮戊二酸）是克雷布斯循环中的关键分子，其决定了生物体的柠檬酸循环的总体速率。作为谷氨酸和谷氨酰胺的前体，α-酮戊二酸也是胃肠道细胞的代谢燃料。它可以降低蛋白质分解代谢并增加蛋白质合成，从而增强骨骼肌中的骨组织形成，并可用于临床应用。 α-酮戊二酸用于肾脏疾病;肠道和胃部疾病，包括细菌感染;肝脏问题;白内障;和反复发酵的酵母菌感染。它还用于接受血液透析的肾病患者处理蛋白质的方式。 AAT Bioquest的Amplite 比色α-酮戊二酸定量试剂盒提供灵敏的比色分析，用于定量生物样品中的α-酮戊二酸。它利用酶偶联反应释放过氧化氢，可通过Amplite Red在吸光度酶标仪中在570 nm处检测到。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 比色法α-酮戊二酸定量试剂盒。 

 

适用仪器

光吸收酶标仪  
吸收: 575nm
推荐孔板： 透明底板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备测试样品和连续稀释的α-酮戊二酸标准品（50μL）
2.加入等体积的α-酮戊二酸工作液（50μL）
3.在37°C孵育60-90分钟
4.监测570nm处的吸光度强度

 

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 Amplite 红色储备液（200X）：
将50μLDMSO（组分E）加入到Amplite TM Red（组分A）的小瓶中以制备200X储备溶液。

 

2.标准溶液

2.1α-酮戊二酸标准
将10μL10mMα-酮戊二酸标准品（组分D）加入990μLPBS中，得到100μMα-酮戊二酸标准溶液（AKG7）。 然后进行1：2连续稀释以获得连续稀释的α-酮戊二酸标准品（AKG6-AKG1）。

 

3.工作溶液

3.1将5 mL测定缓冲液（组分C）加入一个酶混合物1瓶（组分B1）中并充分混合。

3.2将100μLDdH2O加入一个酶混合物2小瓶（组分B2）中并充分混合。

3.3将整个小瓶（100μL）的酶混合物2和25μL的200X Amplite Red储备溶液转移到小瓶混合物1的小瓶中并充分混合以制备α-酮戊二酸的工作溶液。 注意：5mLα-酮戊二酸工作溶液足以容纳一个96孔板。 它不稳定，请及时使用。

 

样品分析

表1.在96孔透明底微孔板中的α-酮戊二酸标准品和测试样品的布局。 AKG =α-酮戊二酸标准品（AKG1-AKG7,1.563至100μM），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL BL TS TS
AKG1 AKG1 … …
AKG2 AKG2 … …
AKG3 AKG3    
AKG4 AKG4    
AKG5 AKG5    
AKG6 AKG6    
AKG7 AKG7    

表2.每个孔的试剂组成

孔 容积 试剂
AKG1-AKG7 50ul 连续稀释液（1.563至100μM）
BL 50ul 分析缓冲液（组分C）
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备α-酮戊二酸标准品（AKG），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向α-酮戊二酸标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLα-酮戊二酸工作溶液，使总α-酮戊二酸测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLα-酮戊二酸工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.将反应混合物在37℃孵育60-90分钟。

4.用吸光度板读数器监测吸光度的增加，在OD为570nm时进行路径检查。

 

参考文献

Dietary alpha-ketoglutarate promotes higher protein and lower triacylglyceride levels and induces oxidative stress in larvae and young adults but not in middle-aged Drosophila melanogaster
Authors: Bayliak MM, Lylyk MP, Shmihel HV, Sorochynska OM, Semchyshyn OI, Storey JM, Storey KB, Lushchak VI.
Journal: Comp Biochem Physiol A Mol Integr Physiol (2017): 28

Loss of Nardilysin, a Mitochondrial Co-chaperone for alpha-Ketoglutarate Dehydrogenase, Promotes mTORC1 Activation and Neurodegeneration
Authors: Yoon WH, Sandoval H, Nagarkar-Jaiswal S, Jaiswal M, Yamamoto S, Haelterman NA, Putluri N, Putluri V, Sreekumar A, Tos T, Aksoy A, Donti T, Graham BH, Ohno M, Nishi E, Hunter J, Muzny DM, Carmichael J, Shen J, Arboleda VA, Nelson SF, Wangler MF, Karaca E, Lupski JR, Bellen HJ.
Journal: Neuron (2017): 115

The facial triad in the alpha-ketoglutarate dependent oxygenase FIH: A role for sterics in linking substrate binding to O2 activation
Authors: Hangasky JA, Taabazuing CY, Martin CB, Eron SJ, Knapp MJ.
Journal: J Inorg Biochem (2017): 26

alpha-Ketoglutarate Accelerates the Initial Differentiation of Primed Human Pluripotent Stem Cells
Authors: TeSlaa T, Chaikovsky AC, Lipchina I, Escobar SL, Hochedlinger K, Huang J, Graeber TG, Braas D, Teitell MA.
Journal: Cell Metab (2016): 485

Alpha-Ketoglutarate as a Molecule with Pleiotropic Activity: Well-Known and Novel Possibilities of Therapeutic Use
Authors: Zdzisinska B, Zurek A, Kandefer-Szerszen M.
Journal: Arch Immunol Ther Exp (Warsz). (2016)

alpha-Ketoglutarate dehydrogenase complex moonlighting: ROS signalling added to the list: An Editorial highlight for ‘Reductions in the mitochondrial enzyme alpha-ketoglutarate dehydrogenase complex in neurodegenerative disease – beneficial or detrimental?’
Authors: Fernandez E, Bolanos JP.
Journal: J Neurochem (2016): 689

Alpha-ketoglutarate enhances milk protein synthesis by porcine mammary epithelial cells
Authors: Jiang Q, He L, Hou Y, Chen J, Duan Y, Deng D, Wu G, Yin Y, Yao K.
Journal: Amino Acids (2016): 2179

alpha-ketoglutarate is associated with delayed wound healing in diabetes
Authors: Tan Q, Wang W, Yang C, Zhang J, Sun K, Luo HC, Mai LF, Lao Y, Yan L, Ren M.
Journal: Clin Endocrinol (Oxf) (2016): 54

Alpha-ketoglutarate promotes skeletal muscle hypertrophy and protein synthesis through Akt/mTOR signaling pathways
Authors: Cai X, Zhu C, Xu Y, Jing Y, Yuan Y, Wang L, Wang S, Zhu X, Gao P, Zhang Y, Jiang Q, Shu G.
Journal: Sci Rep (2016): 26802

Alpha-ketoglutarate reduces ethanol toxicity in Drosophila melanogaster by enhancing alcohol dehydrogenase activity and antioxidant capacity
Authors: Bayliak MM, Shmihel HV, Lylyk MP, Storey KB, Lushchak VI.
Journal: Alcohol (2016): 23

 

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产品名称 货号
Amplite 荧光法α-酮戊二酸定量试剂盒 Cat#10087
Amplite 乙醇定量试剂盒 Cat#40001
Amplite 胆固醇定量试剂盒 Cat#40006

Amplite 荧光法α-酮戊二酸定量试剂盒-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Amplite 荧光法α-酮戊二酸定量试剂盒价格 5670
产品规格

200 Tests

产品货号

Amplite 荧光法α-酮戊二酸定量试剂盒

产品参数
Ex (nm) – Em (nm) –
分子量 – 溶剂 –
存储条件 –
产品概述

Amplite 荧光法α-酮戊二酸定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。α-酮戊二酸（α-酮戊二酸）是克雷布斯循环中的关键分子，其决定了生物体的柠檬酸循环的总体速率。作为谷氨酸和谷氨酰胺的前体，α-酮戊二酸也是胃肠道细胞的代谢燃料。它可以降低蛋白质分解代谢并增加蛋白质合成，从而增强骨骼肌中的骨组织形成，并可用于临床应用。 α-酮戊二酸用于肾脏疾病;肠道和胃部疾病，包括感染;肝脏问题;白内障;和反复发酵的酵母菌感染。它还用于接受血液透析的肾病患者处理蛋白质的方式。 AAT Bioquest的Amplite™比色α-酮戊二酸定量试剂盒提供灵敏的比色分析，用于定量生物样品中的α-酮戊二酸。它利用酶偶联反应释放过氧化氢，可通过Amplite™Red在吸光度酶标仪中在570 nm处检测到。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Amplite 荧光法α-酮戊二酸定量试剂盒。 

 

适用仪器

荧光酶标仪  
Ex: 540nm
Em： 590nm
cutoff: 570nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备测试样品和连续稀释的α-酮戊二酸标准品（50μL）
2.加入等体积的α-酮戊二酸工作液（50μL）
3.在37°C孵育60-90分钟
4.监测570nm处的吸光度强度

 

溶液制备

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1.1 Amplite 红色储备液（200X）：
将50μLDMSO（组分E）加入到Amplite Red（组分A）的小瓶中以制备200X储备溶液。

 

2.标准溶液

2.1α-酮戊二酸标准
将10μL10mMα-酮戊二酸标准品（组分D）加入990μLPBS中，得到100μMα-酮戊二酸标准溶液（AKG7）。 然后进行1：2连续稀释以获得连续稀释的α-酮戊二酸标准品（AKG6-AKG1）。

 

3.工作溶液

3.1将5 mL测定缓冲液（组分C）加入一个酶混合物1瓶（组分B1）中并充分混合。

3.2将100μLDdH2O加入一个酶混合物2小瓶（组分B2）中并充分混合。

3.3将整个小瓶（100μL）的酶混合物2和25μL的200X Amplite Red储备溶液转移到小瓶混合物1的小瓶中并充分混合以制备α-酮戊二酸的工作溶液。 注意：5mLα-酮戊二酸工作溶液足以容纳一个96孔板。 它不稳定，请及时使用。

 

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中α-酮戊二酸标准品和测试样品的布局。 AKG =α-酮戊二酸标准品（AKG1-AKG7,0.1至30μM），BL =空白对照，TS =测试样品。

BL BL TS TS
AKG1 AKG1 … …
AKG2 AKG2 … …
AKG3 AKG3    
AKG4 AKG4    
AKG5 AKG5    
AKG6 AKG6    
AKG7 AKG7    

表2.每个孔的试剂组成

孔 容积 试剂
AKG1-AKG7 50ul 连续稀释液（0.1至30μM）
BL 50ul 分析缓冲液（组分C）
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和2中提供的布局制备α-酮戊二酸标准品（AKG），空白对照（BL）和测试样品（TS）。对于384孔板，每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向α-Ketoglutarate标准品，空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLα-酮戊二酸测定工作溶液，使总测定体积为100μL/孔。 对于384孔板，在每个孔中加入25μLα-酮戊二酸工作溶液，总体积为50μL/孔。

3.将反应在37℃孵育30-60分钟。

4.用Ex / Em = 540 / 590nm（截止值= 570nm）的荧光板读数器监测荧光增加。

 

参考文献

Dietary alpha-ketoglutarate promotes higher protein and lower triacylglyceride levels and induces oxidative stress in larvae and young adults but not in middle-aged Drosophila melanogaster
Authors: Bayliak MM, Lylyk MP, Shmihel HV, Sorochynska OM, Semchyshyn OI, Storey JM, Storey KB, Lushchak VI.
Journal: Comp Biochem Physiol A Mol Integr Physiol (2017): 28

Loss of Nardilysin, a Mitochondrial Co-chaperone for alpha-Ketoglutarate Dehydrogenase, Promotes mTORC1 Activation and Neurodegeneration
Authors: Yoon WH, Sandoval H, Nagarkar-Jaiswal S, Jaiswal M, Yamamoto S, Haelterman NA, Putluri N, Putluri V, Sreekumar A, Tos T, Aksoy A, Donti T, Graham BH, Ohno M, Nishi E, Hunter J, Muzny DM, Carmichael J, Shen J, Arboleda VA, Nelson SF, Wangler MF, Karaca E, Lupski JR, Bellen HJ.
Journal: Neuron (2017): 115

The facial triad in the alpha-ketoglutarate dependent oxygenase FIH: A role for sterics in linking substrate binding to O2 activation
Authors: Hangasky JA, Taabazuing CY, Martin CB, Eron SJ, Knapp MJ.
Journal: J Inorg Biochem (2017): 26

alpha-Ketoglutarate Accelerates the Initial Differentiation of Primed Human Pluripotent Stem Cells
Authors: TeSlaa T, Chaikovsky AC, Lipchina I, Escobar SL, Hochedlinger K, Huang J, Graeber TG, Braas D, Teitell MA.
Journal: Cell Metab (2016): 485

Alpha-Ketoglutarate as a Molecule with Pleiotropic Activity: Well-Known and Novel Possibilities of Therapeutic Use
Authors: Zdzisinska B, Zurek A, Kandefer-Szerszen M.
Journal: Arch Immunol Ther Exp (Warsz). (2016)

alpha-Ketoglutarate dehydrogenase complex moonlighting: ROS signalling added to the list: An Editorial highlight for ‘Reductions in the mitochondrial enzyme alpha-ketoglutarate dehydrogenase complex in neurodegenerative disease – beneficial or detrimental?’
Authors: Fernandez E, Bolanos JP.
Journal: J Neurochem (2016): 689

Alpha-ketoglutarate enhances milk protein synthesis by porcine mammary epithelial cells
Authors: Jiang Q, He L, Hou Y, Chen J, Duan Y, Deng D, Wu G, Yin Y, Yao K.
Journal: Amino Acids (2016): 2179

alpha-ketoglutarate is associated with delayed wound healing in diabetes
Authors: Tan Q, Wang W, Yang C, Zhang J, Sun K, Luo HC, Mai LF, Lao Y, Yan L, Ren M.
Journal: Clin Endocrinol (Oxf) (2016): 54

Alpha-ketoglutarate promotes skeletal muscle hypertrophy and protein synthesis through Akt/mTOR signaling pathways
Authors: Cai X, Zhu C, Xu Y, Jing Y, Yuan Y, Wang L, Wang S, Zhu X, Gao P, Zhang Y, Jiang Q, Shu G.
Journal: Sci Rep (2016): 26802

Alpha-ketoglutarate reduces ethanol toxicity in Drosophila melanogaster by enhancing alcohol dehydrogenase activity and antioxidant capacity
Authors: Bayliak MM, Shmihel HV, Lylyk MP, Storey KB, Lushchak VI.
Journal: Alcohol (2016): 23

 

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