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活细胞或染色™可固定活性染色试剂盒32018-T

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活细胞或染色™可固定活性染色试剂盒

简要描述：活细胞或染色™可固定活性染色试剂盒，产品编码：32018-T。品牌：biotium
Live-or-Dye™ Fixable Viability Staining Kits
用于共价标记死细胞的试剂盒，允许将具有可渗透质膜的细胞排除在流式细胞术分析之外。适用于标准流量、光谱流量和荧光显微镜的多种染料选择。

详细介绍

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

活细胞或染色™可固定活性染色试剂盒，产品编码：32018-T。品牌：biotium

活细胞或染色™可固定活性染色试剂盒，Live-or-Dye™ Fixable Viability Staining Kits

产品描述：

可通过流式细胞术或显微镜区分活细胞和死细胞。在通过流式细胞术分析细胞表面蛋白表达时，活/死染色是有用的探针，因为它们允许从分析中排除来自具有可渗透质膜的死细胞的细胞内荧光信号。

特征

  • 高死细胞特异性

  • 活性染料共价标记

  • 可承受固定和透化

  • 多种颜色选择

  • 专为光谱流设计的染料选项

  • 方便的采样器套件

单色套件组件

  • 活或染色™可固定死细胞染料

  • 无水二甲基二甲硫磺酸

采样器套件组件

  • 5 种不同的活或染料可固定死细胞染料™

  • 无水二甲基二甲硫磺酸

Biotium 提供多种跨越荧光光谱的活或染料活性染料™，为多色分析提供最大的灵活性。访问活或染色™技术页面，了解更多数据和信息。

工作原理

活或染料可固定活性染色剂是细胞膜不透性的胺反应性染料™。染料能够进入损害膜完整性的死细胞，并在细胞内蛋白质上共价标记游离胺。染料标记非常稳定，允许细胞固定和透化，而不会损失细胞之间的荧光或染料转移。活或染色方案已经过优化，以最小的活细胞染色最大限度地提高活/死区分，以防止干扰免疫染色™。

Biotium 具有多种跨越荧光光谱的活或染色™活性染料选择（见下表 1），在设计多色流式组合时具有最大的灵活性。

我们还提供两种采样器套件，每种试剂盒包含五种不同的染料颜色，用于激发所有流行的流式细胞术激光线（见下表 2）。活或染料™采样器套件，标准 （32016） 设计用于最常见的流式细胞仪激光器和滤光片配置，染料可被紫外、紫色、蓝色、黄绿色和红色激光激发。活或染料™采样器套件，光谱（32017）设计用于光谱扫描流式细胞术。它包含可由紫外、紫色、蓝色和红色激光激发的染料，所有这些染料均已在 Cytek® Aurora 光谱细胞仪上进行了验证，并因其能够填补许多光谱流面板中的间隙而被选中。

活或染料™可固定活性染色剂在所有细胞类型中都具有死细胞特异性，包括哺乳动物细胞、细菌和酵母。请参阅我们的细胞染色表，了解有关我们的染料如何染色各种生物的更多信息。

上海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌

  6. 质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式。

染色™荧光蛋白和串联染料抗体标记试剂盒92298A

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染色™荧光蛋白和串联染料抗体标记试剂盒

简要描述：染色™荧光蛋白和串联染料抗体标记试剂盒，产品编码：92298A。品牌：biotium
Mix-n-Stain™ Fluorescent Protein & Tandem Dye Antibody Labeling Kits
在大约4小时内用藻胆蛋白 APC、R-PE （PE）、PERCP 或串联染料轻松标记抗体，无需纯化步骤。

详细介绍

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品牌 其他品牌 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

染色™荧光蛋白和串联染料抗体标记试剂盒，产品编码：92298A。品牌：biotium

染色™荧光蛋白和串联染料抗体标记试剂盒，Easily label your antibody with phycobiliproteins APC, R-PE (PE), PerCP, or tandem dyes in about 4 hours with no purification step.

产品描述：

可让您在大约 4 小时内用荧光藻胆蛋白标记抗体，无需纯化。标记程序可耐受许多常见的缓冲液组分和抗体稳定剂（详见产品实验方案）。

  • 可选择 APC、R-PE （PE）、PERCP 或串联染料

  • 贴标只需几个小时，手动操作时间最少

  • 用于标记 25-50 ug、50-100 ug 或 1 mg IgG 的试剂盒尺寸

  • 无需纯化，100%回收

荧光蛋白（APC、R-PE 和 PerCP）：

  • APC（别藻蓝蛋白）是一种~105 kDa的明亮藻胆蛋白，存在于红藻和蓝藻（蓝绿藻）中。它在 650 nm 处具有最大吸收，在 660 nm 处具有发射。由于荧光量子产率高（~0.68），APC是迄今为止650nm波长区域最亮的染料。

  • R-PE（R-藻红蛋白，也称为PE）是一种分子量为~240 kDa的大藻胆蛋白。它可以被 488、532 和 561 nm 激光线激发，并且在 576 nm 处具有最大发射波长。由于高消光系数（~1，960，000）和高荧光量子产率（~0.82），R-PE是迄今为止565 nm波长区域最亮的染料。R-PE是流式细胞术中最亮的荧光染料之一，但由于其光漂白特性，不建议用于荧光显微镜。

  • PerCP（佩里迪宁叶绿素蛋白复合物）是一种在甲藻中发现的 35 kDa 小藻胆蛋白。PerCP在482 nm处具有最大吸收，在677 nm处具有发射。

串联染料：

串联染料由两个共价连接的荧光分子组成。这方面的一个例子是小分子染料与之偶联的藻胆蛋白。通过称为Förster共振能量转移（FRET）或荧光共振能量转移的过程，串联染料具有供体分子的激发特性和受体的发射特性。串联染料的斯托克斯位移大于原始供体分子的位移。串联染料几乎专门用于流式细胞术，因为能量转移，并且因为它们在受体染料通道中显示渗漏荧光，这需要补偿。除细胞仪外，大多数荧光仪器不进行补偿，通常不配置为串联染料的长斯托克斯位移。

我们提供用于标记以下串联染料的试剂盒，该试剂盒采用 Biotium 具有亮度的下一代CF® 染料。

上海金畔生物科技有限公司

  1. 国内试剂耗材经销代理。

  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

  3. 提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。

  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌

  6. 质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式。

双染法免疫荧光组织化学染色步骤

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双染法免疫荧光组织化学染色步骤

如果同一标本中需要同时显示A、B两种抗原，则A抗原的抗体用FITC标记，B抗原的抗体用TRITC标记，可采用以下染色方法用过的：

免疫荧光细胞化学双染

原代培养的大鼠端脑细胞第14天胚胎：在成骨形态蛋白的诱导下，乙酰胆碱转移酶（绿色荧光）和同源结构域蛋白Islet-1（红色荧光）共存于细胞质中（激光扫描共存）。聚焦显微镜观察）

1.一步双染法，将两种荧光标记抗体按适当比例（A+B）混合，按照直接法进行染色。

2.两步双染法，先用TRITC标记的抗体A进行免疫荧光染色，然后用FITC标记的抗体B进行免疫荧光染色。根据两种抗体的动物种类，可以采用直接法或间接法。结果是A抗原呈橙红色荧光，而B抗原呈黄绿色荧光。在应用中，常用的方法是免疫荧光组织化学中的间接法与荧光染料SABC-Cy3法的结合。例如，在实验设计中，选择小鼠抗大鼠A和兔抗大鼠B作为两种不同的特异性一抗，匹配的二抗分别为FITC-抗小鼠IgG和生物素化抗兔。免疫球蛋白G。

进行双染时，由于两种一抗来源不同，可能会混合一抗。孵育后，清洗未结合的一抗。滴加二抗时，先加入人生物素化抗兔IgG（二抗）孵育。清洗后，滴下 SABC-Cy3 复合物。特异性荧光，然后与FITC-抗小鼠IgG（二抗）孵育，最后封片观察。结果，A抗原显示绿色荧光，B抗原显示红色荧光。

该方法中需要注意的是，两种一抗混合稀释时，抗体的终浓度应为每种抗体的工作浓度。也就是说，混合液要同时满足两种一抗的工作浓度。如果两个一抗来自同一物种，则必须进行两次双染，即A抗原先用第一个一抗和第一个荧光二抗染色，然后用第二个一抗和第一个荧光二抗洗涤荧光二抗。 B抗原染色需使用两种荧光二抗，否则会发生交叉反应，导致染色不特异。

酶法金相学：一种简单的新染色方法

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酶法金相学：一种简单的新染色方法

将有机底物酶促转化为深色、不溶性反应产物被广泛用作免疫组织化学中的检测方法[1]，并且也已用于原位杂交检测[2]。尽管应用广泛，但它并不适合所有应用。产品的扩散可能会限制分辨率，并且染色的连续性可能会掩盖底层的细胞结构。与其他细胞染色剂的对比度可能低于预期，最近开发的镍基增强试剂已经解决了这个问题，该试剂与二氨基联苯胺反应产物结合，产生较暗的信号[3]。某些应用还需要比直接酶染色更高的灵敏度；这通常是通过聚合酶链式反应等扩增方法 [4] 或半抗原化底物（例如生物素化酪胺）的催化沉积来实现的[5]。然而，这大大增加了程序的长度和复杂性，并且还可能受到扩增产物的扩散的影响。

我们发现，在适当的金属源和活化剂存在的情况下，辣根过氧化物酶缀合的探针可以选择性地沉积金属，从而产生黑色的、高度局部化的染色。图 1-4 所示结果显示了新型金相基质与传统 DAB 开发在人类乳腺癌中的比较。将石蜡切片在二甲苯中脱蜡、水合并使用蒸汽热进行 HIER（抗原修复）30 分钟。用3% H 2 O 2封闭内源性过氧化物酶后溶液5分钟，切片与一抗孵育30分钟，随后与Envison检测试剂盒(Dako Corp)孵育30分钟。对照（图 1 和 3）用 DAB 显色剂染色 5 分钟，并用苏木精复染 2 分钟；实验切片（图 2 和 4）用金相基质处理 7-8 分钟，并用甲基绿复染。与 DAB 相比，染色的点状性质和非常低的背景结合程度是显而易见的。该方法还被发现对原位杂交检测高度敏感（图 5），并且在平行免疫印迹中产生的染色比 DAB 染色深得多（图 6）。

酶法金相学：一种简单的新染色方法

图 1 和图 2：对乳腺浸润性导管癌进行黄体酮受体（单克隆抗体 PR-88）染色，然后进行 (1) DAB 或 (2) 酶金相分析（条 = 50 微米）。

图 3 和 4：乳腺导管内粉刺癌，使用多克隆 c-erb-B2 一抗对 Her 2/neu 进行染色，然后进行 (3) DAB 或 (4) 酶金相分析（条 = 25 m）。

图5：中等扩增对照细胞系（4-6个拷贝）中Her-2/neu的原位杂交检测；每个点对应于该基因的一次出现。使用链霉亲和素、辣根过氧化物酶和金属沉积混合物检测的生物素化探针（放大倍数 x 1,000）。

图 6：（上）使用辣根过氧化物酶的新金相底物开发的免疫印迹。将2微克HRP沉积到硝化纤维素上，用4％BSA封闭，然后用金相基质处理； （底部）使用标准 DAB 开发的相同目标。

BOC Sciences荧光探针——细胞和细胞器染色应用

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BOC Sciences荧光探针——细胞和细胞器染色应用

细胞和细胞器染色

在细胞生物学领域，荧光探针是研究细胞结构和功能的重要工具。利用细胞器荧光探针选择性地与细胞器结合，然后通过激光扫描共聚焦显微镜观察，不仅可以获得高清晰度的亚细胞结构图像，还可以动态观察活细胞的形态变化。细胞的病理和生理变化可以通过荧光多重染色，免疫组织化学和原位杂交在分子生物学水平上进行定量研究。它还可用于分析细胞能量代谢、信号转导、膜电位变化、细胞凋亡和细胞类型的分化。BOC Sciences荧光探针——细胞和细胞器染色应用

以下是我们可用的细胞结构和细胞器荧光探针列表（包括但不限于以下内容）：

  • 核探测

核结构可以通过核蛋白染色或核酸直接染色选择性地观察。我们提供的细胞通透性核酸染料可以直接染色活细胞或组织，以标记细胞在组织中的分布。跟踪从有丝分裂到细胞凋亡的整个过程中的核变化。

  • 细胞质探针

细胞质由细胞质基质、内膜系统、细胞骨架和包涵体组成，是生命活动的主要场所。亲脂性染料一般可用作等离子膜染料，但内化很快，因此用于成像的时间很短。尽管不同细胞类型的质膜染色存在差异，但荧光标记的凝集素，如小麦胚芽凝集素，仍被广泛使用。

  • 线粒体探针

线粒体是细胞的能量工厂。因其参与细胞凋亡，也成为近年来的研究热点。线粒体的主要荧光探针有JC-1、罗丹明123和MitoTracker系列探针。

  • 溶酶体探针

溶酶体是被含有一系列酸性水解酶的单层膜蛋白包围的体。溶酶体含有多种酶，如糖苷酶、酸性磷酸酶、弹性蛋白酶、组织蛋白酶等。弱碱性胺选择性地聚集在低pH值的细胞内室中，可用于研究溶酶体的生物合成和发病机制。常用的一种是DAMP，它不发出荧光，需要与抗DNP抗体结合使用以观察染色模式。中性红和吖啶橙等荧光探针也常用于酸性细胞器的染色，但它们缺乏特异性。

  • 高尔基体复合物探针

高尔基体复合物的功能是从粗糙的内质网加工、浓缩、储存和运输蛋白质，最终形成分泌囊泡。高尔基体复合物的荧光探针主要是NBD C6-神经酰胺和BODIPY FL C5-神经酰胺。

  • 内质网探针

常用的DiOC6（3）和类似的DiOC5（3）属于短链羰基花青染料，广泛应用于内质网的研究，包括神经元和酵母中内质网的结构功能和动力学。以及不同细胞类型中内质网、线粒体和微管之间的形态关系。