如何高效解决植物组培污染问题的研究进展

植物组织培养广泛应用于转基因研究、作物育种、观赏花卉进出口、中药材生产等领域,但组培过程中的种苗污染问题,尤其是真菌和内生菌的污染一直是广大科研工作者所关心和头疼的问题。上海金畔生物科技有限公司代理的美国Plant Cell Technology(简称PCT)专门为植物组织培养而研发的专利产品——PPMTM,可有效抑制由于空气、灭菌不彻底、交叉污染、外植体消毒等各种原因导致的细菌、真菌和农杆菌污染。PPMTM是一种热稳定的抗菌剂,在合理的使用剂量下,不会对植物生长产生任何影响。并能广泛适用于绝大多数被子植物和裸子植物。

l  PPMTM相对于传统抗生素具有以下优势:

  • PPMTM广泛抑制和清除细菌和真菌的污染,并防止真菌孢子的萌发。
  • PPMTM是通过抑制多种酶的活性而达到抑菌效果,从而能避免耐药突变体的发生。
  • PPMTM具有热稳定性,无需过滤灭菌,能直接加入培养基高温灭菌而不会影响使用效果。
  • PPMTM用量低,性价比高。

如何高效解决植物组培污染问题的研究进展

PCT自1995年开始着力于PPMTM的研究,迄今为止累积50多篇已发表文献,除此之外更有来自全世界植物研究者使用心得反馈。下表汇总了部分客户的使用反馈,帮助广大科研人员更深入了解PPMTM ,以便有效解决植物污染问题。

PLANT NAME

C(mol/L)

TISSUE TYPE

RESULT / COMMENTS

Potato

1ml/L

Shoot/Callus

used 1ml/l in our culture media to avoid contaminants

Vitis (Grape)

15mL/L

Nodal Segments;

Helpful to control endophytic bacteria in Vitis shoots taken from potted plants and introduced to tissue culture for several weeks with minimal/no toxic effects

Petunia hybrida

5mL/L

Upper young axillary buds

1. HPLC revealed that axillary buds from upper young nodes absorbed significantly more PPM compared with those from the lower nodes. 2. Indexation indicated successful eradication of bacterial contaminants from upper young axillary buds after vacuum-infiltration with 5 ml l−1 PPM

T. modesta

1mL/L

The bulbs of T. modesta

The contamination was only by fungi because the bacterial contamination could be efficiently controlled with streptomycin and PPM as biocides.

orchid

1mL/L

leaf

Great, five star product!

Citrus

4mL/L

Shoot / Tip

eliminates fungus, does not seem to have effect on plant

Wheat

0.5ml/l

wheat embryo culture

we use in regeneration media and sometimes to kill the fungi in regenerated plants

请点击下面链接查看更多物种PPMTM使用建议:

https://www.plantcelltechnology.com/how-people-are-using-ppm/

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植物组培高效广谱型抗菌剂PPM

在植物培养过程中,种苗会在各种环节受到外源微生物的污染,目前常用办法是添加抗生素防止微生物污染,但是大部分抗生素对真菌却达不到良好的抑制作用,美国PCT公司专利产品PPM,是一款针对细菌、真菌等各种污染菌能有效抑制的广谱型抗菌剂,且产品耐高温,可直接加入到培养基中高温灭菌,使用非常方便,且适用于大部分植物样本培养的污染防治。

植物组培抗菌剂(PPM )是广谱型抗真菌剂,靶向细菌和植物组织培养生长培养基中的真菌,以及污染组织。PPM活性成分可以渗透过真菌或细菌细胞壁。

PPM 有效作用于大多数种子霸菱植物-被子植物,以及裸子植物, 不建议在蕨类,苔藓,藻类和水生植物中使用。

主要优势

★高效抗菌/抗真菌剂-对所有植物中真菌起作用,同时抑制微生物。 
★价格低廉,可以作为植物组织培养基的标准成分。 
★靶标多样性-PPM是抑制多种酶,不会产生抗耐药性的突变体。
★热稳定性–可以和培养基一起灭菌。

使用方便—与培养基一起灭菌,或灭菌后加入

外观:透明,无色至黄色

储存条件:储存在4度即可。

使用方法:
1.愈伤: 一般 PPM 浓度为 0.05~0.075% (1L 培养基加入 0.5~0.75ml PPM)。
2. 种子:种子浸泡在含有 2~3% PPM的培养基里,但不要添加Tween 20;不用调节ph值,搅拌8~12 小时。草本植物置于培养基含PPM浓度为 0.05~0.1% PPM的萌发培养基即可;木本植物置于培养基中浓度为 0.2% 的PPM 。
u 外植体 以 1cm 外植体为例,含PPM浓度为4~5%的MS盐培养基中(使用干粉培养基) ,但千万不要添加 Tween 20 和 pH 调整剂,搅拌4~12 小时,之后直接拿出,插入含有PPM 的培养基里;草本植物置于0.05~0.1% PPM 的萌发培养基即可;木本植物置于 0.2% PPM 的萌发培养基。

注意事项:

1操作时配戴丁睛手套,避免接触皮肤(引起皮炎)

2在含有高浓度PPM的培养基中搅拌4-12小时,是预处理消毒过程,不需要调节PH值。勿加入Tween20会与PPM中组分发生反应,影响使用效果。

产品信息:

货号

品名

规格

PPM-30

PPM

30ml

ppm-100

PPM

100ml

PPM-500

PPM

500ml

PPM-1000

PPM

1L