哪种类型的抗体适合我?

哪种类型的抗体适合我?

对于大多数实验室来说,正确的决定取决于科学和成本的某种结合。需要考虑的一些问题是:

您需要多少材料以及需要多长时间?

早期探索型项目可能只需要有限数量的材料,或者您的工作流程可能一次仅使用几微克的抗体。利用多克隆生成对于这些情况非常有效。兔子是多克隆抗体的行业标准,因为它具有强大的免疫系统,并且可以根据需要灵活地一次生产多年的抗体。如果您需要预先大量的材料而不是长期使用,那么对较大的动物(例如山羊)进行免疫可能会有所帮助。 

然而,如果您正在尝试生产用于有可能无限期使用的检测的试剂,那么单克隆生产可能更理想。

抗体的活性是否必须始终相同,或者某些批次间的差异在您的系统中是否可行?

通过多克隆生产,动物得到免疫,您的测试物品就成为最终收集到的一切。随着时间的推移,反应可能会发生变化或成熟,但可以通过在检测中使用一致量的抗体来减轻这种情况。 

同时,单克隆生产的明确目的是执行多个筛选步骤,以找到表达适合您的检测反应的抗体的单个细胞系。只要能够保持稳定性,该细胞系就应该能够在您需要时表达抗体。最终一致性的最终保证是对抗体的可变区进行测序并将其生产为重组蛋白。 

该项目有时间限制吗?

多克隆项目平均需要三个月的时间,而分离出具有所需性能的特定单克隆细胞系可能需要六个月的时间。此后生产重组蛋白形式的抗体可能还需要三个月或更长时间。 

您是否已经拥有希望与新生成的材料并行使用的现有抗体?

无论您当前拥有的抗体是多克隆还是单克隆,请选择不同的物种来开发第二抗体。这样您就可以用单独的二抗进行探测并同时查看两种反应性。例如,在鸡、山羊或豚鼠中制备多克隆是最常选择与现有兔抗体并行使用的选项。 

您的预算是多少?

由于固有的成本效益(平均单克隆成本约为平均多克隆成本的六倍),同时多种抗体的高通量需求很可能会利用多克隆生产。然而,对于早期诊断或治疗,以单克隆项目开始可能会更好地满足您的整体需求,并在项目加速方面带来红利。

如何选择适合您的ethosbiosciences细胞学染色的苏木精

如何选择适合您的ethosbiosciences细胞学染色的苏木精

对于细胞学染色,您实际上是在三种苏木精染色之一之间进行选择:Gill 1X 苏木精、Gill 2X 苏木精Harris 苏木精,酸化。以下是您如何为细胞学染色选择最佳苏木精,以及实验室技术人员选择的两种最常见染色的方案。

识别细胞学标本中的癌细胞、感染、炎症或其他细胞异常

一般来说,渐进式吉尔苏木精适合评估细胞学标本。最常见的是,我们推荐 Gill 1X,因为它被认为是 Gill 苏木精染色剂中最浅的染色剂。它可以补充 OG 和 EA 染色,而不会过度染色标本。有时,我们发现 Gill 2X 苏木精(例如当您分析细胞学样本中的癌细胞、感染或其他细胞异常时)是正确的选择。这很大程度上取决于病理学家的偏好;如果她或他喜欢深紫色染色,Gill 2X 苏木精会更合适。 

Harris 酸化苏木精也常用于细胞学染色,并且可以逐步使用以产生可接受的结果。与 Gill's 1X 苏木精相比,这会产生更深的染色。

在我们的帖子“如何设置和进行 H&E 染色”中查找这些苏木精染色方案。

妇科巴氏涂片和非妇科细胞学标本

细胞学标本,例如巴氏涂片或支气管清洗/刷子,通常适合使用 Gill 1X 苏木精染色。这种渐进染色剂呈浅紫色,可补充方案中的 OG 和 EA 染色剂,而不会过度染色样本。对于这种样本类型,很少有比 1X Gill Hematoxylin 更强烈的染色。

Gill's 1X 和 2X 苏木精细胞学染色方案

  1. 在 95% 乙醇中固定细胞涂片:15 分钟

  2. 用去离子水轻轻冲洗:30 秒

  3. 在苏木精溶液中染色,Gill 1X 或 Gill 2X:1½ 至 3 分钟 

  4. 用去离子水轻轻冲洗:1 分钟

  5. 上蓝试剂:15 至 60 秒 

  6. 用去离子水轻轻冲洗:30 秒

  7. 95% 乙醇:浸 10 次

  8. 巴氏染色 OG-6:1 至 2 分钟 

  9. 试剂酒精,95%:浸 10 次

  10. 巴氏染色 EA 50 或巴氏染色 EA 65 EA:2½ 至 3 分钟 

注:数字表示染料的比例。妇科样本使用 EA 50; EA 65 用于非妇科样本。

  1. 95% 乙醇,两次更换:每次浸泡 10 次

  2. 100% 乙醇,两次更换:每次 1 分钟

  3. 二甲苯或二甲苯替代品,两次更换:每次 1 分钟 

  4. 使用丙烯酸封片剂盖玻片,并在显微镜下检查

先进的哈里斯苏木精、细胞学酸化方案以及其他几个方案可在我们的《常见实验室生物染色快速参考指南》中找到。今天就下载吧!

如果您在处理细胞学和组织学标本的实验室工作,那么您可能需要考虑使用不止一种染色剂:例如,Gill 1X 苏木精(用于细胞学)和 Gill's 3X 苏木精或 Harris(用于组织学)。确定病理学家的偏好,并根据这些指南选择适合需要的染色剂。 

如何选择适合的COD检测仪

如何选择适合的COD检测仪

因为在水污染检测工作中,化学需氧量被作为判断水体污染程度的一项重要的指标,所以COD检测仪是在生活污水、工业废水的处理中是必*仪器,那么我们在购买的时候如何选择呢?所以今天就给大家介绍一下如何选购一台适合自身使用的仪器。
  一、功能特点
  为了满足多种的需求,COD测定仪增加了数据储存、打印以及设有USB接口,方便将数据转移到电脑;为了满足户外使用,设计了便携式仪器,内置大容量电池等等;断电保护、一键恢复出厂设置等功能。可根据自己的需求以及预算选配多种功能。
  二、检测原理
  首先,需要确定仪器是否根据相关标准设计而成,目前相关检测标准是《HJ/T399-2007 水质 化学需氧量的测定快速消解分光光度法》。
  当然,目前市面上的COD检测仪器基本都是采用相关的检测标准的测定方法。
  三、仪器技术参数
  1、高低量程
  市面上有一些COD测定仪并未分高低量程档,统一用高量程检测波长检测。因此,对于低COD值水样的检测不符合标准规定,且存在较大误差和不准确。
  2、测量范围
  由于多种的因素或设计目的,仪器检测范围不一样,可根据所需测水样的基本情况,选择合适测量范围的仪器。
  3、准确性、重复性和光学稳定性
  这三项技术指标可用于判断仪器性能和测量误差。准确性越高即示值误差越小说明仪器测量的结果越准;相对标准偏差越小说明仪器重复性越好。
  另外,仪器采用的光源至关重要。COD检测仪采用的是长寿命冷光源,好一点的仪器一般采用进口冷光源,当然价格上也会稍微贵一点,但仪器测量的准确度高、光学稳定性好。
  只要从以上几个方面来比较,然后结合自身的需求以及预算,基本可选得一款满意的COD测定仪。

如何选择适合自己的细胞培养板

如何选择适合自己的细胞培养板

  细胞培养板因为能给细胞实验节约时间,节约试剂材料费用,可以同时设立多个动态变量方便观察检测等,是细胞培养实验中常用和重要的耗材。但是,你能根据自身需求选择正确的培养板么?
  细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底(U型和V型),培养孔的孔数有6、12、24、48、96、384、1536 孔等。
  1、平底和圆底(U型和V型)培养板的区别和选择
  不同形状的培养板有不同用途。培养细胞,通常是选用平底的,这样便于镜下观测、有明确的底面积、细胞培养液面高度相对一致。因此做MTT等实验时,无论是贴壁和悬浮细胞,一般选用平底板。测吸光值一定要使用平底的培养板。
  U型或V型板,一般在某些特殊要求时才使用。如在免疫学方面,当做两种不同淋巴细胞混合培养时,需要二者相互接触刺激,这时一般会选用U型板,因为细胞会由于重力的作用而聚集在很小的范围内内。圆底培养板还会用于同位素掺入的实验,需要用细胞收集仪收集细胞的培养,如“混合淋巴细胞培养”等。V型板常用做细胞杀伤、免疫学血凝集实验。细胞杀伤这种实验也可用U型板替代(加入细胞后,低速离心)。
  2、细胞培养板与酶标板的区别
  酶标板一般要比细胞培养板贵,细胞板主要做细胞培养,也可以用来测蛋白浓度;酶标板包括包被板和反应板,一般不用做细胞培养,它主要做免疫酶联反应后的蛋白检测,需要更高的要求和特定的酶标工作液。
  3、常用不同培养板的孔底面积及推荐加液量
  不同孔板所加培养液的液面都不宜太深,一般在2~3mm范围,结合不同孔的底面积就可算出各培养孔的适宜加液量。若加液量过多会影响气体(氧气)交换,而且在搬动过程中易溢出造成污染。具体所加细胞密度依实验的目的不同灵活掌握。