活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光价格 3534
产品规格

200 Tests

产品货号

活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光

产品参数
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒,过氧化氢 (H2O2) 是一种活性氧代谢副产物,是许多氧化应激相关状态的关键调节剂。它参与了许多、动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、骨质疏松症、许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物事件。也许过氧化氢生物学有趣的方面是近的报告,即抗体具有将分子氧转化为过氧化氢的能力,有助于免疫系统的正常识别和破坏过程。这种活性物质的测量将有助于确定氧化应激如何调节不同的细胞内途径。该 Cell Meter 过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的 OxiVision Green 过氧化氢探针来量化活细胞中的过氧化氢。 OxiVision Green 具有细胞渗透性,当它与过氧化氢反应时会产生绿色荧光。该试剂盒是一种优化的“混合和读取”分析格式,与 HTS 液体处理仪器兼容。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。  

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活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: FITC 通道
Em: FITC通道
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

96孔板的测定方案

概述

用于溶液测定

1.准备H2O2反应混合物(50μL)

2.加入H2O2标准品或测试样品(50μL)

3.在室温下孵育10-60分钟

4.在Ex / Em = 490/525 nm (cutoff=515nm)处检测荧光强度

注意:在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分。

 

用于活细胞检测

1. 在生长培养基中制备细胞
2. 使用 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液对细胞进行染色并孵育
3. 用测试化合物处理细胞
4. 在 Ex/Em = 490/525 nm (Cutoff = 515nm) 处用底部读取模式检测荧光强度

 

溶液配制

1. OxiVision Green 过氧化氢探针储备液 (250X)
将 50 μL DMSO(组分 D)加入 OxiVision Green 过氧化氢探针(组分 A)的小瓶中,制成 250X OxiVision Green 过氧化氢探针储备液,注意避光。

2. H2O2 标准溶液(20 mM)
将 22.7 μL 的 3% H2O2(0.88 M,组分 B)加入 977 μL 的 Assay Buffer(组分 C)中,制成 20 mM H2O2 标准溶液。

注意 稀释的 H2O2 标准溶液不稳定。 未使用的部分应丢弃。

3.H2O2 标准
将 50 μL 20 mM H2O2 标准溶液加入 950 μL Assay Buffer(组分 C)中,得到 1000 μM H2O2 标准溶液。 取 1000 μM H2O2 标准溶液并进行 1:3 的系列稀释,以得到含有测定缓冲液(组分 C)的系列稀释的 H2O2 标准品(HS1 – HS7)。

4.工作溶液配制

将 20 μL 250X OxiVision Green 过氧化氢探针储备液加入 5 mL 检测缓冲液(组分 C)中,制成 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液。

 

操作步骤

在上清液反应中检测H2O2
表 1. 纯黑色 96 孔微孔板中 H2O2 标准品和测试样品的布局。 HS= H 2 O 2 标准品(HS1 – HS7,300 至 0.3 μM); BL=空白控制; TS=测试样品

BL BL TS TS
HS1 HS1
HS2 HS2
HS3 HS3    
HS4 HS4    
HS5 HS5    
HS6 HS6    
HS7 HS7    

表2. 每孔试剂组成

容积 试剂
HS1-HS7 50ul 连续稀释(300至0.3μM)
BL 50ul 分析缓冲液(组分C)
TS 50ul 测试样本

1.根据表 1 和表 2 中提供的布局准备 H2O2 标准 (HS)、空白对照 (BL) 和测试样品 (TS)。对于 384 孔板,每孔使用 25 μL 试剂,而不是 50 μL。

2. 将 50 μL OxiVision Green 过氧化氢探针工作液加入 H2O2 标准品、空白对照和测试样品的每个孔中,使H2O2 测定总体积为 100 μL/孔。 对于384孔板,将 25 μL 的 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液添加到每个孔中,总体积为 50 μL/孔。

3. 在室温下将反应孵育 15 到 30 分钟,避光。

4. 用荧光酶标仪在Ex= 490 ± 10,Em= 520 ± 10 nm(佳 Ex/Em = 490/525 nm,截止 = 515 nm)检测荧光强度。

 

在活细胞中进行H2O2检测

1.根据需要培养细胞

2.用 PBS 缓冲液清洗细胞,用 100 μL/孔的 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液孵育细胞 5 到 60 分钟。 对于 384 孔板,添加 25 μL/孔的 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液。

3. 在 Ex/Em = 490/525 nm (Cutoff = 515 nm) 下使用荧光酶标仪(底部读取模式)检测荧光增加或使用 FITC 通道通过荧光显微镜成像荧光变化。

 

参考文献

Bio-inspired redox-cycling antimicrobial film for sustained generation of reactive oxygen species
Authors: Huan Liu, Xue Qu, Eunkyoung Kim, Miao Lei, Kai Dai, Xiaoli Tan, Miao Xu, Jinyang Li, Yangping Liu, Xiaowen Shi
Journal: Biomaterials (2018)

PPARα-mediated peroxisome induction compensates PPARγ-deficiency in bronchiolar club cells
Authors: Srikanth Karnati, Gani Oruqaj, Harshavardhan Janga, Srinu Tumpara, Claudia Colasante, Paul P Van Veldhoven, Nancy Braverman, Adrian Pilatz, Thomas J Mariani, Eveline Baumgart-Vogt
Journal: PloS one (2018): e0203466

Semaphorin 4D inhibits neutrophil activation and is involved in the pathogenesis of neutrophil-mediated autoimmune vasculitis
Authors: Masayuki Nishide, Satoshi Nojima, Daisuke Ito, Hyota Takamatsu, Shohei Koyama, Sujin Kang, Tetsuya Kimura, Keiko Morimoto, Takashi Hosokawa, Yoshitomo Hayama
Journal: Annals of the Rheumatic Diseases (2017): annrheumdis–2016

Aggravation of brain infarction through an increase in acrolein production and a decrease in glutathione with aging
Authors: Takeshi Uemura, Kenta Watanabe, Misaki Ishibashi, Ryotaro Saiki, Kyoshiro Kuni, Kazuhiro Nishimura, Toshihiko Toida, Keiko Kashiwagi, Kazuei Igarashi
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2016): 630–635

Hydrogen peroxide detection with high specificity in living cells and inflamed tissues
Authors: Lei Rong, Chi Zhang, Qi Lei, Ming-Ming Hu, Jun Feng, Hong-Bing Shu, Yi Liu, Xian-Zheng Zhang
Journal: Regenerative Biomaterials (2016): rbw022

Modification of lignin in sugarcane bagasse by a monocopper hydrogen peroxide-generating oxidase from bifida fusca
Authors: Cheng-Yu Chen, Cheng-Cheng Lee, Hung-Shuan Chen, Chao-Hsun Yang, Shu-Ping Wang, Jyh-Horng Wu, Menghsiao Meng
Journal: Process Biochemistry (2016): 1486–1495

Dopamine-mediated oxidation of methionine 127 in α-synuclein causes cytotoxicity and oligomerization of α-synuclein
Authors: Kazuhiro Nakaso, Naoko Tajima, Satoru Ito, Mari Teraoka, Atsushi Yamashita, Yosuke Horikoshi, Daisuke Kikuchi, Shinsuke Mochida, Kenji Nakashima, Tatsuya Matsura
Journal: PLoS One (2013): e55068

Hydrogen peroxide stimulates the epithelial sodium channel through a phosphatidylinositide 3-kinase-dependent pathway
Authors: He-Ping Ma
Journal: Journal of Biological Chemistry (2011): 32444–32453

 

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Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光 Cat#11504
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产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
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产品概述

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒,过氧化氢是一种活性氧代谢副产物,可作为许多氧化应激相关状态的关键调节剂。 它涉及许多,动脉粥样硬化,糖尿病血管病变,骨质疏松症,许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物学事件。 这种活性物质的测量有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的OxiVision Blue过氧化物探针来定量活细胞中的过氧化氢。 OxiVision 蓝色过氧化物探针具有细胞渗透性,当与过氧化氢反应时会产生蓝色荧光。 该试剂盒提供了一种监测活细胞中过氧化氢水平的灵敏工具,并且它被优化用于荧光显微镜。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。 

活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: DAPI 滤波片
Em: DAPI 滤波片
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞
2.用OxiVision 蓝色过氧化物传感器染色细胞
3.用测试化合物处理细胞
4.用DAPI滤光片或Ex / Em = 405 / 450nm监测荧光强度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. OxiVision 蓝色过氧化物原液(500X):
将40μLDMSO(组分C)加入到OxiVision 蓝色过氧化物(组分A)的小瓶中并充分混合以制备500X OxiVision 蓝色过氧化物传感器储备溶液。 注意:20μL重组的OxiVision 蓝色过氧化物传感器储备溶液足以用于1个平板。 应立即使用原液。 避光。

  

2.工作溶液

将10μL500XOxiVision 蓝色过氧化物储备溶液加入500μL分析缓冲液(组分B)中,充分混合,制成OxiVision 蓝色过氧化物工作溶液。 注意:此OxiVision 蓝色过氧化物工作溶液不稳定; 使用前根据需要准备。

点击查看细胞制备指南

 

样品分析

1.添加10μL/孔(96孔板)或2.5μL/孔(384孔板)的OxiVision 蓝色过氧化物工作溶液,每孔90μL细胞培养物,96孔板或22.5μL细胞培养物在384孔细胞板中。注意:染色前无需清洗细胞。建议在完全培养基中染色细胞。

2.用测试化合物在完全培养基或37℃的所需缓冲液中处理细胞一段所需的时间。对于对照样品(未处理的细胞),加入相应量的化合物缓冲液。注意:建议在完全培养基中处理细胞。然而,如果测试的化合物对血清敏感,则可以在前吸出生长培养基和血清因子。抽吸后,将1X Hank盐溶液和20 mM Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的缓冲液加入细胞中。或者,可以在无血清培养基中处理细胞。我们用完全培养基中的100μM过氧化氢在37℃处理Jurkat细胞90分钟以诱导过氧化氢。详细信息请参见图1。

3.用DPBS洗涤细胞1-2次,并用100uL /孔(对于96孔板)或25uL /孔(对于384孔板)替换测定缓冲液(组分B)。

4.使用带DAPI过滤器的荧光显微镜拍摄图像。

 

参考文献

Plasma-activated medium selectively eliminates undifferentiated human induced pluripotent stem cells
Authors: Ryo Matsumoto, Kazunori Shimizu, Takunori Nagashima, Hiromasa Tanaka, Masaaki Mizuno, Fumitaka Kikkawa, Masaru Hori, Hiroyuki Honda
Journal: Regenerative Therapy (2016): 55–63

 

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产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
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产品概述

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒,过氧化氢是一种活性氧代谢副产物,可作为许多氧化应激相关状态的关键调节剂。 它涉及许多,动脉粥样硬化,糖尿病血管病变,骨质疏松症,许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物学事件。 这种活性物质的测量有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的OxiVision Blue过氧化物来定量活细胞中的过氧化氢。 OxiVision 蓝色过氧化物具有细胞渗透性,当与过氧化氢反应时会产生蓝色荧光。 该试剂盒提供了一种监测活细胞中过氧化氢水平的敏感工具,并且它被优化用于流式细胞术。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。 

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适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 405nm 滤波片
Em: 450/40nm 滤波片
推荐通道: Pacific Blue通道
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞
2.用OxiVision 蓝色过氧化物传感器染色细胞
3.用测试化合物处理细胞
4.使用流式细胞仪Pacific Blue Channel监测荧光强度(Ex / Em = 405/450 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. OxiVision 蓝色过氧化物传感器原液:
将100μLDMSO(组分B)加入到OxiVision 蓝色过氧化物传感器(组分A)的小瓶中,并充分混合。 注意:1μL重组的OxiVision 蓝色过氧化物传感器原液足以容纳0.5 mL细胞。 应立即使用原液,避光。

点击查看细胞制备指南

   

样品分析

1.用OxiVision 蓝色过氧化物传感器储备液在完全培养基或37°C所需缓冲液中染色细胞20-30分钟,避光。

2.用测试化合物在完全培养基或37℃的所需缓冲液中处理细胞一段所需的时间。对于对照样品(未处理的细胞),加入相应量的化合物缓冲液。注意:建议在完全培养基中处理细胞。然而,如果测试的化合物对血清敏感,则可以在前吸出生长培养基和血清因子。在抽吸后,将细胞重悬于1X Hank盐溶液和20mM Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的缓冲液中。或者,可以在无血清培养基中处理细胞。注意:我们用完全培养基中的100μM过氧化氢在37°C处理Jurkat细胞90分钟以诱导过氧化氢。详细信息请参见图1。

3.使用流式细胞仪监测太平洋蓝色通道(Ex / Em = 405 / 450nm)的荧光强度。

 

参考文献

Plasma-activated medium selectively eliminates undifferentiated human induced pluripotent stem cells
Authors: Ryo Matsumoto, Kazunori Shimizu, Takunori Nagashima, Hiromasa Tanaka, Masaaki Mizuno, Fumitaka Kikkawa, Masaru Hori, Hiroyuki Honda
Journal: Regenerative Therapy (2016): 55–63

 

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活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光适用于流式细胞仪

产品参数
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒,过氧化氢是一种活性氧代谢副产物,可作为许多氧化应激相关事件的关键调节剂。 它涉及许多,动脉粥样硬化,糖尿病血管病变,骨质疏松症,许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物学过程。 这种活性物质的测量有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的OxiVision Green过氧化物传感器来定量活细胞中的过氧化氢。 OxiVision 绿色过氧化物传感器具有细胞渗透性,当与过氧化氢反应时会产生绿色荧光。 该试剂盒提供了一种监测活细胞中过氧化氢水平的敏感工具,并且它被优化用于流式细胞术。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。 

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适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 488nm 滤波片
Em: 530/30nm 滤波片
推荐通道: FITC通道
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞
2.使用OxiVision Green过氧化物染色细胞
3.用测试化合物处理细胞
4.用流式细胞仪FITC通道监测荧光强度(Ex / Em = 490/530 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. OxiVision 绿色过氧化物传感器原液:
将100μLDMSO(组分B)加入到OxiVision 绿色过氧化物(组分A)的小瓶中,并充分混合。 注意:1μL重组的OxiVision 绿色过氧化物储备溶液适用于0.5 mL细胞。 应立即使用原液,避光。

点击查看细胞制备方案

   

样品分析

1.使用OxiVision 绿色过氧化物传感器储备溶液在完全培养基或37°C所需缓冲液中染色细胞30分钟,避光。

2.用测试化合物在完全培养基或37℃的所需缓冲液中处理细胞一段所需的时间。对于对照样品(未处理的细胞),加入相应量的化合物缓冲液。注意:建议在完全培养基中处理细胞。然而,如果测试的化合物对血清敏感,则可以在前吸出生长培养基和血清因子。在抽吸后,将细胞重悬于1X Hank盐溶液和20mM Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的缓冲液中。或者,可以在无血清培养基中处理细胞。注意:我们用完全培养基中的100μM过氧化氢在37°C处理Jurkat细胞90分钟以诱导过氧化氢。详细信息请参见图1。

3.用测试化合物在37℃处理细胞一段所需的时间。取出处理溶液,然后用OxiVision 绿色过氧化物传感器储备液在全培养基或37°C所需的缓冲液中染色细胞一段所需的时间。

4.使用流式细胞仪监测FITC通道(Ex / Em = 490 / 530nm)的荧光强度。

 

参考文献

Role of Polydopamine’s Redox-Activity on its Pro-oxidant, Radical-Scavenging, and Antimicrobial Activities
Authors: Huan Liu, Xue Qu, Haoqi Tan, Jialin Song, Miao Lei, Eunkyoung Kim, Gregory F Payne, Changsheng Liu
Journal: Acta Biomaterialia (2019)

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Amplite 荧光法羊抗鼠IgG-HRP偶联物ELISA检测试剂盒 红色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法羊抗鼠IgG-HRP偶联物ELISA检测试剂盒 红色荧光 价格 2823
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1000 Tests

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Amplite 荧光法羊抗鼠IgG-HRP偶联物ELISA检测试剂盒 红色荧光

产品参数
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Amplite 荧光法羊抗鼠IgG-HRP偶联物ELISA检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于ELISA检测的试剂盒,过氧化氢是一种活性氧代谢副产物,可作为许多氧化应激相关状态的关键调节剂。 它涉及许多,动脉粥样硬化,糖尿病血管病变,骨质疏松症,许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物学事件。 这种活性物质的测量有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的OxiVision Blue过氧化物探针来定量活细胞中的过氧化氢。 OxiVision 蓝色过氧化物探针具有细胞渗透性,当与过氧化氢反应时会产生蓝色荧光。 该试剂盒提供了一种监测活细胞中过氧化氢水平的灵敏工具,并且它被优化用于荧光显微镜。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 荧光法羊抗鼠IgG-HRP偶联物ELISA检测试剂盒。 

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适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 540nm
Em: 590nm
Cutoff: 570nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备ELISA板
2.准备过氧化物酶工作溶液
3.将100μL/孔的过氧化物酶工作溶液加入ELISA板中
4.在室温下孵育15-60分钟
5.监测Ex / Em = 540 / 590nm处的荧光强度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1Amplite 红色过氧化物酶底物储备液(200X):
将250μLDMSO(组分D)加入到Amplite 红色过氧化物酶底物(组分A)的小瓶中。 注意:50μL的Amplite 红色过氧化物酶底物原液足以用于1个平板。

1.2 H2O2储备溶液(20 mM):
将22.7μL的3%H2O2(0.88M,组分B)加入977μL的测定缓冲液(组分C)中。 注意:稀释的H2O2储备溶液不稳定,应丢弃未使用的部分。

 

2.标准溶液

小鼠IgG标准
小鼠IgG(未包括)可用于产生标准曲线。 使用初始浓度3μg/ mL和1:3稀释因子,将0.2M碳酸氢钠缓冲液(pH9.4)的总小鼠IgG稀释到微量培养板中。

 

3.工作溶液

3.1 山羊抗小鼠IgG-HRP结合物工作液:
将2μL山羊抗小鼠IgG-HRP缀合物(组分E)加入10mL含1%BSA的PBS(PBS-BSA,不包括在内)中。 注意:10 mL山羊抗小鼠IgG-HRP结合物工作溶液足以用于1个平板。 推荐该山羊抗小鼠IgG-HRP缀合物工作溶液的浓度作为初始浓度。应根据经验确定每种特定应用的佳浓度。

3.2 过氧化物酶工作溶液:
将50μL的Amplite 红色过氧化物酶底物储备溶液(200X)和100μL的H2O2储备溶液(20mM)加入9.85mL的测定缓冲液(组分C)中以制备总体积为10mL的过氧化物酶工作溶液,避光。

 

样品分析

1.准备ELISA板:

1.1执行所有必要的ELISA准备步骤。

1.2用含有0.02%至0.05%Tween 20(PBS-Tween)和排液的PBS洗涤ELISA孔三次。

1.3向每个孔中加入100μL制备的山羊抗小鼠IgG-HRP缀合物工作溶液。

1.4在室温下孵育30分钟。 排出HRP结合物。

1.5用PBS-Tween洗涤孔三次并排干。

2.在ELISA板中运行过氧化物酶测定:

2.1在含有样品和对照的每个排出的微孔板中加入100μL过氧化物酶工作溶液。

2.2在室温下孵育反应30分钟或更长时间,避光。

2.3用激发530-570nm(佳540nm)和发射590-600nm的荧光板读数器监测荧光增加。 注意:也可以用吸光度酶标仪在576±5 nm的波长下读板。 然而,与荧光读数相比,吸收检测具有更低的灵敏度。

 

参考文献

Assessment of Tofacitinib and Ruxolitinib and their Anti Inflammatory Effects on Myeloperoxidase
Authors: Amber Milton
Journal: (2017)

Patterned Photonic Nitrocellulose for Pseudo-Paper ELISA
Authors: Junjie Chi, Bingbing Gao, Mi Sun, Fengling Zhang, Enben Su, Hong Liu, Zhongze Gu
Journal: Analytical Chemistry (2017)

Spinal Cord Inflammation: Molecular Imaging after Thoracic Aortic Ischemia Reperfusion Injury
Authors: Hassan Albadawi, John W Chen, Rahmi Oklu, Yue Wu, Gregory Wojtkiewicz, Benjamin Pulli, John D Milner, Richard P Cambria, Michael T Watkins
Journal: Radiology (2016): 152222

Myeloperoxidase Nuclear Imaging for Epileptogenesis
Authors: Yinian Zhang, Daniel P Seeburg, Benjamin Pulli, Gregory R Wojtkiewicz, Lionel Bure, Wendy Atkinson, Stefan Schob, Yoshiko Iwamoto, Muhammad Ali, Wei Zhang
Journal: Radiology (2015): 822–830

Myeloperoxidase–Hepatocyte–Stellate Cell Cross Talk Promotes Hepatocyte Injury and Fibrosis in Experimental Nonalcoholic Steatohepatitis
Authors: Benjamin Pulli, Muhammad Ali, Yoshiko Iwamoto, Matthias WG Zeller, Stefan Schob, Jenny J Linnoila, John W Chen
Journal: Antioxidants & redox signaling (2015): 1255–1269

Ordered cleavage of myeloperoxidase ester bonds releases active site heme leading to inactivation of myeloperoxidase by benzoic acid hydrazide analogs
Authors: Jiansheng Huang, Forrest Smith, Peter Panizzi
Journal: Archives of biochemistry and biophysics (2014): 74–85

Raising the shields: PCR in the presence of metallic surfaces protected by tailor-made coatings
Authors: Frank D Scherag, Thomas Brandstetter, Jürgen Rühe
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2014): 576–582

Measuring myeloperoxidase activity in biological samples
Authors: Benjamin Pulli, Muhammad Ali, Reza Forghani, Stefan Schob, Kevin LC Hsieh, Gregory Wojtkiewicz, Jenny J Linnoila, John W Chen
Journal: PLoS One (2013): e67976

Micro-volume wall-less immunoassays using patterned planar plates
Authors: Katherine R Kozak, Jianyong Wang, Melvin Lye, Rashi Takkar, Namyong Kim, Hyunjae Lee, Noo Li Jeon, Kedan Lin, Crystal Zhang, Wai Lee T Wong
Journal: Lab on a Chip (2013): 1342–1350

Distinguishing inflammation from tumor and peritumoral edema by myeloperoxidase magnetic resonance imaging
Authors: Anne Kleijn, John W Chen, Jason S Buhrman, Gregory R Wojtkiewicz, Yoshiko Iwamoto, Martine L Lamfers, Anat O Stemmer-Rachamimov, Samuel D Rabkin, Ralph Weissleder, Robert L Martuza
Journal: Clinical Cancer Research (2011): 4484–4493

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite 荧光法羊抗兔IgG-HRP偶联物ELISA检测试剂盒 Cat#11541
Amplite 荧光测定黑色素测定试剂盒 Cat#11310
Amplite 荧光酪氨酸酶检测试剂盒 Cat#11312

Amplite 荧光法羊抗兔IgG-HRP偶联物ELISA检测试剂盒 红色荧光-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Amplite 荧光法羊抗兔IgG-HRP偶联物ELISA检测试剂盒 红色荧光 价格 2823
产品规格

1000 Tests

产品货号

Amplite 荧光法羊抗兔IgG-HRP偶联物ELISA检测试剂盒 红色荧光

产品参数
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Amplite 荧光法羊抗兔IgG-HRP偶联物ELISA检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于ELISA检测的试剂盒,辣根过氧化物酶(HRP)是广泛用于多种生物学检测的小分子(MW~40KD)。HRP偶联物是广泛用作ELISA(酶联免疫吸附实验)、免疫组化技术、Northern、 Southern和Western blot分析的第二个检测试剂。由于分子量小,因此在与抗体、抗原结合形成复合物时不会带来空间阻碍。它们按4:1的比例与抗体结合。此外,与其它酶标签相比HRP更便宜。Amplite荧光法羊抗兔IgG-HRP偶联物ELISA试剂盒 *红色荧光*含有所有分析必需组分,包括我们的Amplite Red HRP作为底物用于ELISA检测。本试剂盒提供优化分析方案,该方案可应用于高通量液体处理设备,能在微孔板中检出10pg的多抗。它的信号抗原用荧光分析仪读取Ex/Em = 530 to 570 nm/590 to 600 nm或者用酶标仪读取其570nm处的吸光值显示。作为检测试剂,它可以用来分析检测羊抗兔IgG。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 荧光法羊抗兔IgG-HRP偶联物ELISA检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 576 ± 5nm
推荐孔板: 透明底板
   
荧光酶标仪  
Ex: 540nm
Em: 590nm
Cutoff: 570nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备ELISA板
2.添加山羊抗兔IgG-HRP共轭工作液(100μL/孔)
3.在室温下孵育30分钟
4.清洗孔(PBS-Tween 3X)
5.加入过氧化物酶工作液(100μL/孔)
6.在室温下孵育30-60分钟
7.监测Ex / Em = 540/490 nm处的荧光强度(截止= 570 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. Amplite 红色过氧化物酶底物储备液(200X):
将250μLDMSO(组分D)加入到Amplite 红色过氧化物酶底物(组分A)的小瓶中并充分混合以制备200X Amplite 红色过氧化物酶底物储备溶液。 注意:50μL的200X Amplite 红色过氧化物酶底物储备液足以用于1个平板。 应立即使用原液,避光。

2. H2O2储备溶液(20 mM):
将22.7μL的3%H2O2(0.88M,组分B)加入977μL的测定缓冲液(组分C)中以制备20mM H2O2储备溶液。 注意:稀释的H2O2储备溶液不稳定。 应丢弃未使用的部分。

 

3.工作溶液

将50μL的200X Amplite 红色过氧化物酶底物储备溶液和100μL的20mM H2O2储备溶液加入9.85mL的测定缓冲液(组分C)中并充分混合以制备过氧化物酶工作溶液,避光。

点击查看细胞样品制备指南 

 

样品分析

1.准备ELLISA板:

1.1通过执行所有必要的ELISA制备步骤制备ELISA微量培养板(包括适当的对照)。

1.2将2μL山羊抗兔IgG-HRP缀合物(组分E)加入10mL含1%BSA的PBS(PBS-BSA,不包括在内)中以制备山羊抗兔IgG-HRP缀合物工作溶液。注意:10 mL山羊抗兔IgG-HRP结合物工作溶液足以用于1个平板。建议将此山羊抗兔IgG-HRP结合物工作溶液的浓度作为初始浓度进行尝试。每个特定应用的佳浓度可能需要凭经验确定。

1.3用含有0.02%至0.05%Tween 20(PBS-Tween)和排液的PBS洗涤ELISA孔三次。

1.4每孔加入100μL山羊抗兔IgG-HRP结合物工作液。

1.5在室温下孵育30分钟。排出山羊抗兔IgG-HRP结合物。

1.6用PBS-Tween洗涤孔三次并排干。

2.在ELISA板中运行过氧化物酶测定:

2.1在含有样品和对照的每个排出的微孔板中加入100μL过氧化物酶工作溶液。

2.2在室温下孵育反应30分钟或更长时间,避光。

2.3用荧光板读数器在激发= 530-570nm,发射= 590-600nm(佳Ex / Em = 540 / 590nm,截止= 570nm)监测荧光增加。注意:也可以用吸光度酶标仪在576±5 nm的波长下读板。与荧光读数相比,吸收检测具有较低的灵敏度。

 

参考文献

Assessment of Tofacitinib and Ruxolitinib and their Anti Inflammatory Effects on Myeloperoxidase
Authors: Amber Milton
Journal: (2017)

Patterned Photonic Nitrocellulose for Pseudo-Paper ELISA
Authors: Junjie Chi, Bingbing Gao, Mi Sun, Fengling Zhang, Enben Su, Hong Liu, Zhongze Gu
Journal: Analytical Chemistry (2017)

Spinal Cord Inflammation: Molecular Imaging after Thoracic Aortic Ischemia Reperfusion Injury
Authors: Hassan Albadawi, John W Chen, Rahmi Oklu, Yue Wu, Gregory Wojtkiewicz, Benjamin Pulli, John D Milner, Richard P Cambria, Michael T Watkins
Journal: Radiology (2016): 152222

Myeloperoxidase Nuclear Imaging for Epileptogenesis
Authors: Yinian Zhang, Daniel P Seeburg, Benjamin Pulli, Gregory R Wojtkiewicz, Lionel Bure, Wendy Atkinson, Stefan Schob, Yoshiko Iwamoto, Muhammad Ali, Wei Zhang
Journal: Radiology (2015): 822–830

Myeloperoxidase–Hepatocyte–Stellate Cell Cross Talk Promotes Hepatocyte Injury and Fibrosis in Experimental Nonalcoholic Steatohepatitis
Authors: Benjamin Pulli, Muhammad Ali, Yoshiko Iwamoto, Matthias WG Zeller, Stefan Schob, Jenny J Linnoila, John W Chen
Journal: Antioxidants & redox signaling (2015): 1255–1269

Ordered cleavage of myeloperoxidase ester bonds releases active site heme leading to inactivation of myeloperoxidase by benzoic acid hydrazide analogs
Authors: Jiansheng Huang, Forrest Smith, Peter Panizzi
Journal: Archives of biochemistry and biophysics (2014): 74–85

Raising the shields: PCR in the presence of metallic surfaces protected by tailor-made coatings
Authors: Frank D Scherag, Thomas Brandstetter, Jürgen Rühe
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2014): 576–582

Measuring myeloperoxidase activity in biological samples
Authors: Benjamin Pulli, Muhammad Ali, Reza Forghani, Stefan Schob, Kevin LC Hsieh, Gregory Wojtkiewicz, Jenny J Linnoila, John W Chen
Journal: PLoS One (2013): e67976

Micro-volume wall-less immunoassays using patterned planar plates
Authors: Katherine R Kozak, Jianyong Wang, Melvin Lye, Rashi Takkar, Namyong Kim, Hyunjae Lee, Noo Li Jeon, Kedan Lin, Crystal Zhang, Wai Lee T Wong
Journal: Lab on a Chip (2013): 1342–1350

Distinguishing inflammation from tumor and peritumoral edema by myeloperoxidase magnetic resonance imaging
Authors: Anne Kleijn, John W Chen, Jason S Buhrman, Gregory R Wojtkiewicz, Yoshiko Iwamoto, Martine L Lamfers, Anat O Stemmer-Rachamimov, Samuel D Rabkin, Ralph Weissleder, Robert L Martuza
Journal: Clinical Cancer Research (2011): 4484–4493

 

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Amplite 荧光法羊抗鼠IgG-HRP偶联物ELISA检测试剂盒 Cat#11540
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Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒 红色荧光-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒 红色荧光 价格 2823
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500 Tests

产品货号

Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒 红色荧光

产品参数
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于过氧化物酶的试剂盒,过氧化酶是常用于与抗体按4:1比例结合的小分子(MW ~40 KD)。由于分子量小,因此在与抗体、抗原结合形成复合物时不会带来空间阻碍。与其它酶标签相比,过氧化酶也更便宜;其主要缺点是在保护剂(例如叠氮化钠)存在的条件下溶解性低;而在低浓度下,过氧化酶的活性低。HRP偶联物是广泛用作ELISA(酶联免疫吸附实验)、免疫组化技术、Northern、 Southern和Western blot分析的第二个检测试剂。Amplite比色法过氧化酶检测试剂盒 *蓝色* 提供了一种快速(10分钟)HRP一步法均质的、无需洗脱的分析方案。本试剂盒使用Amplite Blue,我们的超灵敏HRP显色底物,即Amplite Blue作为过氧化酶的显色底物,它比双氧水和过氧化酶及其它的过氧化酶的显色底物(例如TMB, ABTS, OPD 和K-Blue)具有更高的灵敏度。Amplite Blue产生高吸收物质,在664nm处有大吸收峰。这种近红外吸收使自动化检测生物样品时本底吸收很小。本试剂盒可以用于ELISA,酶促反应动力学分析,氧化酶抑制剂高通量筛选等。试剂盒经过优化处理,并且可用于高通量液体处理设备。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 576 ± 5nm
推荐孔板: 透明底板
   
荧光酶标仪  
Ex: 540nm
Em: 590nm
Cutoff: 575nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备HRP工作溶液(50μL)
2.添加HRP标准品和/或测试样品(50μL)
3.在室温下孵育10-30分钟
4.监测664±5 nm的吸光度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. Amplite 红色过氧化物酶底物储备液(100X):
将250μLDMSO(组分E)加入到Amplite 红色过氧化物酶底物(组分A)的小瓶中以制备100X Amplite 红色过氧化物酶底物储备溶液。 应立即使用原液,避光。

2. HRP标准溶液(20 U / mL):
将1mL测定缓冲液(组分C)加入到辣根过氧化物酶(组分D)的小瓶中以制备20U / mL的HRP标准溶液。

3. H2O2储备溶液(20 mM):
将22.7μL的3%H2O2(0.88M,组分B)加入977μL的测定缓冲液(组分C)中以制备20mM H2O2储备溶液。 注意:稀释的H2O2溶液不稳定。 应丢弃未使用的部分。

 

2.标准溶液

HRP标准
在1999μL分析缓冲液(组分C)中加入1μL的20U / mL HRP标准溶液,得到10mU / mL HRP标准溶液(SD7)。 取10 mU / mL HRP标准溶液(SD7)并进行1:3连续稀释,得到连续稀释的HRP标准品(SD6-SD1)和分析缓冲液(组分C)。

 

3.工作溶液

将50μL的100X Amplite 红色过氧化物酶底物储备溶液和50μL的20mM H2O2储备溶液加入到4.9mL的测定缓冲液(组分C)中以制备HRP工作溶液,避光。

 

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中HRP标准品和测试样品的布局。 SD = HRP标准品(SD1-SD7,0.01至10 mU / mL); BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
SD1 SD1
SD2 SD2
SD3 SD3    
SD4 SD4    
SD5 SD5    
SD6 SD6    
SD7 SD7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
SD1-SD7 50ul 连续稀释液(0.01至10 mU / mL)
BL 50ul 分析缓冲液(组分C)
TS 50ul 测试样品

1.根据表1和2中提供的布局制备HRP标准品(SD),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。注意:高水平的HRP(例如,> 100mU / mL终浓度)可能由于Amplite TM Red(至非荧光)的过度氧化而导致荧光信号降低。

2.向HRP标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLHRP工作溶液,使总HRP测定体积为100μL/孔。对于384孔板,在每个孔中加入25μLHRP工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应10至30分钟,避光。

4.用荧光板读数器在激发= 540±10nm,发射= 590±10nm(佳Ex / Em = 540 / 590nm,截止= 575nm)监测荧光增加。注意:也可以将板的内容物转移到白色透明底板上,并用吸光度酶标仪在576±5nm的波长下读数。与荧光读数相比,吸收检测具有较低的灵敏度。

 

参考文献

Identification of acetylcholinesterase inhibitors using homogenous cell-based assays in quantitative high-throughput screening platforms
Authors: Shuaizhang Li, Ruili Huang, Samuel Solomon, Yitong Liu, Bin Zhao, Michael F Santillo, Menghang Xia
Journal: Biotechnology journal (2017): 1600715

 

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Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒 Cat#11553
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Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒 近红外荧光-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒 近红外荧光 价格 4245
产品规格

500 Tests

产品货号

Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒 近红外荧光

产品参数
Ex (nm) 648 Em (nm) 668
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于过氧化物酶的试剂盒,过氧化酶是常用于与抗体按4:1比例结合的小分子(MW ~40 KD)。由于分子量小,因此在与抗体、抗原结合形成复合物时不会带来空间阻碍。与其它酶标签相比,过氧化酶也更便宜;其主要缺点是在保护剂(例如叠氮化钠)存在的条件下溶解性低;而在低浓度下,过氧化酶的活性低。HRP偶联物是广泛用作ELISA(酶联免疫吸附实验)、免疫组化技术、Northern、 Southern和Western blot分析的第二个检测试剂。Amplite荧光法过氧化酶检测试剂盒 *近红外荧光* 提供了一种快速(10分钟)HRP一步法均质的、无需洗脱的分析检测方案。本试剂盒使用Amplite IR,HRP近红外荧光底物。Amplite IR是过氧化酶的显色底物,它比H2O2和过氧化酶,及其它的过氧化酶的显色底物(例如TMB, ABTS, OPD 和K-Blue)具有更高的灵敏度。Amplite IR可产生在647 nm具有大吸收光,在670 nM处具有大激发光的底物,这种近红外吸收使自动化检测生物样品时本底吸收很小,在600nm处几乎没有光吸收。本试剂盒可以用于ELISAs,酶促反应动力学分析,氧化酶抑制剂高通量筛选等。本试剂盒经过优化处理,并且可用于高通量液体处理设备。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 647 ± 5nm
推荐孔板: 透明底板
   
荧光酶标仪  
Ex: 640nm
Em: 680nm
Cutoff: 665nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备过氧化物酶工作溶液(50μL)
2.添加HRP标准品和/或测试样品(50μL)
3.在室温下孵育30-60分钟
4.监测Ex / Em = 640/680 nm处的荧光强度(截止= 665 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 Amplite IR过氧化物酶底物储备液(100X):
将250μLDMSO(组分E)加入到Amplite IR过氧化物酶底物(组分A)的小瓶中以制备100X Amplite IR过氧化物酶底物储备溶液。

1.2 HRP标准溶液(20 U / mL):
将1mL测定缓冲液(组分C)加入到辣根过氧化物酶(组分D)的小瓶中以制备20U / mL HRP标准溶液。

1.3 H2O2储备溶液(20 mM):
将22.7μL的3%H2O2(0.88M,组分B)加入977μL的测定缓冲液(组分C)中以制备20mM H2O2储备溶液。 注意:稀释的H2O2溶液不稳定。 应丢弃未使用的部分。

 

2.标准溶液

HRP标准
将15μL20U / mL HRP标准溶液加入985μL测定缓冲液(组分C)中,得到300 mU / mL HRP标准溶液(SD7)。 取300 mU / mL HRP标准溶液(SD7),进行1:3连续稀释,得到连续稀释的HRP标准品(SD6 – SD1)和分析缓冲液(组分C)。

 

3.工作溶液

将50μL的100X Amplite IR过氧化物酶底物储备溶液和50μL的20mM H2O2储备溶液加入到4.9mL的测定缓冲液(组分C)中以制备过氧化物酶工作溶液,避光。

 

样品分析

表1.实心黑色96孔微孔板中HRP标准品和测试样品的布局。 SD = HRP标准品(SD1-SD7,0.41至300mU / mL),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
SD1 SD1
SD2 SD2
SD3 SD3    
SD4 SD4    
SD5 SD5    
SD6 SD6    
SD7 SD7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
SD1-SD7 50ul 连续稀释液(0.41至300 mU / mL)
BL 50ul 分析缓冲液(组分C)
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局制备HRP标准品(SD),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

2.向HRP标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL过氧化物酶工作溶液,使总过氧化物酶测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μL过氧化物酶工作溶液,总体积为50μL/孔。

3.在室温下孵育反应30至60分钟,避光。

4.用荧光板读数器在激发= 600-650nm,发射= 650-690nm(佳Ex / Em = 640 / 680nm,截止= 665nm)监测荧光增加。 注意:也可将板的内容物转移到白色透明底板上,并用吸光度酶标仪在647±5nm波长下读数。 与荧光读数相比,吸收检测具有较低的灵敏度。

 

参考文献

Enzymatic oxidation of dipyridamole in homogeneous and micellar solutions in the horseradish peroxidase-hydrogen peroxide system
Authors: Almeida LE, Imasato H, Tabak M.
Journal: Biochim Biophys Acta (2006): 216

Horseradish peroxidase-driven fluorescent labeling of nanotubes with quantum dots
Authors: Didenko VV, Baskin DS.
Journal: Biotechniques (2006): 295

Recent advances in catalytic peroxidase histochemistry
Authors: Krieg R, Halbhuber KJ.
Journal: Cell Mol Biol (Noisy-le-grand) (2003): 547

Vesicular transport route of horseradish C1a peroxidase is regulated by N- and C-terminal propeptides in tobacco cells
Authors: Matsui T, Nakayama H, Yoshida K, Shinmyo A.
Journal: Appl Microbiol Biotechnol (2003): 517

Development of a novel enzyme/prodrug combination for gene therapy of cancer: horseradish peroxidase/indole-3-acetic acid
Authors: Greco O, Folkes LK, Wardman P, Tozer GM, Dachs GU.
Journal: Cancer Gene Ther (2000): 1414

Preparation, morphological characterization, and activity of thin films of horseradish peroxidase
Authors: Vianello F, Zennaro L, Di Paolo ML, Rigo A, Malacarne C, Scarpa M.
Journal: Biotechnol Bioeng (2000): 488

Synthesis and purification of horseradish peroxidase-labeled oligonucleotides for tyramide-based fluorescence in situ hybridization
Authors: van Gijlswijk RP, van de Corput MP, Bezrookove V, Wiegant J, Tanke HJ, Raap AK.
Journal: Histochem Cell Biol (2000): 175

Evidence for free radical formation during the oxidation of 2′-7′-dichlorofluorescin to the fluorescent dye 2′-7′-dichlorofluorescein by horseradish peroxidase: possible implications for oxidative stress measurements
Authors: Rota C, Chignell CF, Mason RP.
Journal: Free Radic Biol Med (1999): 873

In situ identification of cyanobacteria with horseradish peroxidase-labeled, rRNA-targeted oligonucleotide probes
Authors: Schonhuber W, Zarda B, Eix S, Rippka R, Herdman M, Ludwig W, Amann R.
Journal: Appl Environ Microbiol (1999): 1259

Relative number of cells projecting from contralateral and ipsilateral nucleus isthmi to loci in the optic tectum is dependent on visuotopic location: horseradish peroxidase study in the leopard frog
Authors: Dudkin EA, Gruberg ER.
Journal: J Comp Neurol (1999): 212

 

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产品名称 货号
Amplite 荧光法过氧化酶检测试剂盒 Cat#11552
Amplite 比色法过氧化酶检测试剂盒 Cat#11551
Amplite 发光法过氧化酶检测试剂盒 Cat#11559

Amplite 荧光法谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒 红色荧光-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Amplite 荧光法谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒 红色荧光 价格 4245
产品规格

200 Tests

产品货号

Amplite 荧光法谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒 红色荧光

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Amplite 荧光法谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒 红色荧光 是美国AAT Bioquest生产的检测谷胱甘肽过氧化物酶的试剂盒,谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)是具有过氧化物酶活性的酶家族,以保护生物体免受氧化损伤。GPx在将有机氢过氧化物(例如脂质氢过氧化物)还原成其相应的醇或将游离过氧化氢还原成水。因此,它可以防止细胞膜和细胞中其他氧化剂敏感位点的氧化损伤。现在科研已经注意到,改变GPx水平与由许多评论和复杂疾病引起的损伤相关。在生物样品中测量GPx水平,作为潜在癌症,糖尿病,神经退行性疾病和心血管疾病的潜在指标。AAT Bioquest的荧光谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒提供灵敏的荧光测定法,用于测量生物样品中的GPx水平。该测定基于GPx催化的谷胱甘肽(GSH)氧化成氧化型谷胱甘肽(GSSG)。生成的GSSG通过谷胱甘肽还原酶(GR)和NADPH再循环至还原态GSH:

 

R-O-O-H + 2GSH     GPx             R-O-H + GSSG + H2O

GSSG + NADPH + H+        GR           2GSH + NADP+

 

产品NADP +可以使用我们新开发的专有NADP传感器Quest Fluor™NADP Probe进行专门监控。 NADP传感器仅与NADP反应产生荧光产物。 荧光信号可以用荧光酶标仪在Ex / Em = 420 / 480nm处测量,其与GPx活性成正比。与测量NADPH在340 nm处吸光度降低的其他商业试剂盒相比,我们的Quest Fluor™NADP探针可用于直接量化NADP水平。通过这种荧光测定GPx测定,我们能够在155μL反应体积中检测低至1.2 mU / mL的GPx。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的Amplite 荧光法谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒。 

 

适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 420nm
Em: 480nm
Cutoff: 430nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

96孔板的测定方案

概述

准备GPx分析混合物(50μL)

添加GPx标准品或测试样品(50μL)

在室温下孵育30分钟

加入20μLQuestFluor™NADP探针

添加20μLNAP检测溶液

在室温下孵育10-20分钟

添加15μL增强剂

溶液在室温孵育30-60分钟,在Ex / Em = 420 / 480nm处记录荧光

注意1.为了获得佳效果,强烈建议使用黑色版。

注意2.在开始实验之前,在室温下解冻每个试剂盒组分的一个小瓶。

 

操作方法

 

1.制备谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)标准储备液:

将50μLddH2O或1×PBS缓冲液加入到GPx标准品(组分A)的小瓶中,制成10U / mL标准储备溶液。

注意:未使用的GPx标准储备溶液应分为单次使用的等分试样并储存在-20ºC。

 

2.准备GPx标准的系列稀释液:

2.1将4μLGPx标准储备溶液(10U / mL,来自步骤1)加入996L 1×PBS缓冲液中,以产生浓度为40mU / mL的标准溶液。

注意:稀释的GPx标准溶液不稳定,应在4小时内使用。

2.2取200μL40mU / mL GPx标准溶液进行1:2连续稀释,得到大约20,10,5,2.5,1.25,0.625和0 mU / mL的GPx标准品系列稀释液。

2.3如表1和2中所述,将GPx标准品和含有GPx的测试样品的系列稀释液加入到固体黑色96孔微量培养板中。

 

表1实心黑色96孔微孔板中GPx标准品和测试样品的布局

BL

BL

TS

TS

….

….

 

 

 

 

 

 

GP 1

GP 1

….

….

….

….

 

 

 

 

 

 

GP 2

GP 2

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

GP 3

GP 3

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

GP 4

GP 4

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

GP 5

GP 5

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

GP 6

GP 6

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

GP 7

GP 7

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

注意:GP = GPx标准,BL =空白对照,TS =测试样品。

 

表2每个孔的试剂组成

GPx Standard

Blank Control

Test Sample

Serial Dilutions*: 50 μL

1×PBS Buffer : 50 μL

50 μL

*注意:将连续稀释的GPx标准品从大约0.6 mU / mL加到40 mU / mL,一式两份加入GP1到GP7的孔中。

 

3.准备GSH原液(100X):

将100μlddH2 O加入到GSH小瓶(组分D)中以制备100X GSH储备溶液。

 

4.准备GPx底物储备液(100X):

将100μlddH2O加入到基质小瓶(组分E)中以制备100X底物储备溶液。

 

5.准备GPx分析混合物:

5.1将5 mL测定缓冲液(组分B)加入一瓶酶混合物(组分C)中。

5.2将50μLGSH储备溶液(来自步骤3的组分D),50μL底物储备溶液(组分E,来自步骤4)加入到组分B + C的瓶子中(来自步骤5.1),并充分混合以进行GPx测定 混合物(组分B + C + D + E)。

注1:该GPx测定混合物足以用于一个96孔板。 它不稳定,请及时使用。

注2:不建议储存未使用的GPx分析混合物。 可以将未使用的组分B + C混合物(来自步骤5.1)分成单次使用的等分试样并储存在-20ºC,尽管灵敏度可能会降低。

注3; 将未使用的100X GSH储备溶液(来自步骤3)和100X GPx底物储备溶液(来自步骤4)分成单次使用的等分试样并储存在-20ºC。

 

6.运行GPx分析:

6.1将50μLGPx测定混合物(来自步骤5.2)加入到GPx标准品,空白对照和测试样品的每个孔中(参见步骤2.3),使总体积为100μL/孔。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μLGPx测定混合物。

6.2在室温下孵育反应30分钟,避光。

 

7.运行NADP测定:

7.1将20μLQuestFluor™NADP探针(组分F)加入到GPx标准品,空白对照品和测试样品的每个孔中,充分混合。

7.2在每个孔中加入20μLNAP检测溶液(组分G),充分混匀。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和10μLQuestFluor™NADP探针(组分F)和10μLNAP检测溶液(组分G)。

7.3在室温下孵育反应10-20分钟,避光。

7.4向每个孔中加入15μL增强剂(组分H),使总测定体积为155μL/孔,并在室温下孵育30-60分钟,避光。

注意:对于384孔板,添加7.5μL增强剂。

7.5使用荧光读板仪在Ex / Em = 420/480 nm处监测荧光增加。

 

参考文献

A mechanistic mathematical model for the catalytic action of glutathione peroxidase
Authors: Pannala VR, Bazil JN, Camara AK, Dash RK.
Journal: Free Radic Res (2014): 487

A supramolecular microgel glutathione peroxidase mimic with temperature responsive activity
Authors: Yin Y, Jiao S, Lang C, Liu J.
Journal: Soft Matter (2014): 3374

Basal levels of glutathione peroxidase correlate with onset of radiation induced lung disease in inbred mouse strains
Authors: Kunwar A, Haston CK.
Journal: Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol (2014): L597

Can recombinant human glutathione peroxidase 1 with high activity be efficiently produced in Escherichia coli
Authors: Guo X, Song J, Yu Y, Wei J.
Journal: Antioxid Redox Signal (2014): 1524

Changes of the Thioredoxin System, Glutathione Peroxidase Activity and Total Antioxidant Capacity in Rat Brain Cortex During Acute Liver Failure: Modulation by L-histidine
Authors: Ruszkiewicz J, Albrecht J.
Journal: Neurochem Res. (2014)

Characterization and structural analysis of human selenium-dependent glutathione peroxidase 4 mutant expressed in Escherichia coli
Authors: Yu Y, Song J, Guo X, Wang S, Yang X, Chen L, Wei J.
Journal: Free Radic Biol Med (2014): 332

Characterization of biochemical properties of a selenium-independent glutathione peroxidase of Cryptosporidium parvum
Authors: Kang JM, Ju HL, Sohn WM, Na BK.
Journal: Parasitology (2014): 570

Clinical significance and therapeutic value of glutathione peroxidase 3 (GPx3) in hepatocellular carcinoma
Authors: Qi X, Ng KT, Lian QZ, Liu XB, Li CX, Geng W, Ling CC, Ma YY, Yeung WH, Tu WW, Fan ST, Lo CM, Man K.
Journal: Oncotarget. (2014)

Construction of a highly stable artificial glutathione peroxidase on a protein nanoring
Authors: Miao L, Zhang X, Si C, Gao Y, Zhao L, Hou C, Shoseyov O, Luo Q, Liu J.
Journal: Org Biomol Chem (2014): 362

Daily rhythms of catalase and glutathione peroxidase expression and activity are endogenously driven in the hippocampus and are modified by a vitamin A-free diet
Authors: Navigatore-Fonzo LS, Delgado SM, Gimenez MS, Anzulovich AC.
Journal: Nutr Neurosci (2014): 21

FDP(荧光素二磷酸酯四铵盐) CAS 217305-49-2-AAT Bioquest荧光染料

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FDP(荧光素二磷酸酯四铵盐) CAS 217305-49-2价格 5198
产品规格

5 mg

产品货号

FDP(荧光素二磷酸酯四铵盐) CAS 217305-49-2

产品参数
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 560.39 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

FDP [荧光素二磷酸酯四铵盐]是美国AAT Bioquest生产的荧光素,该产品在与磷酸酶相互作用后,无色和非荧光FDP被水解成高荧光荧光素,其表现出优异的光谱特性,与配备有氩激光激发的大多数荧光仪器的佳检测相匹配。或者,FDP也可用于检测发色模式中的磷酸酶,因为酶产物(荧光素)表现出很大的消光系数(接近100,000cm-1mol-1)。在一些文献中,FDP被认为是敏感的荧光磷酸酶底物之一。FDP已广泛用于各种ELISA测定。此外,它还用于检测酪氨酸磷酸酶。FDP是热不稳定的,需要特别注意保存固体样品和储备溶液。

Mup是用于磷酸酶的荧光底物。它广泛用于检测溶液中的磷酸酶。然而,这种磷酸酶底物不适合活细胞或连续测定,因为MU(4-甲基伞形酮)是酶产物,其仅在pH值> 10时发展出大荧光。因此,也难以使用MUP检测具有酸性佳pH范围的磷酸酶,例如酸性磷酸酶。

AAT Bioquest提供的CF-MUP Plus,用于解决与MUP基质相关的pH限制问题。CF-MU在pH 5.0以上表现出大荧光,因此CF-MUP底物可以很好地用于连续磷酸酶测定。它还可以用于酸性pH的测定,例如酸性磷酸酶和一些蛋白磷酸酶。

衍生自红色荧光二甲基吖啶酮(Sun Red)的磷酸酶底物仅含有单个水解敏感部分,从而避免了基于荧光素底物的双相动力学。磷酸酶催化的太阳红磷酸盐(SRP)的水解产生可以用633nm激光激发并且发射~660nm的太阳红荧光团。虽然Sun Red很容易在633 nm处激发,红色发射约为660 nm,但SRP在633 nm处的吸收非常小,没有红色发射,使SRP成为敏感的NIR磷酸酶传感器之一。请不要使用DMSO制备储备溶液,因为它会显著增加分析背景。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的FDP [荧光素二磷酸酯四铵盐]。 

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适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 490nm
Em: 514nm
Cutoff: 500nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

磷酸盐底物的测定方案

概述

在Tris缓冲液(50μL)中制备10-50μM磷酸盐

添加磷酸酶标准品和/或测试样品(50μL)

在室温或37℃孵育30至120分钟监测荧光强度

注意:以下是溶液中磷酸酶测定的推荐方案。 该说明仅提供指导,应根据具体需要进行修改。

 

1.准备工作解决方案:

1.1在溶剂中制备2至10 mM的储备溶液(见说明书中的表)。任何未使用的溶液需要等分并在<-20℃冷冻。

注意1:不要使用DMSO,ETOH或METH制备SunRed™磷酸盐(目录号11629)的原液,因为它可以显著提高分析背景。

注意2:避免反复冻融循环,避免光照。

1.2制备2X磷酸盐工作溶液:在实验当天,将底物溶解在溶剂中或在室温下解冻等份的储备溶液(来自步骤1.1)。在100 mM Tris缓冲液或您选择的缓冲液(pH 8至9)(非磷酸盐缓冲液)中制备10至50μM的2X工作溶液。

 

2.在上清液中进行磷酸酶测定:

2.1将50μL2X磷酸盐工作溶液(来自步骤1.2)加入磷酸酶标准品,空白对照和测试样品的每个孔中,使总磷酸酶测定体积为100μL/孔。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μL2X磷酸盐工作溶液。

2.2在所需温度下孵育反应30至120分钟,避光。

2.3用荧光板读数器检测适当滤光片组(见说明书中的表)的荧光增加。

2.4空白孔中的荧光(仅用测定缓冲液)用作对照,并从具有磷酸酶反应的那些孔的值中减去。

 

参考文献

Fluorescence quantification of intracellular materials at the single-cell level by an integrated dual-well array microfluidic device
Authors: Chenyu Wang, Lufeng Ren, Wenwen Liu, Qingquan Wei, Manqing Tan, Yude Yu
Journal: Analyst (2019)

Multifunctional and Programmable Modulated Interface Reactions on Proteinosomes
Authors: Pei Zhou, Shuang Wu, Xiaoman Liu, Guangyu Wu, Mohammad Hegazy, Xin Huang
Journal: ACS Applied Materials & Interfaces (2018)

荧光碱性磷酸酶底物 DiFMUP CAS 214491-43-7-AAT Bioquest荧光染料

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荧光碱性磷酸酶底物 DiFMUP CAS 214491-43-7价格 1386
产品规格

5 mg

产品货号

荧光碱性磷酸酶底物 DiFMUP  CAS 214491-43-7

产品参数
Ex (nm) 358 Em (nm) 450
分子量 292.13 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

6,8-二氟-4-甲基伞形基磷酸酯(DiFMUP)是美国AAT Bioquest生产的荧光素,该产品在与磷酸酶相互作用后,无色和非荧光FDP被水解成高荧光荧光素,其表现出优异的光谱特性,与配备有氩激光激发的大多数荧光仪器的佳检测相匹配。或者,FDP也可用于检测发色模式中的磷酸酶,因为酶产物(荧光素)表现出很大的消光系数(接近100,000cm-1mol-1)。在一些文献中,FDP被认为是敏感的荧光磷酸酶底物之一。FDP已广泛用于各种ELISA测定。此外,它还用于检测酪氨酸磷酸酶。FDP是热不稳定的,需要特别注意保存固体样品和储备溶液。

Mup是用于磷酸酶的荧光底物。它广泛用于检测溶液中的磷酸酶。然而,这种磷酸酶底物不适合活细胞或连续测定,因为MU(4-甲基伞形酮)是酶产物,其仅在pH值> 10时发展出大荧光。因此,也难以使用MUP检测具有酸性佳pH范围的磷酸酶,例如酸性磷酸酶。

AAT Bioquest提供的CF-MUP Plus,用于解决与MUP基质相关的pH限制问题。CF-MU在pH 5.0以上表现出大荧光,因此CF-MUP底物可以很好地用于连续磷酸酶测定。它还可以用于酸性pH的测定,例如酸性磷酸酶和一些蛋白磷酸酶。

衍生自红色荧光二甲基吖啶酮(Sun Red)的磷酸酶底物仅含有单个水解敏感部分,从而避免了基于荧光素底物的双相动力学。磷酸酶催化的太阳红磷酸盐(SRP)的水解产生可以用633nm激光激发并且发射~660nm的太阳红荧光团。虽然Sun Red很容易在633 nm处激发,红色发射约为660 nm,但SRP在633 nm处的吸收非常小,没有红色发射,使SRP成为敏感的NIR磷酸酶传感器之一。请不要使用DMSO制备储备溶液,因为它会显著增加分析背景。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的6,8-二氟-4-甲基伞形基磷酸酯(DiFMUP)。

实验方案

磷酸盐底物的测定方案

概述

在Tris缓冲液(50μL)中制备10-50μM磷酸盐

添加磷酸酶标准品和/或测试样品(50μL)

在室温或37℃孵育30至120分钟监测荧光强度

注意:以下是溶液中磷酸酶测定的推荐方案。 该说明仅提供指导,应根据具体需要进行修改。

 

1.准备工作解决方案:

1.1在溶剂中制备2至10 mM的储备溶液(见说明书中的表)。任何未使用的溶液需要等分并在<-20℃冷冻。

注意1:不要使用DMSO,ETOH或METH制备SunRed™磷酸盐(目录号11629)的原液,因为它可以显著提高分析背景。

注意2:避免反复冻融循环,避免光照。

1.2制备2X磷酸盐工作溶液:在实验当天,将底物溶解在溶剂中或在室温下解冻等份的储备溶液(来自步骤1.1)。在100 mM Tris缓冲液或您选择的缓冲液(pH 8至9)(非磷酸盐缓冲液)中制备10至50μM的2X工作溶液。

 

2.在上清液中进行磷酸酶测定:

2.1将50μL2X磷酸盐工作溶液(来自步骤1.2)加入磷酸酶标准品,空白对照和测试样品的每个孔中,使总磷酸酶测定体积为100μL/孔。

注意:对于384孔板,每孔加入25μL样品和25μL2X磷酸盐工作溶液。

2.2在所需温度下孵育反应30至120分钟,避光。

2.3用荧光板读数器检测适当滤光片组(见说明书中的表)的荧光增加。

2.4空白孔中的荧光(仅用测定缓冲液)用作对照,并从具有磷酸酶反应的那些孔的值中减去。

 

参考文献

Application of intracellular alkaline phosphatase activity measurement in detection of neutrophil adherence in vitro
Authors: Bednarska K, Klink M, Sulowska Z.
Journal: Mediators Inflamm (2006): 19307

Evaluation of an alternative method for the enumeration and confirmation of Clostridium perfringens from treated and untreated sewages
Authors: Wohlsen T, Bayliss J, Gray B, Bates J, Katouli M.
Journal: Lett Appl Microbiol (2006): 438

Fluorometric cell-ELISA for quantifying rabies infection and heparin inhibition
Authors: Rincon V, Corredor A, Martinez-Gutierrez M, Castellanos JE.
Journal: J Virol Methods (2005): 33

Purification and partial characterization of an acid phosphatase from Spirodela oligorrhiza and its affinity for selected organophosphate pesticides
Authors: Hoehamer CF, Mazur CS, Wolfe NL.
Journal: J Agric Food Chem (2005): 90

Relative movement and soil fixation of soluble organic and inorganic phosphorus
Authors: Anderson BH, Magdoff FR.
Journal: J Environ Qual (2005): 2228

Crystal structure of a covalent intermediate of endogenous human arylsulfatase A
Authors: Chruszcz M, Laidler P, Monkiewicz M, Ortlund E, Lebioda L, Lewinski K.
Journal: J Inorg Biochem (2003): 386

Development of a rapid 1-h fluorescence-based cytotoxicity assay for Listeria species
Authors: Shroyer ML, Bhunia AK.
Journal: J Microbiol Methods (2003): 35

Enzymatic differentiation of Candida parapsilosis from other Candida spp. in a membrane filtration test
Authors: Bauters TG, Peleman R, Dhont M, Vanhaesebrouck P, Nelis HJ.
Journal: J Microbiol Methods (2003): 11

A colorimetric and fluorometric microplate assay for the detection of microcystin-LR in drinking water without preconcentration
Authors: Bouaicha N, Maatouk I, Vincent G, Levi Y.
Journal: Food Chem Toxicol (2002): 1677

LVV-hemorphin-4 modulates Ca2+/calmodulin-dependent pathways in the immune system by the same mechanism as in the brain
Authors: Barkhudaryan N, Gambarov S, Gyulbayazyan T, Nahapetyan K.
Journal: J Mol Neurosci (2002): 203

磷酸基团近红外荧光染料 SunRed-AAT Bioquest荧光染料

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磷酸基团近红外荧光染料 SunRed 价格 2823
产品规格

5 mg

产品货号

磷酸基团近红外荧光染料 SunRed

产品参数
Ex (nm) 653 Em (nm) 661
分子量 422.20 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

磷酸基团近红外荧光染料 SunRed是美国AAT Bioquest生产的用于磷酸的试剂盒,磷酸酶催化的太阳红磷酸盐(SRP)的水解产生可以用633nm激光激发并且发射~660nm的太阳红荧光团。虽然Sun Red很容易在633 nm处激发,红色发射约为660 nm,但SRP在633 nm处的吸收非常小,没有红色发射,使SRP成为敏感的NIR磷酸酶传感器之一。请不要使用DMSO制备储备溶液,因为它会显着增加分析背景。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的磷酸基团近红外荧光染料 SunRed。 

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 620nm
Em: 660nm
Cutoff: 640nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.在Tris缓冲液(50μL)中制备并添加10 – 50μMSunRed 磷酸盐
2.添加碱性磷酸酶标准品和/或测试样品(50μL)
3.在室温或37°C孵育30至120分钟
4.监测Ex / Em = 620/660 nm处的荧光强度(截止640 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 SunRed 磷酸盐原液:
在无菌水中制备2至10 mM的SunRed 磷酸盐储备液。 注意:应立即使用原液。 注意:不要使用DMSO,ETOH或METH制备储备溶液,因为它会显着增加分析背景。 注意:避光。

 

2.工作溶液

SunRed 磷酸盐工作溶液(2X):
在实验当天,将SunRed 磷酸盐固体溶解在无菌H2O中,或在室温下解冻等份的SunRed 磷酸盐储备溶液。 在100 mM Tris缓冲液或pH 8至9的缓冲液中制备10至50μM的2X工作溶液。建议使用SunRed 磷酸盐终浓度5至25μM测定溶液中的碱性磷酸酶活性。

 

样品分析

1.在碱性磷酸酶标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL2XSunRed™磷酸盐工作溶液,使总碱性磷酸酶测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μL样品和25μL2XSunRed™磷酸盐工作溶液。

2.在所需温度下孵育反应30至120分钟,避光。

3.用荧光板读数器监测Ex / Em = 620 / 630nm处的荧光增加(在640nm处截止)。

 

参考文献

DNA condensation induced by cationic surfactant: a viscosimetry and dynamic light scattering study
Authors: Marchetti S, Onori G, Cametti C.
Journal: J Phys Chem B (2005): 3676

Simultaneous trichromatic fluorescence detection of proteins on Western blots using an amine-reactive dye in combination with alkaline phosphatase- and horseradish peroxidase-antibody conjugates
Authors: Martin K, Hart C, Liu J, Leung WY, Patton WF.
Journal: Proteomics (2003): 1215

Green/red dual fluorescence detection of total protein and alkaline phosphate-conjugated probes on blotting membranes
Authors: Top KP, Hatleberg G, Berggren KN, Ryan D, Kemper C, Haugland RP, Patton WF.
Journal: Electrophoresis (2001): 896

Characterization of 9H-(1,3-dichlor-9, 9-dimethylacridin-2-ona-7-yl)-phosphate (DDAO) as substrate of PP-2A in a fluorimetric microplate assay for diarrhetic shellfish toxins (DSP)
Authors: Leira F, Vieites JM, Vieytes MR, Botana LM.
Journal: Toxicon (2000): 1833

A column centrifugation method for the reconstitution in liposomes of the mitochondrial F0F1 ATP synthase/ATPase
Authors: Vazquez-Contreras E, de Gomez-Puyou MT, Dreyfus G.
Journal: Protein Expr Purif (1996): 55

The electrochemical-proton-gradient-activated states of F0F1 ATPase in plant mitochondria as revealed by detergents
Authors: Valerio M, Diolez P, Haraux F.
Journal: Eur J Biochem (1993): 565

磷酸基团绿色荧光底物 PhosLite-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
磷酸基团绿色荧光底物 PhosLite 价格 2823
产品规格

1 mg

产品货号

磷酸基团绿色荧光底物 PhosLite

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 589.49 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:磷酸基团绿色荧光底物 PhosLite 

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:589.49

溶剂:水

激发波长(nm):345

发射波长(nm):520

 

产品介绍

磷酸基团绿色荧光底物 PhosLite 是美国AAT Bioquest生产的用于磷酸的试剂盒,这种水溶性PhosLite 绿色基质在磷酸酶活性位点产生明亮且光稳定的黄绿色荧光沉淀。其荧光沉淀具有几种独特的性质(例如极大的斯托克斯位移和高光稳定性),使该底物成为5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯(BCIP)的优异荧光形式,BCIP是用于敏感比色检测碱性磷酸酶活性。它可用于免疫印迹,原位杂交和免疫组织化学,但不需要加入硝基蓝四唑氯化物(NBT)。碱性磷酸酶通常与二抗结合。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的磷酸基团绿色荧光底物 PhosLite 。 

 

参考文献

The spatial distribution of acid phosphatase activity in ectomycorrhizal tissues depends on soil fertility and morphotype, and relates to host plant phosphorus uptake
Authors: Alvarez M, Huygens D, Diaz LM, Villanueva CA, Heyser W, Boeckx P.
Journal: Plant Cell Environ (2012): 126

A novel fluorescent transcriptional reporter for cell-based microarray assays
Authors: Redmond TM, Uhler MD.
Journal: Methods Mol Biol (2011): 41

Detection of extracellular phosphatase activity at the single-cell level by enzyme-labeled fluorescence and flow cytometry: the importance of time kinetics in ELFA labeling
Authors: Duhamel S, Gregori G, Van Wambeke F, Nedoma J.
Journal: Cytometry A (2009): 163

Modulation of cultured neural networks using neurotrophin release from hydrogel-coated microelectrode arrays
Authors: Jun SB, Hynd MR, Dowell-Mesfin NM, Al-Kofahi Y, Roysam B, Shain W, Kim SJ.
Journal: J Neural Eng (2008): 203

Duodenal brush border intestinal alkaline phosphatase activity affects bicarbonate secretion in rats
Authors: Akiba Y, Mizumori M, Guth PH, Engel E, Kaunitz JD.
Journal: Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol (2007): G1223

Fluid shear stress induces less calcium response in a single primary osteocyte than in a single osteoblast: implication of different focal adhesion formation
Authors: Kamioka H, Sugawara Y, Murshid SA, Ishihara Y, Honjo T, Takano-Yamamoto T.
Journal: J Bone Miner Res (2006): 1012

Detecting the phosphate status of phytoplankton by enzyme-labelled fluorescence and flow cytometry
Authors: Dignum M, Hoogveld HL, Matthijs HC, Laanbroek HJ, Pel R.
Journal: FEMS Microbiol Ecol (2004): 29

Enzymatic activity of alkaline phosphatase inside protein and polymer structures fabricated via multiphoton excitation
Authors: Basu S, Campagnola PJ.
Journal: Biomacromolecules (2004): 572

Analysis of violet-excited fluorochromes by flow cytometry using a violet laser diode
Authors: Telford WG, Hawley TS, Hawley RG.
Journal: Cytometry A (2003): 48

Extracellular phosphatase activity of natural plankton studied with ELF97 phosphate: fluorescence quantification and labelling kinetics
Authors: Nedoma J, Strojsova A, Vrba J, Komarkova J, Simek K.
Journal: Environ Microbiol (2003): 462

唑酮基磷酸胆碱-AAT Bioquest荧光染料

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唑酮基磷酸胆碱价格 4245
产品规格

1 mg

产品货号

唑酮基磷酸胆碱

产品参数
Ex (nm) 571 Em (nm) 584
分子量 378.32 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:唑酮基磷酸胆碱

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:378.32

溶剂:水

激发波长(nm):575

发射波长(nm):590

 

产品介绍

磷酸基团绿色荧光底物 PhosLite 是美国AAT Bioquest生产的用于磷酸胆碱的染料,甘油磷酸二酯酶可以催化磷酸胆碱从试卤灵磷酸胆碱中释放,并产生高荧光强度的试卤灵,该过程可以使用荧光法和比色吸收法来检测。这种磷酸二酯酶荧光底物能方便用于筛选甘油磷酸二酯酶的抑制剂。它可以用来检测磷脂酶D结合磷酸酶的活性。磷脂酶水解试卤灵磷酸胆碱并产生试卤灵磷酸盐,然后在酸性磷酸酶作用下,生成试卤灵。因此,试卤灵磷酸胆碱也可以用来检测那些不含高水平磷脂酶C的样本内磷脂酶D。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的唑酮基磷酸胆碱。 

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参考文献

Identification of phosphotyrosine mimetic inhibitors of human tyrosyl-DNA phosphodiesterase I by a novel AlphaScreen high-throughput assay
Authors: Marchand C, Lea WA, Jadhav A, Dexheimer TS, Austin CP, Inglese J, Pommier Y, Simeonov A.
Journal: Mol Cancer Ther (2009): 240

Antiplatelet cilostazol, an inhibitor of type III phosphodiesterase, improves swallowing function in patients with a history of stroke
Authors: Teramoto S, Yamamoto H, Yamaguchi Y, Ishii M, Hibi S, Kume H, Ouchi Y.
Journal: J Am Geriatr Soc (2008): 1153

Inhibition of platelet aggregation by olive oil phenols via cAMP-phosphodiesterase
Authors: Dell’Agli M, Maschi O, Galli GV, Fagnani R, Dal Cero E, Caruso D, Bosisio E.
Journal: Br J Nutr (2008): 945

Lipolytic effect of a polyphenolic citrus dry extract of red orange, grapefruit, orange (SINETROL) in human body fat adipocytes. Mechanism of action by inhibition of cAMP-phosphodiesterase (PDE)
Authors: Dallas C, Gerbi A, Tenca G, Juchaux F, Bernard FX.
Journal: Phytomedicine (2008): 783

The effects of a type 4 phosphodiesterase inhibitor and the muscarinic cholinergic antagonist tolterodine tartrate on detrusor overactivity in female rats with bladder outlet obstruction
Authors: Kaiho Y, Nishiguchi J, Kwon DD, Chancellor MB, Arai Y, Snyder PB, Yoshimura N.
Journal: BJU Int (2008): 615

Biochemical characterization of ecto-nucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase (E-NPP, E.C. 3.1.4.1) from rat heart left ventricle
Authors: Rucker B, Almeida ME, Libermann TA, Zerbini LF, Wink MR, Sarkis JJ.
Journal: Mol Cell Biochem (2007): 247

Characterization of a phosphodiesterase capable of hydrolyzing EA 2192, the most toxic degradation product of the nerve agent VX
Authors: Ghanem E, Li Y, Xu C, Raushel FM.
Journal: Biochemistry (2007): 9032

Characterization of the 2′,3′ cyclic phosphodiesterase activities of Clostridium cellum polynucleotide kinase-phosphatase and bacteriophage lambda phosphatase
Authors: Keppetipola N, Shuman S.
Journal: Nucleic Acids Res (2007): 7721

Selective inhibitors for phosphodiesterase 3 and 4 in antigen-induced increase of cough reflex sensitivity in guinea pigs
Authors: Fujimura M, Liu Q.
Journal: Pulm Pharmacol Ther (2007): 543

Cilostazol, an inhibitor of type 3 phosphodiesterase, produces endothelium-independent vasodilation in pressurized rabbit cerebral penetrating arterioles
Authors: Nakamura K, Ikomi F, Ohhashi T.
Journal: J Vasc Res (2006): 86

葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-FITC-AAT Bioquest荧光染料

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葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-FITC价格 2823
产品规格

100 ug

产品货号

葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-FITC

产品参数
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 1283.25 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-FITC

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:1283.25

溶剂:水

激发波长(nm):490

发射波长(nm):514

 

产品介绍

葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-FITC是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,尿苷-5′-二磷酸-1-α-D-葡萄糖(UDP-Glc)是碳水化合物代谢的关键中间体。 UDP-Glc作为糖原的前体,可以代谢成UDP-半乳糖和UDP-葡糖醛酸,然后可以将其作为半乳糖和葡糖醛酸掺入多糖中。 UDP-Glc用作蔗糖脂多糖和糖鞘脂的前体。 UDP-Glc是葡糖基转移酶使用的常见底物,包括某些毒素,例如来自梭菌(Clostridium dicile)的毒素A和B. UDP-Glc的荧光类似物可用于研究葡糖基转移酶和梭菌毒素。 该荧光素UDP-Glc衍生物具有与FITC缀合物相同的光谱性质。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-FITC。 

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参考文献

cDNA cloning and characterization of UDP-glucose: anthocyanidin 3-O-glucosyltransferase in Freesia hybrida
Authors: Sui X, Gao X, Ao M, Wang Q, Yang D, Wang M, Fu Y, Wang L.
Journal: Plant Cell Rep (2011): 1209

Downregulation of putative UDP-glucose: flavonoid 3-O-glucosyltransferase gene alters flower coloring in Phalaenopsis
Authors: Chen WH, Hsu CY, Cheng HY, Chang H, Chen HH, Ger MJ.
Journal: Plant Cell Rep (2011): 1007

Functional analysis of a rice late pollen-abundant UDP-glucose pyrophosphorylase (OsUgp2) promoter
Authors: Huang Z, Gan Z, He Y, Li Y, Liu X, Mu H.
Journal: Mol Biol Rep (2011): 4291

Identification of a UDP-glucose pyrophosphorylase from cotton (Gossypium hirsutum L.) involved in cellulose biosynthesis in Arabidopsis thaliana
Authors: Wang Q, Zhang X, Li F, Hou Y, Liu X.
Journal: Plant Cell Rep (2011): 1303

Molecular analysis of a UDP-glucose: flavonoid 3-O-glucosyltransferase (UFGT) gene from purple potato (Solanum tuberosum)
Authors: Hu C, Gong Y, Jin S, Zhu Q.
Journal: Mol Biol Rep (2011): 561

Molecular cloning and analysis of the UDP-Glucose Pyrophosphorylase in Streptococcus equi subsp. zooepidemicus
Authors: Ma Z, Fan HJ, Lu CP.
Journal: Mol Biol Rep (2011): 2751

Regulation of UDP-glucose dehydrogenase is sufficient to modulate hyaluronan production and release, control sulfated GAG synthesis, and promote chondrogenesis
Authors: Clarkin CE, Allen S, Kuiper NJ, Wheeler BT, Wheeler-Jones CP, Pitsillides AA.
Journal: J Cell Physiol (2011): 749

An enzymatic method to distinguish tetrahydrobiopterin from oxidized biopterins using UDP-glucose:tetrahydrobiopterin glucosyltransferase
Authors: Kim HL, Kim do H, Lee YK, Park SO, Lee YW, Kwon OS, Park YS.
Journal: Anal Biochem (2010): 79

Functional characterization of a UDP-glucose:flavonoid 3-O-glucosyltransferase from the seed coat of black soybean (Glycine max (L.) Merr.)
Authors: Kovinich N, Saleem A, Arnason JT, Miki B.
Journal: Phytochemistry (2010): 1253

A chloroplastic UDP-glucose pyrophosphorylase from Arabidopsis is the committed enzyme for the first step of sulfolipid biosynthesis
Authors: Okazaki Y, Shimojima M, Sawada Y, Toyooka K, Narisawa T, Mochida K, Tanaka H, Matsuda F, Hirai A, Hirai MY, Ohta H, Saito K.
Journal: Plant Cell (2009): 892