iFluor A7琥珀酰亚胺酯-AAT Bioquest荧光染料

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iFluor A7琥珀酰亚胺酯价格 2823
产品规格

1 mg

产品货号

iFluor A7琥珀酰亚胺酯

产品参数
Ex (nm) 764 Em (nm) 782
分子量 1288.58 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

iFluor A7 SE是iFluor系列荧光标记染料之一,可以覆盖整个可见光谱。所有iFluor 染料都具有优异的水溶性。它们的亲水性使有机溶剂的使用极小化。iFluor 染料也具有比经典荧光标记染料更好的标记性能,如FITC,TRITC,Texas Red ,Cy3 ,Cy5和Cy7。一些iFluor 染料在某些抗体上明显优于Alexa Fluor 标记染料。它们是用于标记蛋白质和核酸而不包含性能的极便宜的荧光染料(替代Alexa Fluor 染料)。每种iFluor染料的开发都与特定的Alexa Fluor 或其他标记染料(如DyLight 染料)的光谱特性相匹配。

琥珀酰亚胺基(NHS)酯被证明是用于胺修饰的试剂,因为形成的酰胺键基本上与天然肽键相同并且稳定。这些试剂通常是稳定的并且与脂族胺显示出良好的反应性和选择性。当琥珀酰亚胺酯化合物用于缀合反应时,需要考虑的因素很少:1.溶剂:在大多数情况下,活性染料应溶于无水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO)中。 2.反应pH:胺与琥珀酰亚胺酯的标记反应强烈依赖于pH。胺反应性试剂与非质子化脂族胺基团反应,包括蛋白质的末端胺和赖氨酸的β-氨基。因此,胺酰化反应通常在pH 7.5以上进行。通过琥珀酰亚胺酯进行的蛋白质修饰通常可以在pH 8.5-9.5下进行。 3.反应缓冲液:使用胺反应试剂时,必须避免使用含有游离胺(如Tris和甘氨酸)和硫醇化合物的缓冲液。广泛用于蛋白质沉淀的铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)也必须在进行染料缀合之前除去(例如通过透析)。 4.反应温度:大多数缀合在室温下进行。特定标记反应可能需要升高或降低的温度。iFluor系列染料是AF系列染料的替代品。

iFluor A7琥珀酰亚胺酯

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实验方案

染色样本分析

操作步骤

1.准备蛋白质储备溶液(溶液A):

将100μL反应缓冲液(如1 M碳酸钠溶液或1 M磷酸盐缓冲液,pH~9.0)与900μL目标蛋白溶液(如抗体,蛋白质浓度> 2 mg / ml,如果可能)混合至100μL给予1 mL蛋白质标记原液。

注1:蛋白质溶液(溶液A)的pH值应为8.5±0.5。如果蛋白质溶液的pH低于8.0,则使用1M碳酸氢钠溶液或1M pH 9.0磷酸盐缓冲液将pH调节至8.0-9.0的范围。

注2:蛋白质应溶解于pH7.2-7.4的1X磷酸盐缓冲盐水(PBS)中。如果蛋白质溶解在Tris或甘氨酸缓冲液中,则必须用pH7.2-7.4的1X PBS透析,以除去广泛用于蛋白质沉淀的游离胺或铵盐(例如硫酸铵和乙酸铵)。

注3:不纯的抗体、稳定的牛血清蛋白(BSA)抗体或明胶不会被很好的标记。叠氮化钠或硫柳汞的存在也可能干扰缀合反应。可以通过透析或旋转柱除去叠氮化钠或硫柳汞,以获得标记结果。

注4:如果蛋白质浓度低于2 mg / mL,则结合效率会显着降低。为获得标记效率,建议终蛋白质浓度范围为2-10 mg / mL。

2.准备染料储备溶液(溶液B):

将无水DMSO加入到iFluor 染料SE小瓶中以制备10-20mM储备溶液。 通过移液或涡旋混合均匀。

注意:在开始缀合前准备染料储备溶液(溶液B)。 及时使用。 染料储备溶液的长期储存可降低染料活性。 溶液B可在冰箱中保存两周,避光保存。 避免冻融循环。

3.确定染料/蛋白质比例(可选):

注意:每种蛋白质都需要不同的染料/蛋白质比例,这也取决于染料的性质。蛋白质的过度标记可能不利地影响其结合亲和力,而低染料/蛋白质比率的蛋白质缀合物会降低灵敏度。我们建议您通过使用连续不同量的标记染料溶液重复步骤4和5来实验确定染料/蛋白质比率。通常,对于大多数染料 – 蛋白质缀合物,推荐使用4-6种染料/蛋白质。

3.1使用10:1摩尔比的溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)作为起始点:将5μl染料储备溶液(溶液B,假设染料储备溶液为10 mM)加入到样品瓶中。蛋白质溶液(95μl溶液A)有效摇动。假设蛋白质浓度为10mg / mL并且蛋白质的分子量为~200KD,蛋白质的浓度为~0.05mM。

注意:蛋白质溶液中DMSO的浓度应<10%。

3.2运行缀合反应(参见下面的步骤4)。

3.3重复#3.2,溶液B /溶液A的摩尔比为5:1;分别为15:1和20:1。

3.4使用预制的旋转柱纯化所需的缀合物。

3.5计算上述4种结合物的染料/蛋白质比(DOS)(见说明书)。

3.6运行上述4种结合物的功能测试,确定的染料/蛋白质比例,以扩大标记反应。

4.运行结合反应:

4.1有效加入适量的染料储备溶液(溶液B)到蛋白质溶液(溶液A)的小瓶中晃动。

注意:溶液B /溶液的摩尔比由步骤3.6确定。如果跳过步骤3,我们建议使用10:1溶液B(染料)/溶液A(蛋白质)的摩尔比。

4.2继续在室温下旋转或摇动反应混合物30-60分钟。

5.纯化缀合物

以下方案是使用Sephadex G-25柱纯化染料 – 蛋白质缀合物的实例。

5.1按照制造说明准备Sephadex G-25色谱柱。

5.2将反应混合物(直接从步骤4)加载到Sephadex G-25柱的顶部。

5.3样品在顶部树脂表面下方运行时立即加入PBS(pH 7.2-7.4)。

5.4向所需样品中加入更多PBS(pH 7.2-7.4)以完成色谱柱纯化。 合并含有所需染料 – 蛋白质缀合物的级分。

注1:立即使用时,染料 – 蛋白质偶联物需要用染色缓冲液稀释,并等分多次使用。

注2:对于长期储存,染料 – 蛋白质缀合物溶液需要浓缩或冷冻干燥

 

参考文献

Deep Sequencing Analysis of the Eha-Regulated Transcriptome of Edwardsiella tarda Following Acidification
Authors: D Gao, N Liu, Y Li, Y Zhang, G Liu
Journal: Metabolomics (Los Angel) (2017): 2153–0769

Suramin inhibits cullin-RING E3 ubiquitin ligases
Authors: Kenneth Wu, Robert A Chong, Qing Yu, Jin Bai, Donald E Spratt, Kevin Ching, Chan Lee, Haibin Miao, Inger Tappin, Jerard Hurwitz
Journal: Proceedings of the National Academy of Sciences (2016): E2011–E2018

Glycosaminoglycan mimicry by COAM reduces melanoma growth through chemokine induction and function
Authors: Helene Piccard, Nele Berghmans, Eva Korpos, Chris Dillen, Ilse Van Aelst, Sandra Li, Erik Martens, Sandra Liekens, Sam Noppen, Jo Van Damme
Journal: International Journal of Cancer (2012): E425–E436

Ro 32-0432 ,98A602595


Ro 32-0432 ,98

简要描述:Ro 32-0432 ,98,产品型号:A602595。
CAS 号 151342-35-7

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Ro 32-0432 ,98,产品型号:A602595。

Ro 32-0432 ,98

[151342-35-7 ] 产品详情

CAS 编号:151342-35-7              MDL编号:MFCD01319127

公式 :C28H284个2个                沸点 :

线性结构式:–                               InChI 键:不适用

兆瓦:452.55克/摩尔                    化学编号:11605551

同义词:


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Ro 31-8220A210307


Ro 31-8220

简要描述:Ro 31-8220,产品型号:A210307。
CAS 编号:125314-64-9

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Ro 31-8220,产品型号:A210307。

Ro 31-8220

[125314-64-9 ] 产品详情

CAS 编号: 125314-64-9 MDL号: MFCD00236436
公式 : C25H235个2个小号 沸点 :
线性结构式: InChI 键: 不适用
兆瓦: 457.55克/摩尔 化学编号: 5083
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bis(bis(3,5-bis(trimethylsilyl)phenyl)phosphine)A1386674


bis(bis(3,5-bis(trimethylsilyl)phenyl)phosphine)

简要描述:bis(bis(3,5-bis(trimethylsilyl)phenyl)phosphine),产品型号:A1386674。
储存:惰性气氛,室温。

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bis(bis(3,5-bis(trimethylsilyl)phenyl)phosphine),产品型号:A1386674。

bis(bis(3,5-bis(trimethylsilyl)phenyl)phosphine)储存:惰性气氛,室温。

[ 150971-37-2 ] 产品详情

CAS 编号: 150971-37-2 MDL号: 不适用
公式 : C62H962个P2个8个 沸点 :
线性结构式: InChI 键: 不适用
兆瓦: 1160.06克/摩尔 化学编号:
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PKC-IN-1A326692


PKC-IN-1

简要描述:PKC-IN-1,产品型号:A326692。
CAS 号 1046787-18-1

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PKC-IN-1,产品型号:A326692。

PKC-IN-1CAS 号 1046787-18-1

[1046787-18-1 ] 产品详情

CAS 编号: 1046787-18-1 MDL号:
公式 : C25H37FN8个2个 沸点 :
线性结构式: InChI 键:
兆瓦: 500.61克/摩尔 化学编号: 25155745
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Tetrabutylammonium fluoride tetra-2-methylpropan-2A1463532


Tetrabutylammonium fluoride tetra-2-methylpropan-2

简要描述:Tetrabutylammonium fluoride tetra-2-methylpropan-2-ol complex,产品型号:A1463532。
储存:避光、惰性气氛、室温保存

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Tetrabutylammonium fluoride tetra-2-methylpropan-2-ol complex,产品型号:A1463532。

Tetrabutylammonium fluoride tetra-2-methylpropan-2-ol complex储存:避光、惰性气氛、室温保存

[ 1094520-55-4 ] 产品详情

CAS 编号: 1094520-55-4 MDL号: 不适用
公式 : C32H76FNO4个 沸点 :
线性结构式: InChI 键: 不适用
兆瓦: 557.95克/摩尔 化学编号:
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Bcr-abl-in-1A423402


Bcr-abl-in-1

简要描述:Bcr-abl-in-1,产品型号:A423402。
CAS 号:188260-50-6

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Bcr-abl-in-1,产品型号:A423402。

Bcr-abl-in-1

[188260-50-6 ]产品详情


CAS 号:188260-50-6                MDL 编号:MFCD30533353

公式 :C23H21F4ñ5○                   沸点:

线性结构公式:–                         印记键:不适用

兆瓦:459.44克/摩尔                 Pubchem ID:

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PPY A ,98A757320


PPY A ,98

简要描述:PPY A ,98,产品型号:A757320。
CAS 号:875634-01-8,MDL 编号:MFCD18642591

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[875634-01-8 ]的产品详情

CAS 号: 875634-01-8 MDL 编号: MFCD18642591
公式 : C22H20ñ42 沸点:
线性结构公式: 印记键: 不适用
兆瓦: 372.42克/摩尔 Pubchem ID: 16750094
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(3aS,8aR)-2-(Pyrazin-2-yl)-3a,8a-dihydro-8H-indenoA1464670


(3aS,8aR)-2-(Pyrazin-2-yl)-3a,8a-dihydro-8H-indeno

简要描述:(3aS,8aR)-2-(Pyrazin-2-yl)-3a,8a-dihydro-8H-indeno1,2-d)oxazole,产品型号:A1464670。
储存:惰性气氛,室温

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(3aS,8aR)-2-(Pyrazin-2-yl)-3a,8a-dihydro-8H-indeno1,2-d)oxazole,产品型号:A1464670。

(3aS,8aR)-2-(Pyrazin-2-yl)-3a,8a-dihydro-8H-indeno1,2-d)oxazole储存:惰性气氛,室温

[ 2757082-80-5 ] 产品详情

CAS 编号: 2757082-80-5 MDL号: 不适用
公式 : C14H113个 沸点 :
线性结构式: InChI 键: 不适用
兆瓦: 237.26克/摩尔 化学编号:
同义词:


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peprotech 重组人/鼠/大鼠激活素 A120-14E


peprotech 重组人/鼠/大鼠激活素 A

简要描述:peprotech 重组人/鼠/大鼠激活素 A(源自大肠杆菌)
抑制素 beta-1、FRP、FSH(卵泡刺激素)释放蛋白、红细胞分化因子 (EDF)

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品牌 其他品牌 货号 120-14E
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peprotech 重组人/鼠/大鼠激活素 A(源自大肠杆菌)

激活素 A 是 TGF-β 家族成员,具有广泛的生物活性,包括调节细胞增殖和分化以及促进神经元存活。人类结直肠肿瘤和绝经后妇女中激活素 A 水平升高分别与结直肠癌和乳腺癌有关。激活素 A 的生物活性可被抑制素和可扩散的 TGF-β 拮抗剂卵泡抑素中和。激活素 A 结合两种形式的 I 型激活素受体(Act RI-A 和 Act RI-B)和两种形式的 II 型激活素受体(Act RII-A 和 Act RII-B)。激活素是不同β亚基的同二聚体或异二聚体。它们是作为前体蛋白产生的,其氨基末端前肽被切割以释放 C 末端生物活性配体。重组人/鼠/大鼠激活素 A 是由两条 βA 链组成的 26.0 kDa 二硫键连接的同二聚体,每条链包含 116 个氨基酸残基。

来源:大肠杆菌

同义词:抑制素 beta-1、FRP、FSH(卵泡刺激素)释放蛋白、红细胞分化因子 (EDF)

AA序列(单体):GLECDGKVNI CCKKQFFVSF KDIGWNDWII APSGYHANYC EGECPSHIAG TSGSSLSFHS TVINHYRMRG HSPFANLKSC CVPTKLRPMS MLYYDDGQNI IKKDIQNMIV EECGCS

纯度:通过 SDS-PAGE 凝胶和 HPLC 分析,≥ 97%。

生物活性:根据其抑制鼠MPC-11细胞增殖的能力测定的ED 50 ≤ 2.0 ng/ml,对应于≥ 5 x 10 5单位/mg的比活性

计算分子量:26kDa

入藏号:P08476

基因编号:3624

内毒素:内毒素水平 < 0.1 ng/ug 蛋白质 (< 1 EU/ug)

交叉反应性:

青蛙人+鼠

peprotech 重组人/鼠/大鼠激活素 A(源自大肠杆菌)

GZD824 (Dimesylate),99A423528


GZD824 (Dimesylate),99

简要描述:GZD824 (Dimesylate),99,产品型号:A423528。
储存:惰性气氛,储存在冰箱中,低于-20&#176;C

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应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

GZD824 (Dimesylate),99,产品型号:A423528。

GZD824 (Dimesylate),99储存:惰性气氛,储存在冰箱中,低于-20°C

[1421783-64-3 ]的产品详情

CAS 号:1421783-64-3              MDL 编号:MFCD26142656

公式 :C31H35F3ñ67小号2           沸点:

线性结构公式:–                          印记键:

兆瓦:724.77克/摩尔                  Pubchem ID:71519689

同义词:


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  2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

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  4. 进出口货物代理服务。

  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式,为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源,加强网络建设,提高公司内部运作效率,为客户提供方便、快捷的服务。

  7. 公司突出创新思维,提高工作效能,减低运作成本,为客户提供优惠的价格。

3-(6-((4-(Trifluoromethoxy)phenyl)amino)pyrimidin-A175756


3-(6-((4-(Trifluoromethoxy)phenyl)amino)pyrimidin-

简要描述:3-(6-((4-(Trifluoromethoxy)phenyl)amino)pyrimidin-4-yl)benzamide,产品型号:A175756。
储存:避光、惰性气体、室温

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3-(6-((4-(Trifluoromethoxy)phenyl)amino)pyrimidin-4-yl)benzamide,产品型号:A175756。

3-(6-((4-(Trifluoromethoxy)phenyl)amino)pyrimidin-4-yl)benzamide,储存:避光、惰性气体、室温

[778270-11-4 ]的产品详情

CAS 号: 778270-11-4 MDL 编号: MFCD09265253
公式 : C18H13F3ñ42 沸点:
线性结构公式: 印记键: 不适用
兆瓦: 374.32克/摩尔 Pubchem ID: 5311510
同义词:

水溶性

目录 S (ESOL) : -4.65
溶解度: 0.00834 毫克/毫升;0.0000223 摩尔/升
类别: 中度溶解
目录 S(阿里): -5.39
溶解度: 0.00153 毫克/毫升;0.0000041 摩尔/升
类别 : 中度溶解
目录 S (SILICOS-IT) : -6.9
溶解度: 0.0000473 毫克/毫升;0.000000126 摩尔/升
类别 : 难溶

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Rpn11-IN-1 ,98A440518


Rpn11-IN-1 ,98

简要描述:Rpn11-IN-1 ,98,产品型号:A440518。
CAS号2084867-65-0

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Rpn11-IN-1 ,98,产品型号:A440518。

Rpn11-IN-1 ,98,CAS号2084867-65-0

[2084867-65-0 ]的产品详情

CAS 号: 2084867-65-0 MDL 编号: MFCD30747887
公式 : C15H13ñ3操作系统2 沸点:
线性结构公式: 印记键: 不适用
兆瓦: 315.41克/摩尔 Pubchem ID:
同义词:

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GNF-6702 ,99+A739083


GNF-6702 ,99+

简要描述:GNF-6702 ,99+,产品型号:A739083。
CAS号1799329-72-8

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GNF-6702 ,99+,产品型号:A739083。

GNF-6702 ,99+,CAS号1799329-72-8 

[1799329-72-8 ]的产品详情

CAS 号: 1799329-72-8 MDL 编号:
公式 : C22H16FN72 沸点:
线性结构公式: 印记键:
兆瓦: 429.41克/摩尔 Pubchem ID:
同义词:

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Am 114 ,98A817591


Am 114 ,98

简要描述:Am 114 ,98,产品型号:A817591。
CAS号856849-35-9

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Am 114 ,98,产品型号:A817591。

Am 114 ,98,CAS号856849-35-9 

[856849-35-9 ]的产品详情

CAS 号: 856849-35-9 MDL 编号: MFCD09971093
公式 : C20H2125 沸点:
线性结构公式: 印记键:
兆瓦: 377.01克/摩尔 Pubchem ID: 57369225
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  5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 质量保证,所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式”服务模式,为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源,加强网络建设,提高公司内部运作效率,为客户提供方便、快捷的服务。

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