选购胎牛血清的常见问题和注意事项
Q: 应该如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损? A: 建议 血清应保存在-10℃及以下。若一次无法用完一瓶,无菌分装血 清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。解冻时,建议将血清从冷 冻室先移至2-8℃冰箱解冻,再放置于室温进行解冻。请注 意,解冻过程中需要经常摇晃混合。严禁将FBS 在37℃长时间孵 育解冻。
Q: 培养基中添加了血清和抗生素后,可长期保存吗? A: 一旦 您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时,您应该在2周内使用它。
Q: 如果我的FBS到达时已经部分解冻,还能使用吗? A: 所有的 依科赛生物ExCell Bio血清都在冰冻状态下由干冰运输,因此您 收到时应该仍是冰冻状态。如果只是部分解冻, FBS仍然可以使 用,但是建议先将FBS在冰箱中充分解冻,之后温和的摇晃摇匀,
再移至-10℃及以下进行储存。
Q: 不同批次血清颜色为什么有差异? A: 血清中含有微量的血 红蛋白,与采集血液过程中血细胞的破裂数目有关,只要血红蛋 白的含量在药典规定范围内,颜色的深浅和血清品质无关,不影
响细胞培养。中国药典规定血红蛋白含量≤200mg/L。
Q: 热灭活是必须的吗?A: 实验显示,热灭活对大多数的细胞 而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促 进,或全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的 质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热灭活的血清,会增 加沉淀产生的概率,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小 黑点“,常常会让研究者误以为是血清遭受污染。热灭活过程中 局部温度过高,摇晃不均匀,灭活时间过长,都会造成血清品质 下降。若非必须,可以不需要做热灭活这一步。不但节省时间,更确保血清的质量!
Q: 血清使用前是否有必要热灭活,如何热灭活? A: 请先确认 细胞培养实验方案是否需要对血清进行热灭活。 一般不建议热灭 活,热灭活处理会损失血清中部分营养成分,并且容易发生蛋白 质聚集沉淀;少数对补体敏感的实验需要(如某些免疫学实验,
腺病毒包装,某些PS培养等),可酌情使用热灭活血清。热灭活方法:血清全解冻充分摇匀后置于56°水浴中30分钟
Q: 细胞培养中出现黑点是污染吗?如何处理? A: 一旦您在细 胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否 浑浊,然后在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如 果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变 浑浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,
黑点的出现可能与以下几种情况有关:①细胞生长过老,破碎的 细胞残骸;②配制培养基的pH 值偏高,不宜细胞生长;③培养 原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除;④血清等级不足以维持细胞良好的生长。
Q:FBS 中含有的絮状物是什么东西? A:FBS 中的絮状物可能由 很多种原因造成,其中最常见的沉淀主要成分是纤维蛋白和脂蛋 白,不会影响血清品质,沉淀若需去除,视沉淀大小500-1000×g,离心5-10min去除,也可不做处理。
Q: 为什么要使用正规进口的血清? A:① 有的血清缺乏检验检 疫监管,冷链运输无法保障,严重影响血清批内和批间稳定性, 实验数据结果不可控;②正规的血清来源于中华人民共和国海关 总署允许进口的非疫区国家,防止未经检疫的血液制品中可能携带传染性物质, 一旦流入境内,可能会对试者和研究人员的生命健康造成威胁。