如何选择合适的植物凝胶?

植物凝胶是植物组织培养过程中用来凝固培养基的物质,其自身一般不具有营养,作为固体支持物存在,一般在选用时考虑三个方面:1、使用方便;2、对培养植物不产生不利影响,不与培养基中其他组分例如抗生素发生反应;3、具有较好的透明度。

目前比较常用的植物凝胶主要包括:琼脂(Agar)、结冷胶(Gellan Gum)、卡拉胶(Carrageenan)等。琼脂是一种天然产物,主要来自红藻科的两个属:石花菜属(Gellidium)和江篱属(Gracillaria)。石花菜属本身小且生长缓慢,很难获得,不经济,但其来源的琼脂比江篱属来源的具有更高的凝胶强度。由于琼脂来自天然藻类,所以产品品质容易受到原材料由于生长环境变化导致的影响,最终产生批间差异。不过上海金畔生物科技有限公司代理的Phytotech Labs做为具有20多年生产经验的植物组培产品供应商,在每批琼脂出厂时,会进行清晰度、凝胶强度、植物生物生长以及产品其他理化性质的评估,以确保产品的稳定性。卡拉胶同样来源于藻类,但比琼脂有更好的透明度。结冷胶是新型的凝胶,来源于微生物发酵产物,批间差更加稳定,而且具有用量小,透明度更高的有点。

如何选择合适的植物凝胶?

上海金畔生物科技有限公司代理的专业植物培养基品牌Phytotech Labs,可以为广大植物客户提供以下不同型号的植物凝胶:

A111

琼脂(江蓠来源)

~1150g/cm2

6-10g/L

通用型琼脂,价格更优惠

A296

琼脂(石花菜来源)

~900 g/cm2

6-10g/L

普通植物研究,微生物研究;石花菜生长缓慢很难获得,不经济,所以价格较A111高

A175

高纯度琼脂

~1100 g/cm2

6-10g/L

用于胚胎发生等关键研究的高纯度琼脂;可替代A111,但比A111更纯净

A133

琼脂结冷胶混合物

TBD

3.5-5 g/L

用于工业化放大培养

C257

卡拉胶

TBD

6-10g/L

用于原生质体培养

C2000

卡拉胶(高透明度)

>800 g/cm2

6-10g/L

用于原生质体培养

G434

结冷胶

>800 g/cm2

2-4 g/L

高透明度

G3251

结冷胶

400-700 g/cm2

2-4 g/L

G434升级款

使用注意事项:

l  G434与氨基酸糖苷类抗生素(特别是卡那霉素和潮霉素B)一起使用对植物生长有影响。如遇此类情况,建议降低抗生素的使用浓度

l  结冷胶的溶解要求比较特殊,一是温度,结冷胶不溶于冷水,一定要是加入热水搅拌溶解二是培养基中二价阳离子浓度是结冷胶凝固的关键,一般是Mg2+,和Ca2+这2种离子的总浓度在4-10mM适中,而且2种离子的浓度最好都不要低于1.5mM,低于或者过高都会影响凝胶效果,一般来说MS培养基中二价离子浓度是足够的,1/2MS培养基用结冷胶也可以凝固的很好目前确定不适合用结冷胶的培养基有DKW,SH,LS三是pH值,结冷胶凝固最适合pH值为5.8,一般高温灭菌影响不大,但不排除因为高压条件变化导致pH值变化影响的凝胶效果。

l  植物凝胶尤其是琼脂不凝固是与pH值有关系,pH过低导致的。出现此类情况是因为调节pH值的操作问题,很多客户都先调节了pH值,然后再加入了植物凝胶,这个过程中pH值可能会降低到5.2,才会不凝固。解决办法:加入琼脂粉后调节pH值。

上海金畔生物科技有限公司代理的PhytoTech LABs是美国知名的植物培养基供应商,公司从1997年成立不断发展壮大,其优质植物基础培养基、植物凝胶、植物生长调节剂、抗生素享有盛名,成为全球植物科研工作者的主选品牌。PhytoTech LABs产品涵盖广泛、批次差异小、方便保存、性价比高、品质可靠,满足多样化的实验需求,节省组培实验所需大量人力和时间,提高植物组培环节的效率。PhytoTech LABs通过ISO 9001:2000质量体系认证,所有产品按照cGMP标准生产和包装,生产过程受到严格质量控制,

细胞转化分析—CytoSelect™ 96孔板软琼脂克隆形成试剂盒

肿瘤是指细胞在致瘤因素作用下,基因发生了改变,失去对其生长的正常调控,导致异常增生。在癌变过程中,发生转化的细胞也具有上述特征,如生长过程中对外源生长刺激因子的依赖减少、失去细胞接触抑制效应,并通常导致永生化,这种锚定-不依赖性生长是肿瘤细胞的标识之一,也是检测恶性转化细胞最准确和严谨的标识。软琼脂培养法常用于检测肿瘤细胞和转化细胞系,该分析方案是监测锚定-不依赖性生长的常用手段。软琼脂培养法原理是利用癌细胞接触抑制效应的丧失,能在悬浮状态下能很好地成簇生长(一般正常的非转化细胞不能在悬浮状态下生长)。

细胞转化分析—CytoSelect™ 96孔板软琼脂克隆形成试剂盒常规软琼脂克隆形成实验是将细胞置于包含有软琼脂半干培养基的100mm或者60mm大小培养皿中,让细胞在软琼脂中培养3-4周以形成克隆,然后手动计数细胞克隆的形成数。该方法较为繁琐并耗时,不适合同时监测大量样品,而且在手动计数过程中带有非常大的不确定性,特别是当形成的细胞克隆大小差异较大时,很难得到更有效、精确的数据。

Cell BioLabs的CytoSelect™ 96孔板软琼脂克隆形成分析试剂盒(CytoSelect™  96-Well Cell Transformation Assay)克服了上述难题,使用该试剂盒不再需要3-4周漫长的克隆形成过程,只需要6-8天;而且无需进行手动计数,而是应用MTT(普通光分析)或CyQuant® GR Dye荧光染料(荧光分析),最终使用分光光度计或荧光计读取数值。由于采用上述技术,该软琼脂克隆形成分析试剂盒提供了一个定量的、高通量的方案来精确的检测细胞转化;另外,由于减少了细胞培养时间(6-8天),因此非常适用于一些原癌基因或siRNA的瞬时转染实验中的细胞分析。

常规软琼脂克隆形成分析 高级软琼脂克隆形成分析(可回收)

细胞转化分析—CytoSelect™ 96孔板软琼脂克隆形成试剂盒

细胞转化分析—CytoSelect™ 96孔板软琼脂克隆形成试剂盒

  • 克隆形成时间由原来的2-3周减少为仅需要一周
  • 结果可以直接使用荧光计读取,无需手动计数
  • 克隆形成时间由原来的2-3周减少为仅需要一周
  • 结果可以直接使用分光光度计或荧光计读取,无需手动计数
  • 经形成实验分析后的细胞可以回收并能用于后继实验
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    产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
    CytoSelect™ 96-Well Cell Transformation Assay (Soft Agar Colony Formation)  CBA-130 荧光法检测,一次96孔板分析
    CBA-130-5 荧光法检测,五次96孔板分析
    产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
    CytoSelect™ 96-Well Cell Transformation Assay (Cell Recovery Compatible)    CBA-135 光度计检测,一次96孔板分析
    CBA-135-5 光度计检测,五次96孔板分析
    CBA-140 荧光计检测,一次96孔板分析
    CBA-140-5 荧光计检测,五次96孔板分析

    Cell BioLabs的CytoSelect™ 96孔板软琼脂克隆形成分析试剂盒分两种,一种是常规软琼脂克隆形成分析,另一种是改进后的高级软琼脂克隆形成分析。常规软琼脂形成试剂盒能大大减少实验时间,并使用荧光染料提高了数据的准确性;高级软琼脂克隆形成分析试剂盒则提供了细胞回收方案,而且还分为分光光度计和荧光剂两种检测手段,您可根据您的实验要求选择最合适的细胞转化分析方案。

    Cell BioLabs为您提供全套的细胞分析检测方案,针对于细胞的克隆形成及细胞转化,除了上述软琼脂克隆形成试剂盒外,还有针对细胞包括肿瘤细胞的药物敏感性分析和克隆性肿瘤细胞分离试剂盒提供。另外,Cell Biolabs还开发出其他多方位的基于细胞功能特征,特别是肿瘤细胞的特性的细胞粘附分析、细胞转移与浸润、细胞吞噬快速分析、细胞活力/死亡/毒性分析、细胞衰老及收缩检测,以及血管生成分析等多种分析试剂盒。如果您对上述细胞分析方案感兴趣,请致电021-50837765到上海金畔生物科技有限公司垂询细胞研究的相关实验解决方案,或索取最新的Cell BioLabs产品资料。

    琼脂(Agar)—PhytoTech植物凝胶系列

    琼脂(Agar)是植物培养基中最常用的固化剂,是选用优质天然石花菜、江蓠菜( Gracilaria)等海藻为原料,采用科学方法精炼提纯的天然高分子多糖物质。琼脂由琼脂糖(Agarose)和琼脂胶(Agaropectin)两部分组成,作为胶凝剂的琼脂糖是不含硫酸酯(盐)的非离子型多糖,是形成凝胶的组分,其大分子链链节在1,3苷键交替地相连的β-D-吡喃半乳糖残基和3, 6-α-L-吡喃半乳糖残基,分子量为为120,000。而琼脂胶是非凝胶部分,是带有硫酸酯(盐)、葡萄糖醛酸和丙酮酸醛的复杂多糖。

    作为世界著名的植物培养基供应商,PhytoTech的优质植物基础培养基、植物凝胶、琼脂粉、植物生长调节因子、抗生素享有盛名,成为全球植物科研工作者的主选品牌。其中针对植物凝胶领域,则有琼脂、纯化琼脂、结冷胶、琼脂与结冷胶混合物以及爱尔兰海藻等多种产品供应。PhytoTech的所有植物培养产品均经过组织培养级琼脂(Agar)—PhytoTech植物凝胶系列别测试,以确保您的实验体验和效果。

    一般琼脂以颜色浅、透明度好、洁净的为上品。琼脂使用方便、广泛,通常的用量在6—10g/L之间,若浓度太高,培养基就会变得很硬,营养物质难以扩散到培养的组织中去,若浓度过低,凝固性不好。琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工方式有关外,还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关,长时间的高温会使凝固能力下降,过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解,丧失凝固能力。时间过久,琼脂变褐,也会逐渐丧失凝固能力。新买来的琼脂最好先试一下它的凝固力。另外,对于一些在琼脂上生长不是很好的植物,建议使用其它胶凝剂。美国著名植物培养产品品牌PhytoTech的琼脂(Agar)产品如下:

    产品名称 货号 产品说明(点击查看说明书)
    Agar, TC, Purified Grade A175 植物组织培养级琼脂粉末
    Agar, Plant TC, Research Grade A181 植物组织培养级琼脂粉末
    【注】上述琼脂粉只是存在纯度和抗压强度上的区别

    世界著名的植物培养基供应商PhytoTechnology Laboratories™ 的优质植物基础培养基、植物凝胶、琼脂粉、植物生长调节因子、抗生素享有盛名。作为PhytoTech的中国一级代理,上海金畔生物科技有限公司为您提供最专业和全面的植物培养系列产品,并备有全系列现货。上海金畔生物科技有限公司为您提供从8g、100g、250g、500g、1kg、2.5kg到5kg不同包装规格的原装进口PhytoTech植物组培级琼脂产品。上述琼脂粉末经过至少2种以上植物的组织培养级别测试,能完全满足您的植物组织培养要求。

    如果您对PhytoTech植物组织培养产品及原料耗材等感兴趣感兴趣,请致电021-50837765 到上海金畔生物科技有限公司免费索取相关产品资料,或者问询您所感兴趣的产品类型。