BirA 生物素蛋白连接酶 (EC 6.3.4.15) 通过 ATP 中间体(生物素 5'-腺苷酸)以高效和靶向的方式将 d-生物素共价添加到生物素受体肽/蛋白上。酶促生物素化蛋白质的下游应用多种多样、重要且强大。生物素-亲和素/链霉亲和素相互作用通常用于亲和层析或表面或基质上的蛋白质固定。通过抗生物素抗体或亲和素/链霉亲和素-报告酶缀合物(-HRP、-碱性磷酸酶)或荧光探针进行蛋白质检测成为可能。生物素化 MHC 分子的多聚体形式是免疫生物学中常用的工具。
当与我们的 AviTag™ 生物素受体肽氨基酸序列结合使用时,生物素化发生率是天然大肠杆菌 BCCP 底物的两倍,比其他生物素化肽序列高出一个数量级或更多。因此,与其他可用序列相比,AviTag™ 序列需要更少的 BirA 酶和更短的孵育时间来完成生物素化。如果蛋白质不稳定性或蛋白酶活性是一个问题,这可能对下游的成功很重要。
我们的 BirA 酶是大肠杆菌野生型,由 birA 基因编码,并通过传统方法纯化至 99% 以上的纯度。该酶的其他名称包括:生物素连接酶;生物素操纵子阻遏蛋白;比尔A;生物素全酶合成酶;生物素-[乙酰辅酶A羧化酶]合成酶;生物素-[乙酰辅酶A-羧化酶]连接酶;生物素-[乙酰辅酶A羧化酶]合成酶;乙酰辅酶A全羧化酶合成酶;乙酰辅酶A全羧化酶合成酶;生物素:脱辅基羧化酶连接酶;生物素全酶合成酶。