标签归档：bapta

钙离子荧光探针OregonGreen488 BAPTA1，六钾盐-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙离子荧光探针OregonGreen488 BAPTA1，六钾盐价格 2823
产品规格

500 ug

产品货号

钙离子荧光探针OregonGreen488 BAPTA1，六钾盐

产品参数
Ex (nm) 493 Em (nm) 522
分子量 1114.28 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称：钙离子荧光探针Oregon Green 488 BAPTA-1，六钾盐

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：12个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量：1114.28

溶剂：水

激发波长(nm)：493

发射波长(nm)：522

 

产品介绍

钙离子荧光探针Oregon Green 488 BAPTA-1，六钾盐是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，OG488 BAPTA -1与Oregon Green 488 BAPTA-1的分子相同。 它是一种可见光可激发的钙指示剂，通常与FITC过滤器组配合使用。 OG 488 BAPTA-1的激发和发射分别为494和523 nm。 结合钙离子后其荧光强度增加~14倍。 这种水溶性盐形式可用于通过显微注射或从贴片移液管输注的细胞内负载。 也可获得指示剂的细胞渗透性AM酯形式（＃20507）。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的钙离子荧光探针Oregon Green 488 BAPTA-1，六钾盐。 金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的荧光素。 

点击查看光谱

钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

 

参考文献

Norepinephrine-induced calcium signaling in astrocytes in the respiratory network of the ventrolateral medulla
Authors: Schnell C, Negm M, Driehaus J, Scheller A, Hulsmann S.
Journal: Respir Physiol Neurobiol (2016): 18

Optical electrocorticogram (OECoG) using wide-field calcium imaging reveals the divergence of neuronal and glial activity during acute rodent seizures
Authors: Daniel AG, Laffont P, Zhao M, Ma H, Schwartz TH.
Journal: Epilepsy Behav (2015): 61

Two-Photon Processor and SeNeCA: a freely available software package to process data from two-photon calcium imaging at speeds down to several milliseconds per frame
Authors: Tomek J, Novak O, Syka J.
Journal: J Neurophysiol (2013): 243

Calcium buffering and clearance in spider mechanosensory neurons
Authors: Schmitz J, Hoger U, Torkkeli PH, French AS.
Journal: J Comp Physiol A Neuroethol Sens Neural Behav Physiol (2012): 477

Post hoc immunostaining of GABAergic neuronal subtypes following in vivo two-photon calcium imaging in mouse neocortex
Authors: Langer D, Helmchen F.
Journal: Pflugers Arch (2012): 339

Astrocyte calcium signaling transforms cholinergic modulation to cortical plasticity in vivo
Authors: Takata N, Mishima T, Hisatsune C, Nagai T, Ebisui E, Mikoshiba K, Hirase H.
Journal: J Neurosci (2011): 18155

Microscopic imaging of intracellular calcium in live cells using lifetime-based ratiometric measurements of Oregon Green BAPTA-1
Authors: Lattarulo C, Thyssen D, Kuchibholta KV, Hyman BT, Bacskaiq BJ.
Journal: Methods Mol Biol (2011): 377

Multifocal animated imaging of changes in cellular oxygen and calcium concentrations and membrane potential within the intact adult mouse carotid body ex vivo
Authors: Wotzlaw C, Bernardini A, Berchner-Pfannschmidt U, Papkovsky D, Acker H, F and rey J.
Journal: Am J Physiol Cell Physiol (2011): C266

Somatic depolarization enhances GABA release in cerebellar interneurons via a calcium/protein kinase C pathway
Authors: Bouhours B, Trigo FF, Marty A.
Journal: J Neurosci (2011): 5804

Mitochondrial DNA mutations affect calcium handling in differentiated neurons
Authors: Trevelyan AJ, Kirby DM, Smulders-Srinivasan TK, Nooteboom M, Acin-Perez R, Enriquez JA, Whittington MA, Lightowlers RN, Turnbull DM.
Journal: Brain (2010): 787

钙离子荧光探针OregonGreen488 BAPTA1，AM-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙离子荧光探针OregonGreen488 BAPTA1，AM价格 2823
产品规格

10×50 ug

产品货号

钙离子荧光探针OregonGreen488 BAPTA1，AM

产品参数
Ex (nm) 493 Em (nm) 522
分子量 1258.07 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

OG488 BAPTA -1 AM 与 Oregon Green 488 BAPTA-1 AM 酯分子相同。它是一种细胞渗透性、可见光激发的钙指示剂，通常与 FITC 滤光片组一起使用。通过将溶解的指示剂直接添加到含有培养细胞的培养皿中，可以向细胞装载 OG488 BAPTA -1 AM。来自这些细胞的荧光信号通常使用荧光显微镜、荧光微孔板测定或流式细胞术来测量。

点击查看光谱

 

适用仪器

荧光显微镜  
Ex: FITC 滤波片组
Em： FITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板

 

流式细胞仪  
Ex: 488
Em： 530/30nm
通道: FITC

 

荧光酶标仪  
Ex: 490 nm
Em： 525 nm
Cutoff： 515 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
读取模式: 底读模式/可分液处理

 

溶解方案(溶剂以说明书为准)

  0.1 mg 0.5 mg 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 79.487 µL 397.434 µL 794.868 µL 3.974 mL 7.949 mL
5 mM 15.897 µL 79.487 µL 158.974 µL 794.868 µL 1.59 mL
10 mM 7.949 µL 39.743 µL 79.487 µL 397.434 µL 794.868 µL
实验方案

样品实验方案

储备溶液配制:

除非另有说明，所有未使用的储备溶液应分成一次性等份，并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。

OG488 BAPTA-1 AM

在高质量无水 DMSO 中制备 2 至 5 mM OG488 BAPTA-1 AM 储备溶液。

工作溶液配制:

OG488 BAPTA-1 AM 工作溶液

1.实验当天，将 OG488 BAPTA-1 AM 溶解在 DMSO 中，或将等份指示剂储备溶液解冻至室温。

2.在您选择的缓冲液（例如 Hanks 和 Hepes 缓冲液）中用 0.04% Pluronic® F-127 制备 2 至 20 µM OG488 BAPTA-1 AM 工作溶液。对于大多数细胞系，建议终浓度为 4-5 μM 的 Cal Green  1 AM。细胞加载所需染料的准确浓度必须根据经验确定。

注意：非离子洗涤剂 Pluronic® F-127 有时用于增加 Cal Green™ 1 AM 的水溶性。可以从金畔购买各种 Pluronic® F-127

注意：如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒 (1-2 mM) 添加到染料工作溶液中（孔中的最终浓度为 0.5-1 mM），以减少脱酯后染料的外漏。各种 ReadiUse 丙磺舒产品，包括水溶性、钠盐和稳定溶液，均可从金畔购买。

 

操作步骤

以下是我们推荐的将 AM 酯加载到活细胞中的方案。该方案仅提供指导，实际应根据您的具体需求进行修改。

1.在生长培养基中将细胞孵育过夜。

2.第二天，将 1X OG488 BAPTA-1 AM 工作溶液添加到您的细胞培养板中。

3.将载有染料的板在细胞培养箱中于 37°C 下孵育 30 至 60 分钟。

注意：孵育染料超过 1 小时可以提高某些细胞系的信号强度。

4.用 HHBS 或您选择的缓冲液（包含阴离子转运蛋白抑制剂，例如 1 mM 丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除任何多余的探针。

5.根据需要添加刺激剂，同时使用配备 FITC 滤光片组的荧光显微镜或包含可编程液体处理系统（例如 FDSS、FLIPR 或 FlexStation）的荧光酶标仪在 Ex/Em = 490/525 nm 处测量荧光。

 

试剂应用文献

Protocol for in vitro sonoporation validation using non-targeted microbubbles for human studies of ultrasound-mediated gene delivery
Authors: Zhang, Nisi and Guo, Yutong and Foiret, Josquin and Tumbale, Spencer K and Paulmurugan, Ramasamy and Ferrara, Katherine W
Journal: STAR protocols (2023): 102723
 
Network pharmacology-based research uncovers cold resistance and genesis mechanism of Cinnamomum cassia
Authors: Jiang, Xiao-wen and Lu, Hong-yuan and Xu, Zi-Hua and Zhang, Ying-Shi and Zhao, Qing-Chun and others,
Journal: Fitoterapia (2021): 104824
 
Binding to carboxypeptidase M mediates protective effects of fibrinopeptide Bβ (15-42)
Authors: Sörensen-Zender, Inga and Chen, Rongjun and Song, Rong and David, Sascha and Melk, Anette and Haller, Hermann and Schmitt, Rol and , undefined
Journal: Translational Research (2019)
 
Tuning the Color Palette of Fluorescent Copper Sensors through Systematic Heteroatom Substitution at Rhodol Cores
Authors: Jia, Shang and Ramos-Torres, Karla M and Kolemen, Safacan and Ackerman, Cheri M and Chang, Christopher J
Journal: (2017)
 
Tuning the color palette of fluorescent copper sensors through systematic heteroatom substitution at rhodol cores
Authors: Jia, Shang and Ramos-Torres, Karla M and Kolemen, Safacan and Ackerman, Cheri M and Chang, Christopher J
Journal: ACS chemical biology (2017): 1844–1852

 

参考文献

Microscopic imaging of intracellular calcium in live cells using lifetime-based ratiometric measurements of Oregon Green BAPTA-1
Authors: Lattarulo C, Thyssen D, Kuchibholta KV, Hyman BT, Bacskaiq BJ.
Journal: Methods Mol Biol (2011): 377
 
Calcium Green FlAsH as a genetically targeted small-molecule calcium indicator
Authors: Tour O, Adams SR, Kerr RA, Meijer RM, Sejnowski TJ, Tsien RW, Tsien RY.
Journal: Nat Chem Biol (2007): 423
 
An ensemble and single-molecule fluorescence spectroscopy investigation of Calcium Green 1, a calcium-ion sensor
Authors: Lu Y, Paige MF.
Journal: J Fluoresc (2007): 739
 
Measurement of intracellular calcium levels by the fluorescent Ca2+ indicator Calcium-Green
Authors: Silei V, Fabrizi C, Venturini G, Tagliavini F, Salmona M, Bugiani O, Lauro GM.
Journal: Brain Res Brain Res Protoc (2000): 132
 
Monitoring of Ca2+ release from intracellular stores in permeabilized rat parotid acinar cells using the fluorescent indicators Mag-fura-2 and calcium green C18
Authors: Tojyo Y, Tanimura A, Matsumoto Y.
Journal: Biochem Biophys Res Commun (1997): 189
 
Optical imaging of neuronal activity in tissue labeled by retrograde transport of Calcium Green Dextran
Authors: McPherson DR, McClellan AD, O’Donovan MJ.
Journal: Brain Res Brain Res Protoc (1997): 157
 
Modulation of an Intracellular Calmodulin-Stimulated Ca2+-Pumping ATPase in Cauliflower by Trypsin (The Use of Calcium Green-5N to Measure Ca2+ Transport in Membrane Vesicles)
Authors: Askerlund P., undefined
Journal: Plant Physiol (1996): 913
 
A method for recording intracellular [Ca2+] transients in cardiac myocytes using calcium green-2
Authors: Spencer CI, Berlin JR.
Journal: Pflugers Arch (1995): 579
 
Characterization of calcium translocation across the plasma membrane of primary osteoblasts using a lipophilic calcium-sensitive fluorescent dye, calcium green C18
Authors: Lloyd QP, Kuhn MA, Gay CV.
Journal: J Biol Chem (1995): 22445
 
Calcium green-5N, a novel fluorescent probe for monitoring high intracellular free Ca2+ concentrations associated with glutamate excitotoxicity in cultured rat brain neurons
Authors: Rajdev S, Reynolds IJ.
Journal: Neurosci Lett (1993): 149

钙离子指示剂BAPTA,AM CAS 126150-97-8-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙离子指示剂BAPTA,AM CAS 126150-97-8价格 1095
产品规格

25 mg

产品货号

钙离子指示剂BAPTA,AM CAS 126150-97-8

产品参数
Ex (nm) – Em (nm) –
分子量 764.68 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

关键参数

分子量：764.68

CAS：126150-97-8

溶剂：DMSO

消光系数：N/A

Kd:nM

 

产品介绍

钙离子指示剂BAPTA,AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子指示剂，BAPTA AM是BAPTA（1,2-双（邻氨基苯氧基）乙烷-N，N，N’，N’-四乙酸）的细胞渗透型，细胞可渗透的钙螯合剂。该BAPTA衍生物用于调节细胞和组织中的钙浓度。BAPTA是钙特异性氨基多羧酸。四个羧酸官能团的存在使得两个钙离子的结合成为可能。羧酸盐配体的广泛灵活性对钙和其他金属离子的配位至关重要。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的钙离子指示剂BAPTA,AM。 

点击查看实验方案

钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

实验方案

操作步骤

1.准备HHBS缓冲液，10％Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。


2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM BAPTA，AM * CAS 126150-97-8 *储备液。
2.1BAPTA的量，AM * CAS 126150-97-8 *使用量：1毫克
2.2所需浓度：2 mM
2.3在合适的容器中，将1mg BAPTA，AM * CAS 126150-97-8 *与653.87μL无水DMSO混合。
 

3.在HHBS中制备含有10μMBAPTA，AM * CAS 126150-97-8 * 4,0.08％Pluronic®F-127和2mM丙磺舒的2X工作溶液。
3.1终孔内浓度BAPTA，AM * CAS 126150-97-8 *：5μM
3.2Pluronic®F-127的终井内浓度：0.04％
3.3终孔内浓度的丙磺舒：1mM
3.4在合适的容器中混合16μLBAPTA，AM * CAS 126150-97-8 *，25.6μL10％Pluronic®F-127和256μL25mM丙磺舒。接下来，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为3.2 mL。
注意：对于大多数细胞系，我们建议BAPTA的终浓度，AM * CAS 126150-97-8 *为4至5μM。
注意：推荐的Pluronic F-127井浓度终为0.02％至0.04％。
注意：推荐的终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。
 

4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X，并将每种组分的终浓度调节至以下：5μMBAPTA，AM * CAS 126150-97-8 *，0.04％Pluronic F-127,1mM丙磺舒。
 

5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-120分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。


6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液（或您选择的缓冲液）。
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。接下来，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为4 mL。


7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液，使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先，从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS（或您选择的缓冲液）。
 

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = / nm运行实验。

 

参考文献

Helicobacter pylori induces IL-1β protein through the inflammasome activation in differentiated macrophagic cells
Authors: Shoichiro Kameoka, Takeshi Kameyama, Takaya Hayashi, Seiichi Sato, Naomi Ohnishi, Takeru Hayashi, Naoko Murata-Kamiya, Hideaki Higashi, Masanori Hatakeyama, Akinori Takaoka
Journal: Biomedical Research (2016): 21–27

Licochalcone A induces T24 bladder cancer cell apoptosis by increasing intracellular calcium levels
Authors: Xinhui Yang, Jiangtao Jiang, Xinyan Yang, Jichun Han, Qiusheng Zheng
Journal: Molecular medicine reports (2016): 911–919

Spautin-1 Ameliorates Acute Pancreatitis via Inhibiting Impaired Autophagy and Alleviating Calcium Overload
Authors: Juan Xiao, Xueping Feng, Xiao-Ying Huang, Zhongshi Huang, Yanqiang Huang, Chaogan Li, Genliang Li, Song Nong, Ruoshi Wu, Yongzhi Huang
Journal: Molecular Medicine (2016): 643

Delayed administration of the nucleic acid analog 2Cl-C. OXT-A attenuates brain damage and enhances functional recovery after ischemic stroke
Authors: Naohiko Okabe, Emi Nakamura, Naoyuki Himi, Kazuhiko Narita, Ikuko Tsukamoto, Tokumi Maruyama, Norikazu Sakakibara, Takehiro Nakamura, Toshifumi Itano, Osamu Miyamoto
Journal: Brain research (2013): 115–131

Ras guanyl nucleotide releasing protein 2 affects cell viability and cell–matrix adhesion in ECV304 endothelial cells
Authors: Junichi Takino, Kentaro Nagamine, Takamitsu Hori
Journal: Cell adhesion & migration (2013): 262–266

Involvement of thioredoxin-binding protein 2 in the antitumor activity of CD437
Authors: Saori Matsuoka, Hiroyuki Tsuchiya, Tomohiko Sakabe, Yumi Watanabe, Yoshiko Hoshikawa, Akihiro Kurimasa, Hiroaki Itamochi, Tasuku Harada, Naoki Terakawa, Hiroshi Masutani
Journal: Cancer science (2008): 2485–2490

 

相关产品

产品名称 货号
钙离子指示剂BAPTA,AM 超纯级 Cat#21002

钙离子指示剂BAPTA,AM 超纯级 CAS 126150-97-8-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙离子指示剂BAPTA,AM 超纯级 CAS 126150-97-8价格 1386
产品规格

25 mg

产品货号

钙离子指示剂BAPTA,AM 超纯级 CAS 126150-97-8

产品参数
Ex (nm) – Em (nm) –
分子量 764.68 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

关键参数

分子量：764.68

CAS：126150-97-8

溶剂：DMSO

消光系数：N/A

 

产品介绍

钙离子指示剂BAPTA,AM是美国AAT Bioquest生产的钙离子指示剂，BAPTA AM是BAPTA（1,2-双（邻氨基苯氧基）乙烷-N，N，N’，N’-四乙酸）的细胞渗透型，细胞可渗透的钙螯合剂。该BAPTA衍生物用于调节细胞和组织中的钙浓度。BAPTA是钙特异性氨基多羧酸。四个羧酸官能团的存在使得两个钙离子的结合成为可能。羧酸盐配体的广泛灵活性对钙和其他金属离子的配位至关重要。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商，为您提供优质的钙离子指示剂BAPTA,AM。 

点击查看实验方案

钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

 

操作步骤

1.准备HHBS缓冲液，10％Pluronic®F-127溶液和25 mM Probenecid溶液。

2.在高质量无水DMSO中制备2 mM至5 mM BAPTA，AM * CAS 126150-97-8 *储备液。
2.1BAPTA的量，AM * CAS 126150-97-8 *使用量：1毫克
2.2所需浓度：2 mM
2.3在合适的容器中，将1mg BAPTA，AM * CAS 126150-97-8 *与653.87μL无水DMSO混合。
 

3.在HHBS中制备含有10μMBAPTA，AM * CAS 126150-97-8 * 4,0.08％Pluronic®F-127和2mM丙磺舒的2X工作溶液。
3.1最终孔内浓度BAPTA，AM * CAS 126150-97-8 *：5μM
3.2Pluronic®F-127的最终井内浓度：0.04％
3.3最终孔内浓度的丙磺舒：1mM
3.4在合适的容器中混合16μLBAPTA，AM * CAS 126150-97-8 *，25.6μL10％Pluronic®F-127和256μL25mM丙磺舒。接下来，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为3.2 mL。
注意：对于大多数细胞系，我们建议BAPTA的最终浓度，AM * CAS 126150-97-8 *为4至5μM。
注意：推荐的Pluronic F-127井浓度最终为0.02％至0.04％。
注意：推荐的最终浓度为1至2.5 mM的Probenecid。
 

4.将100μL染料工作溶液加入已经含有100μL培养基的所需孔中。
4.1该步骤将染料工作溶液从2X稀释至1X，并将每种组分的最终浓度调节至以下：5μMBAPTA，AM * CAS 126150-97-8 *，0.04％Pluronic F-127,1mM丙磺舒。
 

5.孵育染料
5.1将染料加载板在细胞培养箱中孵育20-120分钟。
5.2将染料加载板在室温下孵育30分钟。

6.用1.0 mM Probenecid准备HHBS缓冲液（或您选择的缓冲液）。
6.1在合适的容器中加入160μL的25mM丙磺舒。接下来，添加HHBS或您选择的缓冲液，直到体积为4 mL。

7.用HHBS缓冲液或您选择的缓冲液替换染料工作溶液，使用1.0 mM Probenecid。
7.1首先，从所需孔中除去200μL染料工作溶液和培养基。
7.2在相同的孔中加入200μL含有1.0mM丙磺舒的HHBS（或您选择的缓冲液）。
 

8.运行实验
8.1为您的样品添加所需的处理。
8.2以Ex / Em = / nm运行实验。

 

参考文献

Helicobacter pylori induces IL-1β protein through the inflammasome activation in differentiated macrophagic cells
Authors: Shoichiro Kameoka, Takeshi Kameyama, Takaya Hayashi, Seiichi Sato, Naomi Ohnishi, Takeru Hayashi, Naoko Murata-Kamiya, Hideaki Higashi, Masanori Hatakeyama, Akinori Takaoka
Journal: Biomedical Research (2016): 21–27

Licochalcone A induces T24 bladder cancer cell apoptosis by increasing intracellular calcium levels
Authors: Xinhui Yang, Jiangtao Jiang, Xinyan Yang, Jichun Han, Qiusheng Zheng
Journal: Molecular medicine reports (2016): 911–919

Spautin-1 Ameliorates Acute Pancreatitis via Inhibiting Impaired Autophagy and Alleviating Calcium Overload
Authors: Juan Xiao, Xueping Feng, Xiao-Ying Huang, Zhongshi Huang, Yanqiang Huang, Chaogan Li, Genliang Li, Song Nong, Ruoshi Wu, Yongzhi Huang
Journal: Molecular Medicine (2016): 643

Delayed administration of the nucleic acid analog 2Cl-C. OXT-A attenuates brain damage and enhances functional recovery after ischemic stroke
Authors: Naohiko Okabe, Emi Nakamura, Naoyuki Himi, Kazuhiko Narita, Ikuko Tsukamoto, Tokumi Maruyama, Norikazu Sakakibara, Takehiro Nakamura, Toshifumi Itano, Osamu Miyamoto
Journal: Brain research (2013): 115–131

Ras guanyl nucleotide releasing protein 2 affects cell viability and cell–matrix adhesion in ECV304 endothelial cells
Authors: Junichi Takino, Kentaro Nagamine, Takamitsu Hori
Journal: Cell adhesion & migration (2013): 262–266

Involvement of thioredoxin-binding protein 2 in the antitumor activity of CD437
Authors: Saori Matsuoka, Hiroyuki Tsuchiya, Tomohiko Sakabe, Yumi Watanabe, Yoshiko Hoshikawa, Akihiro Kurimasa, Hiroaki Itamochi, Tasuku Harada, Naoki Terakawa, Hiroshi Masutani
Journal: Cancer science (2008): 2485–2490

 

相关产品

产品名称 货号
钙离子指示剂BAPTA,AM Cat#21001

钙离子指示剂BAPTA四钾盐 CAS 73630-08-7-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙离子指示剂BAPTA四钾盐 CAS 73630-08-7价格 1095
产品规格

100 mg

产品货号

钙离子指示剂BAPTA四钾盐 CAS 73630-08-7

产品参数
Ex (nm) – Em (nm) –
分子量 628.79 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

BAPTA（1,2-双（邻氨基苯氧基）乙烷-N，N，N’，N’-四乙酸）是一种水溶性且细胞不可渗透的钙螯合剂。它对钙具有高选择性。BAPTA是钙特异性的氨基聚羧酸。四个羧酸官能团的存在使得两个钙离子的结合成为可能。羧酸盐配体的广泛柔韧性对于钙和其他金属离子的配位至关重要。

钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

实验方案

钙指示剂AM Esters的使用

1.带有钙指示剂AM酯：

      AM酯是非极性酯，很容易穿过活细胞膜，并被活细胞内的细胞酯酶迅速水解。AM酯被广泛用于无创地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须特别注意，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应该用高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）进行重构。DMSO储备溶液应在-20°C的干燥环境中保存，并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。

以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。该协议仅提供指南，应根据您的特定需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM AM酯储备溶液。

b）在实验当天，将固体的钙指示剂溶解在DMSO中，或将等分的指示剂储备溶液解冻至室温。在您选择的含0.04％Pluronic®F-127的缓冲液（例如Hanks and Hepes缓冲液）中，准备2至20 µM的工作溶液。对于大多数细胞系，我们建议钙指示剂的终浓度为4-5 uM。必须根据经验确定细胞加载所需指示剂的确切浓度。为避免因过载和潜在的染料毒性而导致的任何伪影，建议使用可以产生足够信号强度的小探针浓度。

c）如果您的细胞（例如CHO细胞）中含有有机阴离子转运蛋白，则可以将丙磺舒（2–5 mM）或亚砜吡嗪（0.2–0.5 mM）添加到染料工作溶液中（孔浓度为1）丙磺舒为-2.5 mM，亚磺酰吡嗪为0.1 -0.25 mM，以减少去酯化指示剂的泄漏。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）添加到细胞板中。

e）在温度或37°C下将染料加载板室孵育20分钟（尤其是Fluo-8 AM）至2小时，然后在室温下将板孵育30分钟。

注1：降低加载温度可能会减少指示器的分隔。

注2：将Cal-520 AM孵育2小时以上，对于某些细胞系会产生更好的信号强度。

f） 用HHBS或您选择的缓冲液（包含阴离子转运蛋白抑制剂，如1 mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以除去过量的探针。

g）在所需的Ex / Em波长下运行实验。

 

2.测量细胞内钙响应：

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2+水平。

 

参考文献

Helicobacter pylori induces IL-1β protein through the inflammasome activation in differentiated macrophagic cells
Authors: Shoichiro Kameoka, Takeshi Kameyama, Takaya Hayashi, Seiichi Sato, Naomi Ohnishi, Takeru Hayashi, Naoko Murata-Kamiya, Hideaki Higashi, Masanori Hatakeyama, Akinori Takaoka
Journal: Biomedical Research (2016): 21–27

Licochalcone A induces T24 bladder cancer cell apoptosis by increasing intracellular calcium levels
Authors: Xinhui Yang, Jiangtao Jiang, Xinyan Yang, Jichun Han, Qiusheng Zheng
Journal: Molecular medicine reports (2016): 911–919

Spautin-1 Ameliorates Acute Pancreatitis via Inhibiting Impaired Autophagy and Alleviating Calcium Overload
Authors: Juan Xiao, Xueping Feng, Xiao-Ying Huang, Zhongshi Huang, Yanqiang Huang, Chaogan Li, Genliang Li, Song Nong, Ruoshi Wu, Yongzhi Huang
Journal: Molecular Medicine (2016): 643

Delayed administration of the nucleic acid analog 2Cl-C. OXT-A attenuates brain damage and enhances functional recovery after ischemic stroke
Authors: Naohiko Okabe, Emi Nakamura, Naoyuki Himi, Kazuhiko Narita, Ikuko Tsukamoto, Tokumi Maruyama, Norikazu Sakakibara, Takehiro Nakamura, Toshifumi Itano, Osamu Miyamoto
Journal: Brain research (2013): 115–131

Ras guanyl nucleotide releasing protein 2 affects cell viability and cell–matrix adhesion in ECV304 endothelial cells
Authors: Junichi Takino, Kentaro Nagamine, Takamitsu Hori
Journal: Cell adhesion & migration (2013): 262–266

Involvement of thioredoxin-binding protein 2 in the antitumor activity of CD437
Authors: Saori Matsuoka, Hiroyuki Tsuchiya, Tomohiko Sakabe, Yumi Watanabe, Yoshiko Hoshikawa, Akihiro Kurimasa, Hiroaki Itamochi, Tasuku Harada, Naoki Terakawa, Hiroshi Masutani
Journal: Cancer science (2008): 2485–2490

钙离子指示剂BAPTA四钠盐 CAS 126824-24-6-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙离子指示剂BAPTA四钠盐 CAS 126824-24-6价格 1095
产品规格

100 mg

产品货号

钙离子指示剂BAPTA四钠盐 CAS 126824-24-6

产品参数
Ex (nm) – Em (nm) –
分子量 564.36 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

BAPTA（1,2-双（邻氨基苯氧基）乙烷-N，N，N’，N’-四乙酸）是一种水溶性且细胞不可渗透的钙螯合剂。它对钙具有高选择性。BAPTA是钙特异性的氨基聚羧酸。四个羧酸官能团的存在使得两个钙离子的结合成为可能。羧酸盐配体的广泛柔韧性对于钙和其他金属离子的配位至关重要。

钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

实验方案

钙指示剂AM Esters的使用

1.带有钙指示剂AM酯：

      AM酯是非极性酯，很容易穿过活细胞膜，并被活细胞内的细胞酯酶迅速水解。AM酯被广泛用于无创地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须特别注意，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应该用高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）进行重构。DMSO储备溶液应在-20°C的干燥环境中保存，并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。

以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。该协议仅提供指南，应根据您的特定需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM AM酯储备溶液。

b）在实验当天，将固体的钙指示剂溶解在DMSO中，或将等分的指示剂储备溶液解冻至室温。在您选择的含0.04％Pluronic®F-127的缓冲液（例如Hanks and Hepes缓冲液）中，准备2至20 µM的工作溶液。对于大多数细胞系，我们建议钙指示剂的终浓度为4-5 uM。必须根据经验确定细胞加载所需指示剂的确切浓度。为避免因过载和潜在的染料毒性而导致的任何伪影，建议使用可以产生足够信号强度的小探针浓度。

c）如果您的细胞（例如CHO细胞）中含有有机阴离子转运蛋白，则可以将丙磺舒（2–5 mM）或亚砜吡嗪（0.2–0.5 mM）添加到染料工作溶液中（孔浓度为1）丙磺舒为-2.5 mM，亚磺酰吡嗪为0.1 -0.25 mM，以减少去酯化指示剂的泄漏。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）添加到细胞板中。

e）在温度或37°C下将染料加载板室孵育20分钟（尤其是Fluo-8 AM）至2小时，然后在室温下将板孵育30分钟。

注1：降低加载温度可能会减少指示器的分隔。

注2：将Cal-520 AM孵育2小时以上，对于某些细胞系会产生更好的信号强度。

f） 用HHBS或您选择的缓冲液（包含阴离子转运蛋白抑制剂，如1 mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以除去过量的探针。

g）在所需的Ex / Em波长下运行实验。

 

2.测量细胞内钙响应：

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2+水平。

 

参考文献

Helicobacter pylori induces IL-1β protein through the inflammasome activation in differentiated macrophagic cells
Authors: Shoichiro Kameoka, Takeshi Kameyama, Takaya Hayashi, Seiichi Sato, Naomi Ohnishi, Takeru Hayashi, Naoko Murata-Kamiya, Hideaki Higashi, Masanori Hatakeyama, Akinori Takaoka
Journal: Biomedical Research (2016): 21–27

Licochalcone A induces T24 bladder cancer cell apoptosis by increasing intracellular calcium levels
Authors: Xinhui Yang, Jiangtao Jiang, Xinyan Yang, Jichun Han, Qiusheng Zheng
Journal: Molecular medicine reports (2016): 911–919

Spautin-1 Ameliorates Acute Pancreatitis via Inhibiting Impaired Autophagy and Alleviating Calcium Overload
Authors: Juan Xiao, Xueping Feng, Xiao-Ying Huang, Zhongshi Huang, Yanqiang Huang, Chaogan Li, Genliang Li, Song Nong, Ruoshi Wu, Yongzhi Huang
Journal: Molecular Medicine (2016): 643

Delayed administration of the nucleic acid analog 2Cl-C. OXT-A attenuates brain damage and enhances functional recovery after ischemic stroke
Authors: Naohiko Okabe, Emi Nakamura, Naoyuki Himi, Kazuhiko Narita, Ikuko Tsukamoto, Tokumi Maruyama, Norikazu Sakakibara, Takehiro Nakamura, Toshifumi Itano, Osamu Miyamoto
Journal: Brain research (2013): 115–131

Ras guanyl nucleotide releasing protein 2 affects cell viability and cell–matrix adhesion in ECV304 endothelial cells
Authors: Junichi Takino, Kentaro Nagamine, Takamitsu Hori
Journal: Cell adhesion & migration (2013): 262–266

Involvement of thioredoxin-binding protein 2 in the antitumor activity of CD437
Authors: Saori Matsuoka, Hiroyuki Tsuchiya, Tomohiko Sakabe, Yumi Watanabe, Yoshiko Hoshikawa, Akihiro Kurimasa, Hiroaki Itamochi, Tasuku Harada, Naoki Terakawa, Hiroshi Masutani
Journal: Cancer science (2008): 2485–2490