活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体超氧化物活性检测试剂盒-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年4月1日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体超氧化物活性检测试剂盒价格 4245
产品规格

200 Tests

产品货号

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体超氧化物活性检测试剂盒

产品参数

Ex (nm)	513	Em (nm)	537
分子量	–	溶剂	–
存储条件	–

产品概述

Cell Meter 线粒体过氧化物活性检测试剂盒绿色荧光是美国AAT Bioquest生产的用于检测线粒体的试剂盒，线粒体是细胞超氧化物的主要生产者。低至中等水平的超氧化物的产生对于许多基本细胞过程的适当调节是至关重要的，包括基因表达，信号转导和肌肉适应耐力运动训练。不受控制的线粒体超氧化物产生可引发细胞氧化损伤，其导致多种疾病的发病机理，包括癌症，心血管疾病，神经退行性疾病和衰老。细胞内线粒体超氧化物的检测对于理解适当的细胞氧化还原调节及其失调对各种病理的影响非常重要。Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒使用我们独特的超氧化物指示剂MitoROS 520来量化活细胞中的超氧化物水平.MitoROS 520具有细胞渗透性，能够快速，有选择地检测线粒体中的超氧化物。它在与超氧化物反应时产生绿色荧光，并且在Ex / Em = 490 / 520nm处可以容易地读取所得荧光。Cell Meter 荧光线粒体超氧化物活性测定试剂盒提供灵敏的一步荧光测定法，用于检测活细胞中的线粒体超氧化物，孵育1小时。该试剂盒可用于流式细胞仪和荧光显微镜应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 线粒体过氧化物活性检测试剂盒。

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活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

适用仪器

流式细胞仪
Ex:	488 nm
Em：	530/30 nm
通道:	FITC 通道

荧光显微镜
Ex:	FITC 滤波片组
Em：	FITC 滤波片组
推荐孔板:	黑色透明底板
滤波片组:	FITC 滤波片组

实验方案

样本实验方案

概述

适用于荧光显微镜：

1.在生长培养基中制备细胞

2.用测试化合物处理细胞以诱导超氧化物

3.添加MitoROS™520工作解决方案

4.将细胞在37°C染色60分钟

5.监测Ex / Em = 490 / 530nm处的荧光增加

适用于流式细胞仪：

1.在生长培养基中制备细胞

2.用测试化合物处理细胞以诱导超氧化物

3.在37°C下染色细胞60分钟

4.用流式细胞仪监测荧光强度

操作步骤

对于荧光显微镜/ 96孔微孔板：

1.用10μL10X测试化合物（96孔板）或5μL5X测试化合物（384孔板）在培养基或所需缓冲液（例如PBS或HHBS）中处理细胞。对于对照孔（未处理的细胞），加入相应量的化合物缓冲液。

2.为了诱导超氧化物，将细胞在37℃下孵育一段所需的时间，避光。

注意：我们用5μM抗霉素A（AMA）在37°C处理RAW 264.7巨噬细胞2小时以诱导超氧化物。

3.将100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的MitoROS™520工作溶液加入到细胞板中。

4.将细胞在37°C孵育1小时，并使用荧光显微镜和FITC过滤器拍摄图像。

对于流式细胞仪：

1.根据需要处理细胞。

2.为了诱导超氧化物，将细胞在37℃下孵育一段所需的时间，避光。

注意我们用50μM抗霉素A（AMA）在37℃处理Jurkat细胞2小时以诱导超氧化物。

3.将1μL/ 0.5 mL MitoROS™520原液（500X）细胞加入细胞中。

4.将细胞在5％CO 2,37℃培养箱中孵育1小时，并使用FITC通道中的流式细胞仪监测荧光强度（Ex / Em = 488 / 530nm）。

参考文献

Comparison of the detrimental features of microglia and infiltrated macrophages in traumatic brain injury: A study using a hypnotic bromovalerylurea
Authors: Naoki Abe, Mohammed E Choudhury, Minori Watanabe, Shun Kawasaki, Tasuku Nishihara, Hajime Yano, Shirabe Matsumoto, Takehiro Kunieda, Yoshiaki Kumon, Toshihiro Yorozuya
Journal: Glia (2018)

相关产品

产品名称	货号
Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒适合于流式细胞仪	Cat#22970
Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒适合于酶标仪	Cat#22971

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒绿色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒绿色荧光价格 2823
产品规格

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活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒绿色荧光

产品参数

Ex (nm)	–	Em (nm)	–
分子量	–	溶剂	–
存储条件	–

产品概述

Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于ROS检测的试剂盒，Cell Meter检测试剂盒是一类用于检测细胞功能的系列工具，包括细胞活性、细胞毒性、细胞凋亡、细胞膜电位以及细胞周期等方面的指标。每种检测方案均能提供不同荧光颜色的检测方案。这些检测方案为从多角度研究细胞功能活动提供了一种十分有效的方法。活性氧分子（ROS）是氧正常代谢过程的固有副产品，在细胞信号及转导过程中扮演着重要的角色。然而，在氧化应激阶段，ROS水平显著增加。ROS的积聚导致细胞结构的重大破坏。氧化应激通常在心血管疾病，糖尿病，骨质疏松，中风，炎症以及许多神经变性疾病和癌症中被被发现。ROS的测定能帮助我们理解氧化应激如何调节改变的胞内途径。Amplite ROS荧光法检测试剂盒使用我们独特的ROS指示器在活细胞中测定ROS。Amplite ROS Green是细胞通透的，当它与ROS反应时能产生绿色的荧光。本试剂盒具备优化的即用配制，能与高通量筛选的液体控制设备相配。Amplite ROS荧光法检测试剂盒能提供敏感的、一步荧光实验来检测活细胞中胞内的ROS，仅需一小时的孵育。本实验能在96孔或者384孔微孔板中进行，可以实现自动化无需分离步骤。它的信号能轻松被荧光酶标仪或者荧光显微镜读取。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒。

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

适用仪器

荧光显微镜
Ex:	FITC 滤波片组
Em：	FITC 滤波片组
推荐孔板:	黑色透明底板

荧光酶标仪
Ex:	490 nm
Em：	520 nm
Cutoff：	515 nm
推荐孔板:	黑色透明底板
读取模式:	底部读取

实验方案

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞
2.添加Amplite ROS绿色工作溶液（96孔板100μL/孔或384孔板25μL/孔）
3.将细胞在37℃下染色60分钟
4.用测试化合物处理细胞以诱导ROS
5.在Ex / Em = 490/525 nm（截止= 515 nm）或带有FITC滤光片组的荧光显微镜下监测荧光增加（底部读取模式）

溶液配制

1.储备溶液配制

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1. 1Amplite ROS Green原液（500X）：
将40μLDMSO（组分C）加入到Amplite ROS Green（组分A）的小瓶中并充分混合以制备500X Amplite ROS Green原液。避光。注意：20μL的500X Amplite ROS Green原液足以容纳1个平板。

2.制备工作溶液

将20μL500XAmplite ROS Green储备溶液加入10 mL分析缓冲液（组分B）中，充分混合，制成Amplite ROS Green工作溶液。注意：此Amplite ROS Green工作溶液在室温下稳定至少2小时。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.将100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的Amplite ROS Green工作溶液加入细胞板中。

2.将细胞在5％CO₂,37℃培养箱中孵育1小时。

3.用所需缓冲液（如PBS或HHBS）中的20μL11X测试化合物（96孔板）或10μL6X测试化合物（384孔板）处理细胞。对于对照孔（未处理的细胞），加入相应量的化合物缓冲液。

4.为了诱导ROS，将细胞板在室温下或在5％CO₂,37℃培养箱中孵育至少15分钟或所需的一段时间（对于用1mM H₂O₂处理的Hela细胞30分钟）。

5.使用荧光酶标仪（底部读取模式）在Ex / Em = 490 / 525nm（截止= 515nm）监测荧光增加，或使用具有FITC滤光器组的荧光显微镜观察细胞。

数据分析

图1.同时检测RAW 264.7巨噬细胞中细胞内一氧化氮（NO）和总ROS的荧光图像。用Nitrixyte Orange（红色）和Amplite ROS Green（绿色）共染色细胞。然后用或不用20μg/ mL脂多糖（LPS），1mM L-精氨酸（L-Arg）和50μM绿脓素（Pyo）在37℃处理细胞16小时。使用配备有TRITC（Nitrixyte Orange，Red）和FITC（Amplite ROS Green，Green）过滤器组的荧光显微镜同时测量荧光信号。

参考文献

Tyrosine kinase inhibitor conjugated quantum dots for non-small cell lung cancer (NSCLC) treatment
Authors: Nishant S Kulkarni, Vineela Parvathaneni, Snehal K Shukla, Leonard Barasa, Jeanette C Perron, Sabesan Yoganathan, Aaron Muth, Vivek Gupta
Journal: European Journal of Pharmaceutical Sciences (2019)

Activation of p53-Mediated Apoptosis Pathway in HSC3 Cancer Cell Irradiated by Atmospheric DBD Oxygen Plasma
Authors: Nobuya Hayashi, Yukie Miyamaru, Reona Aijima, Yoshio Yamashita
Journal: IEEE Transactions on Plasma Science (2018): 1–7

Role of GPx3 in PPARγ-induced protection against COPD-associated oxidative stress
Authors: Aravind T Reddy, Sowmya P Lakshmi, Asoka Banno, Raju C Reddy
Journal: Free Radical Biology and Medicine (2018)

Topiramate exhibits anti-tumorigenic and metastatic effects in ovarian cancer cells
Authors: Guangxu Xu, Ziwei Fang, Leslie H Clark, Wenchuan Sun, Yajie Yin, Rong Zhang, Stephanie A Sullivan, Arthur-Quan Tran, Weimin Kong, Jiandong Wang
Journal: Am J Transl Res (2018): 1663–1676

Anti-proliferation effect of blue light-emitting diodes against antibiotic-resistant Helicobacter pylori
Authors: Jianwei Ma, Takahiro Hiratsuka, Tsuyoshi Etoh, Junko Akada, Hajime Fujishima, Norio Shiraishi, Yoshio Yamaoka, Masafumi Inomata
Journal: Journal of Gastroenterology and Hepatology (2017)

Notoginsenoside R1 attenuates high glucose-induced endothelial damage in rat retinal capillary endothelial cells by modulating the intracellular redox state
Authors: Chunlan Fan, Yuan Qiao, Minke Tang
Journal: Drug Design, Development and Therapy (2017): 3343

Good hydration and cell-biological performances of superparamagnetic calcium phosphate cement with concentration-dependent osteogenesis and angiogenesis induced by ferric iron
Authors: J Zhang, HS Shi, JQ Liu, T Yu, ZH Shen, JD Ye
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2015): 8782–8795

Topiramate Protects Pericytes from Glucotoxicity: Role for Mitochondrial CA VA in Cerebromicrovascular Disease in Diabetes
Authors: Ping Patrick, Tulin O Price, Ana L Diogo, Nader Sheibani, William A Banks, Gul N Shah
Journal: Journal of endocrinology and diabetes (2015)

Down-regulated peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) in lung epithelial cells promotes a PPARγ agonist-reversible proinflammatory phenotype in chronic obstructive pulmonary disease (COPD)
Authors: Sowmya P Lakshmi, Aravind T Reddy, Yingze Zhang, Frank C Sciurba, Rama K Mallampalli, Steven R Duncan, Raju C Reddy
Journal: Journal of Biological Chemistry (2014): 6383–6393

Superoxide dismutase as a target of clioquinol-induced neurotoxicity
Authors: Kazuyuki Kawamura, Yukiko Kuroda, Masako Sogo, Miki Fujimoto, Toshio Inui, Takao Mitsui
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2014): 181–185

相关产品

产品名称	货号
Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒深红色荧光	Cat#22903
Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒红色荧光	Cat#22901
Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒橙色荧光	Cat#22902

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒红色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒红色荧光价格 2823
产品规格

200 Tests

产品货号

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒红色荧光

产品参数

Ex (nm)	–	Em (nm)	–
分子量	–	溶剂	–
存储条件	–

产品概述

活性氧（ROS）是氧正常代谢的天然副产物，在细胞信号传导中起重要作用。但是，在与氧化应激相关的状态下，ROS水平会急剧增加。 ROS的积累会严重破坏细胞结构。氧化应激在心血管疾病，糖尿病，骨质疏松症，中风，炎性疾病，许多神经退行性疾病和癌症中的作用已得到公认。 ROS测量将有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Amplite 荧光ROS检测试剂盒使用我们独特的ROS指示剂来定量活细胞中的ROS。 Amplite ROS Red具有细胞渗透性。与ROS反应时会产生红色荧光。该试剂盒是一种优化的“混合和读取”测定形式。 Amplite 荧光ROS测定试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法，可在1-2小时的孵育中检测活细胞中的细胞内ROS。该测定可以以方便的96孔或384孔板形式进行，无需分离步骤即可轻松实现自动化。使用荧光酶标仪或荧光显微镜可以轻松读取其信号。它可用于定量ROS活性或筛选ROS抑制剂。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒。

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

适用仪器

荧光显微镜
Ex:	520 nm
Em：	605 nm
推荐孔板:	黑色透明底板
通道:	Texas Red 通道

荧光酶标仪
Ex:	520 nm
Em：	605 nm
Cutoff：	590 nm
推荐孔板:	黑色透明底板
读取模式:	底部读取

实验方案

样品实验方案

简要概述

在生长培养基中准备细胞
加入Amplite ROS Red工作溶液（对于96孔板为100 µL /孔，对于384孔板为25 µL /孔）
在37°C下孵育细胞1小时
用测试化合物处理细胞以诱导ROS
在Ex / Em = 520/605 nm（截止= 590 nm）或安装Ex / Em = 520/605 nm滤光片的荧光显微镜下检测荧光增加（底部读取模式）

溶液配制

储备溶液配制

1. Amplite ROS Red储备液（500X）：将40 µL DMSO（组分C）添加到Amplite ROS Red（组分A）的小瓶中，并充分混合以制成500X Amplite ROS Red储备液。避光。注意：20 µL 500X Amplite ROS Red储备液足以用于1个板。注意：如果将试管紧密密封并避免光照，可以将未使用的部分等分并在<-20°C下保存超过一个月。避免重复冻融循环。

工作溶液配制

将20 µL 500X Amplite ROS Red储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成Amplite ROS Red工作溶液。注意：此Amplite ROS Red工作溶液在室温下至少可稳定2小时。

实验步骤

1.将100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的Amplite ROS Red工作溶液添加到细胞板中。

2.将细胞在5％CO₂、37°C的培养箱中孵育一小时。

3.在所需的缓冲液（例如PBS或HHBS）中，用20µL 11X测试化合物（96孔板）或10 µL 6X测试化合物（384孔板）处理细胞。对于对照孔（未处理的细胞），添加相应量的化合物缓冲液。

4.要诱导ROS，请在室温下或在5％CO₂、37°C的培养箱中孵育细胞板至少15分钟（对于用1 mM H₂O₂处理的Hela细胞为30分钟）。

5.在Ex / Em = 520/605 nm（截止= 590 nm）处使用荧光酶标仪（底部读取模式）检测荧光的增加，或在Ex / Em = 520/605 nm滤光片组（Texas Red）下使用荧光显微镜观察细胞）。

参考文献

Anti-proliferation effect of blue light-emitting diodes against antibiotic-resistant Helicobacter pylori
Authors: Ma, Jianwei and Hiratsuka, Takahiro and Etoh, Tsuyoshi and Akada, Junko and Fujishima, Hajime and Shiraishi, Norio and Yamaoka, Yoshio and Inomata, Masafumi
Journal: Journal of Gastroenterology and Hepatology (2017)

Notoginsenoside R1 attenuates high glucose-induced endothelial damage in rat retinal capillary endothelial cells by modulating the intracellular redox state
Authors: Fan, Chunlan and Qiao, Yuan and Tang, Minke
Journal: Drug Design, Development and Therapy (2017): 3343

Good hydration and cell-biological performances of superparamagnetic calcium phosphate cement with concentration-dependent osteogenesis and angiogenesis induced by ferric iron
Authors: Zhang, J and Shi, HS and Liu, JQ and Yu, T and Shen, ZH and Ye, JD
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2015): 8782–8795

Topiramate Protects Pericytes from Glucotoxicity: Role for Mitochondrial CA VA in Cerebromicrovascular Disease in Diabetes
Authors: Patrick, Ping and Price, Tulin O and Diogo, Ana L and Sheibani, Nader and Banks, William A and Shah, Gul N
Journal: Journal of endocrinology and diabetes (2015)

Down-regulated peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) in lung epithelial cells promotes a PPARγ agonist-reversible proinflammatory phenotype in chronic obstructive pulmonary disease (COPD)
Authors: Lakshmi, Sowmya P and Reddy, Aravind T and Zhang, Yingze and Sciurba, Frank C and Mallampalli, Rama K and Duncan, Steven R and Reddy, Raju C
Journal: Journal of Biological Chemistry (2014): 6383–6393

Superoxide dismutase as a target of clioquinol-induced neurotoxicity
Authors: Kawamura, Kazuyuki and Kuroda, Yukiko and Sogo, Masako and Fujimoto, Miki and Inui, Toshio and Mitsui, Takao
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2014): 181–185

Xanthine oxidase inhibition by febuxostat attenuates experimental atherosclerosis in mice
Authors: Nomura, Johji and Busso, Nathalie and Ives, Annette and Matsui, Chieko and Tsujimoto, Syunsuke and Shirakura, Takashi and Tamura, Mizuho and Kobayashi, Tsunefumi and So, Alex and er and Yamanaka, Yoshihiro
Journal: Scientific reports (2014): 4554

High glucose-induced mitochondrial respiration and reactive oxygen species in mouse cerebral pericytes is reversed by pharmacological inhibition of mitochondrial carbonic anhydrases: implications for cerebral microvascular disease in diabetes
Authors: Shah, Gul N and Morofuji, Yoichi and Banks, William A and Price, Tulin O
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2013): 354–358

Automatic flow injection based methodologies for determination of scavenging capacity against biologically relevant reactive species of oxygen and nitrogen
Authors: Magalhaes LM, Lucio M, Segundo MA, Reis S, Lima JL.
Journal: Talanta (2009): 1219

Diabetes and the impairment of reproductive function: possible role of mitochondria and reactive oxygen species
Authors: Amaral S, Oliveira PJ, Ramalho-Santos J.
Journal: Curr Diabetes Rev (2008): 46

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒橙色荧光-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年3月31日由上海金畔生物科技有限公司

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒橙色荧光价格 2823
产品规格

200 Tests

产品货号

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒橙色荧光

产品参数

Ex (nm)	–	Em (nm)	–
分子量	–	溶剂	–
存储条件	–

产品概述

活性氧（ROS）是氧正常代谢的天然副产物，在细胞信号传导中起重要作用。 ROS的积累会严重破坏细胞结构。氧化应激在心血管疾病，糖尿病，骨质疏松症，中风，炎性疾病，许多神经退行性疾病和癌症中的作用已得到公认。 ROS测量将有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 荧光细胞内总ROS活性测定试剂盒使用我们专有的ROS Brite 570指示剂来定量活细胞中的ROS。与ROS反应后，可渗透细胞且无荧光的ROS Brite 570表现出很强的荧光信号。 ROS Brite 570指示剂位于细胞质中。 ROS Brite 570指示剂的荧光信号可以通过荧光显微镜，高通量筛选，荧光酶标仪或流式细胞仪进行检测。 Cell Meter 荧光细胞内总ROS活性测定试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法，可在孵育1小时内检测活细胞中的细胞内ROS（尤其是超氧化物和羟基自由基）。可以使用荧光酶标仪或带有TRITC滤光片的荧光显微镜以方便的96孔或384孔板形式进行检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒。

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

适用仪器

流式细胞仪
Ex:	488 nm or 532 nm
Em：	575/26 nm
通道:	PE 通道

荧光显微镜
Ex:	TRITC 滤波片组
Em：	TRITC 滤波片组
推荐孔板:	黑色透明底板

荧光酶标仪
Ex:	540 nm
Em：	570 nm
Cutoff：	550 nm
推荐孔板:	黑色透明底板
读取模式：	底读模式

实验方案

样品实验方案

简要概述

（适用于荧光显微镜、荧光酶标仪）

1.在生长培养基中准备细胞

2.用测试化合物处理细胞以诱导ROS

3.添加ROS Brite 570工作溶液（对于96孔板为100 µL /孔，对于384孔板为25 µL /孔）

4.将细胞在37°C下染色30-60分钟

5.在Ex / Em = 540/570 nm（截止= 550 nm）或配备TRITC滤光片的荧光显微镜下检测荧光的增加（底部读取模式）

（流式细胞仪）

1.在生长培养基中准备细胞
2.用测试化合物处理细胞以诱导ROS
3.将ROS Brite 570与细胞一起孵育30-60分钟
4.使用带有FL2通道的流式细胞仪检测荧光强度

溶液配制

储备溶液配制

1. ROS Brite 570储备溶液（500X）：将40 µL DMSO（组分C）添加到ROS Brite 570（组分A）小瓶中，并充分混合以制成500X ROS Brite 570储备液，避光。注意：20 µL 500X ROS Brite 570储备溶液足以用于1个板。对于流式细胞仪，为方便起见，可以将5倍ROS Brite 570储备液稀释5倍至DMSO中的100倍。为了存放，请将管子紧紧密封。

工作溶液配制

将20 µL的500X ROS Brite 570储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成ROS Brite 570工作溶液。注意：此ROS Brite 570工作溶液在室温下至少可稳定2小时。

实验步骤

1.针对荧光显微镜和荧光酶标仪：

1.1在所需的缓冲液（例如PBS或HHBS）中，用10 µL 10X测试化合物（96孔板）或5 µL 5X测试化合物（384孔板）处理细胞。对于对照孔（未处理的细胞），添加相应量的化合物缓冲液。

1.2要诱导ROS，请在室温下或在5％CO₂、37°C的培养箱中孵育细胞板（例如：用100 µM氢过氧化叔丁基（TBHP）处理Hela细胞30分钟）。

1.3将100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的ROS Brite 570工作溶液添加到细胞板中。

1.4将细胞在5％CO₂、37°C的培养箱中孵育30分钟至60分钟。

1.5使用荧光酶标仪（Ext / Em = 540/570 nm（截止= 550nm））检测荧光的增加，或使用带有TRITC滤光片组的荧光显微镜检测细胞。

2.针对流式细胞仪：

2.1准备从5×10⁵到1×10⁶细胞/ mL的密度的细胞。注意：应根据个体情况评估每种细胞系，以确定诱导凋亡的细胞密度。

2.2在所需的缓冲液（例如PBS或HHBS）中用测试化合物处理细胞。对于对照孔（未处理的细胞），添加相应量的化合物缓冲液。

2.3要诱导ROS，请在室温下或在5％CO₂、37°C的培养箱中孵育细胞板至少30分钟（如对于用100 µM氢过氧化叔丁基（TBHP）处理的Hela细胞，则需30分钟））。

2.4向细胞培养基中加入1 µL / mL的500X ROS Brite 570储备液细胞或5 µL / mL的100X ROS Brite 570储备液细胞。

注：1µL/mL 表示每毫升细胞培养基中添加的ROS Brite 570储备液体积为1微升。这个浓度是相对于细胞培养基的总体积而言的，因此也可以说是在每升细胞培养基中添加1毫升ROS Brite 570储备液。这种浓度通常用于细胞实验中，以使得实验物质与细胞有良好的相互作用，同时不会对细胞造成太大的毒性影响。该浓度仅为初学者进行指导，请根据自己的实际情况，调整浓度，优化自己的实验。

2.5将细胞在5％CO₂、37°C的培养箱中孵育30至60分钟。

2.6使用带有FL2通道的流式细胞仪检测荧光强度。

参考文献

Good hydration and cell-biological performances of superparamagnetic calcium phosphate cement with concentration-dependent osteogenesis and angiogenesis induced by ferric iron
Authors: Zhang, J and Shi, HS and Liu, JQ and Yu, T and Shen, ZH and Ye, JD
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2015): 8782–8795

Down-regulated peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) in lung epithelial cells promotes a PPARγ agonist-reversible proinflammatory phenotype in chronic obstructive pulmonary disease (COPD)
Authors: Lakshmi, Sowmya P and Reddy, Aravind T and Zhang, Yingze and Sciurba, Frank C and Mallampalli, Rama K and Duncan, Steven R and Reddy, Raju C
Journal: Journal of Biological Chemistry (2014): 6383–6393

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒深红色荧光-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年3月31日由上海金畔生物科技有限公司

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活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒深红色荧光价格 2823
产品规格

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产品货号

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒深红色荧光

产品参数

Ex (nm)	–	Em (nm)	–
分子量	–	溶剂	–
存储条件	–

产品概述

Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测ROS的试剂盒，活性氧（ROS）是氧正常代谢的天然副产物，在细胞信号传导中起重要作用。ROS的积累会严重破坏细胞结构。氧化应激在心血管疾病，糖尿病，骨质疏松症，中风，炎性疾病，许多神经退行性疾病和癌症中的作用已得到公认。ROS测量将有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。Cell Meter 荧光细胞内总ROS活性测定试剂盒使用我们专有的ROS Brite 670探针来定量活细胞中的ROS。与ROS反应后，可渗透细胞且无荧光的ROS Brite 670表现出很强的荧光信号。ROS Brite 670探针位于细胞质中。ROS Brite 670探针的荧光信号可以通过荧光显微镜，高含量成像，荧光酶标仪或流式细胞仪进行测量。Cell Meter 荧光细胞内总ROS活性测定试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法，可在孵育1小时内检测活细胞中的细胞内ROS（尤其是超氧化物和羟基自由基）。可以使用荧光酶标仪或带有Cy5滤光片的荧光显微镜以方便的96孔或384孔板进行检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒。

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

适用仪器

流式细胞仪
Ex:	640 nm
Em：	660/20 nm
通道:	APC 通道

荧光显微镜
Ex:	Cy5 滤波片组
Em：	Cy5 滤波片组
推荐孔板:	黑色透明底板

荧光酶标仪
Ex:	650 nm
Em：	675 nm
Cutoff：	665 nm
推荐孔板:	黑色透明底板
读取模式：	底读模式

实验方案

样品实验方案

简要概述

适用于荧光酶标仪、荧光显微镜

1.在生长培养基中制备细胞
2.用测试化合物处理细胞以诱导ROS
3.添加ROS Brite 670工作溶液（100μL/孔用于96孔板或25μL/孔用于384孔板）
4.将细胞在37℃下染色30-60分钟
5.在Ex / Em = 650/675 nm（截止= 665 nm）或使用TRITC滤光片组的荧光显微镜下检测荧光（底部读取模式）

适用于流式细胞仪

1.在生长培养基中制备细胞
2.用测试化合物处理细胞以诱导ROS
3.将ROS Brite 670与细胞一起孵育30-60分钟
4.使用具有FL4通道的流式细胞仪监测荧光强度

溶液配制

1.储备溶液配制

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1. ROS Brite 670原液（500X）：
将40μLDMSO（组分C）加入到ROS Brite 670（组分A）的小瓶中并充分混合以制备500X ROS Brite 670储备溶液。避光。注意：20μL的500X ROS Brite 670原液足以容纳1个平板。对于流式细胞仪，为方便起见，可将5倍ROS Brite 670储备液稀释5倍至DMSO中。为了存放，请将管子紧紧密封。

2.工作溶液配制

将20μL500XROS Brite 670储备溶液加入10 mL分析缓冲液（组分B）中，充分混合，制成ROS Brite 670工作溶液。注意：此ROS Brite 670工作溶液在室温下稳定至少2小时。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

（适用于荧光酶标仪、荧光显微镜）

1.用10μL10X测试化合物（96孔板）或5μL5X测试化合物（384孔板）在所需缓冲液（如PBS或HHBS）中处理细胞。对于对照孔（未处理的细胞），加入相应量的化合物缓冲液。

2.为了诱导ROS，将细胞板在室温下或在5％CO₂,37℃培养箱中孵育一段时间（例如：用100μM叔丁基过氧化氢（TBHP）处理Hela细胞30分钟）。

3.向细胞板中加入100μL/孔（96孔板）或25μL/孔（384孔板）的ROS Brite 670工作溶液。

4.将细胞在5％CO₂,37℃培养箱中孵育30分钟至60分钟。

5.使用荧光酶标仪（底部读取模式）在Ex / Em = 650 / 675nm（截止值= 665nm）检测荧光增加，或使用具有TRITC滤光片组的荧光显微镜观察细胞。

（适用于流式细胞仪）

1.以5×10⁵至1×10⁶个细胞/ mL的密度制备细胞。注意：应根据个体评估每个细胞系，以确定诱导细胞凋亡的细胞密度。

2.用所需缓冲液（如PBS或HHBS）处理细胞。对于对照孔（未处理的细胞），加入相应量的化合物缓冲液。

3.为诱导ROS，将细胞板在室温或5％CO₂,37°C培养箱中孵育至少30分钟（用100μM叔丁基过氧化氢（TBHP）处理的Hela细胞30分钟）。

4.将1μL/ mL细胞的500X ROS Brite 670储备溶液或5μL/ mL细胞的100X ROS Brite 670储备溶液加入细胞培养基中。

注：1µL/mL 表示每毫升细胞培养基中添加的ROS Brite 670储备液体积为1微升。这个浓度是相对于细胞培养基的总体积而言的，因此也可以说是在每升细胞培养基中添加1毫升ROS Brite 670储备液。这种浓度通常用于细胞实验中，以使得实验物质与细胞有良好的相互作用，同时不会对细胞造成太大的毒性影响。该浓度仅为初学者进行指导，请根据自己的实际情况，调整浓度，优化自己的实验。

5.将细胞在5％CO₂,37℃培养箱中孵育30至60分钟。

6.使用具有FL4通道的流式细胞仪检测荧光强度。

数据分析

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒深红色荧光

图1.使用Cell Meter 荧光细胞内总ROS活性测定试剂盒检测HeLa细胞中的ROS。将HeLa细胞以15,000个细胞/90μL/孔接种在Costar黑色孔板中过夜。未处理细胞（对照）或用1mM H₂O₂或100μM叔丁基过氧化氢（TBHP）在37℃处理30分钟。加入ROS Brite 670工作溶液（100μL/孔）并在5％CO₂,37℃培养箱中温育1小时。使用FlexStation（Molecular Devices）在底部读取模式下在Ex / Em = 650 / 675nm（截止值= 665nm）下检测荧光信号。

参考文献

Anti-proliferation effect of blue light-emitting diodes against antibiotic-resistant Helicobacter pylori
Authors: Jianwei Ma, Takahiro Hiratsuka, Tsuyoshi Etoh, Junko Akada, Hajime Fujishima, Norio Shiraishi, Yoshio Yamaoka, Masafumi Inomata
Journal: Journal of Gastroenterology and Hepatology (2017)

Notoginsenoside R1 attenuates high glucose-induced endothelial damage in rat retinal capillary endothelial cells by modulating the intracellular redox state
Authors: Chunlan Fan, Yuan Qiao, Minke Tang
Journal: Drug Design, Development and Therapy (2017): 3343

Good hydration and cell-biological performances of superparamagnetic calcium phosphate cement with concentration-dependent osteogenesis and angiogenesis induced by ferric iron
Authors: J Zhang, HS Shi, JQ Liu, T Yu, ZH Shen, JD Ye
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2015): 8782–8795

Topiramate Protects Pericytes from Glucotoxicity: Role for Mitochondrial CA VA in Cerebromicrovascular Disease in Diabetes
Authors: Ping Patrick, Tulin O Price, Ana L Diogo, Nader Sheibani, William A Banks, Gul N Shah
Journal: Journal of endocrinology and diabetes (2015)

Down-regulated peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) in lung epithelial cells promotes a PPARγ agonist-reversible proinflammatory phenotype in chronic obstructive pulmonary disease (COPD)
Authors: Sowmya P Lakshmi, Aravind T Reddy, Yingze Zhang, Frank C Sciurba, Rama K Mallampalli, Steven R Duncan, Raju C Reddy
Journal: Journal of Biological Chemistry (2014): 6383–6393

Superoxide dismutase as a target of clioquinol-induced neurotoxicity
Authors: Kazuyuki Kawamura, Yukiko Kuroda, Masako Sogo, Miki Fujimoto, Toshio Inui, Takao Mitsui
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2014): 181–185

Xanthine oxidase inhibition by febuxostat attenuates experimental atherosclerosis in mice
Authors: Johji Nomura, Nathalie Busso, Annette Ives, Chieko Matsui, Syunsuke Tsujimoto, Takashi Shirakura, Mizuho Tamura, Tsunefumi Kobayashi, Alexander So, Yoshihiro Yamanaka
Journal: Scientific reports (2014): 4554

High glucose-induced mitochondrial respiration and reactive oxygen species in mouse cerebral pericytes is reversed by pharmacological inhibition of mitochondrial carbonic anhydrases: implications for cerebral microvascular disease in diabetes
Authors: Gul N Shah, Yoichi Morofuji, William A Banks, Tulin O Price
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2013): 354–358

Measure intracellular reactive oxygen species using far-red fluorescence
Authors: Hoang Ha
Journal: Unknown

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产品名称	货号
Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒绿色荧光	Cat#22900
Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒红色荧光	Cat#22901
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活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒适合于流式细胞仪-AAT Bioquest荧光染料

发表于2024年3月31日由上海金畔生物科技有限公司

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活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒适合于流式细胞仪价格 4245
产品规格

100 Tests

产品货号

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒适合于流式细胞仪

产品参数

Ex (nm)	–	Em (nm)	–
分子量	–	溶剂	–
存储条件	–

产品概述

活性氧（ROS）是氧正常代谢的天然副产物，在细胞信号传导中起重要作用。但是，在与氧化应激相关的状态下，ROS水平会急剧增加。 ROS的积累会严重破坏细胞结构。氧化应激在心血管疾病，糖尿病，骨质疏松症，中风，炎性疾病，许多神经退行性疾病和癌症中的作用已得到公认。 ROS检测将有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒使用我们独特的Amplite ROS Green荧光定量活细胞中的ROS，Amplite ROS Green具有细胞渗透性。与ROS反应时会生成绿色荧光。 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法，可在培养一小时后检测活细胞中的细胞内ROS。该试剂盒针对流式细胞仪应用进行了优化，其信号可以通过Ex / Em = 490/520 nm（FL1通道）进行检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒。

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

适用仪器

流式细胞仪
Ex:	488 nm
Em：	530/30 nm
通道:	FITC 通道

实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备密度为0.5-1×10⁶细胞/ mL的细胞
2.在0.5 mL细胞悬液中加入1 µL 500X Amplite ROS Green
3.在37℃下将细胞染色1小时
4.处理细胞以诱导ROS
5.使用带有FL1通道的流式细胞仪分析细胞（Ex / Em = 490/520 nm）

溶液配制

1.储备溶液配制

除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。

Amplite ROS绿色储备溶液（500X）：将100 µL DMSO（组分C）添加到Amplite ROS Green（组分A）的小瓶中，并充分混合以制成500X Amplite ROS Green储备液。避光。注意：要存放，请密封管。有关细胞样品制备的指南，请点击查看。

操作步骤

1.对于每个样品，以0.5×10⁵至1×10⁶细胞/ mL的密度在0.5 mL测定缓冲液（组分B）或自备缓冲液中制备细胞。注意：应单独评估每个细胞系，以确定诱导ROS的细胞密度。

2.将1 µL 500X Amplite ROS Green储备溶液加入0.5 mL细胞悬液中。

3.在37ºC下孵育1小时。注意：对于贴壁细胞，用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整，并在与Amplite ROS Green孵育之前用含血清的培养基洗涤细胞一次。合适的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和测试化合物，优化每个实验的孵育时间。

4.通过在所需的缓冲液（例如PBS或HBSS）中添加50 µL 11X测试化合物来处理细胞。对于对照孔（未处的细胞），添加相应量的缓冲液。

5.将细胞在37ºC下孵育，以诱导ROS（避光）。注意：我们在37℃下用100 µM TBHP（氢过氧化叔丁基）处理Jurkat细胞30分钟，以诱导ROS。有关详细信息，请参见图1。

6.使用具有FL1通道（Ex / Em = 490/520 nm）的流式细胞仪检测荧光强度。

图示

活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒适合于流式细胞仪

图1.使用Cell Meter 荧光法细胞内总ROS活性测定试剂盒在TBHP处理后检测Jurkat细胞中的细胞内ROS。将细胞与Amplite ROS Green在37°C孵育1小时。然后将细胞在不使用（蓝色）或（红色）100 µM TBHP的情况下在37°C下处理30分钟。使用流式细胞仪（BD FACSCalibur）在FL1通道处检测荧光信号。

参考文献

Good hydration and cell-biological performances of superparamagnetic calcium phosphate cement with concentration-dependent osteogenesis and angiogenesis induced by ferric iron
Authors: Zhang, J and Shi, HS and Liu, JQ and Yu, T and Shen, ZH and Ye, JD
Journal: Journal of Materials Chemistry B (2015): 8782–8795

Down-regulated peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) in lung epithelial cells promotes a PPARγ agonist-reversible proinflammatory phenotype in chronic obstructive pulmonary disease (COPD)
Authors: Lakshmi, Sowmya P and Reddy, Aravind T and Zhang, Yingze and Sciurba, Frank C and Mallampalli, Rama K and Duncan, Steven R and Reddy, Raju C
Journal: Journal of Biological Chemistry (2014): 6383–6393

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Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒绿色荧光	Cat#22900
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活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体超氧化物检测试剂盒适合于流式细胞仪-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体超氧化物检测试剂盒适合于流式细胞仪

产品参数

Ex (nm)	–	Em (nm)	–
分子量	–	溶剂	–
存储条件	–

产品概述

线粒体是细胞超氧化物的主要生产者。低中等水平的超氧化物的产生对于许多重要细胞过程的适当调节至关重要，这些过程包括基因表达，信号转导和肌肉对耐力运动训练的适应性。不受控制的线粒体超氧化物的产生会触发细胞氧化损伤，从而导致多种疾病的发病机理，包括癌症，心血管疾病，神经退行性疾病和衰老。Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒使用我们独特的超氧化物指示剂来定量活细胞中的超氧化物水平。MitoROS 580具有活细胞渗透性，可以快速，选择性地靶向线粒体中的超氧化物。与超氧化物反应时会生成红色荧光。Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法，可在培养一小时后检测活细胞中的线粒体超氧化物。该试剂盒针对流式细胞仪应用进行了优化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒。

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

适用仪器

流式细胞仪
Ex:	488 nm
Em：	575/26 nm
通道:	PE 通道

实验方案

样品实验方案

简要概述

准备细胞密度为0.5-1×10 ⁶细胞/ mL
用测试化合物处理细胞以诱导超氧化物
将1 µL 500X MitoROS 580加到0.5 mL细胞悬液中
将细胞在37°C染色1小时
使用带有FL2通道的流式细胞仪检测荧光强度

溶液配制

储备溶液配制

1. MitoROS 580储备溶液（500X）：将100 µL DMSO（组分C）添加到MitoROS 580（组分A）小瓶中，并充分混合以制成500X MitoROS 580储备溶液。避光。注意：请密闭存放。

实验步骤

对于每个样品，在自备的0.5 mL生长培养基或缓冲液中制备细胞，密度为5×10 ⁵至1×10 ⁶个细胞/ mL。注意：应单独评估每种细胞系，以确定超氧化物诱导的细胞密度。
在分析缓冲液（组分B）或自备的缓冲液（例如PBS）中用25 µL 20X测试化合物处理细胞以诱导超氧化物。对于对照细胞（未处理的细胞），添加相应量的化合物缓冲液。
将细胞在37°C孵育至少30分钟。注意：将 Jurkat细胞在37°C下用50 µM抗霉素A（AMA）处理30分钟以诱导超氧化物。有关详细信息，请参见图1。
将0.5 µL细胞悬浮液中加入1 µL 500X MitoROS 580储备液。
在37°C下孵育1小时。注意：对于贴壁细胞，用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整，并在MitoROS 580孵育之前用含血清的培养基洗涤一次。适当的孵育时间取决于单个细胞的类型和测试使用的化合物。
使用带有FL2通道的流式细胞仪（Ex / Em = 488/590 nm）检测荧光强度。

图示

图1.使用Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒检测Jurkat细胞中的超氧化物。AMA处理（红色）：将细胞在37°C下用50 µM抗霉素A（AMA）处理30分钟，然后与MitoROS 580孵育1小时。对照（蓝色）：在未经AMA处理的情况下，将细胞与MitoROS 580在37°C孵育1小时。使用流式细胞仪（BD FACSCalibur）在FL2通道检测上荧光信号。

参考文献

Concentration-dependent effect of sodium hypochlorite on stem cells of apical papilla survival and differentiation
Authors: Martin DE, De Almeida JF, Henry MA, Khaing ZZ, Schmidt CE, Teixeira FB, Diogenes A.
Journal: J Endod (2014): 51

Effect of hypochlorite oxidation on cholinesterase-inhibition assay of acetonitrile extracts from fruits and vegetables for monitoring traces of organophosphate pesticides
Authors: Kitamura K, Maruyama K, Hamano S, Kishi T, Kawakami T, Takahashi Y, Onodera S.
Journal: J Toxicol Sci (2014): 71

A simple yet effective chromogenic reagent for the rapid estimation of bromate and hypochlorite in drinking water
Authors: Zhang J, Yang X.
Journal: Analyst (2013): 434

Analysis of the germination kinetics of individual Bacillus subtilis spores treated with hydrogen peroxide or sodium hypochlorite
Authors: Setlow B, Yu J, Li YQ, Setlow P.
Journal: Lett Appl Microbiol (2013): 259

Comparative antimicrobial activities of aerosolized sodium hypochlorite, chlorine dioxide, and electrochemically activated solutions evaluated using a novel standardized assay
Authors: Thorn RM, Robinson GM, Reynolds DM.
Journal: Antimicrob Agents Chemother (2013): 2216

Effect of hypochlorite-based disinfectants on inactivation of murine norovirus and attempt to eliminate or prevent infection in mice by addition to drinking water
Authors: Takimoto K, Taharaguchi M, Sakai K, Takagi H, Tohya Y, Yamada YK.
Journal: Exp Anim (2013): 237

Green synthesis of carbon dots with down- and up-conversion fluorescent properties for sensitive detection of hypochlorite with a dual-readout assay
Authors: Yin B, Deng J, Peng X, Long Q, Zhao J, Lu Q, Chen Q, Li H, Tang H, Zhang Y, Yao S.
Journal: Analyst (2013): 6551

Use of pyrogallol red and pyranine as probes to evaluate antioxidant capacities towards hypochlorite
Authors: Perez-Cruz F, Cortes C, Atala E, Bohle P, Valenzuela F, Olea-Azar C, Speisky H, Aspee A, Lissi E, Lopez-Alarcon C, Bridi R.
Journal: Molecules (2013): 1638

A novel flow-injection analysis system for evaluation of antioxidants by using sodium dichloroisocyanurate as a source of hypochlorite anion
Authors: Ichiba H, Hanami K, Yagasaki K, Tanaka M, Ito H, Fukushima T.
Journal: Drug Discov Ther (2012): 44

Colorimetric determination of hypochlorite with unmodified gold nanoparticles through the oxidation of a stabilizer thiol compound
Authors: Zhang J, Wang X, Yang X.
Journal: Analyst (2012): 2806

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产品参数

Ex (nm)	–	Em (nm)	–
分子量	–	溶剂	–
存储条件	–

产品概述

线粒体是细胞超氧化物的主要生产者。低中等水平的超氧化物的产生对于许多重要细胞过程的适当调节至关重要，这些过程包括基因表达，信号转导和肌肉对耐力运动训练的适应性。不受控制的线粒体超氧化物的产生会触发细胞氧化损伤，从而导致多种疾病的发病机理，包括癌症，心血管疾病，神经退行性疾病和衰老。Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒使用我们独特的超氧化物指示剂来定量活细胞中的超氧化物水平。MitoROS 580具有活细胞渗透性，可以快速，选择性地靶向线粒体中的超氧化物。与超氧化物反应时会生成红色荧光。Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒提供了一种灵敏的一步荧光测定法，可在培养一小时后检测活细胞中的线粒体超氧化物。该试剂盒可用于荧光酶标仪和荧光显微镜应用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的Cell Meter 荧光法线粒体过氧化物检测试剂盒。

活性氧（ROS）篇：包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

适用仪器

荧光酶标仪
Ex:	540 nm
Em：	590 nm
Cutoff：	570 nm
推荐孔板:	黑色透明底板
读取模式:	底部读取

实验方案

样品实验方案

简要概述

在生长培养基中准备细胞
用测试化合物处理细胞以诱导超氧化物
添加MitoROS 580工作溶液
在37°C下将细胞染色30-60分钟
检测Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）处的荧光增加（底部读取模式）或使用配备TRITC滤光片的荧光显微镜

溶液配制

储备溶液配制

MitoROS 580储备溶液（500X）：将50 µL DMSO（组分C）添加到MitoROS 580（组分A）的小瓶中，并充分混合以制成500X MitoROS 580储备液，避光。注意：25 µL 500X MitoROS 580储备溶液足以用于1个板。为了存放，请将管子紧紧密封。

工作溶液配制

将25μL的500X MitoROS 580储备溶液添加到10 mL的测定缓冲液（组分B）中，并充分混合以制成MitoROS 580工作溶液。注意：此MitoROS 580工作溶液在室温下至少可稳定2小时。

实验步骤

在所需的缓冲液（例如PBS或HHBS）中，用10 µL 10X测试化合物（96孔板）或5 µL 5X测试化合物（384孔板）处理细胞。对于对照孔（未处理的细胞），添加相应量的化合物缓冲液。
为了诱导超氧化物，将细胞板在37°C下孵育所需的时间，避光。注意：我们在37°C下用50 µM抗霉素A（AMA）处理HeLa细胞30分钟，以诱导超氧化物。有关详细信息，请参见图1。
将100 µL /孔（96孔板）或25 µL /孔（384孔板）的MitoROS 580工作溶液添加到细胞板中。
将细胞在37°C下孵育30至60分钟。
使用荧光酶标仪（Ext / Em = 540/590 nm（Cutoff = 570 m））检测荧光强度，或者使用带有TRITC滤光片的荧光显微镜观察细胞。

图示

图1.使用Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒（Cat＃22971）在HeLa细胞中测量超氧化物的荧光图像。将100,000个细胞/孔/ 100 µL的HeLa细胞在96孔黑色板中接种过夜。 AMA处理：将细胞在37°C下用50 µM抗霉素A（AMA）处理30分钟，然后与MitoROS 580孵育1小时。未经处理的对照：HeLa细胞与MitoROS 580在37°C下孵育1小时，未经AMA处理。使用带有TRITC滤光片的荧光显微镜检测荧光信号。

图2.使用Cell Meter 荧光细胞内超氧化物检测试剂盒（Cat＃22971）检测HeLa细胞中的细胞内超氧化物。将100,000个细胞/孔/ 100 µL的HeLa细胞在96孔黑色板中接种过夜。将细胞与50 µM绿脓素（Pyo）孵育； 50 µM抗霉素A（AMA）或未经处理（对照）在37ºC下放置30分钟。然后将细胞与MitoROS 580在37℃孵育1小时。使用CLARIOstar酶标仪（BMG Labtech）以底部读取模式在Ex / Em = 540/590 nm（截止= 570 nm）下检测荧光信号。

参考文献

A simple yet effective chromogenic reagent for the rapid estimation of bromate and hypochlorite in drinking water
Authors: Zhang J, Yang X.
Journal: Analyst (2013): 434

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标签归档：活性氧

活性氧 Cell Meter 荧光法线粒体超氧化物活性检测试剂盒-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 荧光法胞内总ROS检测试剂盒绿色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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