钙黄绿素红,AM-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙黄绿素红,AM价格 2823
产品规格

1 mg

产品货号

钙黄绿素红,AM

产品参数
Ex (nm) 562 Em (nm) 576
分子量 1015.79 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

钙黄绿素红,AM是美国AAT Bioquest生产的用于检测活细胞的荧光探针,Calcein AM是用于标记和检测活细胞细胞功能的流行的荧光探针之一。然而,Calcein AM的单色使得在多色应用中不可能使用这种有价值的试剂。例如,由于与GFP相同的颜色,不可能将Calcein AM与GFP-转化细胞组合使用。为了解决Calcein AM的这种颜色限制,我们开发了Calcein Orange ,Calcein Red 和Calcein Deep Red 。这些新的Calcein AM类似物与Calcein AM结合使用,可以对活细胞进行多色标记和功能分析。非荧光Calcein Red AM可以轻松进入活细胞并水解产生强荧光Calcein Red 染料。可以使用常见的TRITC / Cy3滤波片组检测Calcein Red 染料。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的钙黄绿素红,AM。 

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选择指南

Dye Calcein Blue CytoCalcein™ Violet 450 Calcein UltraBlue™ CytoCalcein™ Violet 500 Calcein UltraGreen™ Calcein Calcein Orange™ Calcein Red™ Calcein Deep Red™
原理 在活细胞中,非荧光钙黄绿素 AM 在细胞内酯酶的作用下 AM 酯水解后转化为荧光钙黄绿素产物。
荧光效果 活细胞具有高度荧光,很容易与无荧光的死细胞区分开。
Laser(nm) UV (350) Violet (405) UV (350) Violet (405) Blue (488) Blue (488) Green (532) Yellow (561-568) Red (633-647)
Ex/Em(nm) 354/441 406/445 359/458 420/505 492/514 501/521 531/545 562/576 643/663
是否复用
染料相容性 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容
样品类型 活细胞
适用仪器 荧光显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪
货号   22007 22012 21908 22013 21905 22003 22009 21900 22011

 

适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 532/561 nm
Em: 585/40   nm 

 


荧光显微镜

Ex: TRITC 滤波片组
Em: TRITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板

 


荧光酶标仪

 
Ex: 540 nm
Em: 590 nm
Cutoff: 570 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
读取模式: 底读模式
实验方案

操作步骤

1.准备HHBS缓冲液,10%Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。

2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Calcein Red AM原液。
2.1使用Calcein Red AM的量:1毫克
2.2所需浓度:2 mM
2.3在合适的容器中,将1mg Calcein Red TM AM与492.23μL无水DMSO混合。
 

3.使用10μMCalceinRed AM 4在HHBS中制备2X工作溶液,0.08%Pluronic®F-127和2 mM丙磺舒。
3.1终孔内浓度的Calcein Red AM:5μM
3.2Pluronic®F-127的终井内浓度:0.04%
3.3终孔内浓度的丙磺舒:1mM
3.4在合适的容器中,混合16μL的Calcein Red AM,25.6μL的10%Pluronic F-127和256μL的25mM丙磺舒。然后,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为3.2 mL。
注意:对于大多数细胞系,我们建议Calcein Red AM的终浓度为4至5μM。
注意:推荐的Pluronic F-127孔浓度终为0.02%至0.04%。
注意:推荐的终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。
 

4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X,并将每种组分的终浓度调节至以下:5μM的Calcein Red AM,0.04%Pluronic F-127,1mM丙磺舒。
 

5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-60分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
 

6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液(或您选择的缓冲液)。
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。然后,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为4 mL。

 

7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液,使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先,从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS(或您选择的缓冲液)。
 

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 560/574 nm运行实验。

 

参考文献

A perfused human blood–brain barrier on-a-chip for high-throughput assessment of barrier function and antibody transport
Authors: Nienke R Wevers, Dhanesh G Kasi, Taylor Gray, Karlijn J Wilschut, Benjamin Smith, Remko van Vught, Fumitaka Shimizu, Yasuteru Sano, Takashi Kanda, Graham Marsh
Journal: Fluids and Barriers of the CNS (2018): 23

Astragaloside IV protects blood-brain barrier integrity from LPS-induced disruption via activating Nrf2 antioxidant signaling pathway in mice
Authors: Hongli Li, Ping Wang, Fei Huang, Jinmei Jin, Hui Wu, Beibei Zhang, Zhifei Wang, Hailian Shi, Xiaojun Wu
Journal: Toxicology and applied pharmacology (2017)

Functional imaging of neuronal activity of auditory cortex by using Cal-520 in anesthetized and awake mice
Authors: Jingcheng Li, Jianxiong Zhang, Meng Wang, Junxia Pan, Xiaowei Chen, Xiang Liao
Journal: Biomedical Optics Express (2017): 2599–2610

NINJ2–A novel regulator of endothelial inflammation and activation
Authors: Jingjing Wang, Jingjing Fa, Pengyun Wang, Xinzhen Jia, Huixin Peng, Jing Chen, Yifan Wang, Chenhui Wang, Qiuyun Chen, Xin Tu
Journal: Cellular Signalling (2017)

Erythropoietin Stimulates Endothelial Progenitor Cells to Induce Endothelialization in an Aneurysm Neck After Coil Embolization by Modulating Vascular Endothelial Growth Factor
Authors: Peixi Liu, Yingjie Zhou, Qingzhu An, Yaying Song, Xi Chen, Guo-Yuan Yang, Wei Zhu
Journal: MEDICINE (2016): 1–8

Flexible Endoscopic Spray Application of Respiratory Epithelial Cells as Platform Technology to Apply Cells in Tubular Organs
Authors: Anja Lena Thiebes, Manuel Armin Reddemann, Johannes Palmer, Reinhold Kneer, Stefan Jockenhoevel, Christian Gabriel Cornelissen
Journal: Tissue Engineering Part C: Methods (2016): 322–331

Influence of hypothermia and subsequent rewarming upon leukocyte-endothelial interactions and expression of Junctional-Adhesion-Molecules A and B
Authors: Nicolai V Bogert, Isabella Werner, Angela Kornberger, Patrick Meybohm, Anton Moritz, Till Keller, Ulrich A Stock, Andres Beiras-Fernandez
Journal: Scientific reports (2016)

Inhibition of ABC transport proteins by oil sands process affected water
Authors: Hattan A Alharbi, David MV Saunders, Ahmed Al-Mousa, Jane Alcorn, Alberto S Pereira, Jonathan W Martin, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Aquatic Toxicology (2016): 81–88

Rapid generation of collagen-based microtissues to study cell–matrix interactions
Authors: Marie-Elena Brett, Alexandra L Crampton, David K Wood
Journal: Technology (2016): 1–8

Toxicokinetics and toxicodynamics of chlorpyrifos is altered in embryos of Japanese medaka exposed to oil sands process-affected water: evidence for inhibition of P-glycoprotein
Authors: Hattan A Alharbi, Jane Alcorn, Ahmed Al-Mousa, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Journal of Applied Toxicology (2016)

 

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产品名称 货号
钙红素醋酸盐 Cat#22010
钙黄绿素, AM Cat#22002
钙黄绿素, AM 超纯级 Cat#22003

钙黄绿素绿,AM-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙黄绿素绿,AM价格 2823
产品规格

10×50 ug

产品货号

钙黄绿素绿,AM

产品参数
Ex (nm) 492 Em (nm) 514
分子量 607.47 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

钙黄绿素绿,AM是美国AAT Bioquest生产的用于检测活细胞的荧光探针,Calcein UltraGreen AM可轻松通过活细胞的细胞膜。在运输到活细胞中时,细胞酯酶切断了AM基团,该分子被捕获在细胞内。与Calcein AM相比,Calcein UltraGreen 更适合用于染色活细胞的荧光探针,因为它具有较低的细胞毒性和较长的细胞保留时间。UltraGreen AM不会显着影响细胞功能,如淋巴细胞的增殖或趋化性。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的钙黄绿素绿,AM。 

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选择指南

Dye Calcein Blue CytoCalcein™ Violet 450 Calcein UltraBlue™ CytoCalcein™ Violet 500 Calcein UltraGreen™ Calcein Calcein Orange™ Calcein Red™ Calcein Deep Red™
原理 在活细胞中,非荧光钙黄绿素 AM 在细胞内酯酶的作用下 AM 酯水解后转化为荧光钙黄绿素产物。
荧光效果 活细胞具有高度荧光,很容易与无荧光的死细胞区分开。
Laser(nm) UV (350) Violet (405) UV (350) Violet (405) Blue (488) Blue (488) Green (532) Yellow (561-568) Red (633-647)
Ex/Em(nm) 354/441 406/445 359/458 420/505 492/514 501/521 531/545 562/576 643/663
是否复用
染料相容性 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容
样品类型 活细胞
适用仪器 荧光显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪
货号   22007 22012 21908 22013 21905 22003 22009 21900 22011

 

适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 488 nm
Em: 530/30  nm 
通道: FITC通道

 


荧光显微镜

Ex: FITC 滤波片组
Em: FITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板

 


荧光酶标仪

 
Ex: 490 nm
Em: 525 nm
Cutoff: 515 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
读取模式: 底读模式
实验方案

操作步骤

1.准备HHBS缓冲液,10%Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。

2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Calcein UltraGreen AM原液。
2.1使用Calcein UltraGreen AM的量:1毫克
2.2所需浓度:2 mM
2.3在合适的容器中,将1mg钙黄绿素UltraGreen TM AM与823.09μL无水DMSO混合。
 

3.使用10μMCalceinUltraGreen AM 4在HHBS中制备2X工作溶液,0.08%Pluronic®F-127和2 mM丙磺舒。
3.1终孔内浓度的Calcein UltraGreen AM:5μM
3.2Pluronic®F-127的终孔内浓度:0.04%
3.3终孔内浓度的丙磺舒:1mM
3.4在合适的容器中混合16μL的Calcein UltraGreen AM,25.6μL的10%Pluronic®F-127和256μL的25 mM丙磺舒。然后,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为3.2 mL。
注意:对于大多数细胞系,我们建议Calcein UltraGreen AM的终浓度为4至5μM。
注意:推荐的Pluronic F-127井浓度终为0.02%至0.04%。
注意:推荐的终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。
 

4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X,并将每种组分的终浓度调节至以下:5μM钙黄绿素UltraGreen AM,0.04%Pluronic®F-127,1mM丙磺舒。

 

5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-60分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
 

6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液(或您选择的缓冲液)。
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。 接下来,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为4 mL。
 

7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液,使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先,从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS(或您选择的缓冲液)。
 

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 496/524 nm运行实验。

 

参考文献

Functional imaging of neuronal activity of auditory cortex by using Cal-520 in anesthetized and awake mice
Authors: Jingcheng Li, Jianxiong Zhang, Meng Wang, Junxia Pan, Xiaowei Chen, Xiang Liao
Journal: Biomedical Optics Express (2017): 2599–2610

NINJ2–A novel regulator of endothelial inflammation and activation
Authors: Jingjing Wang, Jingjing Fa, Pengyun Wang, Xinzhen Jia, Huixin Peng, Jing Chen, Yifan Wang, Chenhui Wang, Qiuyun Chen, Xin Tu
Journal: Cellular Signalling (2017)

Erythropoietin Stimulates Endothelial Progenitor Cells to Induce Endothelialization in an Aneurysm Neck After Coil Embolization by Modulating Vascular Endothelial Growth Factor
Authors: Peixi Liu, Yingjie Zhou, Qingzhu An, Yaying Song, Xi Chen, Guo-Yuan Yang, Wei Zhu
Journal: MEDICINE (2016): 1–8

Flexible Endoscopic Spray Application of Respiratory Epithelial Cells as Platform Technology to Apply Cells in Tubular Organs
Authors: Anja Lena Thiebes, Manuel Armin Reddemann, Johannes Palmer, Reinhold Kneer, Stefan Jockenhoevel, Christian Gabriel Cornelissen
Journal: Tissue Engineering Part C: Methods (2016): 322–331

Influence of hypothermia and subsequent rewarming upon leukocyte-endothelial interactions and expression of Junctional-Adhesion-Molecules A and B
Authors: Nicolai V Bogert, Isabella Werner, Angela Kornberger, Patrick Meybohm, Anton Moritz, Till Keller, Ulrich A Stock, Andres Beiras-Fernandez
Journal: Scientific reports (2016)

Inhibition of ABC transport proteins by oil sands process affected water
Authors: Hattan A Alharbi, David MV Saunders, Ahmed Al-Mousa, Jane Alcorn, Alberto S Pereira, Jonathan W Martin, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Aquatic Toxicology (2016): 81–88

Rapid generation of collagen-based microtissues to study cell–matrix interactions
Authors: Marie-Elena Brett, Alexandra L Crampton, David K Wood
Journal: Technology (2016): 1–8

Toxicokinetics and toxicodynamics of chlorpyrifos is altered in embryos of Japanese medaka exposed to oil sands process-affected water: evidence for inhibition of P-glycoprotein
Authors: Hattan A Alharbi, Jane Alcorn, Ahmed Al-Mousa, John P Giesy, Steve B Wiseman
Journal: Journal of Applied Toxicology (2016)

Spraying respiratory epithelial cells to coat tissue-engineered constructs
Authors: Anja Lena Thiebes, Stefanie Albers, Christian Klopsch, Stefan Jockenhoevel, Christian G Cornelissen
Journal: BioResearch open access (2015): 278–287

The efficient hemostatic effect of Antarctic krill chitosan is related to its hydration property
Authors: Shuai Wu, Zhuoyao Huang, Jianhui Yue, Di Liu, Ting Wang, Pierre Ezanno, Changshun Ruan, Xiaoli Zhao, William W Lu, Haobo Pan
Journal: Carbohydrate polymers (2015): 295–303

 

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产品名称 货号
钙黄绿素红,AM Cat#21900
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钙黄绿素蓝,AM-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙黄绿素蓝,AM价格 2823
产品规格

10×50 ug

产品货号

钙黄绿素蓝,AM

产品参数
Ex (nm) 359 Em (nm) 458
分子量 788.65 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称:钙黄绿素蓝,AM

储存条件:-15℃避光防潮

保质期:24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量:788.65

溶剂:DMSO

激发波长(nm):360

发射波长(nm):445

 

选择指南

Dye Calcein Blue CytoCalcein™ Violet 450 Calcein UltraBlue™ CytoCalcein™ Violet 500 Calcein UltraGreen™ Calcein Calcein Orange™ Calcein Red™ Calcein Deep Red™
原理 在活细胞中,非荧光钙黄绿素 AM 在细胞内酯酶的作用下 AM 酯水解后转化为荧光钙黄绿素产物。
荧光效果 活细胞具有高度荧光,很容易与无荧光的死细胞区分开。
Laser(nm) UV (350) Violet (405) UV (350) Violet (405) Blue (488) Blue (488) Green (532) Yellow (561-568) Red (633-647)
Ex/Em(nm) 354/441 406/445 359/458 420/505 492/514 501/521 531/545 562/576 643/663
是否复用
染料相容性 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容
样品类型 活细胞
适用仪器 荧光显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪
货号   22007 22012 21908 22013 21905 22003 22009 21900 22011

钙黄绿素, AM CAS 148504-34-1-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙黄绿素, AM CAS 148504-34-1价格 1386
产品规格

1 mg

产品货号

钙黄绿素, AM CAS 148504-34-1

产品参数
Ex (nm) 501 Em (nm) 521
分子量 994.86 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

钙黄绿素, AM是美国AAT Bioquest生产的用于钙离子定量的试剂,与钙黄绿素相比,钙黄绿素 AM 具有增强的疏水性,因此它很容易穿过活细胞的细胞膜。钙黄绿素 (calcein AM) 的乙酰甲氧基 (AM) 衍生物广泛用于标记活细胞,因为它可以通过细胞膜转运到活细胞中。 AM酯基掩盖了螯合钙的分子部分。在转运到活细胞中后,细胞酯酶切断 AM 基团,分子与细胞内的钙结合(产生强烈的绿色荧光),并被保留在细胞内。由于死细胞缺乏酯酶,因此只有活细胞被标记。此功能使其对于测试细胞活力和短期标记细胞非常有用。与其他活细胞标记试剂(如 BCECF-AM 和羧基荧光素二乙酸酯)相比,calcein-AM 是适合用于染色活细胞的荧光探针,因为它的细胞毒性低。钙黄绿素不会显着影响细胞功能,例如淋巴细胞的增殖或趋化性。此外,使用钙黄绿素的活力测定是可靠的,并且与标准的 51Cr 释放测定具有良好的相关性。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供优质的钙黄绿素,AM。

点击查看光谱

点击查看实验方案

 

选择指南

Dye Calcein Blue CytoCalcein™ Violet 450 Calcein UltraBlue™ CytoCalcein™ Violet 500 Calcein UltraGreen™ Calcein Calcein Orange™ Calcein Red™ Calcein Deep Red™
原理 在活细胞中,非荧光钙黄绿素 AM 在细胞内酯酶的作用下 AM 酯水解后转化为荧光钙黄绿素产物。
荧光效果 活细胞具有高度荧光,很容易与无荧光的死细胞区分开。
Laser(nm) UV (350) Violet (405) UV (350) Violet (405) Blue (488) Blue (488) Green (532) Yellow (561-568) Red (633-647)
Ex/Em(nm) 354/441 406/445 359/458 420/505 492/514 501/521 531/545 562/576 643/663
是否复用
染料相容性 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容
样品类型 活细胞
适用仪器 荧光显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪
货号   22007 22012 21908 22013 21905 22003 22009 21900 22011

 

适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 488 nm
Em: 530/30  nm 
通道: FITC通道

 


荧光显微镜

Ex: FITC 滤波片组
Em: FITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板

 


荧光酶标仪

 
Ex: 490 nm
Em: 525 nm
Cutoff: 515 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
读取模式: 底读模式
实验方案

使用细胞活力指标AM酯类

        AM酯是非极性酯,其易于穿过活细胞膜,并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性将各种极性荧光探针加载到活细胞中。 但是,使用AM酯时必须小心,因为它们在溶液中易于水解。 它们应在使用前用高质量的无水二甲基亚砜(DMSO)溶解。 DMSO储备溶液可以在20℃下干燥储存并避光。 在这些条件下,AM酯可以稳定数月。

        以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。 该说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

 

a)在高质量无水DMSO中制备2至5mM AM酯的储备溶液。非离子洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加AM酯的水溶性。

注意:在稀释到上样缓冲液中之前,可将等体积的20%Pluronic®F-127溶液添加到细胞活力指示剂的DMSO储备溶液中。终的Pluronic®F-127浓度约为0.02%。

注意:不建议长期储存含有Pluronic®F-127的AM酯。

b)在实验当天,要么将细胞活力的固体指示剂溶解在DMSO中,要么将等分的指示剂储备溶液解冻至室温。在缓冲液(如Hanks和Hepes缓冲液)中制备1至10μM的工作溶液。对于大多数细胞系,建议终浓度范围为4至5μM。细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。

c)如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白,可以在细胞培养基中加入丙磺舒(1-2.5 mM)或磺吡酮(0.1-0.25 mM),以减少脱酯化指标的泄漏。在室温或37℃下将细胞与AM酯孵育20分钟至1小时。

d)在不含细胞活力指示剂的缓冲液(含有阴离子转运蛋白抑制剂)中洗涤细胞以除去过量的探针。

注意:通过流式细胞术立即分析细胞样品,以保证每个细胞的平均荧光。

e)在所需的Ex / Em波长下进行实验 。

 

参考文献

Bi-layered α-tocopherol acetate loaded membranes for potential wound healing and skin regeneration
Authors: Saba Zahid, Hamad Khalid, Fakhera Ikram, Haffsah Iqbal, Muhammad Samie, Lubna Shahzadi, Asma Tufail Shah, Muhammad Yar, Aqif Anwar Chaudhry, Sana Javaid Awan
Journal: Materials Science and Engineering: C (2019)

Reactive oxygen species and transient receptor potential cation channel vanilloid 1 (TRPV1) as mediators of Wallerian degeneration
Authors: Bradley James Kievit
Journal: (2019)

TAK1 regulates endothelial cell necroptosis and tumor metastasis
Authors: Lida Yang, Sayali Joseph, Tianliang Sun, Julia Hoffmann, Sophia Thevissen, Stefan Offermanns, Boris Strilic
Journal: Cell Death & Differentiation (2019): 1

Targeting Immune-Related Molecules in Cancer Therapy: A Comprehensive In Vitro Analysis on Patient-Derived Tumor Models
Authors: Claudia Maletzki, Philine Scheinpflug, Anika Witt, Ernst Klar, Michael Linnebacher
Journal: BioMed Research International (2019)

The Fibroblast TIAM2 Promotes Lung Cancer Cell Invasion and Metastasis
Authors: Shuoke Li, Yangwei Ou, Shaobo Liu, Jiye Yin, Wei Zhuo, Masha Huang, Tao Zhu, Wei Zhang, Honghao Zhou, Zhaoqian Liu
Journal: Journal of Cancer (2019): 1879–1889

Functional imaging of neuronal activity of auditory cortex by using Cal-520 in anesthetized and awake mice
Authors: Jingcheng Li, Jianxiong Zhang, Meng Wang, Junxia Pan, Xiaowei Chen, Xiang Liao
Journal: Biomedical Optics Express (2017): 2599–2610

NINJ2–A novel regulator of endothelial inflammation and activation
Authors: Jingjing Wang, Jingjing Fa, Pengyun Wang, Xinzhen Jia, Huixin Peng, Jing Chen, Yifan Wang, Chenhui Wang, Qiuyun Chen, Xin Tu
Journal: Cellular Signalling (2017)

Erythropoietin Stimulates Endothelial Progenitor Cells to Induce Endothelialization in an Aneurysm Neck After Coil Embolization by Modulating Vascular Endothelial Growth Factor
Authors: Peixi Liu, Yingjie Zhou, Qingzhu An, Yaying Song, Xi Chen, Guo-Yuan Yang, Wei Zhu
Journal: MEDICINE (2016): 1–8

Flexible Endoscopic Spray Application of Respiratory Epithelial Cells as Platform Technology to Apply Cells in Tubular Organs
Authors: Anja Lena Thiebes, Manuel Armin Reddemann, Johannes Palmer, Reinhold Kneer, Stefan Jockenhoevel, Christian Gabriel Cornelissen
Journal: Tissue Engineering Part C: Methods (2016): 322–331

Influence of hypothermia and subsequent rewarming upon leukocyte-endothelial interactions and expression of Junctional-Adhesion-Molecules A and B
Authors: Nicolai V Bogert, Isabella Werner, Angela Kornberger, Patrick Meybohm, Anton Moritz, Till Keller, Ulrich A Stock, Andres Beiras-Fernandez
Journal: Scientific reports (2016)

 

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产品名称 货号
钙黄绿素绿,AM Cat#21905
钙黄绿素, AM 超纯级 Cat#22003
钙黄绿素红,AM Cat#21900

钙黄绿素, AM CAS 148504-34-1*超纯级*-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙黄绿素, AM CAS 148504-34-1*超纯级*价格 2111
产品规格

1 mg

产品货号

钙黄绿素, AM CAS 148504-34-1*超纯级*

产品参数
Ex (nm) 501 Em (nm) 521
分子量 994.86 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

钙黄绿素, AM是美国AAT Bioquest生产的用于细胞活力测定的试剂,Calcein AM是一种疏水性化合物,很容易渗透完整的活细胞。 它广泛用于细胞活力测定。 通过细胞内酯酶水解非荧光钙黄绿素AM产生强荧光的亲水钙黄绿素,其在细胞质中良好保留。 酯酶活性与小瓶细胞的数量成比例,因此与由钙黄绿素AM的酯酶催化水解产生的钙黄绿素的荧光强度直接相关。 Calcein AM是用于标记和监测活细胞细胞功能的流行的荧光探针之一。 然而,Calcein AM的单色使得在多色应用中不可能使用这种有价值的试剂。 例如,由于Calcein AM具有与GFP相同的颜色,因此不可能将Calcein AM与GFP转染的细胞组合使用。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商,为您提供优质的钙黄绿素。

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选择指南

Dye Calcein Blue CytoCalcein™ Violet 450 Calcein UltraBlue™ CytoCalcein™ Violet 500 Calcein UltraGreen™ Calcein Calcein Orange™ Calcein Red™ Calcein Deep Red™
原理 在活细胞中,非荧光钙黄绿素 AM 在细胞内酯酶的作用下 AM 酯水解后转化为荧光钙黄绿素产物。
荧光效果 活细胞具有高度荧光,很容易与无荧光的死细胞区分开。
Laser(nm) UV (350) Violet (405) UV (350) Violet (405) Blue (488) Blue (488) Green (532) Yellow (561-568) Red (633-647)
Ex/Em(nm) 354/441 406/445 359/458 420/505 492/514 501/521 531/545 562/576 643/663
是否复用
染料相容性 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容
样品类型 活细胞
适用仪器 荧光显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪
货号   22007 22012 21908 22013 21905 22003 22009 21900 22011

 

适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 488 nm
Em: 530/30  nm 
通道: FITC通道

 


荧光显微镜

Ex: FITC 滤波片组
Em: FITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板

 


荧光酶标仪

 
Ex: 490 nm
Em: 525 nm
Cutoff: 515 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
读取模式: 底读模式
实验方案

使用细胞活力指标AM酯类

        AM酯是非极性酯,其易于穿过活细胞膜,并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针加载到活细胞中。 但是,使用AM酯时必须小心,因为它们易于水解,特别是在溶液中。 它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜(DMSO)。DMSO储备溶液可以在20℃下干燥储存并避光。 在这些条件下,AM酯应稳定数月。

        以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。 该说明书仅提供指南,实际应根据您的具体需求进行修改。

 

a)在高质量无水DMSO中制备2至5mM AM酯的储备溶液。非离子洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加AM酯的水溶性。

注意:在稀释到上样缓冲液中之前,可将等体积的20%Pluronic®F-127溶液添加到细胞活力指示剂的DMSO储备溶液中。终的Pluronic®F-127浓度约为0.02%。

注意:不建议在Pluronic®F-127存在下长期储存AM酯。

b)在实验当天,要么将细胞活力的固体指示剂溶解在DMSO中,要么将等分的指示剂储备溶液解冻至室温。在您选择的缓冲液(如Hanks和Hepes缓冲液)中制备1至10μM的工作溶液。对于大多数细胞系,建议终浓度范围为4至5μM的细胞活力指标。细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。

c)如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白,可以在细胞培养基中加入丙磺舒(1-2.5 mM)或磺吡酮(0.1-0.25 mM),以减少脱酯化指标的泄漏。在室温或37℃下将细胞与AM酯孵育20分钟至1小时。

d)在不含细胞活力指示剂的缓冲液(含有阴离子转运蛋白抑制剂,如果适用)中洗涤细胞以除去过量的探针。

注意:通过流式细胞术立即分析细胞样品,以确定在零时间没有洗涤的每个细胞的平均荧光。

e)在所需的Ex / Em波长下进行实验 。

 

参考文献

Bi-layered α-tocopherol acetate loaded membranes for potential wound healing and skin regeneration
Authors: Saba Zahid, Hamad Khalid, Fakhera Ikram, Haffsah Iqbal, Muhammad Samie, Lubna Shahzadi, Asma Tufail Shah, Muhammad Yar, Aqif Anwar Chaudhry, Sana Javaid Awan
Journal: Materials Science and Engineering: C (2019)

Reactive oxygen species and transient receptor potential cation channel vanilloid 1 (TRPV1) as mediators of Wallerian degeneration
Authors: Bradley James Kievit
Journal: (2019)

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Authors: Lida Yang, Sayali Joseph, Tianliang Sun, Julia Hoffmann, Sophia Thevissen, Stefan Offermanns, Boris Strilic
Journal: Cell Death & Differentiation (2019): 1

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Journal: BioMed Research International (2019)

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Journal: Tissue Engineering Part C: Methods (2016): 322–331

Influence of hypothermia and subsequent rewarming upon leukocyte-endothelial interactions and expression of Junctional-Adhesion-Molecules A and B
Authors: Nicolai V Bogert, Isabella Werner, Angela Kornberger, Patrick Meybohm, Anton Moritz, Till Keller, Ulrich A Stock, Andres Beiras-Fernandez
Journal: Scientific reports (2016)

 

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产品名称 货号
钙黄绿素绿,AM Cat#21905
钙黄绿素, AM Cat#22002
钙黄绿素红,AM Cat#21900

钙蓝素,AM CAS 168482-84-6-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙蓝素,AM CAS 168482-84-6价格 1095
产品规格

1 mg

产品货号

钙蓝素,AM CAS 168482-84-6

产品参数
Ex (nm) 354 Em (nm) 441
分子量 465.41 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

钙蓝素,AM是美国AAT Bioquest生产的细胞渗透性钙黄绿素,它是钙黄绿素的细胞渗透型。进入活细胞后,弱荧光钙黄绿素AM被水解成钙黄绿素,其激发/发射大值与DAPI,Hoechst和AMCA相似。与典型的绿色和红色荧光团(如FITC,TMR和德克萨斯红)的这种特殊光谱分离为多路复用实验提供了额外的选择。因为钙黄绿素AM本身是荧光的,所以可能需要适当的过滤器组和额外的洗涤步骤以使背景荧光小化。我们的钙测定缓冲液可用于有效洗涤细胞外钙黄绿素。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的钙蓝素,AM。 

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选择指南

Dye Calcein Blue CytoCalcein™ Violet 450 Calcein UltraBlue™ CytoCalcein™ Violet 500 Calcein UltraGreen™ Calcein Calcein Orange™ Calcein Red™ Calcein Deep Red™
原理 在活细胞中,非荧光钙黄绿素 AM 在细胞内酯酶的作用下 AM 酯水解后转化为荧光钙黄绿素产物。
荧光效果 活细胞具有高度荧光,很容易与无荧光的死细胞区分开。
Laser(nm) UV (350) Violet (405) UV (350) Violet (405) Blue (488) Blue (488) Green (532) Yellow (561-568) Red (633-647)
Ex/Em(nm) 354/441 406/445 359/458 420/505 492/514 501/521 531/545 562/576 643/663
是否复用
染料相容性 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与绿色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和红色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容 与蓝色和绿色荧光蛋白、指示剂和其他探针兼容
样品类型 活细胞
适用仪器 荧光显微镜、荧光酶标仪、流式细胞仪
货号   22007 22012 21908 22013 21905 22003 22009 21900 22011

 

适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 350 nm or 405 nm
Em: 450/40 nm
通道: Pacific Blue 通道

 


荧光显微镜

Ex: DAPI 滤波片组
Em: DAPI 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板

 


荧光酶标仪

 
Ex: 360 nm
Em: 450 nm
Cutoff: 420 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
读取模式: 底读模式
实验方案

操作步骤

1.准备HHBS缓冲液,10%Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。

2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM Calcein Blue,AM * CAS 168482-84-6 *储备液。
2.1卡介素蓝量,AM * CAS 168482-84-6 *使用量:1毫克
2.2所需浓度:2 mM
2.3在合适的容器中,将1mg钙黄绿素,AM * CAS 168482-84-6 *与1074.32μL无水DMSO混合。
 

3.用含有10μM钙黄绿素的HHBS制备2X工作溶液,AM * CAS 168482-84-6 * 4,0.08%Pluronic®F-127和2 mM丙磺舒。
3.1Calcein Blue的终孔内浓度,AM * CAS 168482-84-6 *:5μM
3.2Pluronic®F-127的终孔内浓度:0.04%
3.3终孔内浓度的丙磺舒:1mM
3.4在合适的容器中混合16μL钙黄绿素,AM * CAS 168482-84-6 *,25.6μL10%Pluronic®F-127和256μL25mM Probenecid。然后,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为3.2 mL。
注意:对于大多数细胞系,我们建议终浓度为Calcein Blue,AM * CAS 168482-84-6 *为4至5μM。
注意:推荐的Pluronic F-127井浓度终为0.02%至0.04%。
注意:推荐的终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。
 

4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1此步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X,并将每种组分的终浓度调整为以下:5μM钙黄绿素,AM * CAS 168482-84-6 *,0.04%Pluronic®F-127,1 mM丙磺舒。

 

5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-60分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。
 

6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液(或您选择的缓冲液)。
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。 接下来,添加HHBS或您选择的缓冲液,直到体积为4 mL。
 

7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液,使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先,从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS(或您选择的缓冲液)。
 

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = 360/445 nm运行实验。

 

参考文献

Functional imaging of neuronal activity of auditory cortex by using Cal-520 in anesthetized and awake mice
Authors: Jingcheng Li, Jianxiong Zhang, Meng Wang, Junxia Pan, Xiaowei Chen, Xiang Liao
Journal: Biomedical Optics Express (2017): 2599–2610

NINJ2–A novel regulator of endothelial inflammation and activation
Authors: Jingjing Wang, Jingjing Fa, Pengyun Wang, Xinzhen Jia, Huixin Peng, Jing Chen, Yifan Wang, Chenhui Wang, Qiuyun Chen, Xin Tu
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Authors: Anja Lena Thiebes, Manuel Armin Reddemann, Johannes Palmer, Reinhold Kneer, Stefan Jockenhoevel, Christian Gabriel Cornelissen
Journal: Tissue Engineering Part C: Methods (2016): 322–331

Influence of hypothermia and subsequent rewarming upon leukocyte-endothelial interactions and expression of Junctional-Adhesion-Molecules A and B
Authors: Nicolai V Bogert, Isabella Werner, Angela Kornberger, Patrick Meybohm, Anton Moritz, Till Keller, Ulrich A Stock, Andres Beiras-Fernandez
Journal: Scientific reports (2016)

Inhibition of ABC transport proteins by oil sands process affected water
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Journal: Technology (2016): 1–8

Toxicokinetics and toxicodynamics of chlorpyrifos is altered in embryos of Japanese medaka exposed to oil sands process-affected water: evidence for inhibition of P-glycoprotein
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Spraying respiratory epithelial cells to coat tissue-engineered constructs
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The efficient hemostatic effect of Antarctic krill chitosan is related to its hydration property
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Phenomenex耗材 7AM-G000-00-GZ0 Guard Column Deactivated Tubing 5m x 0.32mm Ea

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产品货号: 7AM-G000-00-GZK 产品名称: Phenomenex耗材 7AM-G000-00-GZK 产品品牌: Phenomenex(美国飞诺美)

Phenomenex耗材 7AM-G000-00-GZK Guard Column Kit Deactivated Tubing 5m x 0.32mm/ 5 Conn Ea

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Phenomenex耗材 7AM-G000-00-GH0

产品货号: 7AM-G000-00-GH0 产品名称: Phenomenex耗材 7AM-G000-00-GH0 产品品牌: Phenomenex(美国飞诺美)

Phenomenex耗材 7AM-G000-00-GH0 Guard Column High Temp Deactivated Tubing 5m x 0.32mm Ea

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