活性氧 ROS荧光探针 CDCF-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 ROS荧光探针 CDCF价格 1386
产品规格

100 mg

产品货号

活性氧 ROS荧光探针 CDCF

产品参数
Ex (nm) 505 Em (nm) 526
分子量 445.21 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:活性氧ROS荧光探针 CDCF

CAS:111843-78-8

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:445.21

外观:橘色固体

溶剂:DMSO

激发波长(nm):504

发射波长(nm):525

 

产品介绍

活性氧ROS荧光探针 CDCF是美国AAT Bioquest生产的用于检测活性氧的荧光探针。CDCF是5(6) – 羧基-2’,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯和5(6) – 羧基-2’,7’的荧光产物。细胞渗透性5(6) – 羧基-2’,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(H2DCFDA)(也称为二氯荧光素二乙酸酯)是化学还原形式的荧光素,用作细胞中活性氧(ROS)的指示剂, 例如,检测中性粒细胞和巨噬细胞中活性氧中间体的产生。 在通过细胞内酯酶和氧化裂解乙酸酯基团后,非荧光H2DCFDA转化为高荧光CDCF。 5(6) – 羧基-2’,7′-二氯荧光素二乙酸酯染色用于研究多药耐药性蛋白[MRP和P-糖蛋白(Pgp)]。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的活性氧ROS荧光探针 CDCF。 

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活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

参考文献

Altered hepatobiliary disposition of 5 (and 6)-carboxy-2′,7′-dichlorofluorescein in Abcg2 (Bcrp1) and Abcc2 (Mrp2) knockout mice
Authors: Nezasa K, Tian X, Zamek-Gliszczynski MJ, Patel NJ, Raub TJ, Brouwer KL.
Journal: Drug Metab Dispos (2006): 718

CTLA-4IG suppresses reactive oxygen species by preventing synovial adherent cell-induced inactivation of Rap1, a Ras family GTPASE mediator of oxidative stress in rheumatoid arthritis T cells
Authors: Remans PH, Wijbrandts CA, Sanders ME, Toes RE, Breedveld FC, Tak PP, van Laar JM, Reedquist KA.
Journal: Arthritis Rheum (2006): 3135

Effect of culture conditions on the expression and function of Bsep, Mrp2, and Mdr1a/b in sandwich-cultured rat hepatocytes
Authors: Turncliff RZ, Tian X, Brouwer KL.
Journal: Biochem Pharmacol (2006): 1520

Kinetic validation of the use of carboxydichlorofluorescein as a drug surrogate for MRP5-mediated transport
Authors: Pratt S, Chen V, Perry WI, 3rd, Starling JJ, Dantzig AH.
Journal: Eur J Pharm Sci (2006): 524

Listeria innocua and Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus employ different strategies to cope with acid stress
Authors: Shabala L, McMeekin T, Budde BB, Siegumfeldt H.
Journal: Int J Food Microbiol (2006): 1

Non-destructive micromethod for MRP1 functional assay in human lung tumor cells
Authors: Stehfest E, Torky A, Glahn F, Foth H.
Journal: Arch Toxicol (2006): 125

Role of oxidative stress in the apoptosis of hepatocellular carcinoma induced by combination of arsenic trioxide and ascorbic acid
Authors: Li JJ, Tang Q, Li Y, Hu BR, Ming ZY, Fu Q, Qian JQ, Xiang JZ.
Journal: Acta Pharmacol Sin (2006): 1078

A plasma membrane H+-ATPase is required for the formation of proanthocyanidins in the seed coat endothelium of Arabidopsis thaliana
Authors: Baxter IR, Young JC, Armstrong G, Foster N, Bogenschutz N, Cordova T, Peer WA, Hazen SP, Murphy AS, Harper JF.
Journal: Proc Natl Acad Sci U S A (2005): 2649

Expression and activity of multidrug resistance protein 1 in a murine thymoma cell line
Authors: Echevarria-Lima J, Kyle-Cezar F, DF PL, Capella L, Capella MA, Rumjanek VM.
Journal: Immunology (2005): 468

Homocysteinic acid causes oxidative stress in lymphocytes by potentiating toxic effect of NMDA
Authors: Boldyrev AA.
Journal: Bull Exp Biol Med (2005): 33

活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光价格 3534
产品规格

200 Tests

产品货号

活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光

产品参数
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒,过氧化氢 (H2O2) 是一种活性氧代谢副产物,是许多氧化应激相关状态的关键调节剂。它参与了许多、动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、骨质疏松症、许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物事件。也许过氧化氢生物学有趣的方面是近的报告,即抗体具有将分子氧转化为过氧化氢的能力,有助于免疫系统的正常识别和破坏过程。这种活性物质的测量将有助于确定氧化应激如何调节不同的细胞内途径。该 Cell Meter 过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的 OxiVision Green 过氧化氢探针来量化活细胞中的过氧化氢。 OxiVision Green 具有细胞渗透性,当它与过氧化氢反应时会产生绿色荧光。该试剂盒是一种优化的“混合和读取”分析格式,与 HTS 液体处理仪器兼容。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。  

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活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: FITC 通道
Em: FITC通道
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

96孔板的测定方案

概述

用于溶液测定

1.准备H2O2反应混合物(50μL)

2.加入H2O2标准品或测试样品(50μL)

3.在室温下孵育10-60分钟

4.在Ex / Em = 490/525 nm (cutoff=515nm)处检测荧光强度

注意:在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分。

 

用于活细胞检测

1. 在生长培养基中制备细胞
2. 使用 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液对细胞进行染色并孵育
3. 用测试化合物处理细胞
4. 在 Ex/Em = 490/525 nm (Cutoff = 515nm) 处用底部读取模式检测荧光强度

 

溶液配制

1. OxiVision Green 过氧化氢探针储备液 (250X)
将 50 μL DMSO(组分 D)加入 OxiVision Green 过氧化氢探针(组分 A)的小瓶中,制成 250X OxiVision Green 过氧化氢探针储备液,注意避光。

2. H2O2 标准溶液(20 mM)
将 22.7 μL 的 3% H2O2(0.88 M,组分 B)加入 977 μL 的 Assay Buffer(组分 C)中,制成 20 mM H2O2 标准溶液。

注意 稀释的 H2O2 标准溶液不稳定。 未使用的部分应丢弃。

3.H2O2 标准
将 50 μL 20 mM H2O2 标准溶液加入 950 μL Assay Buffer(组分 C)中,得到 1000 μM H2O2 标准溶液。 取 1000 μM H2O2 标准溶液并进行 1:3 的系列稀释,以得到含有测定缓冲液(组分 C)的系列稀释的 H2O2 标准品(HS1 – HS7)。

4.工作溶液配制

将 20 μL 250X OxiVision Green 过氧化氢探针储备液加入 5 mL 检测缓冲液(组分 C)中,制成 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液。

 

操作步骤

在上清液反应中检测H2O2
表 1. 纯黑色 96 孔微孔板中 H2O2 标准品和测试样品的布局。 HS= H 2 O 2 标准品(HS1 – HS7,300 至 0.3 μM); BL=空白控制; TS=测试样品

BL BL TS TS
HS1 HS1
HS2 HS2
HS3 HS3    
HS4 HS4    
HS5 HS5    
HS6 HS6    
HS7 HS7    

表2. 每孔试剂组成

容积 试剂
HS1-HS7 50ul 连续稀释(300至0.3μM)
BL 50ul 分析缓冲液(组分C)
TS 50ul 测试样本

1.根据表 1 和表 2 中提供的布局准备 H2O2 标准 (HS)、空白对照 (BL) 和测试样品 (TS)。对于 384 孔板,每孔使用 25 μL 试剂,而不是 50 μL。

2. 将 50 μL OxiVision Green 过氧化氢探针工作液加入 H2O2 标准品、空白对照和测试样品的每个孔中,使H2O2 测定总体积为 100 μL/孔。 对于384孔板,将 25 μL 的 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液添加到每个孔中,总体积为 50 μL/孔。

3. 在室温下将反应孵育 15 到 30 分钟,避光。

4. 用荧光酶标仪在Ex= 490 ± 10,Em= 520 ± 10 nm(佳 Ex/Em = 490/525 nm,截止 = 515 nm)检测荧光强度。

 

在活细胞中进行H2O2检测

1.根据需要培养细胞

2.用 PBS 缓冲液清洗细胞,用 100 μL/孔的 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液孵育细胞 5 到 60 分钟。 对于 384 孔板,添加 25 μL/孔的 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液。

3. 在 Ex/Em = 490/525 nm (Cutoff = 515 nm) 下使用荧光酶标仪(底部读取模式)检测荧光增加或使用 FITC 通道通过荧光显微镜成像荧光变化。

 

参考文献

Bio-inspired redox-cycling antimicrobial film for sustained generation of reactive oxygen species
Authors: Huan Liu, Xue Qu, Eunkyoung Kim, Miao Lei, Kai Dai, Xiaoli Tan, Miao Xu, Jinyang Li, Yangping Liu, Xiaowen Shi
Journal: Biomaterials (2018)

PPARα-mediated peroxisome induction compensates PPARγ-deficiency in bronchiolar club cells
Authors: Srikanth Karnati, Gani Oruqaj, Harshavardhan Janga, Srinu Tumpara, Claudia Colasante, Paul P Van Veldhoven, Nancy Braverman, Adrian Pilatz, Thomas J Mariani, Eveline Baumgart-Vogt
Journal: PloS one (2018): e0203466

Semaphorin 4D inhibits neutrophil activation and is involved in the pathogenesis of neutrophil-mediated autoimmune vasculitis
Authors: Masayuki Nishide, Satoshi Nojima, Daisuke Ito, Hyota Takamatsu, Shohei Koyama, Sujin Kang, Tetsuya Kimura, Keiko Morimoto, Takashi Hosokawa, Yoshitomo Hayama
Journal: Annals of the Rheumatic Diseases (2017): annrheumdis–2016

Aggravation of brain infarction through an increase in acrolein production and a decrease in glutathione with aging
Authors: Takeshi Uemura, Kenta Watanabe, Misaki Ishibashi, Ryotaro Saiki, Kyoshiro Kuni, Kazuhiro Nishimura, Toshihiko Toida, Keiko Kashiwagi, Kazuei Igarashi
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2016): 630–635

Hydrogen peroxide detection with high specificity in living cells and inflamed tissues
Authors: Lei Rong, Chi Zhang, Qi Lei, Ming-Ming Hu, Jun Feng, Hong-Bing Shu, Yi Liu, Xian-Zheng Zhang
Journal: Regenerative Biomaterials (2016): rbw022

Modification of lignin in sugarcane bagasse by a monocopper hydrogen peroxide-generating oxidase from bifida fusca
Authors: Cheng-Yu Chen, Cheng-Cheng Lee, Hung-Shuan Chen, Chao-Hsun Yang, Shu-Ping Wang, Jyh-Horng Wu, Menghsiao Meng
Journal: Process Biochemistry (2016): 1486–1495

Dopamine-mediated oxidation of methionine 127 in α-synuclein causes cytotoxicity and oligomerization of α-synuclein
Authors: Kazuhiro Nakaso, Naoko Tajima, Satoru Ito, Mari Teraoka, Atsushi Yamashita, Yosuke Horikoshi, Daisuke Kikuchi, Shinsuke Mochida, Kenji Nakashima, Tatsuya Matsura
Journal: PLoS One (2013): e55068

Hydrogen peroxide stimulates the epithelial sodium channel through a phosphatidylinositide 3-kinase-dependent pathway
Authors: He-Ping Ma
Journal: Journal of Biological Chemistry (2011): 32444–32453

 

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活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光 价格 3534
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活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
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产品概述

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒,过氧化氢是一种活性氧代谢副产物,可作为许多氧化应激相关状态的关键调节剂。 它涉及许多,动脉粥样硬化,糖尿病血管病变,骨质疏松症,许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物学事件。 这种活性物质的测量有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的OxiVision Blue过氧化物探针来定量活细胞中的过氧化氢。 OxiVision 蓝色过氧化物探针具有细胞渗透性,当与过氧化氢反应时会产生蓝色荧光。 该试剂盒提供了一种监测活细胞中过氧化氢水平的灵敏工具,并且它被优化用于荧光显微镜。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。 

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适用仪器


荧光显微镜  
Ex: DAPI 滤波片
Em: DAPI 滤波片
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞
2.用OxiVision 蓝色过氧化物传感器染色细胞
3.用测试化合物处理细胞
4.用DAPI滤光片或Ex / Em = 405 / 450nm监测荧光强度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. OxiVision 蓝色过氧化物原液(500X):
将40μLDMSO(组分C)加入到OxiVision 蓝色过氧化物(组分A)的小瓶中并充分混合以制备500X OxiVision 蓝色过氧化物传感器储备溶液。 注意:20μL重组的OxiVision 蓝色过氧化物传感器储备溶液足以用于1个平板。 应立即使用原液。 避光。

  

2.工作溶液

将10μL500XOxiVision 蓝色过氧化物储备溶液加入500μL分析缓冲液(组分B)中,充分混合,制成OxiVision 蓝色过氧化物工作溶液。 注意:此OxiVision 蓝色过氧化物工作溶液不稳定; 使用前根据需要准备。

点击查看细胞制备指南

 

样品分析

1.添加10μL/孔(96孔板)或2.5μL/孔(384孔板)的OxiVision 蓝色过氧化物工作溶液,每孔90μL细胞培养物,96孔板或22.5μL细胞培养物在384孔细胞板中。注意:染色前无需清洗细胞。建议在完全培养基中染色细胞。

2.用测试化合物在完全培养基或37℃的所需缓冲液中处理细胞一段所需的时间。对于对照样品(未处理的细胞),加入相应量的化合物缓冲液。注意:建议在完全培养基中处理细胞。然而,如果测试的化合物对血清敏感,则可以在前吸出生长培养基和血清因子。抽吸后,将1X Hank盐溶液和20 mM Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的缓冲液加入细胞中。或者,可以在无血清培养基中处理细胞。我们用完全培养基中的100μM过氧化氢在37℃处理Jurkat细胞90分钟以诱导过氧化氢。详细信息请参见图1。

3.用DPBS洗涤细胞1-2次,并用100uL /孔(对于96孔板)或25uL /孔(对于384孔板)替换测定缓冲液(组分B)。

4.使用带DAPI过滤器的荧光显微镜拍摄图像。

 

参考文献

Plasma-activated medium selectively eliminates undifferentiated human induced pluripotent stem cells
Authors: Ryo Matsumoto, Kazunori Shimizu, Takunori Nagashima, Hiromasa Tanaka, Masaaki Mizuno, Fumitaka Kikkawa, Masaru Hori, Hiroyuki Honda
Journal: Regenerative Therapy (2016): 55–63

 

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活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光适用于流式细胞仪 价格 3534
产品规格

100 Tests

产品货号

活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光适用于流式细胞仪

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒,过氧化氢是一种活性氧代谢副产物,可作为许多氧化应激相关状态的关键调节剂。 它涉及许多,动脉粥样硬化,糖尿病血管病变,骨质疏松症,许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物学事件。 这种活性物质的测量有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的OxiVision Blue过氧化物来定量活细胞中的过氧化氢。 OxiVision 蓝色过氧化物具有细胞渗透性,当与过氧化氢反应时会产生蓝色荧光。 该试剂盒提供了一种监测活细胞中过氧化氢水平的敏感工具,并且它被优化用于流式细胞术。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。 

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适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 405nm 滤波片
Em: 450/40nm 滤波片
推荐通道: Pacific Blue通道
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞
2.用OxiVision 蓝色过氧化物传感器染色细胞
3.用测试化合物处理细胞
4.使用流式细胞仪Pacific Blue Channel监测荧光强度(Ex / Em = 405/450 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. OxiVision 蓝色过氧化物传感器原液:
将100μLDMSO(组分B)加入到OxiVision 蓝色过氧化物传感器(组分A)的小瓶中,并充分混合。 注意:1μL重组的OxiVision 蓝色过氧化物传感器原液足以容纳0.5 mL细胞。 应立即使用原液,避光。

点击查看细胞制备指南

   

样品分析

1.用OxiVision 蓝色过氧化物传感器储备液在完全培养基或37°C所需缓冲液中染色细胞20-30分钟,避光。

2.用测试化合物在完全培养基或37℃的所需缓冲液中处理细胞一段所需的时间。对于对照样品(未处理的细胞),加入相应量的化合物缓冲液。注意:建议在完全培养基中处理细胞。然而,如果测试的化合物对血清敏感,则可以在前吸出生长培养基和血清因子。在抽吸后,将细胞重悬于1X Hank盐溶液和20mM Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的缓冲液中。或者,可以在无血清培养基中处理细胞。注意:我们用完全培养基中的100μM过氧化氢在37°C处理Jurkat细胞90分钟以诱导过氧化氢。详细信息请参见图1。

3.使用流式细胞仪监测太平洋蓝色通道(Ex / Em = 405 / 450nm)的荧光强度。

 

参考文献

Plasma-activated medium selectively eliminates undifferentiated human induced pluripotent stem cells
Authors: Ryo Matsumoto, Kazunori Shimizu, Takunori Nagashima, Hiromasa Tanaka, Masaaki Mizuno, Fumitaka Kikkawa, Masaru Hori, Hiroyuki Honda
Journal: Regenerative Therapy (2016): 55–63

 

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活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光适用于流式细胞仪 价格 3534
产品规格

100 Tests

产品货号

活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光适用于流式细胞仪

产品参数
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒,过氧化氢是一种活性氧代谢副产物,可作为许多氧化应激相关事件的关键调节剂。 它涉及许多,动脉粥样硬化,糖尿病血管病变,骨质疏松症,许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物学过程。 这种活性物质的测量有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的OxiVision Green过氧化物传感器来定量活细胞中的过氧化氢。 OxiVision 绿色过氧化物传感器具有细胞渗透性,当与过氧化氢反应时会产生绿色荧光。 该试剂盒提供了一种监测活细胞中过氧化氢水平的敏感工具,并且它被优化用于流式细胞术。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。 

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适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 488nm 滤波片
Em: 530/30nm 滤波片
推荐通道: FITC通道
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞
2.使用OxiVision Green过氧化物染色细胞
3.用测试化合物处理细胞
4.用流式细胞仪FITC通道监测荧光强度(Ex / Em = 490/530 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. OxiVision 绿色过氧化物传感器原液:
将100μLDMSO(组分B)加入到OxiVision 绿色过氧化物(组分A)的小瓶中,并充分混合。 注意:1μL重组的OxiVision 绿色过氧化物储备溶液适用于0.5 mL细胞。 应立即使用原液,避光。

点击查看细胞制备方案

   

样品分析

1.使用OxiVision 绿色过氧化物传感器储备溶液在完全培养基或37°C所需缓冲液中染色细胞30分钟,避光。

2.用测试化合物在完全培养基或37℃的所需缓冲液中处理细胞一段所需的时间。对于对照样品(未处理的细胞),加入相应量的化合物缓冲液。注意:建议在完全培养基中处理细胞。然而,如果测试的化合物对血清敏感,则可以在前吸出生长培养基和血清因子。在抽吸后,将细胞重悬于1X Hank盐溶液和20mM Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的缓冲液中。或者,可以在无血清培养基中处理细胞。注意:我们用完全培养基中的100μM过氧化氢在37°C处理Jurkat细胞90分钟以诱导过氧化氢。详细信息请参见图1。

3.用测试化合物在37℃处理细胞一段所需的时间。取出处理溶液,然后用OxiVision 绿色过氧化物传感器储备液在全培养基或37°C所需的缓冲液中染色细胞一段所需的时间。

4.使用流式细胞仪监测FITC通道(Ex / Em = 490 / 530nm)的荧光强度。

 

参考文献

Role of Polydopamine’s Redox-Activity on its Pro-oxidant, Radical-Scavenging, and Antimicrobial Activities
Authors: Huan Liu, Xue Qu, Haoqi Tan, Jialin Song, Miao Lei, Eunkyoung Kim, Gregory F Payne, Changsheng Liu
Journal: Acta Biomaterialia (2019)

Plasma-activated medium selectively eliminates undifferentiated human induced pluripotent stem cells
Authors: Ryo Matsumoto, Kazunori Shimizu, Takunori Nagashima, Hiromasa Tanaka, Masaaki Mizuno, Fumitaka Kikkawa, Masaru Hori, Hiroyuki Honda
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活性氧 DCFH-DA [2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯] CAS 4091-99-0-AAT Bioquest荧光染料

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产品规格

25 mg

产品货号

活性氧 DCFH-DA [2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯]  CAS 4091-99-0

产品参数
Ex (nm) 505 Em (nm) 526
分子量 487.29 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

DCFH-DA [2’,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯]广泛用于监测细胞氧化还原的过程。2’,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(也称为2’,7’二氯荧光素二乙酸酯)被细胞酯酶水解成2’,7′-二氯二氢荧光素(也称为2’,7′-二氯荧光素),然后被氧化成2′ ,7′-二氯荧光素主要由H2O2。 2’,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯可能在细胞内氧化剂应激期间对广泛的氧化反应具有反应性。 金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供优质的活性氧(ROS)荧光探针。

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实验方案

用于染色细胞的样品方案

以下过程提供了一般准则,实际情况应根据您的特定应用进行修改。

1.制备1-10mM DMSO储备溶液。 应将未使用的DMSO储备溶液等分到单次使用的小瓶中并储存在-20℃,避光。

2.在生理缓冲液(如PBS,HBSS,HEPES)中使染料的工作浓度为1-10μM。必须根据经验确定佳工作浓度。

3.从生长培养基中取出细胞,将染料工作溶液(来自步骤2)加入细胞中,并在室温或37℃下孵育细胞5至60分钟。

4.去除染料工作溶液; 用预热的HBSS洗涤,加入预热的HBSS或生长培养基,在佳温度下孵育。 佳孵育时间可能相差较大,因为一些细胞类型通常表现出低水平的酯酶活性。

5.在将细胞暴露于实验诱导物之前,确定加载细胞样品的基线荧光强度。

6.阴性对照应评估如下:

6.1检查未染色的细胞在绿色发射范围内的自发荧光。

6.2对于流式细胞术,确定染料加载和处理后细胞的正向和侧向散射不变。细胞尺寸的变化可能与处理或毒性反应引起的起泡或收缩有关。

6.3检测有没有诱导物的染料和缓冲液/培养基的无细胞混合物的荧光。在没有细胞外酯酶和其他氧化酶的情况下,荧光随时间的逐渐增加可能与自发水解,大气氧化或光诱导有关。

6.4检查已经保存在生长培养基或简单缓冲液中的未处理(对照)负载细胞的荧光。在染料加载孵育后,健康细胞应表现出低水平的荧光,在实验期间相对稳定; 然而,可以观察到荧光逐渐增加(由于自动氧化)或减少(由于细胞中的染料损失或光漂白)。 在没有任何刺激或诱导的情况下,健康的未经处理的细胞中的荧光突发可以指示细胞死亡或一些其他氧化事件的进展。

7.可以用H2O2或叔丁基过氧化氢(TBHP)刺激阳性对照至终浓度~100μM(基于细胞的敏感性和反应增加或减少剂量)。

 

参考文献

Kinetic analysis of fluorescein and dihydrofluorescein effluxes in tumour cells expressing the multidrug resistance protein, MRP1
Authors: Saengkhae C, Loetchutinat C, Garnier-Suillerot A.
Journal: Biochem Pharmacol (2003): 969

Mitochondrial localization of reactive oxygen species by dihydrofluorescein probes
Authors: Diaz G, Liu S, Isola R, Diana A, Falchi AM.
Journal: Histochem Cell Biol (2003): 319

Dihydrofluorescein diacetate is superior for detecting intracellular oxidants: comparison with 2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate, 5(and 6)-carboxy-2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate, and dihydrorhodamine 123
Authors: Hempel SL, Buettner GR, O’Malley YQ, Wessels DA, Flaherty DM.
Journal: Free Radic Biol Med (1999): 146

A rapid diagnostic test for the viability of early cattle and rabbit embryos using diacetyl-fluorescin
Authors: Schilling E, Dopke HH.
Journal: Naturwissenschaften (1978): 658

Determination of fluorescin sodium in ophthalmic solutions
Authors: Robertson EJ, Patel JA.
Journal: Am J Hosp Pharm (1968): 598

[Experimental research on insulin antibodies. II. Immunochemical characterization of guinea pig anti-ox insulin serum conjugated with fluorescin isothiocyanate.]
Authors: Mancini AM, Zampa GA, Costanzi G.
Journal: Boll Soc Ital Biol Sper (1961): 1230

[Experimental research on insulin antibodies. III. Immunohistology of the endocrine pancreas with guinea pig anti-bovine insulin serum, conjugated with fluorescin isothiocyanate.]
Authors: Costanzi G, Mancini UM, Zampa GA.
Journal: Boll Soc Ital Biol Sper (1961): 1233

Two simple media for the demonstration of pyocyanin and fluorescin
Authors: King EO, Ward MK, Raney DE.
Journal: J Lab Clin Med (1954): 301

Influence of the concentration of iron on the production of fluorescin by Pseudomonas aeruginosa
Authors: Totter JR, Moseley FT.
Journal: J Bacteriol (1953): 45

Transfer of fluorescin from Ps. pyocyanea to colonies of other bacteria
Authors: Hurst L, Lowbury EJ.
Journal: J Clin Pathol (1952): 359

自由基与活性氧的区别

自由基与活性氧的区别

自由基、活性氧、氧化应激、氧化、抗氧化剂;这些术语在科学和非科学背景下都有使用,尽管它们的含义和彼此之间的关系经常令人困惑。这些分子具有非常重要的生物学作用。首先,让我们来解释一下这些术语。

自由基与活性氧的区别


自由基

自由基是任何具有不成对电子的分子物质,因此高度不稳定和反应性。通过贡献或接受电子,它们可以分别充当氧化剂或还原剂。自由基是由多种正常生物过程产生的,包括有氧代谢和致病防御机制。它们也可能是由于辐射、污染物和香烟烟雾等外部暴露造成的。

活性氧

活性氧(ROS)是含氧自由基的一个子集。一些最常见的活性氧包括羟基自由基、超氧阴离子和过氧化氢 (H 2 O 2 )。通过氧化磷酸化过程,线粒体是超氧阴离子和过氧化氢的最大产生者。代谢率高的细胞会产生更多的活性氧。活性氮 (RNS) 是非 ROS 自由基的一个例子。一氧化氮 (NO) 是最常见的 RNS,在L-精氨酸代谢过程中产生。

抗氧化剂如何发挥作用?

抗氧化剂可以对抗自由基,它们以两种不同的方式发挥作用。酶抗氧化剂的作用是将有害的 ROS 分解或转化为 H 2 0 2,然后转化为水。超氧化物歧化酶(SOD)催化两种超氧阴离子转化为过氧化氢和氧气。虽然过氧化氢也是一种活性氧,但它对细胞的毒性远低于超氧阴离子。随后,另一种酶抗氧化剂过氧化氢酶将 H 2 0 2进入水中。谷胱甘肽、维生素 E 和维生素 C 等非酶抗氧化剂通过直接与自由基反应发挥作用。例如,谷胱甘肽具有游离的巯基,是自由基攻击的一个有吸引力的目标。然后自由基被猝灭,氧化型谷胱甘肽被谷胱甘肽还原酶回收。

什么是氧化应激?

只要抗氧化剂和自由基之间存在不平衡,氧化应激就会发生,从而导致大量不受控制的反应性自由基物质的产生。氧化应激会导致 DNA、蛋白质和脂质受损,并产生巨大影响。 ROS参与类风湿关节炎、心脏和血管功能障碍以及癌症等多种炎症性疾病的发病机制。最近的一篇综述概述了 ROS 在肿瘤微环境中的作用。

然而,ROS 也参与多种生理过程。从生理学角度来看,ROS 是重要的信号分子,可促进细胞增殖、分化和成熟。 ROS在突触可塑性免疫反应免疫代谢心肌功能氧传感中发挥着重要作用。过氧化氢是多种激酶介导的信号通路的重要调节剂。同样,RNS在生理和病理机制中都有作用。


活性氧 ROS Brite 570-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 ROS Brite 570价格 2823
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活性氧 ROS Brite 570

产品参数
Ex (nm) 555 Em (nm) 568
分子量 732.81 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

ROS Brite 活性氧荧光探针570是美国AAT Bioquest生产的用于检测ROS的试剂,活性氧(ROS)是以化学方法反应的包含活性氧原子的化合物。例如:超氧化物、含有羟基自由基、单线态氧和过氧化物的衍生物。 ROS具有很高的活性,因为存在未配对的价电子层单电子。 ROS是生物氧代谢自然形成的副产物,它在细胞信号传递和体内平衡方面扮演着重要角色。然而在一些环境情况下(如紫外线照射或者高温环境下),ROS水平将大幅度增加。这可能导致细胞结构的重大伤害,日积月累,这被称为氧化应激。外部来源也生成ROS ,如电磁辐射。在氧化应激条件下,活性氧产量大幅度增加, 导致细胞膜脂、蛋白质和核酸的逐渐破坏。这些生物分子的氧化性损伤是与衰老和各种疾病紧密相关,例如动脉粥样硬化、致癌性肿瘤、缺血性贫血、神经衰退性疾病。 ROS Brite 570试剂是用以测量细胞内氧化应激水平的新型荧光分子探针,可以被常用的荧光显微镜高分辨率、微型板块荧光测量 或者流式细胞仪成像。细胞渗透性  ROS Brite 570试剂是没有荧光的,在与活性氧反应产生明亮的近红外荧光 。因此该试剂可以用常用的荧光显微镜高分辨率、微型板块荧光测量 或者流式细胞仪成像通过测量荧光信号来测量细胞内氧化应激水平。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的ROS Brite 活性氧荧光探针570。 

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活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: Cy3/TRITC滤波片组
Em: Cy3/TRITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片组: Cy3/TRITC 滤波片组
实验方案

样品操作及实验分析

1)在DMSO中准备10至20 mM ROS Brite 储备溶液。 通过用20 mM Hepes缓冲液(HHBS)将DMSO储备溶液稀释到Hanks溶液中,制成5至10 µM的工作溶液。

2)根据需要处理细胞(例如,使用50-100 nM血管紧张素II处理RASM细胞3-5小时)。

3)将细胞与ROS Brite (5-10 µM,来自步骤#1)在37ºC下孵育15 -30分钟。

注意:所使用的ROS Brite 的浓度随细胞系的不同而不同,需要测试不同的浓度才能获得佳剂量。 对于cat#16053,可能使用的浓度较低,例如0.5-5 uM。

4)用HHBS缓冲液代替染料加载溶液。

5)用适当的荧光仪器(例如荧光显微镜,流式细胞仪或体内成像仪器)分析细胞。

 

参考文献

Thiol-Mediated Synthesis of Hyaluronic Acid-Epigallocatechin-3-O-Gallate Conjugates for the Formation of Injectable Hydrogels with Free Radical Scavenging Property and Degradation Resistance
Authors: Chixuan Liu, Ki Hyun Bae, Atsushi Yamashita, Joo Eun Chung, Motoichi Kurisawa
Journal: Biomacromolecules (2017)

Transient receptor potential melastatin 8 ion channel in macrophages modulates colitis through a balance-shift in TNF-alpha and interleukin-10 production
Authors: M Khalil, A Babes, R Lakra, S Försch, PW Reeh, S Wirtz, C Becker, MF Neurath, MA Engel
Journal: Mucosal immunology (2016)

VEGFR2 signaling prevents colorectal cancer cell senescence to promote tumorigenesis in mice with colitis
Authors: Sebastian Foersch, Tobias Sperka, Christina Lindner, Astrid Taut, Karl L Rudolph, Georg Breier, Frank Boxberger, Tilman T Rau, Arndt Hartmann, Michael Stürzl
Journal: Gastroenterology (2015): 177–189

 

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ROS Brite 活性氧荧光探针700 体内成像优化 Cat#16004
ROS Brite 活性氧荧光探针APF Cat#16050
ROS Brite 活性氧荧光探针670 Cat#16002

活性氧 ROS Brite 670-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 ROS Brite 670价格 2823
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活性氧 ROS Brite 670

产品参数
Ex (nm) 651 Em (nm) 670
分子量 758.85 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

ROS Brite 活性氧荧光探针670是美国AAT Bioquest生产的用于检测ROS的试剂,活性氧(ROS)是以化学方法反应的包含活性氧原子的化合物。例如:超氧化物、含有羟基自由基、单线态氧和过氧化物的衍生物。 ROS具有很高的活性,因为存在未配对的价电子层单电子。 ROS是生物氧代谢自然形成的副产物,它在细胞信号传递和体内平衡方面扮演着重要角色。然而在一些环境情况下(如紫外线照射或者高温环境下),ROS水平将大幅度增加。这可能导致细胞结构的重大伤害,日积月累,这被称为氧化应激。外部来源也生成ROS ,如电磁辐射。在氧化应激条件下,活性氧产量大幅度增加, 导致细胞膜脂、蛋白质和核酸的逐渐破坏。这些生物分子的氧化性损伤是与衰老和各种疾病紧密相关,例如动脉粥样硬化、致癌性肿瘤、缺血性贫血、神经衰退性疾病。 ROS Brite 670试剂是用以测量细胞内氧化应激水平的新型荧光分子探针,可以被常用的荧光显微镜高分辨率、微型板块荧光测量 或者流式细胞仪成像。细胞渗透性  ROS Brite 670试剂是没有荧光的,在与活性氧反应产生明亮的近红外荧光 。因此该试剂可以用常用的荧光显微镜高分辨率、微型板块荧光测量 或者流式细胞仪成像通过测量荧光信号来测量细胞内氧化应激水平。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的ROS Brite 活性氧荧光探针670。 

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实验方案

样品操作及实验分析

1)在DMSO中准备10至20 mM ROS Brite 储备溶液。 通过用20 mM Hepes缓冲液(HHBS)将DMSO储备溶液稀释到Hanks溶液中,制成5至10 µM的工作溶液。

2)根据需要处理细胞(例如,使用50-100 nM血管紧张素II处理RASM细胞3-5小时)。

3)将细胞与ROS Brite (5-10 µM,来自步骤#1)在37ºC下孵育15 -30分钟。

注意:所使用的ROS Brite 的浓度随细胞系的不同而不同,需要测试不同的浓度才能获得佳剂量。 对于cat#16053,可能使用的浓度较低,例如0.5-5 uM。

4)用HHBS缓冲液代替染料加载溶液。

5)用适当的荧光仪器(例如荧光显微镜,流式细胞仪或体内成像仪器)分析细胞。

 

参考文献

Thiol-Mediated Synthesis of Hyaluronic Acid-Epigallocatechin-3-O-Gallate Conjugates for the Formation of Injectable Hydrogels with Free Radical Scavenging Property and Degradation Resistance
Authors: Chixuan Liu, Ki Hyun Bae, Atsushi Yamashita, Joo Eun Chung, Motoichi Kurisawa
Journal: Biomacromolecules (2017)

Transient receptor potential melastatin 8 ion channel in macrophages modulates colitis through a balance-shift in TNF-alpha and interleukin-10 production
Authors: M Khalil, A Babes, R Lakra, S Försch, PW Reeh, S Wirtz, C Becker, MF Neurath, MA Engel
Journal: Mucosal immunology (2016)

VEGFR2 signaling prevents colorectal cancer cell senescence to promote tumorigenesis in mice with colitis
Authors: Sebastian Foersch, Tobias Sperka, Christina Lindner, Astrid Taut, Karl L Rudolph, Georg Breier, Frank Boxberger, Tilman T Rau, Arndt Hartmann, Michael Stürzl
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活性氧 ROS Brite 700 体内成像优化-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 ROS Brite 700 体内成像优化

产品参数
Ex (nm) 682 Em (nm) 701
分子量 1295.14 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

ROS Brite 活性氧荧光探针700 体内成像优化 是美国AAT Bioquest生产的用于检测ROS的试剂,活性氧(ROS)是以化学方法反应的包含活性氧原子的化合物。例如:超氧化物、含有羟基自由基、单线态氧和过氧化物的衍生物。 ROS具有很高的活性,因为存在未配对的价电子层单电子。 ROS是生物氧代谢自然形成的副产物,它在细胞信号传递和体内平衡方面扮演着重要角色。然而在一些环境情况下(如紫外线照射或者高温环境下),ROS水平将大幅度增加。这可能导致细胞结构的重大伤害,日积月累,这被称为氧化应激。外部来源也生成ROS ,如电磁辐射。在氧化应激条件下,活性氧产量大幅度增加, 导致细胞膜脂、蛋白质和核酸的逐渐破坏。这些生物分子的氧化性损伤是与衰老和各种疾病紧密相关,例如动脉粥样硬化、致癌性肿瘤、缺血性贫血、神经衰退性疾病。 ROS Brite 700试剂是用以测量小动物氧化应激水平的新型荧光分子探针。 Th cell-impermeant ROS Brite 700试剂是水溶性的没有荧光,当其和活性氧反应产生明亮的近红外荧光 。因此该试剂可以用常用的荧光显微镜高分辨率、微型板块荧光测量 或者流式细胞仪成像通过测量荧光信号来测量细胞内氧化应激水平。对于细胞活性氧应激水平检测,我们推荐您使用我们的 cell-permemeant ROS Brite 570, 670 and 780 试剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的ROS Brite 活性氧荧光探针700 体内成像优化 。 

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实验方案

样品操作及实验分析

1)在DMSO中准备10至20 mM ROS Brite 储备溶液。 通过用20 mM Hepes缓冲液(HHBS)将DMSO储备溶液稀释到Hanks溶液中,制成5至10 µM的工作溶液。

2)根据需要处理细胞(例如,使用50-100 nM血管紧张素II处理RASM细胞3-5小时)。

3)将细胞与ROS Brite (5-10 µM,来自步骤#1)在37ºC下孵育15 -30分钟。

注意:所使用的ROS Brite 的浓度随细胞系的不同而不同,需要测试不同的浓度才能获得佳剂量。 对于cat#16053,可能使用的浓度较低,例如0.5-5 uM。

4)用HHBS缓冲液代替染料加载溶液。

5)用适当的荧光仪器(例如荧光显微镜,流式细胞仪或体内成像仪器)分析细胞。

 

参考文献

Thiol-Mediated Synthesis of Hyaluronic Acid-Epigallocatechin-3-O-Gallate Conjugates for the Formation of Injectable Hydrogels with Free Radical Scavenging Property and Degradation Resistance
Authors: Chixuan Liu, Ki Hyun Bae, Atsushi Yamashita, Joo Eun Chung, Motoichi Kurisawa
Journal: Biomacromolecules (2017)

Transient receptor potential melastatin 8 ion channel in macrophages modulates colitis through a balance-shift in TNF-alpha and interleukin-10 production
Authors: M Khalil, A Babes, R Lakra, S Försch, PW Reeh, S Wirtz, C Becker, MF Neurath, MA Engel
Journal: Mucosal immunology (2016)

VEGFR2 signaling prevents colorectal cancer cell senescence to promote tumorigenesis in mice with colitis
Authors: Sebastian Foersch, Tobias Sperka, Christina Lindner, Astrid Taut, Karl L Rudolph, Georg Breier, Frank Boxberger, Tilman T Rau, Arndt Hartmann, Michael Stürzl
Journal: Gastroenterology (2015): 177–189

 

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产品名称 货号
ROS Brite 活性氧荧光探针570 Cat#16000
ROS Brite 活性氧荧光探针APF Cat#16050
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活性氧 ROS Brite APF-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 ROS Brite APF价格 2111
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活性氧 ROS Brite APF

产品参数
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 423.42 溶剂 DMSO
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产品概述

ROS Brite 活性氧荧光探针APF是美国AAT Bioquest研发的检测活性氧的荧光探针,活性氧(ROS)是含氧的化学反应性分子(如超氧化物,羟基,单线态氧和过氧化物)。由于存在不成对的价电子,ROS具有高反应性。 ROS形成氧的正常代谢的天然副产物,并且在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而,在环境压力(例如,UV或热暴露)期间,ROS水平可显着增加。这可能导致细胞结构的显着损害。累积地,这被称为氧化应激。 ROS也由外源性源如电离辐射产生。在氧化应激条件下,ROS产生显着增加,导致随后膜脂,蛋白质和核酸的改变。这些生物分子的氧化损伤与衰老以及各种病理事件有关,包括动脉粥样硬化,致癌作用,缺血性再灌注损伤和神经退行性疾病。细胞渗透性ROS Brite APF和HPF试剂是非荧光的并且在与羟基自由基或过氧亚硝酸根阴离子反应时产生亮绿色荧光(激发/发射= 490 / 515nm),APF也将与次氯酸根阴离子(OCl-)反应。此外,APF和HPF在过氧化物酶存在下也与过氧化氢反应。可以使用荧光成像,高内容成像,微孔板荧光测定法或流式细胞术测量所得荧光。 APF和HPF显示出对光诱导氧化的相对高的抗性。 APF和HPF在与羟基或过氧亚硝酸根阴离子反应之前是非荧光的。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的ROS检测探针。

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活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: FITC 滤波片组
Em: FITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片组: FITC 滤波片组
实验方案

ROS Brite 染料的分析方案

该方案仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。在制备ROS Brite 工作溶液之前,根据需要处理细胞。

 

1)在DMSO中制备10至20mM ROS Brite APF(或HPF)储备溶液。通过将DMSO储备溶液稀释到含有20mM Hepes缓冲液(HHBS)的Hanks溶液中,制备1至10μM的工作溶液。

2)根据需要处理细胞(例如,用50-100nM血管紧张素II处理RASM细胞3-5小时)。

3)用ROS Brite APF(或HPF)(1-10μM,步骤#1)在37℃孵育细胞20-60分钟。

4)用HHBS缓冲液替换染料加载溶液。

5)用适当的荧光仪器在Ex / Em = 490 / 525mm(截止= 515nM)下用底部读取模式分析细胞(例如,用于荧光显微镜的FITC滤光片,用于流式细胞仪的FL1滤光片)。

注意:BSA和酚红会影响荧光,应谨慎使用。 APF和HPF均可用于溶液测定或细胞内测量。

 

参考文献

Dual-stimuli-responsive TiOx/DOX nanodrug system for lung cancer synergistic therapy
Authors: Zideng Dai, Xue-Zhi Song, Junkai Cao, Yunping He, Wen Wen, Xinyu Xu, Zhenquan Tan
Journal: RSC Advances (2018): 21975–21984

Inhibitory Anti-Peroxidasin Antibodies in Pulmonary-Renal Syndromes
Authors: A Scott McCall, Gautam Bhave, Vadim Pedchenko, Jacob Hess, Meghan Free, Dustin J Little, Thomas P Baker, William F Pendergraft, Ronald J Falk, Stephen W Olson
Journal: Journal of the American Society of Nephrology (2018): ASN–2018050519

 

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产品名称 货号
ROS Brite 活性氧荧光探针570 Cat#16000
ROS Brite 活性氧荧光探针700 体内成像优化 Cat#16004
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活性氧 ROS Brite HPF-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 ROS Brite HPF价格 2111
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活性氧 ROS Brite HPF

产品参数
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 424.40 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

ROS Brite 活性氧荧光探针HPF是美国AAT Bioquest研发的检测活性氧的荧光探针,活性氧(ROS)是含氧的化学反应性分子(如超氧化物,羟基,单线态氧和过氧化物)。由于存在不成对的价电子,ROS具有高反应性。 ROS形成氧的正常代谢的天然副产物,并且在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而,在环境压力(例如,UV或热暴露)期间,ROS水平可显着增加。这可能导致细胞结构的显着损害。累积地,这被称为氧化应激。 ROS也由外源性源如电离辐射产生。在氧化应激条件下,ROS产生显着增加,导致随后膜脂,蛋白质和核酸的改变。这些生物分子的氧化损伤与衰老以及各种病理事件有关,包括动脉粥样硬化,致癌作用,缺血性再灌注损伤和神经退行性疾病。细胞渗透性ROS Brite™APF和HPF试剂是非荧光的并且在与羟基自由基或过氧亚硝酸根阴离子反应时产生亮绿色荧光(激发/发射= 490 / 515nm),APF也将与次氯酸根阴离子(OCl-)反应。此外,APF和HPF在过氧化物酶存在下也与过氧化氢反应。可以使用荧光成像,高内容成像,微孔板荧光测定法或流式细胞术测量所得荧光。 APF和HPF显示出对光诱导氧化的相对高的抗性。 APF和HPF在与羟基或过氧亚硝酸根阴离子反应之前是非荧光的。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的ROS检测探针。

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适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 488 nm
Em: 530/30  nm 
通道: FITC通道

 


荧光显微镜

Ex: FITC 滤波片组
Em: FITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板

 


荧光酶标仪

 
Ex: 490nm
Em: 515nm
Cutoff: 515nm
推荐孔板: 黑色透明底板
读取模式: 底读模式
实验方案

ROS Brite 染料的分析方案

该方案仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。在制备ROS Brite 工作溶液之前,根据需要处理细胞。

 

1)在DMSO中制备10至20mM ROS Brite APF(或HPF)储备溶液。通过将DMSO储备溶液稀释到含有20mM Hepes缓冲液(HHBS)的Hanks溶液中,制备1至10μM的工作溶液。

2)根据需要处理细胞(例如,用50-100nM血管紧张素II处理RASM细胞3-5小时)。

3)用ROS Brite APF(或HPF)(1-10μM,步骤#1)在37℃孵育细胞20-60分钟。

4)用HHBS缓冲液替换染料加载溶液。

5)用适当的荧光仪器在Ex / Em = 490 / 525mm(截止= 515nM)下用底部读取模式分析细胞(例如,用于荧光显微镜的FITC滤光片,用于流式细胞仪的FL1滤光片)。

注意:BSA和酚红会影响荧光,应谨慎使用。 APF和HPF均可用于溶液测定或细胞内测量。

 

参考文献

Developmental toxicity evaluation of three hexabromocyclododecane diastereoisomers on zebrafish embryos
Authors: Du M, Zhang D, Yan C, Zhang X.
Journal: Aquat Toxicol (2012): 1

MAPK inhibitors and siRNAs differentially affect cell death and ROS levels in arsenic trioxide-treated human pulmonary fibroblast cells
Authors: Park WH.
Journal: Oncol Rep (2012): 1611

MG132, a proteasome inhibitor, induces human pulmonary fibroblast cell death via increasing ROS levels and GSH depletion
Authors: Park WH, Kim SH.
Journal: Oncol Rep (2012): 1284

beta-Lapachone induces heart morphogenetic and functional defects by promoting the death of erythrocytes and the endocardium in zebrafish embryos
Authors: Wu YT, Lin CY, Tsai MY, Chen YH, Lu YF, Huang CJ, Cheng CM, Hwang SP.
Journal: J Biomed Sci (2011): 70

Enhancement of gallic acid-induced human pulmonary fibroblast cell death by N-acetyl cysteine and L-buthionine sulfoximine
Authors: You BR, Park WH.
Journal: Hum Exp Toxicol (2011): 992

Gallic acid-induced lung cancer cell death is accompanied by ROS increase and glutathione depletion
Authors: You BR, Kim SZ, Kim SH, Park WH.
Journal: Mol Cell Biochem (2011): 295

MAPK inhibitors differentially affect gallic acid-induced human pulmonary fibroblast cell growth inhibition
Authors: Park WH.
Journal: Mol Med Report (2011): 193

Mitogen-activated protein kinase inhibitors differently affect the growth inhibition and death of a proteasome inhibitor, MG132-treated human pulmonary fibroblast cells
Authors: Park WH.
Journal: Hum Exp Toxicol (2011): 1945

Proteasome inhibition by MG132 induces growth inhibition and death of human pulmonary fibroblast cells in a caspase-independent manner
Authors: You BR, Park WH.
Journal: Oncol Rep (2011): 1705

Effects of arsenic trioxide on cell death, reactive oxygen species and glutathione levels in different cell types
Authors: Han YH, Moon HJ, You BR, Kim SZ, Kim SH, Park WH.
Journal: Int J Mol Med (2010): 121

 

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ROS Brite 活性氧荧光探针570 Cat#16000
ROS Brite 活性氧荧光探针700 体内成像优化 Cat#16004
ROS Brite 活性氧荧光探针APF Cat#16050

活性氧 MitoROS 线粒体ROS 580-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
活性氧 MitoROS 线粒体ROS 580价格 2823
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500 Tests

产品货号

活性氧 MitoROS 线粒体ROS 580

产品参数
Ex (nm) 500 Em (nm) 582
分子量 N/A 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

MitoROS 线粒体活性氧荧光探针580是美国AAT Bioquest生产的用于检测线粒体活性氧的荧光探针,活性氧(ROS)是含氧的化学反应性分子。实例包括超氧化物,羟基,单线态氧和过氧化物。由于存在不成对的价电子,ROS具有高反应性。 ROS形成氧的正常代谢的天然副产物,并且在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而,在环境压力(例如,UV或热暴露)期间,ROS水平可显着增加。这可能导致细胞结构的显着损害。累积地,这被称为氧化应激。 MitoROS 580是一种超氧化物敏感染料,在加载到活细胞后定位于线粒体。超氧化物氧化MitoROS 580会产生红色荧光。 MitoROS 580可用荧光显微镜或荧光流式细胞仪监测线粒体中的超氧化物。 MitoROS 580试剂渗透活细胞,选择性地靶向线粒体。它被超氧化物迅速氧化。它不太可能被其他活性氧(ROS)和活性氮物质(RNS)氧化。氧化产物在细胞中高度荧光。 MitoROS 580为研究各种病理中的氧化应激提供了有价值的工具。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的MitoROS 线粒体活性氧荧光探针580。 

活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

实验方案

使用MitoROS 580分析方案

该协议仅提供指南,应根据您的具体需求进行修改。在制作MitoROS 580工作溶液之前,根据需要处理细胞。

 

溶液配制

1)MitoROS 580 原液 (1000X)配制

将 13 µL DMSO 添加到 MitoROS 580 小瓶中并充分混合。注意:未使用的原液可以储存在 -20 oC,避光保存。

2)MitoROS 580 工作溶液(2X)配制

用 20 mM Hepes 缓冲液 (HHBS) 将 DMSO 原液稀释到 Hanks 溶液中,制成 2X 工作溶液。注意:2X MitoROS 580 工作液不稳定,请及时使用。

 

操作步骤

1.细胞培养

2.将细胞(例如 96 孔板中的 100 µL/孔)与等体积的 2X MitoROS 580 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 分钟,避光。 注意:MitoROS 580 的终细胞浓度不应超过 1 X。浓度超过 1 X 会产生细胞毒性效应,包括线粒体形态改变和荧光重新分布到细胞核和细胞质中。 注意:不同细胞对 MitoROS 580 的反应不同,请相应调整工作浓度。

3.轻轻清洗细胞 3 次,并用 HHBS 缓冲液替换。

4.使用适当的荧光仪器 (例如, 荧光显微镜、流式细胞仪) 观察细胞。(Ex/Em = 510/580 nm)

 

参考文献

Intracellular Fenton Reaction based on Mitochondria-Targeted Copper (Ⅱ)-Peptide Complex for Induced Apoptosis
Authors: Xia Li, Sijia Hao, Ailing Han, Yayu Yang, Guozhen Fang, Jifeng Liu, Shuo Wang
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2019)

The contribution of oxidative stress to platelet senescence during storage
Authors: Li Wang, Rufeng Xie, Zhijia Fan, Jie Yang, Wei Liang, Qiang Wu, Mei X Wu, Zhicheng Wang, Yuan Lu
Journal: Transfusion (2019)

Carbon monoxide poisoning–induced delayed encephalopathy accompanies decreased in microglial cell numbers: distinctive pathophysiological features from hypoxemia–induced brain damage
Authors: Keisuke Sekiya, Tasuku Nishihara, Naoki Abe, Amane Konishi, Hideyuki Nandate, Taisuke Hamada, Keizo Ikemune, Yasushi Takasaki, Junya Tanaka, Migiwa Asano
Journal: Brain research (2018)

活性氧 ROS Brite DHCF-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 ROS Brite DHCF价格 2823
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1 mg

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活性氧 ROS Brite DHCF

产品参数
Ex (nm) 560 Em (nm) 575
分子量 701.50 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

ROS Brite 活性氧荧光探针DHCF是美国AAT Bioquest生产的用于检测活性氧的荧光探针,活性氧(ROS)是含氧的化学反应性分子(如超氧化物,羟基,单线态氧和过氧化物)。由于存在不成对的价电子,ROS具有高反应性。 ROS形成氧的正常代谢的天然副产物,并且在细胞信号传导和体内平衡中具有重要作用。然而,在环境压力(例如,UV或热暴露)期间,ROS水平可显着增加。这可能导致细胞结构的显着损害。累积地,这被称为氧化应激。 ROS也由外源性源如电离辐射产生。在氧化应激条件下,ROS产生显着增加,导致随后膜脂,蛋白质和核酸的改变。这些生物分子的氧化损伤与衰老以及各种病理事件有关,包括动脉粥样硬化,致癌作用,缺血性再灌注损伤和神经退行性疾病。 ROS Brite 试剂是一系列新型荧光探针,用于测量细胞中的氧化应激。透过细胞的ROS Brite 试剂是非荧光的,在ROS氧化后产生明亮的荧光。可以使用荧光成像,高内涵成像,微孔板荧光测定法或流式细胞术测量所得荧光。 ROS Brite 570,670和700试剂对羟基自由基和过氧化物均具有良好的选择性。 ROS Brite 700针对体内成像进行了优化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的ROS Brite 活性氧荧光探针DHCF。 

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活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

实验方案

ROS Brite染料的分析方案

该说明书仅提供指南,应根据您的具体需求进行修改。 在制备ROS Brite™工作溶液之前,根据需要处理细胞或动物。

 

1)在DMSO中制备10至20mM ROS Brite储备溶液。 通过将DMSO储备溶液稀释到含有20mM Hepes缓冲液(HHBS)的Hanks溶液中,制备5至10μM的工作溶液。

2)根据需要处理细胞(例如,用50-100nM血管紧张素II处理RASM细胞3-5小时)。

3)用ROS Brite(5-10μM,步骤#1)在37℃孵育细胞15-30分钟。

注意:使用的ROS Brite浓度因细胞系不同而不同,需要进行不同浓度的测试才能获得佳剂量。 对于Cat#16053,可以使用较低的浓度,例如0.5-5μM。

4)用HHBS缓冲液替换染料加载溶液。

5)用合适的荧光仪器(例如荧光显微镜,流式细胞仪或体内成像仪器)分析细胞。

 

参考文献

An oxidative stress mechanism of shikonin in human glioma cells
Authors: Yang JT, Li ZL, Wu JY, Lu FJ, Chen CH.
Journal: PLoS One (2014): e94180

Association rule mining of cellular responses induced by metal and metal oxide nanoparticles
Authors: Liu R, France B, George S, Rallo R, Zhang H, Xia T, Nel AE, Bradley K, Cohen Y.
Journal: Analyst (2014): 943

HPLC-based monitoring of products formed from hydroethidine-based fluorogenic probes–the ultimate approach for intra- and extracellular superoxide detection
Authors: Kalyanaraman B, Dranka BP, Hardy M, Michalski R, Zielonka J.
Journal: Biochim Biophys Acta (2014): 739

Low Amounts of Mitochondrial Reactive Oxygen Species Define Human Sperm Quality
Authors: Marques M, Sousa AP, Paiva A, Almeida-Santos T, Ramalho-Santos J.
Journal: Reproduction. (2014)

Muscadine grape skin extract reverts snail-mediated epithelial mesenchymal transition via superoxide species in human prostate cancer cells
Authors: Burton LJ, Barnett P, Smith B, Arnold RS, Hudson T, Kundu K, Murthy N, Odero-Marah VA.
Journal: BMC Complement Altern Med (2014): 97

Nonthermal plasma induces head and neck cancer cell death: the potential involvement of mitogen-activated protein kinase-dependent mitochondrial reactive oxygen species
Authors: Kang SU, Cho JH, Chang JW, Shin YS, Kim KI, Park JK, Yang SS, Lee JS, Moon E, Lee K, Kim CH.
Journal: Cell Death Dis (2014): e1056

Subneurotoxic copper(II)-induced NF-kappaB-dependent microglial activation is associated with mitochondrial ROS
Authors: Hu Z, Yu F, Gong P, Qiu Y, Zhou W, Cui Y, Li J, Chen H.
Journal: Toxicol Appl Pharmacol (2014): 95

The acute inhibitory effect of iodide excess on sodium/iodide symporter expression and activity involves the PI3K/Akt signaling pathway
Authors: Serrano-Nascimento C, da Silva Teixeira S, Nicola JP, Nachbar RT, Masini-Repiso AM, Nunes MT.
Journal: Endocrinology (2014): 1145

A role for mitochondrial oxidants in stress-induced premature senescence of human vascular smooth muscle cells
Authors: Mistry Y, Poolman T, Williams B, Herbert KE.
Journal: Redox Biol (2013): 411

Application of concave microwells to pancreatic tumor spheroids enabling anticancer drug evaluation in a clinically relevant drug resistance model
Authors: Yeon SE, No da Y, Lee SH, Nam SW, Oh IH, Lee J, Kuh HJ.
Journal: PLoS One (2013): e73345

 

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ROS Brite 活性氧荧光探针570 Cat#16000
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活性氧 Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒价格 4245
产品规格

200 Tests

产品货号

活性氧 Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒

产品参数
Ex (nm) 576 Em (nm) 598
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于线粒体检测的试剂盒,细胞内羟基自由基的检测对于理解适当的细胞氧化还原调节及其失调对各种病理的影响至关重要。羟基(HO·)是与其他分子高度反应的活性氧(ROS)之一,以实现稳定性。通常,羟基被认为是氧化代谢的有害副产物,其可以在生命系统中引起分子损伤。它显示平均寿命为10-9秒,可以与几乎所有生物分子如核DNA,线粒体DNA,蛋白质和膜脂质发生反应。 AAT Bioquest的Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒经过优化,可用于检测线粒体中的ROS。 MitoROS OH580是活细胞渗透探针,可以快速和选择性地靶向活细胞中的羟基自由基。当它与OH·反应时产生红色荧光,并且可以在Ex / Em = 540 / 590nm处容易地读取。 Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒提供灵敏的荧光探针,可在孵育1小时后检测活细胞中的OH·。该试剂盒可用于荧光酶标仪和荧光显微镜应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒。 

活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器


荧光显微镜

Ex:

Cy3/TRITC 滤波片组

Em:

Cy3/TRITC 滤波片组

推荐孔板:

黑色透明底板

 


荧光酶标仪

 
Ex: 540 nm
Em: 590 nm
Cutoff: 570 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
读取模式: 底读模式
实验方案

96孔板分析示例

概述

准备细胞用MitoROS OH580工作溶液

在37ºC孵育细胞60分钟

用测试化合物孵育细胞(诱导OH·)

在Ex / Em = 540/590 nm处检测荧光增加

注意:使用前在室温下解冻所有组件。

 

操作步骤

1.准备细胞:

1.1对于贴壁细胞:在生长培养基中将细胞过夜,10,000至40,000个细胞/孔/90μL用于96孔板或2,500至10,000个细胞/孔/20μL用于384孔板。

1.2对于非贴壁细胞:从培养基中离心细胞,将细胞沉淀悬浮于培养基中,100,000-200,000细胞/孔/90μL,96孔poly-D赖氨酸平板或25,000-50,000细胞/孔/ 对于384孔聚-D赖氨酸板,20μL。 在实验之前,在制动器关闭的情况下以800rpm离心板2分钟。

注意:应对每个细胞系进行单独评估,以确定佳细胞密度。

 

2.准备MitoROS OH580方案:

2.1Prepare MitoROS OH580储备液(500X):将50μLDMSO(组分C)加入MitoROS OH580(组分A)的小瓶中,并充分混合。

注意:25μL重组的MitoROS OH580原液足以容纳1个平板。 如果管子密封并且避光,可以将未使用的部分等分并在≤-20℃下储存超过一个月。避免反复冻融循环。

2.2准备MitoROS OH580工作溶液:将25μL500XDMSO重构的MitoROS OH580储备溶液(来自步骤2.1)加入10 mL分析缓冲液(组分B)中,并充分混合。 该工作溶液在室温下稳定至少2小时。

 

3.进行羟基自由基测定:

3.1取出培养基,加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的MitoROS OH580工作溶液(步骤2.2)到细胞板中。将细胞在37ºC孵育1小时。

3.2为了诱导羟基自由基,用37℃的所需缓冲液(如PBS或HHBS)中的文本化合物处理细胞一段所需的时间,避光。

注意1:我们用芬顿反应(10μMCuCl2和100μMH2O2)在37℃处理HeLa细胞1小时,以诱导外源性羟基自由基。详细信息请参见图1。

注意2:我们用生长培养基中的PMA(佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯)在37℃下处理RAW 264.7细胞4小时,以刺激内源性羟基自由基。详细信息请参见图2。

3.3用HHBS或DPBS将细胞洗涤2-3次,并向每个孔中加入100μL测定缓冲液(组分B)。

3.4使用具有TRITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞中的荧光信号,或使用荧光酶标仪在Ex / Em = 540 / 590nm(截止= 570nm)下以底部读取模式测量荧光增加。

 

数据分析

活性氧 Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒

图1.使用MitoROS OH580(Cat#16055)在HeLa细胞中测量羟基自由基的荧光图像。 将HeLa细胞与MitoROS OH580工作溶液在37℃下孵育1小时,然后用HHBS洗涤一次。 芬顿反应:然后将细胞用10μMCuCl2和100μMH2O2在1X HBSS缓冲液中于37℃处理1小时。 对照:将HeLa细胞保持在1X HBSS缓冲液中而不进行处理。 用HHBS洗涤3次后,使用具有TRITC过滤器组(红色)的荧光显微镜测量HeLa细胞。 细胞核用Hoechst 33342(Cat#17530,Blue)染色。

 

活性氧 Cell Meter 线粒体羟基自由基检测试剂盒

图2.使用MitoROS OH580(Cat#16055)检测RAW 264.7细胞中的细胞内羟基自由基。 将细胞与MitoROS OH580工作溶液在37℃下孵育1小时,然后用HHBS洗涤一次。 然后将细胞在没有或与PMA(佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯,10-500ng / mL)在生长培养基中于37℃温育4小时。 用HHBS洗涤3次后,使用具有TRITC过滤器组的荧光显微镜测量HeLa细胞。

 

参考文献

Oxyl and hydroxyl radical transfer in mitochondrial amidoxime reducing component-catalyzed nitrite reduction
Authors: Yang J, Giles LJ, Ruppelt C, Mendel RR, Bittner F, Kirk ML.
Journal: J Am Chem Soc (2015): 5276

Arbutin, an intracellular hydroxyl radical scavenger, protects radiation-induced apoptosis in human lymphoma U937 cells
Authors: Wu LH, Li P, Zhao QL, Piao JL, Jiao YF, Kadowaki M, Kondo T.
Journal: Apoptosis (2014): 1654

Chloroplast-located BjFer1 together with anti-oxidative genes alleviate hydrogen peroxide and hydroxyl radical injury in cytoplasmic male-sterile Brassica juncea
Authors: Yang J, Liu S, Yang X, Zhang M.
Journal: Mol Biol Rep (2012): 4169

Hydroxyl radical (.OH) played a pivotal role in oridonin-induced apoptosis and autophagy in human epidermoid carcinoma A431 cells
Authors: Yu Y, Fan SM, Song JK, Tashiro S, Onodera S, Ikejima T.
Journal: Biol Pharm Bull (2012): 2148

Excess no predisposes mitochondrial succinate-cytochrome c reductase to produce hydroxyl radical
Authors: Chen J, Chen CL, Alevriadou BR, Zweier JL, Chen YR.
Journal: Biochim Biophys Acta (2011): 491

Postresuscitation syndrome: potential role of hydroxyl radical-induced endothelial cell damage
Authors: Huet O, Dupic L, Batteux F, Matar C, Conti M, Chereau C, Lemiale V, Harrois A, Mira JP, Vicaut E, Cariou A, Duranteau J.
Journal: Crit Care Med (2011): 1712

Endogenous 3,4-dihydroxyphenylalanine and dopaquinone modifications on protein tyrosine: links to mitochondrially derived oxidative stress via hydroxyl radical
Authors: Zhang X, Monroe ME, Chen B, Chin MH, Heibeck TH, Schepmoes AA, Yang F, Petritis BO, Camp DG, 2nd, Pounds JG, Jacobs JM, Smith DJ, Bigelow DJ, Smith RD, Qian WJ.
Journal: Mol Cell Proteomics (2010): 1199

Hyperglycemia induces apoptosis in rat liver through the increase of hydroxyl radical: new insights into the insulin effect
Authors: Frances DE, Ronco MT, Monti JA, Ingaramo PI, Pisani GB, Parody JP, Pellegrino JM, Sanz PM, Carrillo MC, Carnovale CE.
Journal: J Endocrinol (2010): 187

Acarbose reduces myocardial infarct size by preventing postprandial hyperglycemia and hydroxyl radical production and opening mitochondrial KATP channels in rabbits
Authors: Minatoguchi S, Zhang Z, Bao N, Kobayashi H, Yasuda S, Iwasa M, Sumi S, Kawamura I, Yamada Y, Nishigaki K, Takemura G, Fujiwara T, Fujiwara H.
Journal: J Cardiovasc Pharmacol (2009): 25

Endogenous activation of mitochondrial KATP channels protects human failing myocardium from hydroxyl radical-induced stunning
Authors: Maack C, Dabew ER, Hohl M, Schafers HJ, Bohm M.
Journal: Circ Res (2009): 811