calzyme凝乳酶简述

calzyme凝乳酶  货号：223A0020

凝乳酶是一种蛋白水解酶，主要存在于小牛的第四胃组织中，但也存在于其他一些反刍哺乳动物中。小牛第四胃（vells）的提取物既含有活性凝乳酶，也含有酶原凝乳酶，该酶原通过在4℃下暴露于pH 3.6中1至2天而被激活为凝乳酶（酶分析方法）。干酪中使用的vells粗提物被称为凝乳酶，可以纯化到相对容易获得结晶凝乳酶的阶段。

结晶肾素是一种异源蛋白，可通过色谱分离为两种成分肾素A和肾素B .这两种成分也可通过激活两种不同的酶原获得。

凝乳酶在pH 5.5至6.0之间稳定，在pH 6.5以上相对不稳定.它对血红蛋白的最佳活性是在pH 3.7，在pH 4.9以上相对不活跃。氨基酸组成已被确定，这表明与胃蛋白酶有许多相似之处。凝乳酶的分子量为40，000，等电点为pH 4.5。

30℃时每分钟凝固10毫升牛奶的凝乳酶量

底物:100毫升牛奶（或同等浓度的奶粉溶液）并加入1毫升氯化钙（1.0摩尔/升）。 标准溶液。:用蒸馏水1:100稀释凝乳酶。 酶溶液。:适当稀释，使凝固时间为标准凝乳酶的0.75至1.5倍

将水浴温度设置为30℃ 向50 ml试管中加入10 ml底物批次，并在30°C水浴中培养至少45分钟。 在零点时，向底物管中加入1 ml稀释的标准凝乳酶。在水浴中轻轻混合，使试管侧面形成一层液体膜，并记录凝结开始的时间（t1）。 重复步骤3。凝血时间应在0至5秒内一致。 使用酶溶液重复步骤3。记录凝血时间（t2）。 如下所示计算活动。

calzyme谷丙转氨酶产品介绍

（L-丙氨酸:2氧代戊二酸氨基转移酶；2.6.1.2谷丙转氨酶（GPT）也称为丙氨酸氨基转移酶。它催化以下反应:GPT L-丙氨酸+α-酮戊二酸-》丙酮酸+L-谷氨酸转氨反应在中间代谢中起重要作用。转氨酶的催化活性需要磷酸吡哆醛作为辅酶。GPT存在于许多动植物组织中，在哺乳动物的心脏和肝脏中活性尤其高。这种酶在哺乳动物组织中以两种不同的同工酶形式存在，线粒体形式和细胞质形式。来自猪心的GPT已被广泛研究。它的分子量为10万。

在pH 7.5和25℃的磷酸钾缓冲液中，催化1微摩尔α-酮戊二酸转化为L-谷氨酸的酶量

由NADH氧化引起的340 nm处吸光度的降低与GPT的催化活性成正比。

组分：

0.1 M磷酸钾缓冲液，pH 7.5。

缓冲液中的1.15M L-丙氨酸（103毫克/毫升）。

缓冲液中的0.31Mα-酮戊二酸（45毫克/毫升）。

蒸馏水中的0.008 M NADH二钠盐（5毫克/毫升）。准备新鲜的。

乳酸脱氢酶（LDH），缓冲液中250 U/ml。化验前立即准备新鲜样品。

酶（GPT）溶液。在缓冲液中制备，使最终浓度为0.1-0.2 U/ml。必须在化验前立即制备新鲜样品。

PROCEDURE

1. 将分光光度计（配有条形记录仪和温度控制装置）设置在340 nm和25°c。

2.向比色皿移液管中加入所示量的以下试剂: 左旋丙氨酸2.60毫升 α-酮戊二酸盐0.10毫升 NADH 0.10毫升 乳酸脱氢酶0.10毫升 混合并在分光光度计中孵育5分钟以达到温度平衡，然后记录340 nm处的空白率。

3.通过向比色皿中加入0.1毫升酶（GPT）溶液来启动反应。

4.记录5-8分钟内340 nm处吸光度的下降率。

5.计算(delta)E340nm纳米/分钟