预活化马来酰亚胺-AAT Bioquest荧光染料

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预活化马来酰亚胺 价格 1386
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300 ug

产品货号

预活化马来酰亚胺

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
存储条件 在零下15度以下保存
产品概述

产品基本信息

产品名称:预活化马来酰亚胺

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品介绍

ReadiUse 预活化马来酰亚胺是硫醇反应性HRP衍生物。它可用于容易记具有硫醇基团的蛋白质(例如抗体)或其他生物分子。ReadiUse 预活化HRP马来酰亚胺坚固且易于使用。它可以用于通过简单混合标记抗体,即抗体的微酸性或中性溶液(pH6-7)可以直接与HRP马来酰亚胺混合,并将反应混合物摇动1-2小时。在大多数情况下,所得溶液可直接用于ELISA测定而无需进一步纯化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的预活化马来酰亚胺。 

 

参考文献

Assessment of Tofacitinib and Ruxolitinib and their Anti Inflammatory Effects on Myeloperoxidase
Authors: Amber Milton
Journal: (2017)

Patterned Photonic Nitrocellulose for Pseudo-Paper ELISA
Authors: Junjie Chi, Bingbing Gao, Mi Sun, Fengling Zhang, Enben Su, Hong Liu, Zhongze Gu
Journal: Analytical Chemistry (2017)

Spinal Cord Inflammation: Molecular Imaging after Thoracic Aortic Ischemia Reperfusion Injury
Authors: Hassan Albadawi, John W Chen, Rahmi Oklu, Yue Wu, Gregory Wojtkiewicz, Benjamin Pulli, John D Milner, Richard P Cambria, Michael T Watkins
Journal: Radiology (2016): 152222

Myeloperoxidase Nuclear Imaging for Epileptogenesis
Authors: Yinian Zhang, Daniel P Seeburg, Benjamin Pulli, Gregory R Wojtkiewicz, Lionel Bure, Wendy Atkinson, Stefan Schob, Yoshiko Iwamoto, Muhammad Ali, Wei Zhang
Journal: Radiology (2015): 822–830

Myeloperoxidase–Hepatocyte–Stellate Cell Cross Talk Promotes Hepatocyte Injury and Fibrosis in Experimental Nonalcoholic Steatohepatitis
Authors: Benjamin Pulli, Muhammad Ali, Yoshiko Iwamoto, Matthias WG Zeller, Stefan Schob, Jenny J Linnoila, John W Chen
Journal: Antioxidants & redox signaling (2015): 1255–1269

Ordered cleavage of myeloperoxidase ester bonds releases active site heme leading to inactivation of myeloperoxidase by benzoic acid hydrazide analogs
Authors: Jiansheng Huang, Forrest Smith, Peter Panizzi
Journal: Archives of biochemistry and biophysics (2014): 74–85

Raising the shields: PCR in the presence of metallic surfaces protected by tailor-made coatings
Authors: Frank D Scherag, Thomas Brandstetter, Jürgen Rühe
Journal: Colloids and Surfaces B: Biointerfaces (2014): 576–582

Measuring myeloperoxidase activity in biological samples
Authors: Benjamin Pulli, Muhammad Ali, Reza Forghani, Stefan Schob, Kevin LC Hsieh, Gregory Wojtkiewicz, Jenny J Linnoila, John W Chen
Journal: PLoS One (2013): e67976

Micro-volume wall-less immunoassays using patterned planar plates
Authors: Katherine R Kozak, Jianyong Wang, Melvin Lye, Rashi Takkar, Namyong Kim, Hyunjae Lee, Noo Li Jeon, Kedan Lin, Crystal Zhang, Wai Lee T Wong
Journal: Lab on a Chip (2013): 1342–1350

Distinguishing inflammation from tumor and peritumoral edema by myeloperoxidase magnetic resonance imaging
Authors: Anne Kleijn, John W Chen, Jason S Buhrman, Gregory R Wojtkiewicz, Yoshiko Iwamoto, Martine L Lamfers, Anat O Stemmer-Rachamimov, Samuel D Rabkin, Ralph Weissleder, Robert L Martuza
Journal: Clinical Cancer Research (2011): 4484–4493

5-TAMRA 马来酰亚胺 四甲基罗丹明-5-马来酰亚胺 CAS 154480-30-5-AAT Bioquest荧光染料

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5-TAMRA 马来酰亚胺 四甲基罗丹明-5-马来酰亚胺 CAS 154480-30-5 价格 2823
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1 mg

产品货号

5-TAMRA 马来酰亚胺 四甲基罗丹明-5-马来酰亚胺 CAS 154480-30-5

产品参数
Ex (nm) 552 Em (nm) 578
分子量 481.51 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:5-TAMRA 马来酰亚胺 四甲基罗丹明-5-马来酰亚胺

CAS:154480-30-5 

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:481.51

溶剂:DMSO

激发波长(nm):552

发射波长(nm):578

 

产品介绍

5-TAMRA 马来酰亚胺 四甲基罗丹明-5-马来酰亚胺是美国AAT Bioquest生产的罗丹明类染料。四甲基罗丹明-5-马来酰亚胺是从四甲基罗丹明-5(6)-马来酰亚胺混合物中纯化出来的单体,广泛地用于多肽和蛋白质的硫醇修饰。在一些复杂的生物学研究中,实验比材料耗费更加关键。与6-异构体相比,四甲基罗丹明-5-马来酰亚胺更适合用于蛋白质和多肽的硫羟化修饰。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的5-TAMRA 马来酰亚胺 四甲基罗丹明-5-马来酰亚胺。 

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参考文献

4-aminopyridine prevents the conformational changes associated with P/C-type inactivation in Shaker channels
Authors: Claydon TW, Vaid M, Rezazadeh S, Kehl SJ, Fedida D.
Journal: J Pharmacol Exp Ther. (2006)

Fluorometric measurements of intermolecular distances between the alpha and beta subunits of the Na+/K+-ATPase
Authors: Dempski RE, Hartung K, Friedrich T, Bamberg E.
Journal: J Biol Chem. (2006)

Severing of F-actin by yeast cofilin is pH-independent
Authors: Pavlov D, Muhlrad A, Cooper J, Wear M, Reisler E.
Journal: Cell Motil Cytoskeleton (2006): 533

Both rotor and stator subunits are necessary for efficient binding of F1 to F0 in functionally assembled Escherichia coli ATP synthase
Authors: Krebstakies T, Zimmermann B, Graber P, Altendorf K, Borsch M, Greie JC.
Journal: J Biol Chem (2005): 33338

Cytochrome c conformations resolved by the photon counting histogram: watching the alkaline transition with single-molecule sensitivity
Authors: Perroud TD, Bokoch MP, Zare RN.
Journal: Proc Natl Acad Sci U S A (2005): 17570

Membrane topology of loop 13-14 of the Na+/glucose cotransporter (SGLT1): a SCAM and fluorescent labelling study
Authors: Gagnon DG, Holt A, Bourgeois F, Wallendorff B, Coady MJ, Lapointe JY.
Journal: Biochim Biophys Acta (2005): 173

Perturbation analysis of the voltage-sensitive conformational changes of the Na+/glucose cotransporter
Authors: Loo DD, Hirayama BA, Cha A, Bezanilla F, Wright EM.
Journal: J Gen Physiol (2005): 13

The beta subunit of the Na+/K+-ATPase follows the conformational state of the holoenzyme
Authors: Dempski RE, Friedrich T, Bamberg E.
Journal: J Gen Physiol (2005): 505

Distances between tropomyosin sites across the muscle thin filament using luminescence resonance energy transfer: evidence for tropomyosin flexibility
Authors: Chen Y, Lehrer SS.
Journal: Biochemistry (2004): 11491

Conformational dynamics of Na+/K+- and H+/K+-ATPase probed by voltage clamp fluorometry
Authors: Geibel S, Zimmermann D, Zifarelli G, Becker A, Koenderink JB, Hu YK, Kaplan JH, Friedrich T, Bamberg E.
Journal: Ann N Y Acad Sci (2003): 31

5(6)-TAMRA C6 马来酰亚胺-AAT Bioquest荧光染料

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5(6)-TAMRA C6 马来酰亚胺价格 1386
产品规格

5 mg

产品货号

5(6)-TAMRA C6 马来酰亚胺

产品参数
Ex (nm) 552 Em (nm) 578
分子量 623.65 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:5(6)-TAMRA C6 马来酰亚胺

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:623.65

溶剂:DMSO

激发波长(nm):552

发射波长(nm):578

 

产品介绍

5(6)-TAMRA C6 马来酰亚胺是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。5(6)-TMR C6马来酰亚胺是四甲基罗丹明-5(6)-马来酰亚胺非常好的替代试剂。它选择性地与含有硫醇基团的多肽、蛋白质和其它生物分子反应(例如,硫醇修饰的寡聚核苷酸和含硫醇的有机分子)。在相似的共轭条件下,它形成的共轭物比四甲基罗丹明-5(6)-马来酰亚胺形成的共轭物更强。5(6)-TMR C6马来酰亚胺的光谱特征与四甲基罗丹明-5(6)-马来酰亚胺一样。因此所有四甲基罗丹明-5(6)-马来酰亚胺形成的共轭体系都能用5(6)-TMR C6马来酰亚胺来实现。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的5(6)-TAMRA C6 马来酰亚胺。 

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参考文献

Recombinant human erythropoietin prevents ischemia-induced apoptosis and necrosis in explant cultures of the rat organ of Corti
Authors: Andreeva N, Nyamaa A, Haupt H, Gross J, Mazurek B.
Journal: Neurosci Lett (2006): 86

[Mechanism of advanced glycation end products-induced hyperpermeability in endothelial cells.]
Authors: Guo XH, Huang QB, Chen B, Wang SY, Hou FF, Fu N.
Journal: Sheng Li Xue Bao (2005): 205

Musculature of an illoricate predatory rotifer Asplanchnopus multiceps as revealed by phalloidin fluorescence and confocal microscopy
Authors: Kotikova EA, Raikova OI, Reuter M, Gustafsson MK.
Journal: Tissue Cell (2004): 189

Nontypeable Haemophilus influenzae strain 2019 produces a biofilm containing N-acetylneuraminic acid that may mimic sialylated O-linked glycans
Authors: Greiner LL, Watanabe H, Phillips NJ, Shao J, Morgan A, Zaleski A, Gibson BW, Apicella MA.
Journal: Infect Immun (2004): 4249

Resonance energy transfer nanobiosensors based on affinity binding between apo-enzyme and its substrate
Authors: Chinnayelka S, McShane MJ.
Journal: Biomacromolecules (2004): 1657

Fluorescent dyes modify properties of proteins used in microvascular research
Authors: Bingaman S, Huxley VH, Rumbaut RE.
Journal: Microcirculation (2003): 221

Maturity of pericytes in cerebral neocapillaries induced by growth factors: fluorescence immuno-histochemical analysis using confocal laser microscopy
Authors: Jariyapongskul A, Nakano A, Yamaguchi S, Nageswari K, Niimi H.
Journal: Clin Hemorheol Microcirc (2003): 417

Assessment of lectin-binding analysis for in situ detection of glycoconjugates in biofilm systems
Authors: Neu T, Swerhone GD, Lawrence JR.
Journal: Microbiology (2001): 299

C-terminal actin-binding sites of smooth muscle caldesmon switch actin between conformational states
Authors: Borovikov YS, Avrova SV, Vikhoreva NN, Vikhorev PG, Ermakov VS, Copeland O, Marston SB.
Journal: Int J Biochem Cell Biol (2001): 1151

Role of sipA in the early stages of Salmonella typhimurium entry into epithelial cells
Authors: Jepson MA, Kenny B, Leard AD.
Journal: Cell Microbiol (2001): 417

Texas Red 马来酰亚胺-AAT Bioquest荧光染料

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Texas Red 马来酰亚胺价格 1386
产品规格

5 mg

产品货号

Texas Red 马来酰亚胺

产品参数
Ex (nm) 586 Em (nm) 603
分子量 728.83 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:Texas Red 马来酰亚胺

储存条件:-15℃,避光干燥

保质期:12个月

 

物理化学光谱特性

分子量:728.83

溶剂:DMSO

Ex(nm):585

Em(nm):602

 

产品介绍

Texas Red 马来酰亚胺是美国AAT Bioquest生产的荧光染料,TR C2马来酰亚胺是标记含硫醇生物分子(例如多肽、蛋白质和硫醇修饰的寡聚核苷酸)非常理想的硫醇反应性荧光试剂。它选择性地与含硫醇基团的多肽、蛋白质、和其它的生物分子(如硫醇衍生的有机小分子)反应。它与TR偶联物具有相同的光谱特性,因此所有TR缀合体系都能用TR C2马来酰亚胺实现。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Texas Red 马来酰亚胺。 

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参考文献

A comparative study of the potential of solid triglyceride nanostructures coated with chitosan or poly(ethylene glycol) as carriers for oral calcitonin delivery
Authors: Garcia-Fuentes M, Prego C, Torres D, Alonso MJ.
Journal: Eur J Pharm Sci (2005): 133

Bead-based cellular analysis, sorting and multiplexing
Authors: Sanchez-Martin RM, Muzerelle M, Chitkul N, How SE, Mittoo S, Bradley M.
Journal: Chembiochem (2005): 1341

Budding dynamics of multicomponent tubular vesicles
Authors: Li L, Liang X, Lin M, Qiu F, Yang Y.
Journal: J Am Chem Soc (2005): 17996

Emission characteristics of fluorescent labels with respect to temperature changes and subsequent effects on DNA microchip studies
Authors: Liu WT, Wu JH, Li ES, Selamat ES.
Journal: Appl Environ Microbiol (2005): 6453

Fluorescence properties of fluorescein, tetramethylrhodamine and Texas Red linked to a DNA aptamer
Authors: Unruh JR, Gokulrangan G, Wilson GS, Johnson CK.
Journal: Photochem Photobiol (2005): 682

Orientational dynamics and dye-DNA interactions in a dye-labeled DNA aptamer
Authors: Unruh JR, Gokulrangan G, Lushington GH, Johnson CK, Wilson GS.
Journal: Biophys J (2005): 3455

Purification and fluorescent labeling of the human serotonin transporter
Authors: Rasmussen SG, Gether U.
Journal: Biochemistry (2005): 3494

Transepithelial transport of fluorescent p-glycoprotein and MRP2 substrates by insect Malpighian tubules: confocal microscopic analysis of secreted fluid droplets
Authors: Leader JP, O’Donnell MJ.
Journal: J Exp Biol (2005): 4363

Measurement of normal and anomalous diffusion of dyes within protein structures fabricated via multiphoton excited cross-linking
Authors: Basu S, Wolgemuth CW, Campagnola PJ.
Journal: Biomacromolecules (2004): 2347

Multistep fluorescence resonance energy transfer in sequential chromophore array constructed on oligo-DNA assemblies
Authors: Ohya Y, Yabuki K, Hashimoto M, Nakajima A, Ouchi T.
Journal: Bioconjug Chem (2003): 1057

 

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产品名称 货号
Texas Red 酰肼 Cat#481
Texas Red 叠氮化物 Cat#484
Texas Red 尸胺 Cat#482

AMCA C2马来酰亚胺-AAT Bioquest荧光染料

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AMCA C2马来酰亚胺价格 2823
产品规格

5 mg

产品货号

AMCA C2马来酰亚胺

产品参数
Ex (nm) 346 Em (nm) 434
分子量 355.34 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:AMCA C2马来酰亚胺

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:355.34

溶剂:DMSO

激发波长(nm):334

发射波长(nm):342

 

产品介绍

AMCA C2马来酰亚胺是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。AMCA 是一种强烈的蓝色荧光染料,在365nm处被激发。它具有很强的耐光性,而且在pH4~10之间都能产生荧光。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的AMCA C2马来酰亚胺。 

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参考文献

Functional expression of the peptide transporter PEPT2 in the mammalian enteric nervous system
Authors: Ruhl A, Hoppe S, Frey I, Daniel H, Schemann M.
Journal: J Comp Neurol (2005): 1

Increased resonance energy transfer between fluorophores bound to DNA in proximity to metallic silver particles
Authors: Malicka J, Gryczynski I, Fang J, Kusba J, Lakowicz JR.
Journal: Anal Biochem (2003): 160

Dental extractions in patients maintained on oral anticoagulant therapy: comparison of INR value with occurrence of postoperative bleeding
Authors: Blinder D, Manor Y, Martinowitz U, Taicher S.
Journal: Int J Oral Maxillofac Surg (2001): 518

[Hemostatic wound management in marcumar patients. Collagen fleece vs. tranexamic acid]
Authors: Bublitz R, Sommer S, Weingart D, Bauerle K, Both A.
Journal: Mund Kiefer Gesichtschir (2000): 240

[Oral surgical procedures during anticoagulant therapy]
Authors: Blinder D, Martinowitz U, Ardekian L, Peleg M, Taicher S.
Journal: Harefuah (1996): 681

Evidence for cobinding of self- and allopeptides to human class II major histocompatibility antigen DR1 by energy transfer
Authors: Kropshofer H, Max H, Kalbacher H.
Journal: Proc Natl Acad Sci U S A (1993): 403

Soluble aggregates of IgG and immune complexes enhance IL-6 production by renal mesangial cells
Authors: van den Dobbelsteen ME, van der Woude FJ, Schroeijers WE, van Es LA, Daha MR.
Journal: Kidney Int (1993): 544

Time-resolved energy transfer measurements of donor-acceptor distance distributions and intramolecular flexibility of a CCHH zinc finger peptide
Authors: Eis PS, Lakowicz JR.
Journal: Biochemistry (1993): 7981

Improved indirect fluorescence immunocytochemical method using counterstains
Authors: Newkirk RF, Mack J.
Journal: Biotechniques (1992): 536

Triple immunofluorescence confocal laser scanning microscopy: spatial correlation of novel cellular differentiation markers in human muscle biopsies
Authors: Schubert W.
Journal: Eur J Cell Biol (1991): 272

6-OG488 马来酰亚胺(相当于Oregon Green® 488 马来酰亚胺)-AAT Bioquest荧光染料

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6-OG488 马来酰亚胺(相当于Oregon Green® 488 马来酰亚胺)价格 2823
产品规格

5 mg

产品货号

6-OG488 马来酰亚胺(相当于Oregon Green® 488 马来酰亚胺)

产品参数
Ex (nm) 498 Em (nm) 526
分子量 463.35 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:6-OG488 马来酰亚胺

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:463.35

溶剂:DMSO

激发波长(nm):496

发射波长(nm):524

 

产品介绍

6-OG488 马来酰亚胺是美国AAT Bioquest生产的荧光染料。OG488马来酰亚胺与OregonGreen®488马来酰亚胺(Invitrogen#O6034,OregonGreen®是Invitrogen的商标)是相同的分子。这种荧光素的氟化类似物具有较高的光稳定性和较低的pKa~4.7,而荧光素马来酰亚胺具有pKa~6.4。OG488马来酰亚胺的pKa降低使其荧光在生理pH范围内基本上对pH不敏感。 该硫醇反应性OG488马来酰亚胺可用于制备亮绿色荧光生物共轭物,其激发/发射大值为~496 / 524nm。 它是具有严重pH依赖性和低光稳定性的荧光素马来酰亚胺的极好替代品。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的6-OG488 马来酰亚胺。 

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参考文献

Biodegradable polymersomes as carriers and release systems for paclitaxel using Oregon Green(R) 488 labeled paclitaxel as a model compound
Authors: Lee JS, Feijen J.
Journal: J Control Release (2012): 312

Microscopic imaging of intracellular calcium in live cells using lifetime-based ratiometric measurements of Oregon Green BAPTA-1
Authors: Lattarulo C, Thyssen D, Kuchibholta KV, Hyman BT, Bacskaiq BJ.
Journal: Methods Mol Biol (2011): 377

Pharmacokinetics of intraocular drug delivery of Oregon green 488-labeled triamcinolone by subtenon injection using ocular fluorophotometry in rabbit eyes
Authors: Lee SJ, Kim ES, Geroski DH, McCarey BE, Edelhauser HF.
Journal: Invest Ophthalmol Vis Sci (2008): 4506

Trans-scleral permeability of Oregon green 488
Authors: Lee SJ, Kim SJ, Kim ES, Geroski DH, McCarey BE, Edelhauser HF.
Journal: J Ocul Pharmacol Ther (2008): 579

A mismatch-selective bifunctional rhodium-Oregon Green conjugate: a fluorescent probe for mismatched DNA
Authors: Zeglis BM, Barton JK.
Journal: J Am Chem Soc (2006): 5654

The Pennsylvania Green Fluorophore: a hybrid of Oregon Green and Tokyo Green for the construction of hydrophobic and pH-insensitive molecular probes
Authors: Mottram LF, Boonyarattanakalin S, Kovel RE, Peterson BR.
Journal: Org Lett (2006): 581

Cetuximab-Oregon Green 488
Authors: Unknown
Journal: In: Molecular Imaging and Contrast Agent Database (MICAD), Bethesda (MD) (2004)

Collagen-binding adhesion protein 35-Oregon Green 488
Authors: Cheng KT, Van Zandvoort M.
Journal: In: Molecular Imaging and Contrast Agent Database (MICAD), Bethesda (MD). (2004)

Alexa and Oregon Green dyes as fluorescence anisotropy probes for measuring protein-protein and protein-nucleic acid interactions
Authors: Rusinova E, Tretyachenko-Ladokhina V, Vele OE, Senear DF, Alexander Ross JB.
Journal: Anal Biochem (2002): 18

Imaging of changes in sarcoplasmic reticulum [Ca(2+)] using Oregon Green BAPTA 5N and confocal laser scanning microscopy
Authors: White C, McGeown G.
Journal: Cell Calcium (2002): 151

DABCYL C2马来酰亚胺-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
DABCYL C2马来酰亚胺价格 2823
产品规格

25 mg

产品货号

DABCYL C2马来酰亚胺

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 391.42 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:DABCYL C2马来酰亚胺

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:391.42

溶剂:DMSO

激发波长(nm):428

发射波长(nm):N/A

 

产品介绍

DABCYL C2马来酰亚胺是DABCYL的硫醇反应形式,被广泛用于制备各种包含DABCYL的基于FRET的探针。 DABCYL是开发基于FRET的核酸探针和蛋白酶底物的受欢迎受体之一。 它通常与EDANS或蓝色荧光供体(如香豆素染料)配对。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的DABCYL C2马来酰亚胺。 

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试剂应用文献

Protein N-terminal processing: substrate specificity of Escherichia coli and human methionine aminopeptidases
Authors: Xiao, Qing and Zhang, Feiran and Nacev, Benjamin A and Liu, Jun O and Pei, Dehua
Journal: Biochemistry (2010): 5588–5599

 

参考文献

Recombinant expression and partial characterization of an active soluble histo-aspartic protease from Plasmodium falciparum
Authors: Xiao H, Sinkovits AF, Bryksa BC, Ogawa M, Yada RY.
Journal: Protein Expr Purif (2006): 88
 
Internally quenched peptides for the study of lysostaphin: An antimicrobial protease that kills Staphylococcus aureus
Authors: Warfield R, Bardelang P, Saunders H, Chan WC, Penfold C, James R, Thomas NR.
Journal: Org Biomol Chem (2006): 3626
 
A quenched fluorescent dipeptide for assaying dispase- and lysin-like proteases
Authors: Weimer S, Oertel K, Fuchsbauer HL.
Journal: Anal Biochem (2006): 110
 
Characterization and inhibition of SARS-coronavirus main protease
Authors: Liang PH., undefined
Journal: Curr Top Med Chem (2006): 361
 
Fluorogenic peptide substrates containing benzoxazol-5-yl-alanine derivatives for kinetic assay of cysteine proteases
Authors: Szabelski M, Rogiewicz M, Wiczk W.
Journal: Anal Biochem (2005): 20
 
ADAM33 enzyme properties and substrate specificity
Authors: Zou J, Zhang R, Zhu F, Liu J, Madison V, Uml and SP., undefined
Journal: Biochemistry (2005): 4247
 
Enzymatic activity characterization of SARS coronavirus 3C-like protease by fluorescence resonance energy transfer technique
Authors: Chen S, Chen LL, Luo HB, Sun T, Chen J, Ye F, Cai JH, Shen JK, Shen X, Jiang HL.
Journal: Acta Pharmacol Sin (2005): 99
 
Fluorogenic peptide substrates for carboxydipeptidase activity of cathepsin B
Authors: Stachowiak K, Tokmina M, Karpinska A, Sosnowska R, Wiczk W.
Journal: Acta Biochim Pol (2004): 81
 
Synthesis of poly(ethylene glycol)-based saquinavir prodrug conjugates and assessment of release and anti-HIV-1 bioactivity using a novel protease inhibition assay
Authors: Gunaseelan S, Debrah O, Wan L, Leibowitz MJ, Rabson AB, Stein S, Sinko PJ.
Journal: Bioconjug Chem (2004): 1322
 
Highly sensitive intramolecularly quenched fluorogenic substrates for renin based on the combination of L-2-amino-3-(7-methoxy-4-coumaryl)propionic acid with 2,4-dinitrophenyl groups at various positions
Authors: Paschalidou K, Neumann U, Gerhartz B, Tzougraki C.
Journal: Biochem J (2004): 1031

ReadiView 生物素 马来酰亚胺-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
ReadiView 生物素 马来酰亚胺价格 2823
产品规格

5 mg

产品货号

ReadiView 生物素 马来酰亚胺

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 660.70 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存
产品概述

产品基本信息

产品名称:ReadiView 生物素 马来酰亚胺

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:660.70

溶剂:DMSO

 

产品介绍

ReadiView 生物素 马来酰亚胺是美国AAT Bioquest生产的生物素类产品。生物素/抗生物素蛋白复合物广泛应用于各种生物检测。虽然大量生物素标记的生物共轭物可商购,但生物素化程度(生物素/生物聚合物的比例)的准确测定对于生物化学家来说仍然是一个巨大的挑战。HABA仍然主要用于确定生物素化程度(通过其吸收消光系数= 34,000 / M-1cm-1)。当添加含生物素的样品时,生物素与抗生物素蛋白强烈结合并取代弱结合的HABA。由此产生的吸光度降低与生物素的量有关。然而,有许多因素影响HABA方法的准确性,使得该方法对于许多生物素标记的缀合物是不可靠的。我们的ReadiView 生物素含有专门设计的颜色标签(CT),通过简单计算280 nm / 385 nm的校正吸收率,可轻松获得生物素化程度。我们特别设计的标签对生物素结合亲和力的影响非常小,其吸收大值旨在使标签对用于标记抗生物素蛋白的大多数荧光团具有小的猝灭效应。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的ReadiView 生物素 马来酰亚胺。 

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参考文献

A low-cost, high-performance system for fluorescence lateral flow assays
Authors: Linda G Lee, Eric S Nordman, Martin D Johnson, Mark F Oldham
Journal: Biosensors (2013): 360–373

Implementation of P22 viral capsids as nanoplatforms
Authors: Sebyung Kang, Masaki Uchida, Alison O’Neil, Rui Li, Peter E Prevelige, Trevor Douglas
Journal: Biomacromolecules (2010): 2804–2809

Calcium-dependent activation of transglutaminase 2 by nanosecond pulsed electric fields
Authors: Keiko Morotomi-Yano, Ken-ichi Yano
Journal: FEBS Open Bio

 

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产品名称 货号
ReadiView 生物素 琥珀酰亚胺酯 Cat#3059
ReadiView 生物素 酸 Cat#3050
ReadiView 生物素 酰肼 Cat#3055

生物胞素 C2 马来酰亚胺-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
生物胞素 C2 马来酰亚胺价格 2823
产品规格

5 mg

产品货号

生物胞素 C2 马来酰亚胺

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 494.61 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存
产品概述

产品基本信息

产品名称:生物胞素 C2 马来酰亚胺

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:494.61

溶剂:DMSO

激发波长(nm):N/A

发射波长(nm):N/A

 

产品介绍

生物胞素 C2 马来酰亚胺是美国AAT Bioquest生产的生物素类荧光探针。生物胞素马来酰亚胺易与生物大分子硫羟基部分反应,形成硫醚偶联物,它十分稳定。生物胞素马来酰亚胺需要温和地结合条件。例如,在PH5.5通常是修饰半胱氨酸残基的佳PH, 并且无论什么时候,尽量减少暴露在空气中溶液反应,尽可能避免硫羟化底物在空气中氧化。大多偶联物在室温下形成。然而,升高或者降低温度都可能需要特定的标记反应。生物胞素必须置于无外来硫醇的缓冲液中(6-巯基乙醇、二硫苏糖醇和巯基乙胺)反应。蛋白质或者多肽通过与不含有硫醇基团(SH)的试剂进行硫羟化反应形成生物胞素。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的生物胞素 C2 马来酰亚胺。 

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参考文献

The anterograde and retrograde axonal transport of biotinylated dextran amine and biocytin in the nervous system of teleosts
Authors: Xue HG, Yang CY, Ito H.
Journal: Brain Res Brain Res Protoc (2004): 106

Biocytin and biotin uptake into NB2a neuroblastoma and C6 astrocytoma cells
Authors: Baur B, Suormala T, Baumgartner ER.
Journal: Brain Res (2002): 111

Correlative fluorescence and electron microscopy of biocytin-filled neurons with a preservation of the postsynaptic ultrastructure
Authors: Morozov Y, Khalilov I, Ben-Ari Y, Represa A.
Journal: J Neurosci Methods (2002): 81

A new quantitative analytical method of serum biotinidase activity using biocytin as a substrate and its clinical significance in Japan
Authors: Kumasaka K, Muratsugu M, Fukui T, Kimura M, Takagi Y, Hashizume N.
Journal: Clin Chim Acta (2001): 71

Biotin and biocytin uptake into cultured primary calf brain microvessel endothelial cells of the blood-brain barrier
Authors: Baur B, Baumgartner ER.
Journal: Brain Res (2000): 348

In vitro biocytin injection into perinatal mouse brain: a method for tract tracing in developing tissue
Authors: Chang SL, LoTurco JJ, Nisenbaum LK.
Journal: J Neurosci Methods (2000): 1

A method of combining biocytin tract-tracing with avidin-biotin-peroxidase complex immunocytochemistry for pre-embedding electron microscopic labeling in neonatal tissue
Authors: Erisir A, Aoki C.
Journal: J Neurosci Methods (1998): 189

A radioiodinated biocytin derivative for in-vivo applications
Authors: Nakamoto Y, Sakahara H, Saga T, Yao Z, Zhang M, Sato N, Zhao S, Arano Y, Ono M, Saji H, Konishi J.
Journal: Nucl Med Commun (1998): 963

A rapid method for combined laser scanning confocal microscopic and electron microscopic visualization of biocytin or neurobiotin-labeled neurons
Authors: Sun XJ, Tolbert LP, Hildebrand JG, Meinertzhagen IA.
Journal: J Histochem Cytochem (1998): 263

Biotinylated dextran amine and biocytin hydrochloride are useful tracers for the study of retinal projections in the frog
Authors: Scalia F, Galoyan SM, Eisner S, Harris E, Su W.
Journal: J Neurosci Methods (1997): 167

SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯 CAS 64987-85-5-AAT Bioquest荧光染料

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SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯 CAS 64987-85-5价格 1095
产品规格

25 mg

产品货号

SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯 CAS 64987-85-5

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 334.32 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存
产品概述

SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯是美国AAT Bioquest生产的荧光染料,SMCC是一种不可裂解且可透膜的交联剂,间隔臂为8.3Å。它含有胺反应性琥珀酰亚胺酯(SE)和巯基反应性马来酰亚胺基团。NHS酯在pH 7-9下与伯胺反应形成稳定的酰胺键。马来酰亚胺与pH6.5-7.5的巯基反应形成稳定的硫醚键。SMCC的SE组与载体蛋白上的赖氨酸残基反应,将它们转化为反应性马来酰亚胺。SMCC是一种广泛用于产生稳定的马来酰亚胺的载体蛋白的试剂,其可以自发地与巯基反应。或者,可将这些相对稳定的马来酰亚胺活化的中间体冻干并储存,以便随后与半抗原缀合。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的SMCC 4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯。 

实验方案

操作方案

1.制备含胺蛋白质的缀合缓冲液,蛋白质-NH 2 (缓冲液A):磷酸盐缓冲盐水(PBS,pH 7.2)或pH值为7.2至8.0的其他无胺缓冲液可用于此。

注意:避免在缀合过程中含有伯胺(如Tris或甘氨酸)和巯基的缓冲液,因为它们会与预期的反应竞争。如有必要,将样品透析或脱盐至适当的缓冲液如PBS中。

 

2.制备含巯基蛋白质的缀合缓冲液,蛋白质-SH(缓冲液B):pH为6.5-7.5的不含巯基的缓冲液可用于此。

注1:在缀合过程中避免使用含有巯基的缓冲液,因为它们会与预期的反应竞争。如有必要,将样品透析或脱盐至适当的缓冲液如PBS中。

注2:加入1-5mM EDTA有助于螯合二价金属,从而减少含巯基蛋白质中的二硫化物形成。

 

3.准备脱盐柱,将改性蛋白与过量交联剂和反应副产物分离。

 

4.在其缀合缓冲液A和缓冲液B中制备含胺蛋白质(蛋白质-NH2)和含巯基蛋白质(蛋白质-SH)溶液。

 

5.制备蛋白质1-NH 2 -SMCC(或SMCC Plus )缀合物:将适量的SMCC(或SMCC Plus )加入到缓冲液A中的含胺蛋白质溶液中。蛋白质-NH 2的浓度 决定SMCC(或SMCC Plus )摩尔过量使用。SMCC(或SMCC Plus )摩尔过量的建议体积如下,但佳比例必须使用目标蛋白质通过实验确定:

  • 蛋白质样品<1 mg / mL使用40-80倍摩尔过量。
  • 1-4 mg / mL的蛋白质样品使用20倍摩尔过量。
  • 5-10 mg / mL的蛋白质样品使用5至10倍摩尔过量。

 

6.将上述反应混合物在室温下孵育30-60分钟或在4℃孵育2-4小时。

注1:为了在完成前停止缀合反应,加入含有还原半胱氨酸的缓冲液,其浓度比Protein-SH的巯基浓度高几倍。

注2:可以通过电泳分离和随后的蛋白质染色来估计缀合效率。

 

7.使用用共轭缓冲液A平衡的脱盐柱除去多余的SMCC(或SMCC Plus )。

 

8.将含硫醇(蛋白-SH)和脱盐的含胺蛋白(蛋白-NH 2)SMCC(或SMCC Plus )缀合物混合并混合,摩尔比对应于终缀合物所需的摩尔比,并与亲属一致两种蛋白质上存在的巯基和活化胺的数量。

注意:与马来酰亚胺部分反应的分子必须具有游离(还原的)巯基。对于蛋白质,在室温下使用5mM TCEP还原二硫键30分钟,然后通过合适的脱盐柱两次。请注意,蛋白质(例如抗体)可能会通过完全还原其二硫键而失活。可以用2-巯基乙胺·HCl(2-MEA)实现IgG中铰链区二硫键的选择性还原。可以使用N-琥珀酰亚胺基S-乙酰硫代乙酸酯(SATA)或2-亚氨基硫杂环戊烷·盐酸盐(Traut’s Reagent)将巯基化合物添加到分子中,后者可以修饰伯胺。

 

参考文献

N-glycan targeted gene delivery to the dendritic cell SIGN receptor
Authors: Kevin Anderson, Christian Fernandez, Kevin G Rice
Journal: Bioconjugate chemistry (2010): 1479–1485

Sulfo-SMCC 4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐 CAS 92921-24-9-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Sulfo-SMCC 4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐 CAS 92921-24-9 价格 3534
产品规格

100 mg

产品货号

Sulfo-SMCC 4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐 CAS 92921-24-9

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 436.37 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

Sulfo-SMCC 4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐是美国AAT Bioquest生产的荧光染料,Sulfo-SMCC是SMCC的水溶性形式。它含有胺反应性磺基琥珀酰亚胺酯(SSE)和巯基反应性马来酰亚胺基团。NHS酯在pH 7-9下与伯胺反应形成稳定的酰胺键。马来酰亚胺与pH6.5-7.5的巯基反应形成稳定的硫醚键。SMCC的SSE组与载体蛋白上的赖氨酸残基反应,将它们转化为反应性马来酰亚胺。Sulfo-SMCC是一种广泛用于产生稳定的马来酰亚胺的载体蛋白的试剂,其可以自发地与巯基反应。或者,可将这些相对稳定的马来酰亚胺活化的中间体冻干并储存,以便随后与半抗原缀合。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Sulfo-SMCC 4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐。 

实验方案

样品实验方案

1.制备含胺蛋白质的缀合缓冲液,蛋白质-NH 2 (缓冲液A):磷酸盐缓冲盐水(PBS,pH 7.2)或pH值为7.2至8.0的其他无胺缓冲液可用于此。

注意:避免在缀合过程中含有伯胺(如Tris或甘氨酸)和巯基的缓冲液,因为它们会与预期的反应竞争。如有必要,将样品透析或脱盐至适当的缓冲液如PBS中。

 

2.制备含巯基蛋白质的缀合缓冲液,蛋白质-SH(缓冲液B):pH为6.5-7.5的不含巯基的缓冲液可用于此。

注1:在缀合过程中避免使用含有巯基的缓冲液,因为它们会与预期的反应竞争。如有必要,将样品透析或脱盐至适当的缓冲液如PBS中。

注2:加入1-5mM EDTA有助于螯合二价金属,从而减少含巯基蛋白质中的二硫化物形成。

 

3.准备脱盐柱,将改性蛋白与过量交联剂和反应副产物分离。

 

4.在其缀合缓冲液A和缓冲液B中制备含胺蛋白质(蛋白质-NH2)和含巯基蛋白质(蛋白质-SH)溶液。

 

5.制备蛋白质1-NH 2 -SMCC(或SMCC Plus)缀合物:将适量的SMCC(或SMCC Plus)加入到缓冲液A中的含胺蛋白质溶液中。蛋白质-NH 2的浓度 决定SMCC(或SMCC Plus)摩尔过量使用。SMCC(或SMCC Plus)摩尔过量的建议体积如下,但佳比例必须使用目标蛋白质通过实验确定:

  • 蛋白质样品<1 mg>
  • 1-4 mg / mL的蛋白质样品使用20倍摩尔过量。
  • 5-10 mg / mL的蛋白质样品使用5至10倍摩尔过量。

 

6.将上述反应混合物在室温下孵育30-60分钟或在4℃孵育2-4小时。

注1:为了在完成前停止缀合反应,加入含有还原半胱氨酸的缓冲液,其浓度比Protein-SH的巯基浓度高几倍。

注2:可以通过电泳分离和随后的蛋白质染色来估计缀合效率。

 

7.使用用共轭缓冲液A平衡的脱盐柱除去多余的SMCC(或SMCC Plus)。

 

8.将含硫醇(蛋白-SH)和脱盐的含胺蛋白(蛋白-NH 2)SMCC(或SMCC Plus)缀合物混合并混合,摩尔比对应于终缀合物所需的摩尔比,并与亲属一致两种蛋白质上存在的巯基和活化胺的数量。

注意:与马来酰亚胺部分反应的分子必须具有游离(还原的)巯基。对于蛋白质,在室温下使用5mM TCEP还原二硫键30分钟,然后通过合适的脱盐柱两次。请注意,蛋白质(例如抗体)可能会通过完全还原其二硫键而失活。可以用2-巯基乙胺·HCl(2-MEA)实现IgG中铰链区二硫键的选择性还原。可以使用N-琥珀酰亚胺基S-乙酰硫代乙酸酯(SATA)或2-亚氨基硫杂环戊烷·盐酸盐(Traut’s Reagent)将巯基化合物添加到分子中,后者可以修饰伯胺。

 

参考文献

N-glycan targeted gene delivery to the dendritic cell SIGN receptor
Authors: Kevin Anderson, Christian Fernandez, Kevin G Rice
Journal: Bioconjugate chemistry (2010): 1479–1485

3-马来酰亚胺基丙酸羟基琥珀酰亚胺酯 CAS 55750-62-4-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
3-马来酰亚胺基丙酸羟基琥珀酰亚胺酯 CAS 55750-62-4价格 1386
产品规格

100 mg

产品货号

3-马来酰亚胺基丙酸羟基琥珀酰亚胺酯 CAS 55750-62-4

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 266.21 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存
产品概述

3-马来酰亚胺基丙酸羟基琥珀酰亚胺酯是美国AAT Bioquest生产的荧光探针,3-马来酰亚胺基丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯是不可裂解和膜可渗透的交联剂。它含有胺反应性琥珀酰亚胺酯(SE)和巯基反应性马来酰亚胺基团。NHS酯在pH 7-9下与伯胺反应形成稳定的酰胺键。马来酰亚胺与pH6.5-7.5的巯基反应形成稳定的硫醚键。SE-基团的3-马来酰亚胺基丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯与载体蛋白上的赖氨酸残基反应,将它们转化为反应性马来酰亚胺。3-马来酰亚胺基丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯是广泛用于产生稳定的马来酰亚胺活化的载体蛋白的试剂,其可以自发地与巯基反应。或者,可将这些相对稳定的马来酰亚胺活化的中间体冻干并储存,以便随后与半抗原缀合。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的3-马来酰亚胺基丙酸羟基琥珀酰亚胺酯。 

实验方案

样品实验方案

1.制备含胺蛋白质的缀合缓冲液,蛋白质-NH 2 (缓冲液A):磷酸盐缓冲盐水(PBS,pH 7.2)或pH值为7.2至8.0的其他无胺缓冲液可用于此。

注意:避免在缀合过程中含有伯胺(如Tris或甘氨酸)和巯基的缓冲液,因为它们会与预期的反应竞争。如有必要,将样品透析或脱盐至适当的缓冲液如PBS中。

 

2.制备含巯基蛋白质的缀合缓冲液,蛋白质-SH(缓冲液B):pH为6.5-7.5的不含巯基的缓冲液可用于此。

注1:在缀合过程中避免使用含有巯基的缓冲液,因为它们会与预期的反应竞争。如有必要,将样品透析或脱盐至适当的缓冲液如PBS中。

注2:加入1-5mM EDTA有助于螯合二价金属,从而减少含巯基蛋白质中的二硫化物形成。

 

3.准备脱盐柱,将改性蛋白与过量交联剂和反应副产物分离。

 

4.在其缀合缓冲液A和缓冲液B中制备含胺蛋白质(蛋白质-NH2)和含巯基蛋白质(蛋白质-SH)溶液。

 

5.制备蛋白质1-NH 2 -SMCC(或SMCC Plus)缀合物:将适量的SMCC(或SMCC Plus)加入到缓冲液A中的含胺蛋白质溶液中。蛋白质-NH 2的浓度 决定SMCC(或SMCC Plus)摩尔过量使用。SMCC(或SMCC Plus)摩尔过量的建议体积如下,但最佳比例必须使用目标蛋白质通过实验确定:

  • 蛋白质样品<1 mg / mL使用40-80倍摩尔过量。
  • 1-4 mg / mL的蛋白质样品使用20倍摩尔过量。
  • 5-10 mg / mL的蛋白质样品使用5至10倍摩尔过量。

 

6.将上述反应混合物在室温下孵育30-60分钟或在4℃孵育2-4小时。

注1:为了在完成前停止缀合反应,加入含有还原半胱氨酸的缓冲液,其浓度比Protein-SH的巯基浓度高几倍。

注2:可以通过电泳分离和随后的蛋白质染色来估计缀合效率。

 

7.使用用共轭缓冲液A平衡的脱盐柱除去多余的SMCC(或SMCC Plus)。

 

8.将含硫醇(蛋白-SH)和脱盐的含胺蛋白(蛋白-NH 2)SMCC(或SMCC Plus)缀合物混合并混合,摩尔比对应于最终缀合物所需的摩尔比,并与亲属一致两种蛋白质上存在的巯基和活化胺的数量。

注意:与马来酰亚胺部分反应的分子必须具有游离(还原的)巯基。对于蛋白质,在室温下使用5mM TCEP还原二硫键30分钟,然后通过合适的脱盐柱两次。请注意,蛋白质(例如抗体)可能会通过完全还原其二硫键而失活。可以用2-巯基乙胺·HCl(2-MEA)实现IgG中铰链区二硫键的选择性还原。可以使用N-琥珀酰亚胺基S-乙酰硫代乙酸酯(SATA)或2-亚氨基硫杂环戊烷·盐酸盐(Traut’s Reagent)将巯基化合物添加到分子中,后者可以修饰伯胺。

 

参考文献

N-glycan targeted gene delivery to the dendritic cell SIGN receptor
Authors: Kevin Anderson, Christian Fernandez, Kevin G Rice
Journal: Bioconjugate chemistry (2010): 1479–1485

蛋白质和硫醇化生物分子的马来酰亚胺标记

蛋白质和其他硫醇化生物分子的马来酰亚胺标记

硫醇与马来酰亚胺的反应是广泛用于生物共轭和标记生物分子(包括蛋白质和肽)的过程。它按照以下方案进行:

蛋白质和硫醇化生物分子的马来酰亚胺标记

马来酰亚胺是对硫醇表现出高选择性的亲电子化合物。虽然马来酰亚胺在自然界中几乎不存在,但硫醇却非常丰富。它们以半胱氨酸残基形式存在于蛋白质和肽中。尽管天然DNA不含硫醇,但具有硫醇基团的合成寡核苷酸可以很容易地制备。

硫醇易于氧化二聚并形成二硫键。因此,半胱氨酸残基形成二硫键,从而稳定蛋白质的三级结构。二硫化物不与马来酰亚胺反应。因此,有必要在缀合前还原二硫化物并排除反应中的氧气。

缀合方案取决于起始组分的溶解度。对于水溶性较低的化合物(如大多数荧光染料马来酰亚胺),必须使用有机共溶剂(如 DMSO或 DMF)。

我们建议采用以下方案将Lumprobe 染料马来酰亚胺与蛋白质、肽和其他硫醇化生物分子结合。

  1. 将待标记的蛋白质或其他含有硫醇的分子溶解在塑料小瓶中的脱气缓冲液中,pH 7-7.5(PBS、Tris 和 HEPES 很好,但也可以使用其他不含硫醇的缓冲液)。可以通过在缓冲液上施加真空几分钟或通过惰性气体(氮气、氩气或氦气)鼓泡来对缓冲液进行脱气。对于蛋白质,最佳浓度为 1-10 mg/mL。

  2. 添加过量的 TCEP(三羧乙基膦)试剂以减少二硫键,用惰性气体冲洗并关闭。 TCEP 过量 100 倍就可以了。将混合物在室温下放置 20 分钟。

  3. 将马来酰亚胺染料溶解在 DMSO 或新鲜 DMF 中(100 uL 中 1-10 mg)。

  4. 将马来酰亚胺染料溶液添加到硫醇溶液中(染料过量 20 倍),用惰性气体冲洗小瓶,然后紧紧关闭。

  5. 充分混合并在 4°C 或室温下放置过夜。

  6. 通过凝胶过滤、HPLC、FPLC 或电泳纯化产物。

对于水溶性差的马来酰亚胺,像大多数染料马来酰亚胺一样,我们建议使用共溶剂(DMF 或 DMSO)。具有良好水溶性的马来酰亚胺(如磺基-氰基马来酰亚胺)可以溶解在水中。如果出现沉淀,请增加混合物中有机助溶剂的含量,以实现更好的标记。

建议仅将透析作为纯化具有良好水溶性的马来酰亚胺的方法。

Amplite 马来酰亚胺定量试剂盒 比色法-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Amplite 马来酰亚胺定量试剂盒 比色法价格 2823
产品规格

100 tests

产品货号

Amplite 马来酰亚胺定量试剂盒 比色法

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Amplite 马来酰亚胺定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的马来酰亚胺定量试剂盒,马来酰亚胺可以在302nm下通过分光光度法直接测定。但是,620M-1cm-1的小消光系数使得该测定不敏感,并且该测定由于在相同波长下的蛋白质吸光度而进一步复杂化。该比色马来酰亚胺测定试剂盒通过首先使样品与过量硫醇反应,然后使用摩尔消光系数为19,800M -1 cm -1的4,4′-DTDP测定剩余的未反应的硫醇来定量马来酰亚胺基团。马来酰亚胺的量计算为所有马来酰亚胺基团完全反应后硫醇的初始量与未反应的硫醇的量之间的差值。用于测定马来酰亚胺基团的该分光光度测定法是反向GSH测定法。它利用了GSH的硫醇与马来酰亚胺部分的高反应性。使样品的马来酰亚胺与GSH形成稳定的硫代琥珀酰亚胺基键。在样品反应完成后,通过使用4,4′-DTDP估算过量的GSH,即反应混合物中剩余的GSH硫醇。滴定与样品反应的GSH的量以确定马来酰亚胺的程度。对于更灵敏的马来酰亚胺定量,我们建议您使用具有更高灵敏度的荧光测定试剂盒#5523。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 马来酰亚胺定量试剂盒。 

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
推荐孔板: 透明底板
实验方案

样品实验方案

溶液配制

1.储备溶液配制

未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. 1 MEA原液(500X):
将200μL蒸馏水加入MEA小瓶(组分A)中。 注意:10μL的500X MEA储备溶液足以进行50次反应(0.5 mL /反应)。 未使用的500X MEA储备溶液应分成单次使用的等分试样,储存在-20℃并避光。

1.2 4,4′-DTDP储备溶液(50X):
将1mL DMSO(组分D)加入到4,4′-DTDP(组分B)的小瓶中,并充分混合。 注意:100μL50X4,4′-DTDP储备溶液足以进行10次反应(0.5 mL /反应)。 未使用的50X 4,4′-DTDP储备溶液应分成单次使用的等分试样,储存在-20℃并避光。

 

2.工作溶液配制

2.1 MEA工作溶液配制:
将10μLMEA储备溶液(500X)加入5mL蒸馏水中,并充分混合。注意:MEA工作溶液不稳定,我们建议随用随配。

 

操作步骤(以下推荐的方案适用于Cuvette)

1.设置3个总SH管:向每个管中加入400μL测定缓冲液(组分C)和100μLMEA工作溶液,并在室温下孵育20分钟。

2.为每个样品设置3个试管:加入0.05mg测试样品和足够的测定缓冲液(组分C),使总体积为400μL/管。向每个管中加入100μLMEA工作溶液,在室温下孵育20分钟。

3.测量作为空白对照的测定缓冲液(组分C)在324nm处的吸光度。

4.在管仍在孵育时(从步骤1开始)继续进行总SH测定。向每个总SH管中加入10μL50X4,4′-DTDP储备溶液,并在室温下孵育2分钟。注意:不要将50X 4,4′-DTDP储备溶液添加到含有样品的试管中。

5.在不洗涤比色杯的情况下测量3个总SH管在324nm处的吸光度。记录读数并将它们平均为“ODTSH”

6.清洁比色皿并读取第一个样品管(来自步骤2)在324nm(OD0)的吸光度,然后加入任何4,4′-DTDP储备溶液(50X)。

7.将10μL4,4′-DTDP储备溶液(50X)加入样品比色杯(来自步骤6)并充分混合。将样品在室温下孵育2分钟并读取324nm处的吸光度(OD)。清洁比色皿,并对剩余的管重复步骤6和7。记录所有读数。

 

数据分析

计算每个样品的马来酰亚胺基团数(曲线作为例子)。

1.计算每个管的ΔOD:

ΔOD= ODTSH – [OD-OD0] = ODTSH + OD0-OD

2.计算每个样品的马来酰亚胺:

(马来酰亚胺的摩尔数)/(共轭物)=([(ΔOD)/(DTDP在324nm的消光系数)]×样品体积(L))/([共轭重量] / [共轭物的分子量])

=([ΔOD÷19,800]×0.51mL÷1000)/([共轭重量mg÷1000] / [共轭物的分子量])

=([ΔOD]×[共轭物的分子量])/([共轭重量mg]×38824)

Amplite 马来酰亚胺定量试剂盒 比色法

 

参考文献

Perlecan-targeted nanoparticles for drug delivery to triple-negative breast cancer
Authors: Vidhi Khanna, Stephen Kalscheuer, Ameya Kirtane, Wenqui Zhang, Jayanth Panyam
Journal: Future Drug Discovery (2019)

Conjugation with eight-arm PEG markedly improves the in vitro activity and prolongs the blood circulation of staphylokinase
Authors: Fangbing Qi, Chunyang Hu, Weili Yu, Tao Hu
Journal: Bioconjugate chemistry (2018)

Conjugation with an inulin-chitosan adjuvant markedly improves the immunogenicity of Mycobacterium tuberculosis CFP10-TB10. 4 fusion protein
Authors: Weili Yu, Tao Hu
Journal: Molecular Pharmaceutics (2016)

Moderate PEGylation of the carrier protein improves the polysaccharide-specific immunogenicity of meningococcal group A polysaccharide conjugate vaccine
Authors: Tingting Zhang, Weili Yu, Yanfei Wang, Tao Hu
Journal: Vaccine (2015): 3208–3214

Rapid quantification of maleimide in bioconjuated samples using a novel colorimetric method (TECH2P. 761)
Authors: Jinfang Liao, Haitao Guo, Zhen Luo, Qin Zhao, Jack Diwu
Journal: The Journal of Immunology (2015): 206–7

Successful acquisition of a neutralizing monoclonal antibody against a novel neutrophil-activating peptide, mitocryptide-1
Authors: Tatsuya Hattori, Kenta Nakashima, Takayuki Marutani, Yoshiaki Kiso, Yoshisuke Nishi, Hidehito Mukai
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2015): 54–59

CD133-targeted paclitaxel delivery inhibits local tumor recurrence in a mouse model of breast cancer
Authors: Suresh Kumar Swaminathan, Emilie Roger, Udaya Toti, Lin Niu, John R Ohlfest, Jayanth Panyam
Journal: Journal of Controlled Release (2013): 280–287

PEG as a spacer arm markedly increases the immunogenicity of meningococcal group Y polysaccharide conjugate vaccine
Authors: Qingrui Huang, Dongxia Li, Aijun Kang, Wenqi An, Bei Fan, Xiaowei Ma, Guanghui Ma, Zhiguo Su, Tao Hu
Journal: Journal of Controlled Release (2013): 382–389

 

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Amplite 马来酰亚胺快速定量试剂盒 比色法-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Amplite 马来酰亚胺快速定量试剂盒 比色法价格 2823
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Amplite 马来酰亚胺快速定量试剂盒 比色法

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Amplite 马来酰亚胺快速定量试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于胺定量的试剂盒,具有马来酰亚胺基团的各种交联剂广泛用于将蛋白质与蛋白质或蛋白质交联至其他生物分子。马来酰亚胺交联技术的关键点是与单一蛋白质或抗体连接的马来酰亚胺的定量。马来酰亚胺可以在302nm下通过分光光度法直接测定。然而,620M-1cm-1的小消光系数使得该测定不敏感,并且该测定由于在相同波长下的蛋白质吸光度而进一步复杂化。 AAT Bioquest的Amplite 快速比色马来酰亚胺定量试剂盒使用我们专有的马来酰亚胺传感器Maleimide Blue ,在~780nm处具有大吸光度,可快速准确地量化马来酰亚胺。该测定的原理是马来酰亚胺蓝 与马来酰亚胺连接的样品反应,并且所得产物通过单个旋转柱以除去过量的传感器。测量纯化产物的吸收光谱,并且可以从780nm和280nm(对于蛋白质)或260nm(对于寡核苷酸和核酸)的吸光度比计算马来酰亚胺与蛋白质的比率。这种Amplite 快速马来酰亚胺定量试剂盒可在传统的比色皿,NanoDrop 分光光度计或方便的96孔吸光板读数器中进行,带有UV透明板。该试剂盒已广泛用于从蛋白质,寡核苷酸和核酸样品中快速定量马来酰亚胺基团。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Amplite 马来酰亚胺快速定量试剂盒。

 

适用仪器


光吸收酶标仪  
推荐孔板: 透明底板
实验方案

实验方案

1.准备样品溶液:

1.1使用50至100μg马来酰亚胺样品(蛋白质或其他聚合物)。

1.2使用分析缓冲液(组分B)将体积调节至100μL。 注意:马来酰亚胺连接的抗体或蛋白质样品应在pH = 6.0缓冲液中且不含游离马来酰亚胺。

 

2.运行马来酰亚胺测定:

2.1将马来酰亚胺样品加入一瓶马来酰亚胺蓝(组分A)中。

2.2通过反复移液几次将其混合均匀,或将小瓶涡旋几秒钟。

2.3将反应混合物保持在室温下并旋转或摇动30-60分钟。

 

3.准备用于样品纯化的旋转柱:

3.1将旋转柱(组分C)反转几次以重悬沉淀的凝胶并除去任何气泡。

3.2取下尖端并将色谱柱放入洗涤管(2 mL,组分D)中。取下盖子,让多余的填料缓冲液通过重力排放到凝胶床的顶部。如果色谱柱没有开始流动,请将盖子推回色谱柱并再次将其取出以开始流动。丢弃排出的缓冲液,然后将色谱柱放回洗涤管中。但是,如果将色谱柱放入12 x 75 mm试管(未提供)中,请立即离心。

3.3在1000 x g的摇摆式离心机中离心1分钟(参见“离心注释”部分)以除去包装缓冲液。丢弃缓冲区。

3.4将1 mL分析缓冲液(组分B)应用于色谱柱,让缓冲液通过重力排出,或将色谱柱离心1分钟以除去缓冲液。丢弃收集管中的缓冲液。重复此过程3-4次。

3.5在摇动式离心机中以1,000×g离心2分钟(参见离心注释部分)以除去反应缓冲液。丢弃缓冲区。注意:旋转柱(组分C)可以装入2 mL微量离心管或12 x 75 mm试管中,以便在离心过程中收集样品。使用随柱提供的2 mL微管进行初始色谱柱平衡步骤。注意:能够产生1,000 x g最小力的摆动式离心机适用于Bio-Spin柱。在特定转速下产生的重力是微量离心机转子半径的函数。有关从每分钟转数(RPM)到离心力或g力的转换信息,请参阅摆动式离心机说明手册。或者,使用公式计算达到1,000 x g重力所需的RPM速度。

RCF(g)=(1.12×10-5)×(RPM)2×r

RCF =相对离心力
RPM =转子的速度
r =从转子中心到Bio-Spin柱中间测量的以厘米为单位的半径

 

4.纯化Malemide反应产物:

4.1将色谱柱放入干净的收集管(1.5 mL,组分E)中。 小心地将样品(100μL)直接加载到色谱柱中心。

4.2加载样品后,在顶部加入10μL分析缓冲液(组分B),以1,000 x g离心柱5分钟,然后将溶液收集到收集管中。

 

5.用0.2mL或0.5 mL石英比色皿运行吸收光谱:

5.1根据所用的比色皿大小和吸光度读数,用测定缓冲液(组分B)将马来酰亚胺反应产物稀释5-10倍。 稀释因子不影响最终的马来酰亚胺定量结果。

5.2测量900 nm至250 nm范围内的吸收光谱,或仅读取280 nm和782 nm处的吸光度数。

 

示例分析

使用BSA-马来酰亚胺作为实例,用0.5mL比色皿测量计算马来酰亚胺连接的BSA样品上的马来酰亚胺基团的数目。

样品:BSA-马来酰亚胺,10.75mg / mL,pH = 6.0缓冲液

 

1.使用4.7μL(50μg)BSA-马来酰亚胺,然后加入95.3μL分析缓冲液(组分B),使总体积为100μL。
2.将100μL以上溶液加入到马来酰亚胺蓝TM小瓶(组分A)中,充分混合。
3.在室温下旋转60分钟。
4.用旋转柱(组分C)纯化,并收集产物。
5.取50μL产物,加入400μL分析缓冲液(组分B)至0.5mL比色皿中并测量吸光度光谱。

 

常数:

BSA在280nm处的消光系数:43824M-1cm-1
最大吸收(780±3nm)时的马来酰亚胺Blue 消光系数:275,000 M-1 cm-1
马来酰亚胺蓝 在280nm(CF280nm)的校正因子:0.207

 

结果:

用上述BSA-马来酰亚胺样品获得的OD读数:A280nm = 0.290,A782nm = 1.214

 

计算:

用以下公式计算BSA-马来酰亚胺量:

(马来酰亚胺的摩尔数)/(蛋白质或抗体的摩尔数)=
([A782nm] /εMaleimideBlue )/ [(A280nm-CF280nm x [A782nm])/ε蛋白或抗体在280nm处]

马来酰亚胺比=(1.214 / 275000)/(0.290 – 0.207×1.214)/ 43824 = 5.00

 

参考文献

Conjugation with an inulin-chitosan adjuvant markedly improves the immunogenicity of Mycobacterium tuberculosis CFP10-TB10. 4 fusion protein
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