伤口愈合过程通常要经历三个阶段：上皮化、结缔组织沉积和收缩，其中收缩过程通常被认为是由一种被称为肌成纤维细胞的特殊成纤维细胞所介导的。3D胶原凝胶已被广泛应用于成纤维细胞收缩、整合素信号、细胞凋亡和细胞骨架重组等方面的研究，在体外研究中比传统的2D培养方法更具有生物学意义。

上海金畔生物科技有限公司代理的Cell Biolabs品牌提供了两种不同的3D胶原细胞培养模型，帮助研究人员更加方便地对成纤维细胞的收缩能力进行体外分析，即两步法附着模型（two-step attached model）和漂浮基质收缩模型（floating matrix contraction model）。其中，两步法附着模型分为两个步骤，首先附着的胶原基质内的细胞收缩产生机械力的积累，然后通过释放胶原基质消除外部机械应力，进而让胶原发生收缩。而漂浮基质收缩模型是将含有细胞的胶原基质漂浮在培养基中，在没有外部机械力积累和细胞内部纤维应力的情况下直接产生收缩作用。

1. 两步法附着模型细胞收缩分析试剂盒Cell Contraction Assay

两步法附着模型是检测细胞收缩的传统经典方法，包括了附着的胶原基质内的细胞收缩产生机械力的积累和释放胶原基质并产生收缩两个步骤。Cell Contraction Assay细胞收缩分析试剂盒提供了一套简单的系统，方便研究人员快速分析和评估细胞的体外收缩情况以及筛选细胞收缩介质。

产品信息

产品特点

用3D胶原基质培养细胞，通过测量胶原基质大小的变化来分析细胞收缩情况

可以通过分析细胞收缩来筛选细胞收缩介质

试剂盒中包含了细胞收缩抑制剂作为实验可选组分

检测原理

检测案例

细胞收缩抑制剂BDM对细胞收缩的抑制效果对比

将0.5 x 10⁶个COS-7细胞在0.5 mL胶原基质中培养2天，实验组细胞用10 mM BDM预处理细胞1小时，然后同时释放BDM处理组和对照组的胶原基质。用尺子测量释放后不同时间胶原基质的直径（单位：mm），对比BDM处理组与对照组细胞收缩的变化。

2.漂浮基质模型细胞收缩分析试剂盒Cell Contraction Assays, Floating Matrix Model

在漂浮基质模型细胞收缩分析试剂盒中，采用了带有抗粘附涂层的专用细胞收缩培养板，让含有细胞的胶原基质可以漂浮在培养基中，在没有外部机械力积累和细胞内部纤维应力的情况下直接产生收缩作用。该方法免去了传统收缩实验的胶原基质释放步骤，提供了一种更快、更高通量的方法来评估细胞收缩。

产品信息

产品特点

采用了专门的细胞收缩培养板免去了胶原基质释放步骤

用3D胶原基质培养细胞，通过测量胶原基质大小的变化来分析细胞收缩情况

试剂盒中包含了细胞收缩抑制剂作为实验可选组分

检测案例

细胞收缩后胶原基质的形态变化（虚线表示胶原基质的边缘）

细胞收缩抑制剂BDM对细胞收缩的抑制效果对比

根据实验方案(上图)，虚线表示凝胶边缘，用尺子分别测量无细胞组、有细胞组和10mM细胞收缩抑制剂BDM处理组的胶原基质的直径（单位：mm），对比BDM处理组与对照组细胞收缩的变化。

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在伤口愈合过程中通常包括以下三步：表皮细胞增生、结缔组织沉积和细胞收缩。其中细胞收缩过程是由一种特化的成纤维细胞，即成肌纤维细胞介导实现的。三维胶原蛋白凝胶（3-Dimensional Collagen Gels）技术被广泛用于成纤维细胞的收缩研究。

针对成纤维细胞的重构及收缩的研究已经建立起多个细胞培养模型。在悬浮培养收缩模型中，包含有细胞的新鲜聚合的胶原蛋白基质网在细胞培养基中悬浮培养，这样细胞收缩在无外部机械负荷和纤维应力的作用下进行；在另一种接触培养模型中，包含有细胞的新鲜聚合的胶原蛋白基质网仍然进行贴壁培养，因此这在细胞收缩的过程中伴随着纤维应力的聚集等；除此之外的第三种模型，即两步法模型，则是首先细胞进行贴壁生长并逐步形成机械负荷，随后细胞脱离培养基质开始悬浮生长，并在没有外部机械负荷和纤维应力的作用下继续收缩。

成纤维细胞的重构及收缩的研究中，成纤维细胞在胶原蛋白凝胶中收缩的信号调控机理随细胞是否承受外部机械负荷而不同；另外，不同的生长因子也能引发不同的收缩反应。如在基质网内生长的情况下，血浆脂类家族-溶血磷脂酸（LPA）能诱导强力的收缩反应；而在悬浮条件下，LPA和PDGF都能促进收缩反应。

Cell Biolabs的Collagen-based Contraction Assay Kit胶原蛋白收缩分析试剂盒提供了一个简单并更接近真实的离体收缩分析系统，采用两步法模型，能有效的检测细胞离体环境下的收缩能力或用于筛选细胞收缩调控分子，简便快捷。试剂盒内的三维胶原蛋白凝胶（3D Collagen Matrix）由于能提供一个更接近真实的模拟在体环境，因此与传统的二维粘附技术相比，更能反应细胞的真实收缩情况。

Cell Biolabs的细胞收缩检测试剂盒的主要操作原理及步骤如上图所示，首先将细胞包埋到3D结构的胶原质觉中进行贴壁生长并逐步形成机械负荷，随后将细胞脱离培养基质开始悬浮生长，并在没有外部机械负荷和纤维应力的作用下继续收缩。然后对凝胶大小的改变进行分析。

Collagen-based Contraction Assay Kit胶原蛋白收缩分析试剂盒内包括用于铺设胶原凝胶的胶原蛋白液、中和试剂、PBS等，还有作为阴性对照的细胞收缩抑制剂2, 3-Butanedione Monoxime (BDM)等其它试剂。该细胞收缩试剂盒能完成24孔板的24次分析，该试剂盒也能用于三维胶原蛋白凝胶（3D Collagen Matrix）的细胞培养。

Cell BioLabs为您提供全套的细胞分析检测方案，针对于细胞收缩，特别是成纤维细胞收缩分析，提供了基于胶原蛋白的3D两部法细胞收缩检测方案。另外，Cell Biolabs还开发出其他多方位的基于细胞功能特征，特别是肿瘤细胞的特性的克隆形成、细胞的粘附分析、细胞伤口愈合实验、包括了细胞趋化及趋触以及游出的细胞迁移分析、细胞吞噬试验、细胞衰老及失巢凋亡，以及血管生成分析等多种分析试剂盒。如果您对上述细胞分析方案感兴趣，请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询细胞研究的相关实验解决方案，或索取最新的Cell BioLabs产品资料。