葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-PEG-FITC-AAT Bioquest荧光染料

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葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-PEG-FITC价格 4245
产品规格

100 ug

产品货号

葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-PEG-FITC

产品参数
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 1530.54 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-PEG-FITC

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:1530.54

溶剂:水

激发波长(nm):490

发射波长(nm):514

 

产品介绍

葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-PEG-FITC是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,尿苷-5′-二磷酸-1-α-D-葡萄糖(UDP-Glc)是碳水化合物代谢的关键中间体。 UDP-Glc作为糖原的前体,可以代谢成UDP-半乳糖和UDP-葡糖醛酸,然后可以将其作为半乳糖和葡糖醛酸掺入多糖中。 UDP-Glc用作蔗糖脂多糖和糖鞘脂的前体。 UDP-Glc是葡糖基转移酶使用的常见底物,包括某些毒素,例如来自梭菌(Clostridium dicile)的毒素A和B. UDP-Glc的荧光类似物可用于研究葡糖基转移酶和梭菌毒素。 该荧光素UDP-Glc衍生物具有与FITC缀合物相同的光谱性质。 与#11705相比,该UDP-Glc衍生物在荧光团和UDP部分之间具有更长的间隔区。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的葡糖基转称酶与梭菌酶荧光底物UDP-Gic-PEG-FITC。 

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参考文献

cDNA cloning and characterization of UDP-glucose: anthocyanidin 3-O-glucosyltransferase in Freesia hybrida
Authors: Sui X, Gao X, Ao M, Wang Q, Yang D, Wang M, Fu Y, Wang L.
Journal: Plant Cell Rep (2011): 1209

Downregulation of putative UDP-glucose: flavonoid 3-O-glucosyltransferase gene alters flower coloring in Phalaenopsis
Authors: Chen WH, Hsu CY, Cheng HY, Chang H, Chen HH, Ger MJ.
Journal: Plant Cell Rep (2011): 1007

Functional analysis of a rice late pollen-abundant UDP-glucose pyrophosphorylase (OsUgp2) promoter
Authors: Huang Z, Gan Z, He Y, Li Y, Liu X, Mu H.
Journal: Mol Biol Rep (2011): 4291

Identification of a UDP-glucose pyrophosphorylase from cotton (Gossypium hirsutum L.) involved in cellulose biosynthesis in Arabidopsis thaliana
Authors: Wang Q, Zhang X, Li F, Hou Y, Liu X.
Journal: Plant Cell Rep (2011): 1303

Molecular analysis of a UDP-glucose: flavonoid 3-O-glucosyltransferase (UFGT) gene from purple potato (Solanum tuberosum)
Authors: Hu C, Gong Y, Jin S, Zhu Q.
Journal: Mol Biol Rep (2011): 561

Molecular cloning and analysis of the UDP-Glucose Pyrophosphorylase in Streptococcus equi subsp. zooepidemicus
Authors: Ma Z, Fan HJ, Lu CP.
Journal: Mol Biol Rep (2011): 2751

Regulation of UDP-glucose dehydrogenase is sufficient to modulate hyaluronan production and release, control sulfated GAG synthesis, and promote chondrogenesis
Authors: Clarkin CE, Allen S, Kuiper NJ, Wheeler BT, Wheeler-Jones CP, Pitsillides AA.
Journal: J Cell Physiol (2011): 749

An enzymatic method to distinguish tetrahydrobiopterin from oxidized biopterins using UDP-glucose:tetrahydrobiopterin glucosyltransferase
Authors: Kim HL, Kim do H, Lee YK, Park SO, Lee YW, Kwon OS, Park YS.
Journal: Anal Biochem (2010): 79

Functional characterization of a UDP-glucose:flavonoid 3-O-glucosyltransferase from the seed coat of black soybean (Glycine max (L.) Merr.)
Authors: Kovinich N, Saleem A, Arnason JT, Miki B.
Journal: Phytochemistry (2010): 1253

A chloroplastic UDP-glucose pyrophosphorylase from Arabidopsis is the committed enzyme for the first step of sulfolipid biosynthesis
Authors: Okazaki Y, Shimojima M, Sawada Y, Toyooka K, Narisawa T, Mochida K, Tanaka H, Matsuda F, Hirai A, Hirai MY, Ohta H, Saito K.
Journal: Plant Cell (2009): 892

Amplite 比色法碱性磷酸酶检测试剂盒 黄色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 比色法碱性磷酸酶检测试剂盒 黄色荧光价格 2111
产品规格

500 Tests

产品货号

Amplite 比色法碱性磷酸酶检测试剂盒 黄色荧光

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Amplite 比色法碱性磷酸酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于过氧化物酶的试剂盒,碱性磷酸酶是用于ELISA,免疫组织化学,Northern,Southern和Western印迹应用的高度灵敏的酶。 它广泛用于各种生物测定(特别是免疫测定)和基于ELISA的诊断。 这种Amplite 碱性磷酸酶检测试剂盒使用pNPP(一种生色磷酸酶底物)来定量溶液,细胞提取物以及固体表面(如PVDF膜)上的碱性磷酸酶活性。 该试剂盒通过我们优化的“混合和读取”测定方案提供所有必需组分,该方案与HTS液体处理仪器兼容。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 比色法碱性磷酸酶检测试剂盒。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
吸收: 400nm
推荐孔板: 透明底板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备碱性磷酸酶标准品和/或测试样品(50μL)
2.添加ALP工作溶液(50μL)
3.在室温或37°C孵育10 – 30分钟
4.监测400nm处的吸光度增加

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 pNPP储备液(100X):
将300μL蒸馏水加入pNPP小瓶(组分A)中。 好好混合。 应立即使用pNPP储备溶液。 注意:如果妥善保存,解决方案应该有效期为3-4周。

1.2 碱性磷酸盐标准溶液:
添加100μL含0.1%BSA(H2O-0.1%BSA)的蒸馏水至碱性磷酸酶标准品(组分C,10单位),以产生100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液。

 

2.标准溶液

碱性磷酸盐标准
将10μL100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液加入990μLH2O-0.1%BSA中,生成1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液。 然后取100μL的1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液进行1:10稀释,得到100 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液(AS7)。 然后进行1:3连续稀释以获得剩余标准品(AS6-AS1)。 注意:应丢弃未使用的稀释碱性磷酸酶标准溶液部分。

 

3.工作溶液

将50μLpNPP储备溶液(100X)加入5mL测定缓冲液(组分B)中,使总体积为5.05mL的pNPP工作溶液。

 

样品操作及分析

表1.碱性磷酸酶标准品和白色/透明底96孔微孔板中的样品的布局。 AS =碱性磷酸酶标准品(AS1-AS7,0.1至100 mU / mL); BL =空白对照; TS =测试样品

BL BL TS TS
AS1 AS1
AS2 AS2
AS3 AS3    
AS4 AS4    
AS5 AS5    
AS6 AS6    
AS7 AS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
AS1-AS7 50ul 连续稀释(0.1至100 mU / mL)
BL 50ul H2O-0.1%BSA
TS 50ul 测试样品

1.在上清液中:

1.1根据表1和2中提供的布局制备碱性磷酸盐标准品(AS),空白对照品(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

1.2向碱性磷酸盐标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μLpNPP工作溶液,使总碱性磷酸盐测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μLpNPP工作溶液,总体积为50μL/孔。

1.3将反应在所需温度下孵育10至30分钟,避光。

1.4用吸光度读板仪在400 nm处监测吸光度的增加。

 

2.在细胞中:

2.1根据需要处理细胞。

2.2将等体积的pNPP工作溶液加入每个细胞孔(例如100μL/ 96孔板或50μL/ 384孔板)中。 注意:或者,从细胞板中取出生长培养基,用5 mL蒸馏水稀释5 mL工作溶液。 然后向细胞孔中加入100μL(对于96孔板)或50μL(对于384孔板)1:1稀释的工作溶液。

2.3将反应在所需温度下孵育30至60分钟,避光。

2.4用吸光度读板仪在400 nm处监测吸光度的增加。

 

参考文献

An mTOR Signaling Modulator Suppressed Heterotopic Ossification of Fibrodysplasia Ossificans Progressiva
Authors: Kyosuke Hino, Chengzhu Zhao, Kazuhiko Horigome, Megumi Nishio, Yasue Okanishi, Sanae Nagata, Shingo Komura, Yasuhiro Yamada, Junya Toguchida, Akira Ohta
Journal: Stem cell reports (2018): 1106–1119

R51Q SNX10 induces osteopetrosis by promoting uncontrolled fusion of monocytes to form giant, non-functional osteoclasts
Authors: Maayan Barnea, Merle Stein, Sabina Winograd-Katz, Moran Shalev, Esther Arman, Ori Brenner, Fadi Thalji, Moien Kanaan, Hila Elinav, Polina Stepensky
Journal: bioRxiv (2018): 332551

The impact of various scaffold components on vascularized bone constructs
Authors: Ahmad Eweida, Matthias Schulte, Oliver Frisch, Ulrich Kneser, Leila Harhaus
Journal: Journal of Cranio-Maxillofacial Surgery (2017)

A Mineralized High Strength and Tough Hydrogel for Skull Bone Regeneration
Authors: Bing Xu, Pengbin Zheng, Fei Gao, Wei Wang, Hongtao Zhang, Xuran Zhang, Xuequan Feng, Wenguang Liu
Journal: Advanced Functional Materials (2016)

DRG axon elongation and growth cone collapse rate induced by Sema3A are differently dependent on NGF concentration
Authors: Andrius Kaselis, Rimantas Treinys, Ruta Vosyliute, Saulius Satkauskas
Journal: Cellular and molecular neurobiology (2014): 289–296

Acute oral toxicity and kinetic behaviors of inorganic layered nanoparticles
Authors: Jin Yu, Hea-Eun Chung, Soo-Jin Choi
Journal: Journal of Nanomaterials (2013): 12

Effect of Some Antihypertensive Drugs on Alkaline Phosphatase and DNA of Mice
Authors: OY El-Khawaga, A El-Waseef, YO Ellazec, MM El-Naggar, Abd M Alla
Journal: International Journal of Genomics and Proteomics (2013): 60

An engineering understanding of the small intestine
Authors: Monica Rosalia Jaime Fonseca
Journal: (2012)

Cytotoxicity and alkaline phosphatase activity evaluation of endosequence root repair material
Authors: Mahmoud Reza Modareszadeh, Peter M Di Fiore, David A Tipton, Narges Salamat
Journal: Journal of endodontics (2012): 1101–1105

Alginate-loaded liposomes can protect encapsulated alkaline phosphatase functionality when exposed to gastric pH
Authors: Alan M Smith, Monica R Jaime-Fonseca, Liam M Grover, Serafim Bakalis
Journal: Journal of agricultural and food chemistry (2010): 4719–4724

 

相关产品

产品名称 货号
Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 Cat#11952
Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 Cat#11953
Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 Cat#11954

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 蓝色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 蓝色荧光 价格 2823
产品规格

500 Tests

产品货号

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 蓝色荧光

产品参数
Ex (nm) 360 Em (nm) 448
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于磷酸酶的试剂盒,碱性磷酸酶是广泛分布于人体各脏器器官中,其中以肝脏为多其次为肾脏,骨骼、肠、和胎盘等组织,。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA 或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端,并生成一分子的有机基团和一分子的无机磷酸。碱性磷酸酶不是单一的酶,而是一组同功酶。碱性磷酸酶在ELISA、免疫组化,Northern, Southern 和 Western blot分析中有很高的灵敏度。它广泛地用于多种生物学分析(特别是免疫分析)和基于ELISA的疾病诊断。Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 *蓝色荧光* 用MUP,一种碱性磷酸酶的蓝色荧光底物来定量检测溶液中、细胞抽提液,固相物质表面(例如PVDF膜)的碱性磷酸酶活性。本试剂盒提供所有必须成分,包括我们佳的产品组合和分析方法,并且与可用于HTS(高通量筛选)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 360nm
Em: 450nm
Cutoff: 435nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备碱性磷酸酶工作溶液(50μL)
2.添加碱性磷酸酶标准品和/或测试样品(50μL)
3.在室温或37°C孵育10 – 30分钟
4.监测Ex / Em = 360/450 nm处的荧光强度(截止= 435 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 MUP Plus 原液(250X):
将100μL无菌H2O加入到MUP Plus (组分A)的小瓶中,制成250X MUP Plus 原液。 应立即使用MUP Plus 原液。

1.2 碱性磷酸酶标准溶液(100 mU / mL):
加入100μL含0.1%BSA(H2O-0.1%BSA)的蒸馏水至碱性磷酸酶标准品(组分C,10单位),得到100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液。

 

2.标准溶液

碱性磷酸酶标准
将10μL100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液加入990μLH2O-0.1%BSA中,生成1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液。 取1,000 mU / mL标准溶液,在H2O-0.1%BSA中进行1:10,得到100 mU / mL标准溶液(AS7)。 然后取100 mU / mL标准溶液(AS7),在H2O-0.1%BSA中进行1:3连续稀释,得到连续稀释的碱性磷酸酶标准品(AS6-AS1)。 注意:应丢弃未使用部分稀释的碱性磷酸酶标准溶液。

 

3.工作溶液

将20μL250XMUP Plus 储备溶液加入5 mL分析缓冲液(组分B)中,制成碱性磷酸酶工作溶液。 注意:避光。 为每个实验准备新鲜的碱性磷酸酶工作溶液。

点击查看细胞制备指南

 

样品操作及分析

表1.在实心黑色96孔微孔板中的碱性磷酸酶标准品和测试样品的布局。 AS =碱性磷酸酶标准品(AS1-AS7,0.1-100mU / mL); BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
AS1 AS1
AS2 AS2
AS3 AS3    
AS4 AS4    
AS5 AS5    
AS6 AS6    
AS7 AS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
AS1-AS7 50ul 连续稀释液(0.1至100 mU / mL)
BL 50ul H2O – 0.1% BSA
TS 50ul 测试样本

1.在上清液中进行碱性磷酸盐测定:

1.1根据表1和2中提供的布局制备碱性磷酸酶标准品(AS),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

1.2向碱性磷酸酶标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL碱性磷酸酶工作溶液,使总碱性磷酸酶测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μL碱性磷酸酶工作溶液,总体积为50μL/孔。

1.3将反应在所需温度下孵育10至30分钟,避光。

1.4用荧光板读数器在激发= 360±10nm,发射= 450±10nm(截止= 435nm)监测荧光增加。

 

2.在细胞中进行碱性磷酸酶测定:

2.1根据需要处理细胞。

2.2向每个细胞孔中加入等体积的碱性磷酸酶工作溶液(例如100μL/ 96孔板或50μL/ 384孔板)。 注意:或者,从细胞板中取出生长培养基,用5 mL蒸馏水稀释5 mL碱性磷酸酶工作溶液。 然后向细胞孔中加入100μL(对于96孔板)或50μL(对于384孔板)1:1稀释的工作溶液。

2.3将反应在所需温度下孵育30至60分钟,避光。

2.4用荧光板读数器在激发= 360±10nm,发射= 450±10nm(截止= 435nm)监测荧光增加。

 

参考文献

The impact of various scaffold components on vascularized bone constructs
Authors: Ahmad Eweida, Matthias Schulte, Oliver Frisch, Ulrich Kneser, Leila Harhaus
Journal: Journal of Cranio-Maxillofacial Surgery (2017)

A Mineralized High Strength and Tough Hydrogel for Skull Bone Regeneration
Authors: Bing Xu, Pengbin Zheng, Fei Gao, Wei Wang, Hongtao Zhang, Xuran Zhang, Xuequan Feng, Wenguang Liu
Journal: Advanced Functional Materials (2016)

DRG axon elongation and growth cone collapse rate induced by Sema3A are differently dependent on NGF concentration
Authors: Andrius Kaselis, Rimantas Treinys, Ruta Vosyliute, Saulius Satkauskas
Journal: Cellular and molecular neurobiology (2014): 289–296

Acute oral toxicity and kinetic behaviors of inorganic layered nanoparticles
Authors: Jin Yu, Hea-Eun Chung, Soo-Jin Choi
Journal: Journal of Nanomaterials (2013): 12

Effect of Some Antihypertensive Drugs on Alkaline Phosphatase and DNA of Mice
Authors: OY El-Khawaga, A El-Waseef, YO Ellazec, MM El-Naggar, Abd M Alla
Journal: International Journal of Genomics and Proteomics (2013): 60

An engineering understanding of the small intestine
Authors: Monica Rosalia Jaime Fonseca
Journal: (2012)

Cytotoxicity and alkaline phosphatase activity evaluation of endosequence root repair material
Authors: Mahmoud Reza Modareszadeh, Peter M Di Fiore, David A Tipton, Narges Salamat
Journal: Journal of endodontics (2012): 1101–1105

Alginate-loaded liposomes can protect encapsulated alkaline phosphatase functionality when exposed to gastric pH
Authors: Alan M Smith, Monica R Jaime-Fonseca, Liam M Grover, Serafim Bakalis
Journal: Journal of agricultural and food chemistry (2010): 4719–4724

Regulation of the osteoblast-specific transcription factor Osterix by NO66, a Jumonji family histone demethylase
Authors: Krishna M Sinha, Hideyo Yasuda, Madelene M Coombes, Sharon YR Dent, Benoit De Crombrugghe
Journal: The EMBO journal (2010): 68–79

 

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产品名称 货号
Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 Cat#11953
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Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 绿色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 绿色荧光 价格 2823
产品规格

500 Tests

产品货号

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 绿色荧光

产品参数
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于磷酸酶的试剂盒,碱性磷酸酶是广泛分布于人体各脏器器官中,其中以肝脏为多其次为肾脏,骨骼、肠、和胎盘等组织,。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA 或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端,并生成一分子的有机基团和一分子的无机磷酸。碱性磷酸酶不是单一的酶,而是一组同功酶。碱性磷酸酶在ELISA、免疫组化,Northern, Southern 和 Western blot分析中有很高的灵敏度。它广泛地用于多种生物学分析(特别是免疫分析)和基于ELISA的疾病诊断。Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 *绿色荧光* 用FDP,一种灵敏的碱性磷酸酶绿色荧光底物来定量检测溶液中、细胞抽提液,固相物质表面(例如PVDF膜)的碱性磷酸酶活性。本试剂盒提供所有必需组分,包括我们佳的产品组合和分析方法,并且与可用于HTS(高通量筛选)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒。 

点击查看光谱

 

适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 490nm
Em: 525nm
Cutoff: 515nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备碱性磷酸酶工作溶液(50μL)
2.添加碱性磷酸酶标准品或测试样品(50μL)
3.在室温或37°C孵育10 – 30分钟
4.监测Ex / Em = 490/525 nm处的荧光强度(Cutfoff = 515 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 FDP(250X):
将100μLDMSO(组分D)加入到FDP小瓶(组分A)中以制备250X FDF储备溶液。 应立即使用FDP储备溶液。

1.2 碱性磷酸酶标准溶液(100 U / mL):
将100μL含0.1%BSA(H2O-0.1%BSA)的蒸馏水加入碱性磷酸酶标准品(组分C,10单位)中,得到100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液。 注意:碱性磷酸酶标准溶液不稳定。

 

2.标准溶液

碱性磷酸酶标准
将10μL100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液加入990μLH2O-0.1%BSA中,生成1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液。 取1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液,进行1:10(AS7),然后在H2O-0.1%BSA中进行1:3连续稀释,得到碱性磷酸酶标准品(AS6-AS1)的连续稀释液。

 

3.工作溶液

将20μL250XFDP储备溶液加入5 mL分析缓冲液(组分B)中并充分混合以制备碱性磷酸酶工作溶液。 注意:避光。

点击查看细胞制备指南

 

样品操作及分析

表1.碱性磷酸酶标准品和实心黑色96孔微孔板中的测试样品的布局。 AS =碱性磷酸酶标准品(AS1-AS7,0.1至100 mU / mL); BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
AS1 AS1
AS2 AS2
AS3 AS3    
AS4 AS4    
AS5 AS5    
AS6 AS6    
AS7 AS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
AS1-AS7 50ul 连续稀释(0.1至100 mU / mL)
BL 50ul H2O – 0.1% BSA
TS 50ul 测试样本

1.在上清液中进行碱性磷酸酶测定:

1.1根据表1和2中提供的布局制备碱性磷酸酶标准品(AS),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。注意:根据需要准备细胞或组织样本。应丢弃未使用的碱性磷酸酶标准品系列稀释液。

1.2向碱性磷酸酶标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL碱性磷酸酶工作溶液,使总碱性磷酸酶测定体积为100μL/孔。对于384孔板,在每个孔中加入25μL碱性磷酸酶工作溶液,总体积为50μL/孔。

1.3将反应在所需温度下孵育10至30分钟,避光。可选:在30分钟孵育结束时,加入50μL/孔(对于96孔板)或25μL/孔(对于384孔板)的终止溶液(组分E)。

1.4用荧光板读数器在激发= 490±10,发射= 525±10nm(截止= 515nm)监测荧光增加。

 

2.在细胞中运行碱性磷酸酶测定:

2.1根据需要处理细胞。

2.2从细胞板中完全除去生长培养基。 注意:由于生长培养基与FDP的干扰,重要的是从细胞板中完全除去生长培养基。

2.3用5mL蒸馏水将1mL稀释的5mL碱性磷酸酶工作溶液稀释。

2.4向细胞孔中加入100μL(对于96孔板)或50μL(对于384孔板)1:1稀释的碱性磷酸酶工作溶液。

2.5将反应在所需温度下孵育30至60分钟,避光。 可选:在30分钟孵育结束时加入50μL/孔(对于96孔板)或25μL/孔(对于384孔板)的终止溶液(组分E)。

2.6用荧光板读数器在激发= 490±10,发射= 525±10nm(截止= 515nm)监测荧光增加。

 

参考文献

Development and validation of bioengineered intestinal tubules for translational research aimed at safety and efficacy testing of drugs and nutrients
Authors: Paulus GM Jochems, Jeroen van Bergenhenegouwen, Anne Metje van Genderen, Sophie T Eis, Livia JF Wilod Versprille, Harry J Wichers, Prescilla V Jeurink, Johan Garssen, Rosalinde Masereeuw
Journal: Toxicology in Vitro (2019)

Rapid detection of Escherichia coli in beverages using genetically engineered bacteriophage T7
Authors: Nicharee Wisuthiphaet, Xu Yang, Glenn M Young, Nitin Nitin
Journal: AMB Express (2019): 55

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Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 红色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 红色荧光 价格 2823
产品规格

500 Tests

产品货号

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒 红色荧光

产品参数
Ex (nm) 592 Em (nm) 609
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于磷酸酶的试剂盒,碱性磷酸酶是广泛分布于人体各脏器器官中,其中以肝脏为多其次为肾脏,骨骼、肠、和胎盘等组织,。这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团,从而使DNA 或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端,并生成一分子的有机基团和一分子的无机磷酸。碱性磷酸酶不是单一的酶,而是一组同功酶。碱性磷酸酶在ELISA、免疫组化,Northern, Southern 和 Western blot分析中有很高的灵敏度。它广泛地用于多种生物学分析(特别是免疫分析)和基于ELISA的疾病诊断。Amplite 荧光法碱性磷酸酶分析试剂盒 *红色荧光* 利用磷酸酶SunRed红色荧光底物的特性,来定量检测溶液中、细胞抽提液,固相物质表面(例如PVDF膜)的碱性磷酸酶活性。这种磷酸酶荧光底物在磷酸酶催化下产生的荧光产物具有强烈的红色荧光。本试剂盒提供所有必需组分,包括我们佳的产品组合和分析方法,并且与可用于HTS(高通量筛选)。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 荧光法碱性磷酸酶检测试剂盒。 

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适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 620nm
Em: 660nm
Cutoff: 630nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备碱性磷酸酶工作溶液(50μL)
2.添加碱性磷酸酶标准品和/或测试样品(50μL)
3.在室温或37°C孵育30至120分钟
4.监测Ex / Em = 620/660 nm处的荧光强度(截止= 630 nm)

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1.1 SunRed 底物储备液(250X):
将100μL双无菌H2O加入到SunRed 底物(组分A)的小瓶中,制备250X SunRed 底物储备溶液。 应立即使用原液。

1.2碱性磷酸酶标准溶液(100 U / mL):
添加100μL含0.1%BSA(H2O-0.1%BSA)的蒸馏水至碱性磷酸酶标准品(组分C,10单位),以产生100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液。 注意:碱性磷酸酶标准溶液不稳定。

 

2.标准溶液

碱性磷酸酶标准
将10μL100单位/ mL碱性磷酸酶标准溶液加入990μLH2O-0.1%BSA中,生成1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液。 取1,000 mU / mL碱性磷酸酶标准溶液,进行1:3连续稀释,得到连续稀释的碱性磷酸酶标准品(AS7-AS1)和H2O-0.1%BSA。

 

3.工作溶液

对于一个96孔板,将20μL250XSunRed 底物储备溶液加入到5 mL分析缓冲液(组分B)中并充分混合以制备碱性磷酸酶工作溶液。 注意:避免光照并为每个实验准备新鲜的反应混合物。

点击查看细胞制备指南

 

样品操作及分析

表1.碱性磷酸酶标准品和实心黑色96孔微孔板中的测试样品的布局。 AS =碱性磷酸酶标准品(AS1-AS7,0.3至300 mU / mL); BL =空白对照; TS =测试样品。

BL BL TS TS
AS1 AS1
AS2 AS2
AS3 AS3    
AS4 AS4    
AS5 AS5    
AS6 AS6    
AS7 AS7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
AS1-AS7 50ul 连续稀释(0.3至300 mU / mL)
BL 50ul H2O – 0.1% BSA
TS 50ul 测试样本

1.在上清液中进行碱性磷酸酶测定:

1.1根据表1和2中提供的布局制备碱性磷酸酶标准品(AS),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25μL试剂代替50μL。

1.2向碱性磷酸酶标准品,空白对照和测试样品的每个孔中加入50μL碱性磷酸酶工作溶液,使总碱性磷酸酶测定体积为100μL/孔。 对于384孔板,在每个孔中加入25μL碱性磷酸酶工作溶液,总体积为50μL/孔。

1.3在所需温度下将反应温育30至120分钟,避光。

1.4用Ex / Em = 620 / 660nm(截止值= 630nm)的荧光板读数器监测荧光增加。

 

2.在细胞中运行碱性磷酸酶测定:

2.1根据需要处理细胞。

2.2从细胞板中完全除去生长培养基。 注意:由于生长培养基与SunRed™底物的干扰,重要的是从细胞板中完全除去生长培养基。

2.3用5mL蒸馏水将1mL稀释的5mL碱性磷酸酶工作溶液稀释。

2.4向每个细胞孔中加入100μL(96孔板)或50μL(384孔板)的1:1稀释的碱性磷酸酶工作溶液。

2.5在所需温度下孵育反应30至60分钟,避光。

2.6用Ex / Em = 620 / 660nm(截止值= 630nm)的荧光板读数器监测荧光增加。

 

参考文献

The impact of various scaffold components on vascularized bone constructs
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D-荧光素磷酸盐 CAS 145613-12-3-AAT Bioquest荧光染料

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D-荧光素磷酸盐 CAS 145613-12-3价格 2823
产品规格

1 mg

产品货号

D-荧光素磷酸盐 CAS 145613-12-3

产品参数
Ex (nm) 385 Em (nm) 529
分子量 426.25 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:D-荧光素磷酸盐

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:426.25

溶剂:水

激发波长(nm):328

发射波长(nm):533

 

产品介绍

荧光素是美国AAT Bioquest生产的荧光染料,D-荧光素磷酸盐是用生物荧光检测碱性磷酸酶和蛋白磷酸酶高灵敏的生物荧光底物。它与磷酸酶/ATP系统联合使用。D-荧光素磷酸盐在磷酸酶(例如,碱性磷酸酶、酸性磷酸酶和蛋白磷酸酶)催化下形成D-荧光素,在磷酸酶和辅因子存在的条件下,发出荧光。我们的Amplite 萤光素酶分析试剂盒可以用来检测通过磷酸酶催化D-荧光素磷酸盐而释放出来的D-荧光素。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的荧光素。 

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D-荧光素半乳糖苷 CAS 131474-38-9-AAT Bioquest荧光染料

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D-荧光素半乳糖苷 CAS 131474-38-9价格 2823
产品规格

5 mg

产品货号

D-荧光素半乳糖苷 CAS 131474-38-9

产品参数
Ex (nm) 385 Em (nm) 529
分子量 442.46 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:D-荧光素半乳糖苷

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:442.46

溶剂:DMSO

激发波长(nm):328

发射波长(nm):533

 

产品介绍

荧光素是美国AAT Bioquest生产的荧光染料,D-荧光素半乳糖苷含有β-半乳糖苷的一部分,与D-荧光素6号位的氧原子相连;因此可以阻止萤火虫荧光素酶对D-荧光素半乳糖苷的识别。然而,在β-半乳糖苷酶的作用下,半乳糖苷部分被有效地移去;使得荧光素酶能很好的识别D-荧光素。在同源性分析或者具有荧光素酶及其辅因子的细胞裂解物中,用化学荧光测定半乳糖苷酶活性时D-荧光素半乳糖苷是具有高灵敏度的底物。当作为二元底物时,β-半乳糖苷酶(LacZ基因)和荧光素酶的水平都可以被高灵敏地检出。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的荧光素。 

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D-荧光素甲酯-AAT Bioquest荧光染料

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D-荧光素甲酯价格 2823
产品规格

5 mg

产品货号

D-荧光素甲酯

产品参数
Ex (nm) 385 Em (nm) 529
分子量 294.35 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:D-荧光素甲酯

CAS:73918-26-0

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:294.35

溶剂:DMSO

激发波长(nm):328

发射波长(nm):533

 

产品介绍

D-荧光素甲酯是美国AAT Bioquest生产的荧光染料,D-荧光素甲酯含有在羧基位置连接的甲基部分,因此防止它被萤火虫荧光素酶识别。 然而,酯通过脂肪酶活性有效地水解,并且所得的D-荧光素被荧光素酶很好地识别。 D-荧光素甲酯是用于在均相测定中或在与荧光素酶及其辅因子组合的细胞裂解物样品中化学发光测量脂肪酶活性的敏感底物。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的D-荧光素甲酯。 

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5 mg

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D-荧光素乙酯 CAS 135251-85-3

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Ex (nm) 385 Em (nm) 529
分子量 308.38 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
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产品名称:D-荧光素乙酯

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储存条件:-15℃避光防潮

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Authors: Mano, Hiroki and Ishimoto, Tetsuya and Okada, Takuya and Toyooka, Naoki and Mori, Hisashi
Journal: Biological and Pharmaceutical Bulletin (2014): 1689–1693
 

参考文献

Mutagenesis of solvent-exposed amino acids in Photinus pyralis luciferase improves stability and pH-tolerance
Authors: Law GH, G and elman OA, Tisi LC, Lowe CR, Murray JA.
Journal: Biochem J (2006): 305
 
Determination of p-glycoprotein ATPase activity using luciferase
Authors: Matsunaga T, Kose E, Yasuda S, Ise H, Ikeda U, Ohmori S.
Journal: Biol Pharm Bull (2006): 560
 
Expression of firefly luciferase in Candida albicans and its use in the selection of stable transformants
Authors: Doyle TC, Nawotka KA, Purchio AF, Akin AR, Francis KP, Contag PR.
Journal: Microb Pathog (2006): 69
 
PET imaging and optical imaging with D-luciferin [11C]methyl ester and D-luciferin [11C]methyl ether of luciferase gene expression in tumor xenografts of living mice
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Journal: Bioorg Med Chem Lett (2006): 331
 
Bioluminescence of monolayers of firefly luciferase immobilized on graphite
Authors: Palomba S, Berovic N, Palmer RE.Journal: Langmuir (2006): 5451
 
Bovine serum albumin displays luciferase-like activity in presence of luciferyl adenylate: insights on the origin of protoluciferase activity and bioluminescence colours
Authors: Viviani VR, Ohmiya Y.
Journal: Luminescence (2006): 262
 
Noninvasive bioluminescence imaging of luciferase expressing intracranial U87 xenografts: correlation with magnetic resonance imaging determined tumor volume and longitudinal use in assessing tumor growth and antiangiogenic treatment effect
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Journal: Neurosurgery (2006): 365
 
Two different domains of the luciferase gene in the heterotrophic dinoflagellate Noctiluca scintillans occur as two separate genes in photosynthetic species
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Journal: Proc Natl Acad Sci U S A. (2006)
 
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Journal: J Photochem Photobiol B (2006): 123
 
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D-荧光素甲酯 Cat#12514

D-荧光素醋酸-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
D-荧光素醋酸价格 2823
产品规格

5 mg

产品货号

D-荧光素醋酸

产品参数
Ex (nm) 385 Em (nm) 529
分子量 322.36 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:D-荧光素醋酸

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:322.36

溶剂:DMSO

激发波长(nm):328

发射波长(nm):533

 

产品介绍

D-荧光素醋酸是美国AAT Bioquest生产的荧光染料,D-荧光素乙酯含有在羧基位置连接的甲基部分,因此防止它被萤火虫荧光素酶识别。 然而,酯通过脂肪酶活性有效地水解,并且所得的D-荧光素被荧光素酶很好地识别。 D-荧光素甲酯是用于在均相测定中或在与荧光素酶及其辅因子组合的细胞裂解物样品中化学发光测量脂肪酶活性的敏感底物。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的D-荧光素醋酸。 

Luc的Ex/Em及其他相关内容链接:Spectral properties of luciferin and EGFP. A: Normalized excitation and… | Download Scientific Diagram (researchgate.net)

金畔问号:荧光素酶到底该如何检测?

 

试剂应用文献

C3-Luc Cells Are an Excellent Model for Evaluation of Cellular Immunity following HPV16L1 Vaccination
Authors: Li-Li Li, He-Rong Wang, Zhi-Yi Zhou, Jing Luo, Xiao-Li Wang, Xiang-Qian Xiao, Yu-Bai Zhou, Yi Zeng
Journal: PloS one (2016): e0149748

Genome-wide microRNA analysis identifies miR-188-3p as novel prognostic marker and molecular factor involved in colorectal carcinogenesis
Authors: Martin Pichler, Verena Stiegelbauer, Petra Vychytilova-Faltejskova, Cristina Ivan, Hui Ling, Elke Winter, Xinna Zhang, Matthew Goblirsch, Annika Wulf-Goldenberg, Masahisa Ohtsuka
Journal: American Association for Cancer Research (2016): clincanres–0497

Identification of a Novel Protein Kinase A Inhibitor by Bioluminescence-Based Screening
Authors: Tetsuya Ishimoto, Kenji Azechi, Hisashi Mori
Journal: Biological and Pharmaceutical Bulletin (2015): 1969–1974

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Authors: Hiroki Mano, Tetsuya Ishimoto, Takuya Okada, Naoki Toyooka, Hisashi Mori
Journal: Biological and Pharmaceutical Bulletin (2014): 1689–1693

 

参考文献

Mutagenesis of solvent-exposed amino acids in Photinus pyralis luciferase improves stability and pH-tolerance
Authors: Law GH, G and elman OA, Tisi LC, Lowe CR, Murray JA.
Journal: Biochem J (2006): 305
 
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Authors: Matsunaga T, Kose E, Yasuda S, Ise H, Ikeda U, Ohmori S.
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Amplite 荧光法神经氨酸酶检测试剂盒 蓝色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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Amplite 荧光法神经氨酸酶检测试剂盒 蓝色荧光 价格 4245
产品规格

200 Tests

产品货号

Amplite 荧光法神经氨酸酶检测试剂盒 蓝色荧光

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Amplite 荧光法神经氨酸酶检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于β-半乳糖苷酶的试剂盒,神经氨酸酶,也称为唾液酸酶,是糖苷水解酶,其催化末端唾液酸残基和神经氨酸的水解。常见的神经氨酸酶是病毒神经氨酸酶。唾液酸和邻近糖残基之间的连接的切割允许病毒通过粘蛋白转运并破坏宿主细胞上的血凝素受体,从而允许从感染细胞中洗脱后代病毒颗粒。神经氨酸酶促进感染细胞释放流感病毒,并促进病毒在呼吸道内传播。因此,它是流感开发的重要目标。神经氨酸酶的检测和筛选其抑制剂是研究生物过程和预防流感感染的重要任务之一。有一些检测试剂盒可用于检测神经氨酸酶,但所有商业上可用的试剂盒使用起来都很繁琐。我们的Amplite 荧光神经氨酸酶检测试剂盒提供灵敏且稳定的荧光测定法,可检测细胞或生物样品中存在的神经氨酸酶。在神经氨酸酶切割后,非荧光神经氨酸酶底物变为强荧光。该试剂盒可在100μL测定体积中检测低至0.3 mU / mL的神经氨酸酶。该测定可以以方便的96孔或384孔微量滴定板形式进行,并且易于适应自动化而无需分离步骤。荧光酶标仪在Ex / Em = ~320 / ~450nm处可以容易地读取信号。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 荧光法神经氨酸酶检测试剂盒。 

 

适用仪器


荧光酶标仪  
Ex: 320 nm
Em: 460 nm
Cutoff: 420 nm
推荐孔板: 纯黑色孔板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.准备神经氨酸酶工作溶液(50 µL)
2.加入神经氨酸酶标准品或测试样品(50 µL)
3.在37°C或室温下孵育1-2小时
4.监控Ex / Em = 320/460 nm(截止= 420 nm)的荧光增加

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
1.1 神经氨酸酶标准溶液(2U / mL):
将50 µL ddH2O加入小瓶神经氨酸酶标准品(组分C)中,制成约2 U / mL神经氨酸酶标准溶液。

1.2 FluLite 蓝色原液(200X):
将50 µL ddH2O加入FluLite Blue(组分A)小瓶中,制成200X储备溶液。

 

2.标准溶液

神经氨酸酶标准品
将10 µL的2 U / mL神经氨酸酶标准储备液加到990 µL的测定缓冲液(组分B)中,以生成20 mU / mL的神经氨酸酶标准品(NA7)。 取20 mU / mL神经氨酸酶标准溶液,并按1:2进行系列稀释,以使用分析缓冲液(组分B)获得系列稀释的神经氨酸酶标准品(NA6-NA1)。 注意:稀释的神经氨酸酶标准溶液不稳定。 在4小时内使用。

 

3.工作溶液

3.1 0.3%β-巯基乙醇测定缓冲液:
将30 µLβ-巯基乙醇(组分F)添加到10 mL反应缓冲液(组分B)中,并充分混合。
注意:制备酶稀释缓冲液需要额外的缓冲液,用于生成标准曲线。

3.2 FDG工作方案:
将25 µL 1X FDG储备溶液加到5 mL的0.3%β-巯基乙醇测定缓冲液中。 注意:请勿将FDG溶液在室温下长时间放置,否则会发生自发水解。

3.3 裂解缓冲液工作液:
将25μL的200X FluLite 蓝色储备溶液添加到5 mL的测定缓冲液(组分B)中并充分混合以制备神经氨酸酶工作溶液。

 

样品操作及分析

表1.黑色固体96孔微孔板中神经氨酸酶标准品和测试样品的布局。 NA =神经氨酸酶标准品(NA1-NA7,0.312至20 mU / mL),BL =空白对照,TS =测试样品。

BL BL TS TS
NA1 NA1
NA2 NA2
NA3 NA3    
NA4 NA4    
NA5 NA5    
NA6 NA6    
NA7 NA7    

表2.每个孔的试剂组成

容积 试剂
NA1-NA7 50ul 连续稀释(0.312至20 mU / mL)
BL 50ul 空白对照
TS 50ul 测试样本

1.根据表1和2中提供的布局,准备神经氨酸酶标准品(NA),空白对照(BL)和测试样品(TS)。对于384孔板,每孔使用25 µL试剂代替50 µL。

2.向神经氨酸酶标准品,空白对照和测试样品的每个孔中添加50μL神经氨酸酶工作溶液,以使神经氨酸酶测定的总体积为100μL/孔。 对于384孔板,请向每个孔中添加25 µL神经氨酸酶工作溶液,总体积为50 µL /孔。

3.在避光的条件下,将反应在37°C或室温下孵育1至2小时。 注意:37°C孵育可获得更好的结果。

4.用荧光酶标仪监测在Ex / Em = 320/460 nm(截止= 420 nm)处的荧光增加。

 

参考文献

Neuraminidase inhibiting antibody responses in pigs differ between influenza A virus N2 lineages and by vaccine type
Authors: Sandbulte MR, Gauger PC, Kitikoon P, Chen H, Perez DR, Roth JA, Vincent AL.
Journal: Vaccine (2016): 3773

Rapid screening, identification, and purification of neuraminidase inhibitors from Lithospermum erythrorhizon Sieb.et Zucc. by ultrafiltration with HPLC-ESI-TOF-MS combined with semipreparative HPLC
Authors: Zhang M, Zhao H, Zhao Z, Yan H, Lv R, Cui L, Yuan J, Wang D, Geng Y, Liu D, Wang X.
Journal: J Sep Sci (2016): 2097

Development of a surface plasmon resonance assay to measure the binding affinity of wild-type influenza neuraminidase and its H274Y mutant to the antiviral drug zanamivir
Authors: Somasundaram B, Fee CJ, Fredericks R, Watson AJ, Fairbanks AJ.
Journal: J Mol Recognit (2015): 87

[Susceptibility of human influenza A (H3N2) viruses to neuraminidase inhibitors isolated during 2011-2012 in China]
Authors: Huang W, Tan M, Zhao X, Cheng Y, Li X, Guo J, Wei H, Xiao N, Wang Z, Wang D, Shu Y.
Journal: Zhonghua Yu Fang Yi Xue Za Zhi (2015): 481

Evaluation of the antigenic relatedness and cross-protective immunity of the neuraminidase between human influenza A (H1N1) virus and highly pathogenic avian influenza A (H5N1) virus
Authors: Lu X, Liu F, Zeng H, Sheu T, Achenbach JE, Veguilla V, Gubareva LV, Garten R, Smith C, Yang H, Stevens J, Xu X, Katz JM, Tumpey TM.
Journal: Virology (2014): 169

Neuraminidase-inhibition assay for the identification of influenza A virus neuraminidase virus subtype or neuraminidase antibody specificity
Authors: Pedersen JC.
Journal: Methods Mol Biol (2014): 27

Partial antiviral activities detection of chicken Mx jointing with neuraminidase gene (NA) against Newcastle disease virus
Authors: Zhang Y, Fu D, Chen H, Zhang Z, Shi Q, Elsayed AK, Li B.
Journal: PLoS One (2013): e71688

Preparation and diagnostic utility of a hemagglutination inhibition test antigen derived from the baculovirus-expressed hemagglutinin-neuraminidase protein gene of Newcastle disease virus
Authors: Choi KS, Kye SJ, Jeon WJ, Park MJ, Kim S, Seul HJ, Kwon JH.
Journal: J Vet Sci (2013): 291

[Evaluation of the anti-neuraminidase antibodies in clinical trials of the live influenza vaccine of the A(H5N2) subtype]
Authors: Smolonogina TA, Desheva Iu A, Rekstin AR, Mironov AN, Rudenko LG.
Journal: Vopr Virusol (2013): 31

The chemiluminescent neuraminidase inhibition assay: a functional method for detection of influenza virus resistance to the neuraminidase inhibitors
Authors: Okomo-Adhiambo M, Hurt AC, Gubareva LV.
Journal: Methods Mol Biol (2012): 95

 

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纤溶酶荧光底物D-VLK-AMC-AAT Bioquest荧光染料

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纤溶酶荧光底物D-VLK-AMC价格 1386
产品规格

5 mg

产品货号

纤溶酶荧光底物D-VLK-AMC

产品参数
Ex (nm) 341 Em (nm) 441
分子量 743.69 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:纤溶酶荧光底物D-VLK-AMC

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:743.68

溶剂:DMSO

Ex(nm):351

Em(nm):430

 

产品介绍

        纤溶酶荧光底物D-VLK-AMC是美国AAT Bioquest生产的荧光底物,D-VLK-AMC是纤溶酶,是一种敏感、高度特异性荧光底物。 它可以与荧光显微镜,荧光微孔板或流式细胞仪一起使用。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的纤溶酶荧光底物D-VLK-AMC。 

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试剂应用文献

Diabetogenic agent alloxan is a proteasome inhibitor
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Advanced-glycation-end-product-induced formation of immunoproteasomes: involvement of RAGE and Jak2/STAT1
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参考文献

Alveolar extracellular 20S proteasome in patients with acute respiratory distress syndrome
Authors: Sixt SU, Adamzik M, Spyrka D, Saul B, Hakenbeck J, Wohlschlaeger J, Costabel U, Kloss A, Giesebrecht J, Dahlmann B, Peters J.
Journal: Am J Respir Crit Care Med (2009): 1098
 
Quinone reductase acts as a redox switch of the 20S yeast proteasome
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Comparative expression analysis and characterization of 20S proteasomes in human intestinal tissues: The proteasome pattern as diagnostic tool for IBD patients
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BCL-2 family regulation by the 20S proteasome inhibitor bortezomib
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The 20S proteasome of Schistosoma mansoni: a proteomic analysis
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酪朊酸,FITC标记-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
酪朊酸,FITC标记价格 2823
产品规格

5 mg

产品货号

酪朊酸,FITC标记

产品参数
Ex (nm) 491 Em (nm) 516
分子量 N/A 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

酪朊酸,FITC标记是美国AAT Bioquest生产的荧光染料,酪蛋白被认为是通用的蛋白酶底物,经蛋白酶催化所得产物具有很宽的光谱范围。由于这种本身就具有荧光特征的酪蛋白可以被许多蛋白酶水解,因此它们广泛地用于荧光测定法检测蛋白酶活性的试验中。作为一个完整的底物,酪蛋白上带着5-FITC标签,具有显著的荧光淬灭效果。经过蛋白酶催化水解,释放其淬灭效果,产生明亮的绿色荧光染料所标记的短肽;这种荧光强度的增加与蛋白酶的活性成直接的比例关系。我们不推荐将这种偶联物用于荧光偏振分析。在荧光偏振分析中我们可以使用常规的荧光素标记的酪蛋白偶联物。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的酪朊酸,FITC标记。 

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实验方案

样品实验方案 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
酪蛋白,FITC共轭原液:
在PBS缓冲液中制成5-10 mg / mL酪蛋白,FITC偶联的原液。

 

2.工作溶液

酪蛋白FITC共轭工作溶液(2X):
将FITC偶联的原液以100-400μg/ mL的浓度稀释至50-100 mM Tris缓冲液(pH 7.4)中。 2X Assay工作溶液设计用于检测胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,嗜热菌蛋白酶,蛋白酶K,蛋白酶XIV和人白细胞弹性蛋白酶的活性。 对于其他蛋白酶,请参考表1中合适的测定缓冲液配方。 对于每种蛋白酶,应通过实验确定测定工作溶液的佳浓度。

 

样品操作及分析

1.将等体积的胰蛋白酶标准品或样品与2X Assay工作溶液混合。

2.在Ex / Em = 490/525 nm处监控荧光的增加。

2.1 对于动力学读数:立即开始连续连续测量荧光强度,并每5分钟记录一次数据,持续30分钟。

2.2 对于终点读数:在避光的条件下,将反应在所需温度下孵育30至60分钟。 然后测量荧光强度。

表1.测定工作溶液的适当测定缓冲液配方

蛋白酶 1x 分析缓冲液
组织蛋白酶D 20 mM柠檬酸钠,pH 3.0
木瓜蛋白酶 20 mM乙酸钠,20 mM半胱氨酸,2 mM EDTA,pH 6.5
PAE 20 mM磷酸钠,pH 8.0
胃蛋白酶 10 mM HCl,pH 2.0
猪胰弹性蛋白酶 10 mM Tris-HCl,pH 8.8
枯草杆菌 20 mM磷酸钾缓冲液,pH 7.6,150 mM NaCl

 

参考文献

Liquid temperature measurement method in microchannels by using fluorescence polarization
Authors: Kazuya Tatsumi, Chi Hsuan Hsu, Atsushi Suzuki, Kazuyoshi Nakabe
Journal: Heat and Mass Transfer (2017): 1–10

Micro-scale temperature measurement method using fluorescence polarization
Authors: K Tatsumi, CH Hsu, A Suzuki, K Nakabe
Journal: (2016): 032097

Microscopic Fluid Temperature Measurements Using Fluorescence Polarization Method
Authors: Kazuya Tatsumi, Akihisa Tozaki, Kazuyoshi Nakabe
Journal: (2011): T10167–T10167

酪朊酸,TAMRA标记-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
酪朊酸,TAMRA标记价格 2823
产品规格

5 mg

产品货号

酪朊酸,TAMRA标记

产品参数
Ex (nm) 552 Em (nm) 578
分子量 N/A 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

酪朊酸,TAMRA标记是美国AAT Bioquest生产的荧光染料,由于这种本身就具有荧光特征的酪蛋白可以被许多蛋白酶水解,因此它们广泛地用于荧光测定法检测蛋白酶活性的试验中。作为一个完整的底物,酪蛋白上带着TAMRA标签,具有显著的荧光淬灭效果。具有显著的荧光淬灭效果。经过蛋白酶催化水解,释放其淬灭效果,产生明亮的绿色荧光染料所标记的短肽;这种荧光强度的增加与蛋白酶的活性成直接的比例关系。与FITC标记的酪蛋白相比,这种酪蛋白底物产生荧光不依赖于pH,这种特性使其能够更方便地用于需要在低pH条件进行的荧光分析。我们不推荐将这种偶联物用于荧光偏振分析。在荧光偏振分析中我们可以使用常规的荧光素标记的酪蛋白偶联物。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的酪朊酸,TAMRA标记。 

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实验方案

样品实验方案 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分为一次性使用的等分试样,并在制备后储存在-20°C下。 避免重复冻融循环。
酪蛋白,TAMRA共轭原液:
在PBS缓冲液中制成5-10 mg / mL酪蛋白,TAMRA偶联的原液。 注意:未使用的储备溶液可分为一次性使用的等分试样,并在-20 oC下保存,并避免暴露在光线下。

 

2.工作溶液

酪蛋白TAMRA共轭的工作溶液(2X):
将TAMRA共轭的原液以100-400μg/ mL的浓度稀释至50-100 mM Tris缓冲液(pH 7.4)中。 2X Assay工作溶液设计用于检测胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,嗜热菌蛋白酶,蛋白酶K,蛋白酶XIV和人白细胞弹性蛋白酶的活性。 对于其他蛋白酶,请参考表1中合适的测定缓冲液配方。 对于每种蛋白酶,应通过实验确定测定工作溶液的最佳浓度。

 

样品操作及分析

1.将等体积的胰蛋白酶标准品或样品与2X Assay工作溶液混合。

2.在Ex / Em = 490/525 nm处监控荧光的增加。

2.1 对于动力学读数:立即开始连续连续测量荧光强度,并每5分钟记录一次数据,持续30分钟。

2.2 对于终点读数:在避光的条件下,将反应在所需温度下孵育30至60分钟。 然后测量荧光强度。

表1.测定工作溶液的适当测定缓冲液配方

蛋白酶 1x 检测缓冲液
组织蛋白酶D 20 mM柠檬酸钠,pH 3.0
木瓜蛋白酶 20 mM乙酸钠,20 mM半胱氨酸,2 mM EDTA,pH 6.5
PAE 20 mM磷酸钠,pH 8.0
胃蛋白酶 10 mM HCl,pH 2.0
猪胰弹性蛋白酶 10 mM Tris-HCl,pH 8.8
枯草杆菌 20 mM磷酸钾缓冲液,pH 7.6,150 mM NaCl

 

参考文献

Liquid temperature measurement method in microchannels by using fluorescence polarization
Authors: Kazuya Tatsumi, Chi Hsuan Hsu, Atsushi Suzuki, Kazuyoshi Nakabe
Journal: Heat and Mass Transfer (2017): 1–10

Micro-scale temperature measurement method using fluorescence polarization
Authors: K Tatsumi, CH Hsu, A Suzuki, K Nakabe
Journal: (2016): 032097

Microscopic Fluid Temperature Measurements Using Fluorescence Polarization Method
Authors: Kazuya Tatsumi, Akihisa Tozaki, Kazuyoshi Nakabe
Journal: (2011): T10167–T10167

荧光底物Leu-AMC [L-亮氨酸-7-酰胺基-4-甲基香豆素] CAS 62480-44-8-AAT Bioquest荧光染料

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产品规格

10 mg

产品货号

荧光底物Leu-AMC [L-亮氨酸-7-酰胺基-4-甲基香豆素] CAS 62480-44-8

产品参数
Ex (nm) 341 Em (nm) 441
分子量 324.80 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:荧光底物Leu-AMC [L-亮氨酸-7-酰胺基-4-甲基香豆素]

CAS:62480-44-8

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:324.80

溶剂:DMSO

激发波长(nm):351

发射波长(nm):430

 

产品介绍

荧光底物Leu-AMC [L-亮氨酸-7-酰胺基-4-甲基香豆素]是美国AAT Bioquest生产的荧光染料,Leu-AMC是亮氨酸氨肽酶的荧光底物。 在蛋白酶水解后,Leu-AMC释放出强烈荧光的AMC荧光团,其可以用Ex / Em = 350 / 430nm容易地检测。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供最优质的荧光底物Leu-AMC [L-亮氨酸-7-酰胺基-4-甲基香豆素]。 

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参考文献

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