从FFPE样品中全面可靠地提取总核酸
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微波提取 DNA 的方法和技术介绍
微波提取 DNA 的方法和技术介绍
微波爆裂细胞是一种有用的 DNA 提取方法,特别是对于廉价、快速和高通量的工作流程?它可以用作主要的细胞裂解过程,生产用于 PCR 的粗 DNA 提取物,或作为更复杂的提取过程中的一个步骤,以改善细胞裂解。
作为一种细胞裂解方法,微波具有快速、廉价、高通量、单管的优点,并且能够在不使用任何可能影响下游过程的化学物质的情况下破裂细胞。它主要通过将样品加热到高温来工作,但也有报道在较低温度下修改细胞膜等机制(例如细菌细胞膜穿孔)。
Goodwin & Lee (1993)发表了一个早期的例子,作者在 CTAB/氯仿提取之前对不同生命领域的多种类群进行了测试。
从那时起,研究人员定期针对特定应用发布该方法的变体或实例,通常省略 CTAB/氯仿步骤并使用直接 PCR。以下是一些示例:
⭐人体样本:Taglia 等人。 (2022) 描述了使用微波 DNA 提取法提取人类样本(唾液、血液、精液)的方法。
⭐植物样本:von Post 等人。 (2003) 描述了从大麦种子中高通量提取 DNA 进行基因分型,在碱性缓冲液中使用微波,然后用 Tris-HCl 缓冲液中和,每天可以处理数千颗种子。
⭐真菌样本:Ferreira 等人。 (1996) 在 PCR 之前使用微波打开干燥的真菌孢子。
⭐动物样本:Firmansya 等人。 (2023) 比较了三种蚊子 DNA 提取方法,发现微波可以产生与其他方法相当的结果,同时是一种更快、更便宜的工作流程。
快速提取超高分子量植物 DNA 的方法和技术
对于任何有兴趣提取高分子量植物基因组 DNA 的人,例如使用牛津纳米孔或 PacBio 测序等长读长技术进行基因组测序,这里有一种快速(与类似方法相比)、简单且经济的方法,适合单-分子测序,由Li 等人描述。 (2020)。
我们发现它特别有趣,因为提取涉及细胞壁、质体 DNA 和核膜的仔细、多步骤去除,每个步骤后都有洗涤阶段,而不是单个 DNA 提取步骤然后进行清洁。
提取首先使用渗透缓冲液去除细胞壁以释放完整的细胞核。然后对细胞核进行过滤、洗涤和离心,然后在 CTAB/氯仿提取过程中轻轻裂解。叶绿体和质体 DNA 在这些过程中被去除。多个洗涤步骤有助于去除不需要的化合物,例如次生代谢物和叶绿素,而温和的裂解和缓冲液可最大限度地减少 DNA 碎片。
重要的是,该方法使用含有 Tris-HCl、蔗糖、三氯化亚精胺和四氯化精胺的新型提取缓冲液。精胺和亚精胺是多胺,可稳定和保护真核细胞中的 DNA,吸收自由基并浓缩 DNA,从而以最小的碎片提取 DNA。
另一个关键步骤是选择新鲜的嫩叶,在提取前将其在黑暗中保存长达 48 小时,以尽量减少光合副产物的积累。
在棉花、黑草和草莓中使用这种方法,作者能够在每 10 克新鲜组织中提取 100 微克 gDNA,其中大多数提取的 DNA 大小在 100 kb 到 1000 kb 之间!
如何提取游离DNA?
如何提取游离DNA?
cfDNA 的分离、定量和评估并不是一项简单的任务。它需要敏感且可靠的工作流程。
cfDNA 是一种极其难以处理的样品类型,因为 cfDNA 的产量通常有限且高度碎片化。这就是 MagVigen™ cfDNA 提取试剂盒(货号 #K61003)发挥作用的地方。它可以为 NGS 检测提供更高产量和更高质量的 cfDNA 样本(相对于 Qiagen 试剂盒)。
cfDNA 提取工作流程
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1.溶解:溶解等离子体样品。
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2.结合和捕获:将 MagVigen™ 纳米颗粒与样品混合。纳米颗粒与 cfDNA 片段结合。
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3.沉淀和重新分散 1:磁性沉淀珠子直至溶液澄清。珠子响应磁力(通过使用磁铁,例如磁力分离架),使结合的材料能够快速有效地与样品的其余部分分离。通过抽吸除去上清液(未结合的材料),剩下的是纳米颗粒结合的目标。然后将珠粒重新分散在洗涤 1 缓冲液中。
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4.转移:将洗涤 1 溶液转移至 1.5 或 2ml 管中。
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5.沉淀和重新分散 2:磁力沉淀,按照步骤 3 去除上清液。这次将珠粒重新分散在 75% 乙醇中。
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6.清洗和沉淀 2,3:使用 75% 乙醇清洗珠粒。将珠子沉淀并除去所有上清液。将珠粒重新分散在 75% 乙醇中。执行此步骤两次。
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7.洗脱:高质量 cfDNA 的最终洗脱。为下游 NGS、PCR 或其他应用做好准备。
2次洗脱有助于提高cfDNA产量。
脱氧核糖核酸提取试剂盒(碘化钠法)B48202
脱氧核糖核酸提取试剂盒(碘化钠法)
简要描述:脱氧核糖核酸提取试剂盒(碘化钠法),产品编码:B48202。品牌:IvyFineChemicalsDNA Extraction EZ-Kit (Sodium Iodide Method)在4°C下稳定两年。仅供实验室使用。
详细介绍
产品咨询
品牌 | 其他品牌 | 供货周期 | 一个月 |
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应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药,综合 |
脱氧核糖核酸提取试剂盒(碘化钠法),产品编码:B48202。品牌:IvyFineChemicals
脱氧核糖核酸提取试剂盒(碘化钠法),DNA Extraction EZ-Kit (Sodium Iodide Method)
产品描述:
DNA提取EZ-试剂盒是一种 简化碘化钠法,纯化低至几 来自组织提取物、血液样本、细胞的 DNA 皮克 裂解物、蛋白质或生物制药样品。整个 过程包括两种简单的孵育和离心 在单个微量离心管中执行步骤,不使用任何危险品 材料,如苯酚和氯仿。优化的洗涤剂 在高蛋白浓度下实现高效的 DNA 提取 或在必要时增强蛋白酶K消化。纯化 DNA对于许多DNA应用来说足够纯净,例如PCR, 实时荧光定量PCR、限制性内切酶消化和克隆, DNA测序,或皮克格林荧光染色。
上海金畔生物科技有限公司
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国内试剂耗材经销代理。
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国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。
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提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。
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进出口货物代理服务。
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公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌
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质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式。
celldata核酸提取试剂盒的主要成分和使用方法
celldata核酸提取试剂盒的主要成分和使用方法
RIPA 裂解和提取缓冲液概述
RIPA 裂解和提取缓冲液概述
Scientific RIPA 裂解和提取缓冲液是一种用于培养的哺乳动物细胞的常用细胞裂解试剂的高质量、即用型且全披露的配方。
RIPA 缓冲液的特点:
•便利— 即用型解决方案;无需自行装配和制备组成部分
•灵活— 可与许多应用兼容,包括报告基因检测、蛋白检测、免疫检测和蛋白纯化
•通用— 可提取细胞质、细胞膜和细胞核蛋白
•披露的配方— 不含专有组成部分,用户可全面控制和了解可能存在的兼容性问题
该 RIPA 缓冲液可从培养的哺乳动物细胞(包括铺板细胞和团状悬浮细胞)中高效裂解并提取蛋白。该常用试剂可提取细胞膜、细胞核和细胞质蛋白,并可与许多应用兼容,包括报告基因检测、 Scientific BCA 蛋白检测、免疫检测和蛋白纯化。 Scientific Halt 蛋白酶抑制剂混合物(产品编号 78430)和 Halt 磷酸酶抑制剂混合物(产品编号 78420)等抑制剂也可与该 RIPA 缓冲液配方兼容,可在使用前添加以防止蛋白水解并保持蛋白磷酸化。
RIPA 缓冲液的名称来源于为其开发这种缓冲液的原始应用:放射免疫沉淀测定。尽管目前在实验室中很少使用这种同位素检测方法,但该裂解缓冲液配方的首字母缩略词已被广泛使用。RIPA 细胞裂解试剂可从各种细胞类型中高效提取蛋白,因为其含有三种非离子型和离子型去污剂。该去污剂配方的一大劣势是,与其他裂解试剂相比,其与某些下游应用相对不兼容。
规格
内容与储存
使用celldata核酸提取试剂盒进行核酸提取的步骤
使用celldata核酸提取试剂盒进行核酸提取的步骤
RNA 和 DNA 提取试剂盒详细介绍
RNA 和 DNA 提取试剂盒详细介绍
RNA 和 DNA 提取试剂盒 来自 FFPE 样品、新鲜组织和细胞或琼脂糖凝胶
从 FFPE 样品中分离 RNA 和 DNA:使用 CAT5™ 技术从 FFPE 样品中以高产量和高质量分离核酸
从新鲜组织和细胞中分离 RNA:只需 20 分钟即可获得高质量 RNA
DNA凝胶提取试剂盒:从琼脂糖凝胶中分离 DNA
从 FFPE 组织样品中分离 RNA 和 DNA
福尔马林固定的组织样本对 RNA 和 DNA 提取来说是一个挑战,通常会导致后续步骤的产量低和性能差。大多数现有方法依靠加热来去除交联和加合物,这仅部分有效并且会导致不稳定核酸的额外片段化。相比之下,基于斯坦福大学发起的研究的催化 CAT5™ 技术大大加速了甲醛损伤的去除,并允许回收更高质量的核酸。这会导致更高的产量、更完整的 RNA 或 DNA,以及更好的下游分析结果,如 PCR、微阵列或下一代测序 (NGS)。
CAT5™催化技术
• 甲醛交联的酶促逆转
• 有效:比基于热的方法产量更高
• 温和:无需高温或刺激性溶剂
• RNA 或 DNA 质量更高,碎片更少
用于从 FFPE 组织样本中分离 RNA 的 RNAstorm™ 试剂盒
RNAstorm™ FFPE 分离试剂盒采用专有的 CAT5™ 技术,可增强去除甲醛引起的损伤,并以更高的产量和质量、更好的完整性和更大的扩增能力纯化 RNA。
RNAstorm 衍生 RNA 的品质已在许多方面得到证明,包括更高的 RIN 分数、更高的产量、更高的 DV200 和改进的 RNA-seq 比对。根据 Illumina 的技术说明,Illumina RNA-seq 成功性能的最佳预测指标是 DV200 分数,它代表长于 200 个核苷酸的 RNA 片段的百分比。无论您是进行 RNA-seq、RT-qPCR、微阵列还是其他基因表达分析,RNAstorm™ 试剂盒都是您成功的最佳机会。
用于从 FFPE 组织样本中分离 DNA 的 DNAstorm™ 试剂盒
DNAstorm™ FFPE 分离试剂盒使用与 RNAstorm™ 试剂盒相同的 CAT5™ 技术,可增强去除甲醛引起的损伤,并提供更高产量、质量和更大扩增能力的 DNA。DNAstorm™ 试剂盒是 NGS、qPCR 和其他高级 DNA 分析应用的最佳解决方案。
从新鲜组织和细胞中分离 RNA
在短短 20 分钟内从培养细胞或新鲜组织中纯化出高质量的总 RNA。使用简单快速的基于柱的方案可以获得高产量(高达 120 μg)。使用 DNase 处理步骤去除污染的 DNA,并且该方案避免使用有毒化学品,例如苯酚或氯仿。
RNAstorm™ RNA 分离试剂盒的优势
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仅需 20 分钟即可获得高质量的总 RNA
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简单的工作流程可产生高达 120 μg 的 RNA
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包括 DNase 处理
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无苯酚-氯仿,无乙醇沉淀
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随时可用于下一代测序 (RNA-Seq)、RT-PCR、cDNA 合成和微阵列
DNA凝胶提取试剂盒
Biotium 的 DNA 凝胶提取试剂盒是一种基于硅胶离心柱的 DNA 提取试剂盒,旨在从 TAE 或 TBE 缓冲液中的琼脂糖凝胶中纯化 40 bp-40 kb 的 DNA 片段。每根柱子的最大结合容量为 10 微克 DNA。Biotium 的 DNA 凝胶提取试剂盒可去除 GelRed™ 和 GelGreen™ 核酸凝胶染料,以及其他常用的核酸凝胶染料。纯化的 DNA 与常见的下游应用兼容,例如转化、测序、PCR 和限制性消化。
上海金畔生物科技有限公司
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国内试剂耗材经销代理。
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国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。
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提供加急物流处理,进口货物,最快交期1-2周。
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进出口货物代理服务。
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公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。
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质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式,为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源,加强网络建设,提高公司内部运作效率,为客户提供方便、快捷的服务。
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公司突出创新思维,提高工作效能,减低运作成本,为客户提供优惠的价格。
celldata核酸提取试剂盒的使用注意事项
celldata核酸提取试剂盒的使用注意事项
celldata核酸提取试剂盒常见的四种种类
celldata核酸提取试剂盒常见的四种种类
现货供应核酸提取纯化试剂盒
RNA提取试剂盒 |
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目录号 |
产品名称 |
包装(次) |
价格(元) |
K1101 |
Karrol总RNA提取试剂 |
100 ml |
500 |
K1102 |
血液总RNA提取试剂盒 |
50 |
680 |
K1103 |
植物总RNA提取试剂盒 |
50 |
680 |
K1100-2 |
小RNA提取试剂盒 |
50 |
780 |
基因组DNA提取试剂盒 |
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目录号 |
产品名称 |
包装(次) |
价格(元) |
K2301 |
动物组织和细胞基因组DNA提取试剂盒 |
50 |
300 |
K2303 |
血液基因组DNA提取试剂盒 |
50 |
300 |
K2304 |
植物基因组DNA提取试剂盒 |
50 |
300 |
K2305 |
土壤总DNA提取试剂盒 |
50 |
1500 |
K2306 |
微生物基因组DNA提取试剂盒 |
50 |
300 |
K2309-1 |
粪便总DNA(微生物)提取试剂盒 |
50 |
1200 |
K2309-2 |
粪便总DNA(脱落细胞)提取试剂盒 |
50 |
500 |
DNA回收与纯化试剂盒 |
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目录号 |
产品名称 |
包装(次) |
价格(元) |
K2201 |
DNA胶回收提取试剂盒 |
50 |
120 |
K2202 |
PCR产物回收提取试剂盒 |
50 |
120 |
质粒DNA提取试剂盒 |
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目录号 |
产品名称 |
包装(次) |
价格(元) |
K2200 |
质粒DNA提取试剂盒 |
50 |
120 |
K2200M |
质粒DNA大量提取试剂盒 |
10 |
650 |
上海金畔生物科技有限公司为您提供最优的生物实验室解决方案,我们向您推荐从核酸到蛋白的系列分析试验技术解决方案。其产品涉及目前被广泛应用的cDNA、PCR、电泳以及转染等产品,另有各类分子生物学实验室最常用的各种生物缓冲系统,可为科研工作者赢取更多的试验时间。如果您对上述产品感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询,或索取最新的产品资料。