条件细胞培养基简介
什么是条件媒体?
培养的细胞通常需要添加特定的生长因子以实现增殖、分化或存活。然而,一些重组蛋白的使用成本昂贵。这要么是因为它们难以制造(因此成本高昂),要么是因为它们需要大量。
生产纯化重组蛋白的大部分成本是纯化步骤。然而,如果重组蛋白由生产细胞分泌到周围介质中,则可以避免纯化。为了使细胞培养变得经济实惠,许多研究人员选择通过将培养基与生产细胞一起孵育,将这些重组蛋白直接添加到细胞培养基中。在用生长因子调节培养基后,可以立即将其储存或转移到需要它的感兴趣的细胞上。这种含有细胞分泌的成分且另一组细胞需要的成分的培养基称为条件培养基。
Wnt-3a 和 R-Spondin 1 经常通过调节添加到培养基中。重组 Wnt-3a 很难制备,因此价格昂贵。 R-Spondin 1 并不昂贵,但细胞培养中通常需要高浓度 (0.5-1.0 ug/ml),这意味着需要大量使用。
考虑到经济上可行的重组蛋白替代品,花费数小时培养细胞和分析条件培养基的科学家可能会改变选择。此外,使用这种方法增加了另一个变量,因为用于调节培养基的细胞会将代谢物分泌到培养基中并耗尽营养物质。实际上,接受培养基的细胞正在获得二手培养基,尽管分泌的生长因子有所改善。
那么有没有更好的解决方案呢?增长因子成本的部分驱动因素是浪费。添加到培养基中的大部分生长因子在到达细胞之前就会降解。对于 3D 培养物来说,这个问题尤其严重,因为细胞被保存在水凝胶中,生长因子无法有效迁移。在 CellGS,我们一直与美国、欧洲和亚洲的实验室合作,研究 PODS的使用 ,以提供更低成本、更有效的条件培养基替代品。
PODS在细胞附近缓慢释放蛋白质,从而减少了需要添加的生长因子的频率,并使可用性曲线变平,减少了细胞的压力,从而提高了细胞的质量。