novocib:肌苷单磷酸脱氢酶（IMPDH 酶）概述
肌苷单磷酸脱氢酶 (IMPDH ) (EC 1.1.1.205) 催化肌苷 5'-单磷酸 (IMP) 转化为黄苷 5'-单磷酸 (XMP)，这是鸟苷生物合成和鸟嘌呤库的关键步骤核苷酸。
在人类中，IMPDH 是多种治疗应用（癌症、免疫性疾病……）的经过验证的靶点。多种IMPDH抑制剂，包括重磅药物（例如CellCept ®），已显示出其临床功效。除了核苷（或 NAD）类似物外，新的化学实体（NCE）已被确定为有效的 IMPDH 抑制剂，目前正在研究中。
已知哺乳动物和细菌 IMPDH 具有显着不同的动力学特性和抑制剂敏感性(1, 2)。
NOVOCIB提供两种重组 IMPDH 酶：人类 IMPDH，II 型和金黄色葡萄球菌IMPDH。这两种酶是选择物种特异性 IMPDH 抑制剂的有用工具。
简要描述：novocib：肌苷 5′-单磷酸脱氢酶，2 型（Human IMPDH, Type 2）
详细介绍
产品咨询
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | E-Nov1 |
|---|---|---|---|
| 供货周期 | 一个月 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药,综合 |
novocib：肌苷 5'-单磷酸脱氢酶，2 型（Human IMPDH, Type 2）
同义词： 肌苷 5'-单磷酸脱氢酶，2 型，IMP 脱氢酶，II 型，IMPDH2
肌苷 5'-单磷酸脱氢酶 2 型（IMPDH 2，EC1.1.1.205）是 IMPDH 的主要亚型，也是治疗多种癌症和传染病以及防止淋巴细胞增殖的有效靶标。
NOVOCIB的 IMPDH 2 已通过 RT-PCR 扩增从人肝癌细胞中提取的 mRNA（NP_000875.2，100% 同一性）进行克隆，并在大肠杆菌中表达。
NOVOCIB的纯化 IMPDH 2 是一种活性酶，其特征在于其对肌苷 5'-单磷酸和 NAD 底物的亲和力，以及对酶抑制剂（如霉酚酸和利巴韦林单磷酸）的敏感性。
单位定义： 1 单位 IMPDH II 型在 pH 8.8、37℃、每分钟催化 1 摩尔 IMP 氧化成 XMP
比活性： ≥ 0.050 单位/毫克蛋白质
以稳定的冻干形式提供，运输时不带干冰
测定条件： KH 2 PO 4 0.1M，pH8.8，NAD 250μM，DTT 2.5mM，2.5mU/ml 人重组IMPDH II，37℃孵育。通过添加终浓度为 250μM 的 IMP 开始反应。在 iEMS Reader MF (Labsystems) 读板器中在 340 nm 处跟踪 NADH 形成。
IMPDH – 主要治疗应用的选择靶点
IMP 氧化为 XMP 被认为是鸟嘌呤核苷酸生物合成的关键步骤，鸟嘌呤核苷酸池控制细胞增殖和许多其他主要细胞过程(1)。 IMPDH 抑制导致鸟嘌呤核苷酸减少，从而中断增殖细胞中的核酸合成。 IMPDH 参与从头鸟嘌呤核苷酸生物合成，使得 IMPDH 成为细胞增殖和分化中的关键酶(2)。 IMPDH 被认为是几个主要治疗领域的有效靶点。 IMPDH 抑制剂可用作抗病毒的药（例如利巴韦林）、抗寄生虫药、抗菌药、抗白血病药和免疫抑制剂(2)。 IMPDH II 型是该酶的主要亚型，选择性地在增殖细胞（包括淋巴细胞和肿瘤细胞）中表达(2)。
免疫学中的 IMPDH
IMPDH 在淋巴细胞中高度活跃。它是治疗免疫疾病和诱导免疫抑制的经过验证的靶点（CellCept ®，一种霉酚酸 (MPA) 前药 – 罗氏公司 2006 年作为免疫抑制剂获得 1.85 亿瑞士法郎，2006 年被认为是治疗重症肌无力的孤儿药；CellCept ®在狼疮性肾炎的 III 期试验中取得了积极的结果。 IMPDH 也被认为是治疗牛皮癣、类风湿性关节炎 (RA) 和系统性红斑狼疮 (SLE) 的佳的靶点(3)。
肿瘤学中的 IMPDH
IMPDH，特别是在肿瘤细胞中过度表达的 II 型，被认为是癌症化疗的高效靶标(1,2,4,5)。几种 IMPDH 抑制剂正在开发中，用于治疗急性和慢性粒细胞白血病 (AML、CML) (6)和其他癌症（胰腺癌、结肠癌、膀胱癌）。此外，研究表明，使用 IMPDH 抑制剂可以抵消某些肿瘤中可能出现的耐药性(7) 。例如，甲氨蝶呤耐药性与 IMPDH 的过度表达直接相关，抑制 IMPDH 可以恢复药物疗效(8)。与其他抗癌药物的组合扩展了IMPDH抑制剂的潜在应用。
目前开发的IMPDH抑制剂
CellCept ®、利巴韦林、咪唑立宾和噻唑呋林是当前使用的针对IMPDH的药物的例子。苯甲酰胺核苷、tiazofurine 和 MPA 正在针对白血病进行 II/III 期开发：结果被认为非常令人鼓舞(8)。
IMPDH II 原子结构已得到解析，为进一步先导优化提供了宝贵的背景(9)。除核苷类似物外，NCE 已被确定为 IMPDH 抑制剂（10、11、12、13、14）并进入开发试验（例如AVN-944：晚期血液恶性肿瘤的 I 期，胰腺和其他实体瘤的 II 期）。
所有这些都证明了新型 IMPDH 抑制剂的前景如何，以及为什么化合物的抑制活性值得在如此高度相关的目标上进行评估。
AVN-944 |
VX-148 |
VX-497 |
MPA (mycophenolic acid) |
CellCept® |
BMS-337197 |
Tiazofurin |
Ribavirine |
Mizoribine |
上海金畔生物科技有限公司
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简要描述：LDH细胞毒性分析试剂盒使用刃天青作为荧光指示剂来测量受损细胞释放的LDH的活性。LDH Cytotoxicity Assay乳酸脱氢酶细胞毒性试验
详细介绍
产品咨询
| 品牌 | 其他品牌 | 货号 | TBS2002 |
|---|---|---|---|
| 供货周期 | 一个月 |
LDH Cytotoxicity Assay乳酸脱氢酶细胞毒性试验
简要描述：小鼠乳酸脱氢酶(LDH)ELISA kit，产品编码：JYM0033MoMouse Lactate Dehydrogenase (LDH)ELISA Kit有效期：6个月保存条件：2-8℃
详细介绍
产品咨询
| 品牌 | 基因美 | 供货周期 | 现货 |
|---|---|---|---|
| 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,制药,综合 |
小鼠乳酸脱氢酶(LDH)ELISA kit，产品编码：JYM0033Mo
小鼠乳酸脱氢酶(LDH)ELISA kit，Mouse Lactate Dehydrogenase (LDH)ELISA Kit
【实验方法】双抗体夹心法
【种属】小鼠
【检测范围】 见说明书
【检测波长】450 nm
【样本类型】血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本
【反应时间】 1.5~2h
小鼠乳酸脱氢酶（LDH）酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供科研使用。
本试剂盒用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中乳酸脱氢酶（LDH）的含量.
有效期：6个月
保存条件：2-8℃
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠乳酸脱氢酶（LDH）水平。用纯化的小鼠乳酸脱氢酶（LDH）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入乳酸脱氢酶（LDH），再与HRP标记的乳酸脱氢酶（LDH）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的乳酸脱氢酶（LDH）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠乳酸脱氢酶（LDH）浓度.
试剂盒组成
样本处理及要求
1.血清：室温血液自然凝固 10-20 分钟，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合 10-20 分钟后，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心 20 分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用 PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心.
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的 PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持 2-8℃的温度。加入一定量的 PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性.
操作步骤
1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔 10 孔，在第一、第二孔中分别加标准品 100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液 50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取 100μl 分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液 50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl 弃掉，再各取 50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取 50μl 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取 50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液 50μl，混匀后从第九第十孔中各取 50μl 弃掉。（稀释后各孔加样量都为 50μl，浓度分别为 1800pg/ml, 1200pg/ml, 600pg/ml, 300pg/ml， 150pg/ml）
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl（样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 加酶：每孔加入酶标试剂 50ul，空白孔除外。
4. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
5. 配液：将 30(48T 的 20 倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30(48T 的 20 倍)倍稀释后备用。
6. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。
7. 显色：每孔先加入显色剂 A50ul，再加入显色剂 B50ul，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 10 分钟.
8. 终止：每孔加终止液 50ul，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
9. 测定：以空白孔调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止液后 15分钟以内进行。
注意事项
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD值大于标准品孔第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准.
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的 OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度.
试剂盒性能
1.样品线性回归与预期浓度相关系数 R 值为 0.92 以上。
2.批内与批间应分别小于 9%和 15%.
检测范围
30pg/ml -2000pg/ml
上海金畔生物科技有限公司
国内试剂耗材经销代理。
国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。
提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。
进出口货物代理服务。
公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌
质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式。