活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光价格 3534
产品规格

200 Tests

产品货号

活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 绿色荧光

产品参数
Ex (nm) 498 Em (nm) 517
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒,过氧化氢 (H2O2) 是一种活性氧代谢副产物,是许多氧化应激相关状态的关键调节剂。它参与了许多、动脉粥样硬化、糖尿病血管病变、骨质疏松症、许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物事件。也许过氧化氢生物学有趣的方面是近的报告,即抗体具有将分子氧转化为过氧化氢的能力,有助于免疫系统的正常识别和破坏过程。这种活性物质的测量将有助于确定氧化应激如何调节不同的细胞内途径。该 Cell Meter 过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的 OxiVision Green 过氧化氢探针来量化活细胞中的过氧化氢。 OxiVision Green 具有细胞渗透性,当它与过氧化氢反应时会产生绿色荧光。该试剂盒是一种优化的“混合和读取”分析格式,与 HTS 液体处理仪器兼容。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。  

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活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: FITC 通道
Em: FITC通道
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

96孔板的测定方案

概述

用于溶液测定

1.准备H2O2反应混合物(50μL)

2.加入H2O2标准品或测试样品(50μL)

3.在室温下孵育10-60分钟

4.在Ex / Em = 490/525 nm (cutoff=515nm)处检测荧光强度

注意:在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分。

 

用于活细胞检测

1. 在生长培养基中制备细胞
2. 使用 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液对细胞进行染色并孵育
3. 用测试化合物处理细胞
4. 在 Ex/Em = 490/525 nm (Cutoff = 515nm) 处用底部读取模式检测荧光强度

 

溶液配制

1. OxiVision Green 过氧化氢探针储备液 (250X)
将 50 μL DMSO(组分 D)加入 OxiVision Green 过氧化氢探针(组分 A)的小瓶中,制成 250X OxiVision Green 过氧化氢探针储备液,注意避光。

2. H2O2 标准溶液(20 mM)
将 22.7 μL 的 3% H2O2(0.88 M,组分 B)加入 977 μL 的 Assay Buffer(组分 C)中,制成 20 mM H2O2 标准溶液。

注意 稀释的 H2O2 标准溶液不稳定。 未使用的部分应丢弃。

3.H2O2 标准
将 50 μL 20 mM H2O2 标准溶液加入 950 μL Assay Buffer(组分 C)中,得到 1000 μM H2O2 标准溶液。 取 1000 μM H2O2 标准溶液并进行 1:3 的系列稀释,以得到含有测定缓冲液(组分 C)的系列稀释的 H2O2 标准品(HS1 – HS7)。

4.工作溶液配制

将 20 μL 250X OxiVision Green 过氧化氢探针储备液加入 5 mL 检测缓冲液(组分 C)中,制成 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液。

 

操作步骤

在上清液反应中检测H2O2
表 1. 纯黑色 96 孔微孔板中 H2O2 标准品和测试样品的布局。 HS= H 2 O 2 标准品(HS1 – HS7,300 至 0.3 μM); BL=空白控制; TS=测试样品

BL BL TS TS
HS1 HS1
HS2 HS2
HS3 HS3    
HS4 HS4    
HS5 HS5    
HS6 HS6    
HS7 HS7    

表2. 每孔试剂组成

容积 试剂
HS1-HS7 50ul 连续稀释(300至0.3μM)
BL 50ul 分析缓冲液(组分C)
TS 50ul 测试样本

1.根据表 1 和表 2 中提供的布局准备 H2O2 标准 (HS)、空白对照 (BL) 和测试样品 (TS)。对于 384 孔板,每孔使用 25 μL 试剂,而不是 50 μL。

2. 将 50 μL OxiVision Green 过氧化氢探针工作液加入 H2O2 标准品、空白对照和测试样品的每个孔中,使H2O2 测定总体积为 100 μL/孔。 对于384孔板,将 25 μL 的 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液添加到每个孔中,总体积为 50 μL/孔。

3. 在室温下将反应孵育 15 到 30 分钟,避光。

4. 用荧光酶标仪在Ex= 490 ± 10,Em= 520 ± 10 nm(佳 Ex/Em = 490/525 nm,截止 = 515 nm)检测荧光强度。

 

在活细胞中进行H2O2检测

1.根据需要培养细胞

2.用 PBS 缓冲液清洗细胞,用 100 μL/孔的 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液孵育细胞 5 到 60 分钟。 对于 384 孔板,添加 25 μL/孔的 OxiVision Green 过氧化氢探针工作溶液。

3. 在 Ex/Em = 490/525 nm (Cutoff = 515 nm) 下使用荧光酶标仪(底部读取模式)检测荧光增加或使用 FITC 通道通过荧光显微镜成像荧光变化。

 

参考文献

Bio-inspired redox-cycling antimicrobial film for sustained generation of reactive oxygen species
Authors: Huan Liu, Xue Qu, Eunkyoung Kim, Miao Lei, Kai Dai, Xiaoli Tan, Miao Xu, Jinyang Li, Yangping Liu, Xiaowen Shi
Journal: Biomaterials (2018)

PPARα-mediated peroxisome induction compensates PPARγ-deficiency in bronchiolar club cells
Authors: Srikanth Karnati, Gani Oruqaj, Harshavardhan Janga, Srinu Tumpara, Claudia Colasante, Paul P Van Veldhoven, Nancy Braverman, Adrian Pilatz, Thomas J Mariani, Eveline Baumgart-Vogt
Journal: PloS one (2018): e0203466

Semaphorin 4D inhibits neutrophil activation and is involved in the pathogenesis of neutrophil-mediated autoimmune vasculitis
Authors: Masayuki Nishide, Satoshi Nojima, Daisuke Ito, Hyota Takamatsu, Shohei Koyama, Sujin Kang, Tetsuya Kimura, Keiko Morimoto, Takashi Hosokawa, Yoshitomo Hayama
Journal: Annals of the Rheumatic Diseases (2017): annrheumdis–2016

Aggravation of brain infarction through an increase in acrolein production and a decrease in glutathione with aging
Authors: Takeshi Uemura, Kenta Watanabe, Misaki Ishibashi, Ryotaro Saiki, Kyoshiro Kuni, Kazuhiro Nishimura, Toshihiko Toida, Keiko Kashiwagi, Kazuei Igarashi
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2016): 630–635

Hydrogen peroxide detection with high specificity in living cells and inflamed tissues
Authors: Lei Rong, Chi Zhang, Qi Lei, Ming-Ming Hu, Jun Feng, Hong-Bing Shu, Yi Liu, Xian-Zheng Zhang
Journal: Regenerative Biomaterials (2016): rbw022

Modification of lignin in sugarcane bagasse by a monocopper hydrogen peroxide-generating oxidase from bifida fusca
Authors: Cheng-Yu Chen, Cheng-Cheng Lee, Hung-Shuan Chen, Chao-Hsun Yang, Shu-Ping Wang, Jyh-Horng Wu, Menghsiao Meng
Journal: Process Biochemistry (2016): 1486–1495

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Authors: Kazuhiro Nakaso, Naoko Tajima, Satoru Ito, Mari Teraoka, Atsushi Yamashita, Yosuke Horikoshi, Daisuke Kikuchi, Shinsuke Mochida, Kenji Nakashima, Tatsuya Matsura
Journal: PLoS One (2013): e55068

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Journal: Journal of Biological Chemistry (2011): 32444–32453

 

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活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光-AAT Bioquest荧光染料

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活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光 价格 3534
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100 Tests

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活性氧 Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒 蓝色荧光

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
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产品概述

Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测过氧化物的试剂盒,过氧化氢是一种活性氧代谢副产物,可作为许多氧化应激相关状态的关键调节剂。 它涉及许多,动脉粥样硬化,糖尿病血管病变,骨质疏松症,许多神经退行性疾病和唐氏综合症有关的生物学事件。 这种活性物质的测量有助于确定氧化应激如何调节各种细胞内途径。 Cell Meter 细胞内荧光过氧化氢检测试剂盒使用我们独特的OxiVision Blue过氧化物探针来定量活细胞中的过氧化氢。 OxiVision 蓝色过氧化物探针具有细胞渗透性,当与过氧化氢反应时会产生蓝色荧光。 该试剂盒提供了一种监测活细胞中过氧化氢水平的灵敏工具,并且它被优化用于荧光显微镜。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 细胞内荧光法过氧化氢检测试剂盒。 

活性氧(ROS)篇:包含总ROS和多种活性氧离子检测试剂大全

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: DAPI 滤波片
Em: DAPI 滤波片
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

样品实验方案

简要概述

1.在生长培养基中制备细胞
2.用OxiVision 蓝色过氧化物传感器染色细胞
3.用测试化合物处理细胞
4.用DAPI滤光片或Ex / Em = 405 / 450nm监测荧光强度

 

溶液制备 

1.储备溶液

所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。 避免反复冻融循环。
1. OxiVision 蓝色过氧化物原液(500X):
将40μLDMSO(组分C)加入到OxiVision 蓝色过氧化物(组分A)的小瓶中并充分混合以制备500X OxiVision 蓝色过氧化物传感器储备溶液。 注意:20μL重组的OxiVision 蓝色过氧化物传感器储备溶液足以用于1个平板。 应立即使用原液。 避光。

  

2.工作溶液

将10μL500XOxiVision 蓝色过氧化物储备溶液加入500μL分析缓冲液(组分B)中,充分混合,制成OxiVision 蓝色过氧化物工作溶液。 注意:此OxiVision 蓝色过氧化物工作溶液不稳定; 使用前根据需要准备。

点击查看细胞制备指南

 

样品分析

1.添加10μL/孔(96孔板)或2.5μL/孔(384孔板)的OxiVision 蓝色过氧化物工作溶液,每孔90μL细胞培养物,96孔板或22.5μL细胞培养物在384孔细胞板中。注意:染色前无需清洗细胞。建议在完全培养基中染色细胞。

2.用测试化合物在完全培养基或37℃的所需缓冲液中处理细胞一段所需的时间。对于对照样品(未处理的细胞),加入相应量的化合物缓冲液。注意:建议在完全培养基中处理细胞。然而,如果测试的化合物对血清敏感,则可以在前吸出生长培养基和血清因子。抽吸后,将1X Hank盐溶液和20 mM Hepes缓冲液(HHBS)或您选择的缓冲液加入细胞中。或者,可以在无血清培养基中处理细胞。我们用完全培养基中的100μM过氧化氢在37℃处理Jurkat细胞90分钟以诱导过氧化氢。详细信息请参见图1。

3.用DPBS洗涤细胞1-2次,并用100uL /孔(对于96孔板)或25uL /孔(对于384孔板)替换测定缓冲液(组分B)。

4.使用带DAPI过滤器的荧光显微镜拍摄图像。

 

参考文献

Plasma-activated medium selectively eliminates undifferentiated human induced pluripotent stem cells
Authors: Ryo Matsumoto, Kazunori Shimizu, Takunori Nagashima, Hiromasa Tanaka, Masaaki Mizuno, Fumitaka Kikkawa, Masaru Hori, Hiroyuki Honda
Journal: Regenerative Therapy (2016): 55–63

 

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100 Tests

产品货号

Cell Meter 胞内NADH / NADPH荧光成像分析试剂盒

产品参数
Ex (nm) 535 Em (nm) 557
分子量 溶剂
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产品概述

Cell Meter 胞内NADH / NADPH荧光成像分析试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测NADH/NADPH的试剂盒,细胞内二氢烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NADH及其磷酸酯NADPH的检测对于疾病诊断和发现是重要的。通常,氧化还原偶联NAD / NADH和NADP / NADPH在能量代谢,糖酵解,三羧酸循环和线粒体呼吸中起关键作用。细胞中NAD(P)H水平的增加与细胞内的相关的活性氧(ROS)的异常产生和DNA损伤。然而,由于缺乏敏感的NAD(P)H探针,在生物系统中检测细胞内NAD(P)H具有挑战性。 Cell Meter™细胞内NADH / NADPH荧光成像试剂盒提供了监测活细胞中细胞内NAD(P)H水平的有效方法。 JZL1707 NAD(P)H传感器是一种的荧光探针,用于检测和成像细胞中的NADH / NADPH。探针结合NADH / NADPH以产生具有高灵敏度和特异性的强荧光信号。 JZL1707 NAD(P)H传感器可以很容易地加载到活细胞中,使用Cy3®TRITC过滤器可以方便地监测其荧光信号。该试剂盒针对荧光成像和酶标仪应用进行了优化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 胞内NADH / NADPH荧光成像分析试剂盒。 

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适用仪器


荧光显微镜  
Ex: TRITC 滤波片组
Em: TRITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板
实验方案

实验示例

概述

1.在生长培养基中制备细胞

2.将细胞与测试化合物和JZL1707 NAD(P)H传感器工作溶液在37oC孵育30-60分钟

3.将细胞洗净并保持在测定缓冲液中

4.在Ex / Em = 540/590 nm(截止波长= 570 nm)或使用TRITC滤光片的荧光显微镜下监测荧光强度(底部读取模式)

 

操作步骤

1.刺激NADP / NADPH,用10μL10X试验化合物(96孔板)或5μL5X试验化合物(384孔板)在无血清培养基或所需缓冲液(如PBS或HHBS)中处理细胞)。 对于对照孔(未处理的细胞),加入相应量的培养基或化合物缓冲液。

注意:JZL1707 NAD(P)H传感器对血清敏感,因此建议将细胞保存在无血清培养基或您选择的缓冲液中。或者,可以在常规的全培养基中制备和处理细胞。 与JZL1707 NAD(P)H传感器一起孵育时,更换为您选择的无血清培养基或缓冲液。

2.在细胞板中加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的JZL1707 NAD(P)H传感器工作溶液。 将细胞与测试化合物和JZL1707 NAD(P)H传感器工作溶液在37oC共孵育30-60分钟,避光。

注意:对于NADH / NADPH阳性对照处理:将HeLa细胞与100μMNADH或NADPH在无血清培养基中孵育30分钟,并与JZL1707 NAD(P)H传感器工作溶液在37℃下共孵育30分钟。 详细信息请参见图1。

3.用所需缓冲液洗涤细胞一次。 移除每个孔中的溶液,并添加100μL/孔的测定缓冲液(组分B)用于96孔板或25μL/孔用于384孔板。

4.使用具有底部读取模式的Ex / Em = 540 / 590nm(截止= 570nm)的酶标仪监测荧光增加,或使用荧光显微镜和Cy3过滤器或TRITC过滤器组拍摄图像。

 

参考文献

Celastrol attenuates angiotensin II mediated human umbilical vein endothelial cells damage through activation of Nrf2/ERK1/2/Nox2 signal pathway
Authors: Miao Li, Xin Liu, Yongpeng He, Qingyin Zheng, Min Wang, Yu Wu, Yuanpeng Zhang, Chaoyun Wang
Journal: European Journal of Pharmacology (2017): 124–133

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100 Tests

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Cell Meter 胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒

产品参数
Ex (nm) 535 Em (nm) 557
分子量 溶剂
存储条件
产品概述

Cell Meter 胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒是美国AAT Bioquest生产的用于检测NADH/NADPH的试剂盒,细胞内二氢烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NADH及其磷酸酯NADPH的检测对于疾病诊断和发现是重要的。通常,氧化还原偶联NAD / NADH和NADP / NADPH在能量代谢,糖酵解,三羧酸循环和线粒体呼吸中起关键作用。细胞中NAD(P)H水平的增加与活性氧(ROS)和DNA损伤的异常产生有关。然而,由于缺乏敏感的NAD(P)H探针,在生物系统中检测细胞内NAD(P)H具有挑战性。 Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒提供了一种监测活细胞内细胞内NAD(P)H水平的有效方法。 JZL1707 NAD(P)H传感器是一种的荧光探针,用于检测和成像细胞中的NADH / NADPH。探针结合NADH / NADPH以产生具有高灵敏度和特异性的强荧光信号。 JZL1707 NAD(P)H传感器可以很容易地加载到活细胞中,并且可以使用PE通道中的流式细胞仪方便地监测其荧光信号。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒。 

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适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 488 nm
Em: 575/26  nm 
通道: PE 通道
实验方案

实验示例

概述

1.准备细胞(0.5-1×106细胞/ mL)
2.将细胞与测试化合物和JZL1707 NAD(P)H传感器在37ºC下孵育30-60分钟
3.洗涤细胞并将其保存在测定缓冲液中
4.使用PE通道通过流式细胞仪分析细胞

 

操作步骤

1.对于每个样品,在0.5 mL无血清培养基或您选择的缓冲液中以1×105至1×106细胞/ mL的密度制备细胞。注意:应单独评估每个细胞系,以确定佳细胞密度。对于粘附细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并用无血清培养基洗涤细胞一次。注意:JZL1707 NAD(P)H传感器对血清敏感,因此建议将细胞保存在您选择的无血清培养基或缓冲液中。或者,可以制备细胞并在常规完全培养基中处理。与JZL1707 NAD(P)H Sensor孵育时,请更改为无血清培养基或您选择的缓冲液。
在37ºC下将细胞与测试化合物一起孵育所需的时间,以刺激细胞内的NADH / NADPH。注意:适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和测试化合物。优化每个实验的孵育时间。

2.将1 µL JZL1707 NAD(P)H传感器(组分A)加入0.5 mL细胞悬液中。在37ºC下孵育30-60分钟。注意:对于NADH / NADPH阳性对照处理:将Jurkat细胞与100 µM NADH或NADPH在无血清培养基中孵育30分钟,然后与JZL1707 NAD(P)H Sensor工作溶液在37ºC共同孵育30分钟。分钟。有关详细信息,请参见图1。

3.用所需的缓冲液洗涤细胞一次。将细胞保存在测定缓冲液(组分B)中。

4.使用流式细胞仪监测PE通道的荧光强度。

 

参考文献

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Authors: Miao Li, Xin Liu, Yongpeng He, Qingyin Zheng, Min Wang, Yu Wu, Yuanpeng Zhang, Chaoyun Wang
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Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
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产品概述

Cell Meter 细胞内NADH / NADPH荧光成像试剂盒 深红色荧光 是美国AAT Bioquest生产的用于检测NADH/NADPH的试剂盒,细胞内二氢烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NADH及其磷酸酯NADPH的检测对于疾病诊断和发现是重要的。通常,氧化还原偶联NAD / NADH和NADP / NADPH在能量代谢,糖酵解,三羧酸循环和线粒体呼吸中起关键作用。细胞中NAD(P)H水平的增加与活性氧(ROS)和DNA损伤的异常产生有关。然而,由于缺乏敏感的NAD(P)H探针,在生物系统中检测细胞内NAD(P)H具有挑战性。 Cell Meter™细胞内NADH / NADPH荧光成像试剂盒提供了监测远光谱中活细胞中细胞内NAD(P)H水平的有效方法,并且可以与其他应用如GFP表达细胞或MitoTracker的应用相结合。 JJ1902 NAD(P)H是一种的荧光探针,用于检测和成像细胞中的NADH / NADPH。该荧光探针结合NADH / NADPH,产生高灵敏度和特异性的强荧光信号。 JJ1902 NAD(P)H传感器可以很容易地加载到活细胞中,使用Cy5®过滤器可以方便地监测其荧光信号。该试剂盒针对荧光成像和酶标仪应用进行了优化。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 细胞内NADH / NADPH荧光成像试剂盒。 

 

适用仪器


荧光显微镜  
Ex: 590 nm
Em: 655 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
滤波片组: Cy5 滤波片组
实验方案

实验样品示例

概述

1.在生长培养基中制备细胞

2.将细胞与测试化合物和JJ1902 NAD(P)H传感器工作溶液在37℃孵育20  –  30分钟

3.将细胞洗净并保持在测定缓冲液中

4.在Ex / Em = 590/655 nm(截止= 610 nm)或使用Cy5®过滤器的荧光显微镜下监测荧光强度(底部读取模式)

注意:在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分。

 

操作方法

1.制备工作溶液

将10μL JJ1902 NAD(P)H探针储备溶液(组分A)加入2.5mL测定缓冲液(组分B)中,并充分混合。该JZL1707 NAD(P)H探针工作溶液在室温下1小时内稳定。

注意:40μL的JZL1707 NAD(P)H传感器原液足以用于一个板

 

2.实验步骤

①刺激NADP / NADPH,用10μL10X试验化合物(96孔板)或5μL5X试验化合物(384孔板)在无血清培养基或所需缓冲液(如PBS或HHBS)中处理细胞。 对于对照孔(未处理的细胞),加入相应量的培养基或化合物缓冲液。

注意:JJ1902 NAD(P)H探针在血清存在的情况下也是兼容的。探针的条件优化是强烈推荐的细胞系到细胞系。

②在细胞板中加入100μL/孔(96孔板)或25μL/孔(384孔板)的JJ1902 NAD(P)H探针工作溶液。将细胞与测试化合物和JJ1902 NAD(P)H探针工作溶液在37℃共孵育20-30分钟,避光。

注意:对于NADH / NADPH阳性对照处理:将HeLa细胞与100μMNADH或NADPH在无血清培养基中孵育30分钟,并与JJ1902 NAD(P)H探针工作溶液在37℃下共培养30分钟。 详细信息请参见图1。

③用所需缓冲液洗涤细胞一次。移除每个孔中的溶液,并添加100μL/孔的测定缓冲液(组分B)用于96孔板或25μL/孔用于384孔板。

④使用底板读取模式在Ex / Em = 590 / 655nm(截止= 610 nm)下使用酶标仪监测荧光增加,或使用荧光显微镜和Cy5®过滤器过滤器获取图像。

 

参考文献

Celastrol attenuates angiotensin II mediated human umbilical vein endothelial cells damage through activation of Nrf2/ERK1/2/Nox2 signal pathway
Authors: Miao Li, Xin Liu, Yongpeng He, Qingyin Zheng, Min Wang, Yu Wu, Yuanpeng Zhang, Chaoyun Wang
Journal: European Journal of Pharmacology (2017): 124–133

Cytosolic Redox Status of Wine Yeast (Saccharomyces Cerevisiae) under Hyperosmotic Stress during Icewine Fermentation
Authors: Fei Yang, Caitlin Heit, Debra L Inglis
Journal: Fermentation (2017): 61

Epigenetic regulation of Runx2 transcription and osteoblast differentiation by nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Min Ling, Peixin Huang, Shamima Islam, Daniel P Heruth, Xuanan Li, Li Qin Zhang, Ding-You Li, Zhaohui Hu, Shui Qing Ye
Journal: Cell & Bioscience (2017): 27

MCU-dependent mitochondrial Ca2+ inhibits NAD+/SIRT3/SOD2 pathway to promote ROS production and metastasis of HCC cells
Authors: T Ren, H Zhang, J Wang, J Zhu, M Jin, Y Wu, X Guo, L Ji, Q Huang, H Yang
Journal: Oncogene (2017)

Metabolic and molecular insights into an essential role of nicotinamide phosphoribosyltransferase
Authors: Li Q Zhang, Leon Van Haandel, Min Xiong, Peixin Huang, Daniel P Heruth, Charlie Bi, Roger Gaedigk, Xun Jiang, Ding-You Li, Gerald Wyckoff
Journal: Cell Death & Disease (2017): e2705

Pyrroloquinoline Quinone, a Redox-active o-Quinone, Stimulates Mitochondrial Biogenesis by Activating SIRT1/PGC-1α Signaling Pathway
Authors: Kazuhiro Saihara, Ryosuke Kamikubo, Kazuto Ikemoto, Koji Uchida, Mitsugu Akagawa
Journal: Biochemistry (2017)

Resveratrol attenuates excessive ethanol exposure induced insulin resistance in rats via improving NAD+/NADH ratio
Authors: Gang Luo, Bingqing Huang, Xiang Qiu, Lin Xiao, Ning Wang, Qin Gao, Wei Yang, Liping Hao
Journal: Molecular Nutrition & Food Research (2017)

A Snapshot of the Plant Glycated Proteome STRUCTURAL, FUNCTIONAL, AND MECHANISTIC ASPECTS
Authors: Tatiana Bilova, Elena Lukasheva, Dominic Brauch, Uta Greifenhagen, Gagan Paudel, Elena Tarakhovskaya, Nadezhda Frolova, Juliane Mittasch, Gerd Ulrich Balcke, Alain Tissier
Journal: Journal of Biological Chemistry (2016): 7621–7636

AMPK activation protects cells from oxidative stress-induced senescence via autophagic flux restoration and intracellular NAD+ elevation
Authors: Xiaojuan Han, Haoran Tai, Xiaobo Wang, Zhe Wang, Jiao Zhou, Xiawei Wei, Yi Ding, Hui Gong, Chunfen Mo, Jie Zhang
Journal: Aging cell (2016): 416–427

Cell-Line Selectivity Improves the Predictive Power of Pharmacogenomic Analyses and Helps Identify NADPH as Biomarker for Ferroptosis Sensitivity
Authors: Kenichi Shimada, Miki Hayano, Nen C Pagano, Brent R Stockwell
Journal: Cell chemical biology (2016): 225–235

 

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产品名称 货号
Cell Meter 胞内NADH / NADPH荧光成像分析试剂盒 Cat#15290

Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 深红色荧光-AAT Bioquest荧光染料

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品,欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 深红色荧光 价格 7092
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Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 深红色荧光

产品参数
Ex (nm) Em (nm)
分子量 溶剂
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Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒是美国AAT Bioquest研发的检测NADP/NADPH的试剂盒,细胞内二氢烟酰胺腺嘌呤二核苷酸NADH及其磷酸酯NADPH的检测对于疾病诊断和发现是重要的。通常,氧化还原偶联NAD / NADH和NADP / NADPH在能量代谢,糖酵解,三羧酸循环和线粒体呼吸中起关键作用。细胞中NAD(P)H水平升高与活性氧(ROS)和DNA损伤的异常产生有关。然而,由于缺乏敏感的NAD(P)H探针,检测细胞内NAD具有挑战性。(P)H在生物系统中。Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒提供了一种监测远光谱活细胞中细胞内NAD(P)H水平的有效方法,可与其他应用如GFP表达细胞或MitoTracker的应用相结合。JJ1902 NAD(P)H探针是一种的荧光探针,用于检测和成像细胞中的NADH / NADPH。该荧光探针结合NADH / NADPH,产生高灵敏度和特异性的强荧光信号。JJ1902 NAD(P)H探针可以很容易地加载到活细胞中,并且可以使用APC通道中的流式细胞仪方便地监测其荧光信号。金畔生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Cell Meter 细胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒。 

 

适用仪器


流式细胞仪  
Ex: 640 nm
Em: 660/20  nm 
通道: APC 通道
实验方案

实验样品示例

概述

1.准备细胞(0.5  –  1×106细胞/ mL)

2.将含有测试化合物和JJ1902 NAD(P)H探针的细胞在37℃孵育20-30分钟

3.将细胞洗净并保持在测定缓冲液中

4.使用APC通道用流式细胞仪分析细胞

注意:在开始实验之前,在室温下解冻所有试剂盒组分。

 

操作方法

1.对于每个样品,将细胞制备在0.5 mL无血清培养基或您选择的缓冲液中,密度为1×105至1×106个细胞/ mL。

注意1:应对每个细胞系进行单独测评,以确定佳细胞密度。 对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并用无血清培养基洗涤细胞一次。

注意2:JJ1902 NAD(P)H探针在血清存在的情况下也兼容。

 

2.将细胞与测试化合物在37℃孵育所需的一段时间以刺激细胞内NADH / NADPH。

注意:适当的孵育时间取决于单个细胞类型和使用的测试化合物。 优化每个实验的孵育时间。

 

3.将1μL JJ1902NAD(P)H探针(组分A)加入0.5 mL细胞悬浮液中。在37℃下孵育30-60分钟。

注意对于NADH / NADPH阳性对照处理:将Jurkat细胞与100μMNADH或NADPH在无血清培养基中孵育30分钟,并与JJ1902 NAD(P)H探针工作溶液在37℃下共温育30分钟。 详细信息请参见说明书中的图1。

4.用所需的缓冲液(如HHBS或DPBS)洗涤细胞一次。将细胞保存在分析缓冲液(组分B)中。

 

5.使用流式细胞仪监测APC通道的荧光强度。

 

参考文献

Celastrol attenuates angiotensin II mediated human umbilical vein endothelial cells damage through activation of Nrf2/ERK1/2/Nox2 signal pathway
Authors: Miao Li, Xin Liu, Yongpeng He, Qingyin Zheng, Min Wang, Yu Wu, Yuanpeng Zhang, Chaoyun Wang
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Journal: Cell & Bioscience (2017): 27

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Journal: Cell Death & Disease (2017): e2705

Pyrroloquinoline Quinone, a Redox-active o-Quinone, Stimulates Mitochondrial Biogenesis by Activating SIRT1/PGC-1α Signaling Pathway
Authors: Kazuhiro Saihara, Ryosuke Kamikubo, Kazuto Ikemoto, Koji Uchida, Mitsugu Akagawa
Journal: Biochemistry (2017)

Resveratrol attenuates excessive ethanol exposure induced insulin resistance in rats via improving NAD+/NADH ratio
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A Snapshot of the Plant Glycated Proteome STRUCTURAL, FUNCTIONAL, AND MECHANISTIC ASPECTS
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Journal: Journal of Biological Chemistry (2016): 7621–7636

AMPK activation protects cells from oxidative stress-induced senescence via autophagic flux restoration and intracellular NAD+ elevation
Authors: Xiaojuan Han, Haoran Tai, Xiaobo Wang, Zhe Wang, Jiao Zhou, Xiawei Wei, Yi Ding, Hui Gong, Chunfen Mo, Jie Zhang
Journal: Aging cell (2016): 416–427

Cell-Line Selectivity Improves the Predictive Power of Pharmacogenomic Analyses and Helps Identify NADPH as Biomarker for Ferroptosis Sensitivity
Authors: Kenichi Shimada, Miki Hayano, Nen C Pagano, Brent R Stockwell
Journal: Cell chemical biology (2016): 225–235

 

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产品名称 货号
Cell Meter 胞内NADH / NADPH流式细胞分析试剂盒 Cat#15291

L-Lysine hydrochloride, cell culture reagent657-27-2


L-Lysine hydrochloride, cell culture reagent

简要描述:L-Lysine hydrochloride, cell culture reagent,产品型号:657-27-2。
同义词:(S)-2,6-二氨基己酸单盐酸盐;赖氨酸;钾
分子式:C6H14N2O2·HCl
分子量:182.6
贝尔斯坦注册号:3563889
EC编号:211-519-9
MDL 编号:MFCD00064564

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应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,综合

L-Lysine hydrochloride, cell culture reagent,产品型号:657-27-2

L-Lysine hydrochloride, cell culture reagent,描述:


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  7. 公司突出创新思维,提高工作效能,减低运作成本,为客户提供优惠的价格。

L-Tyrosine, cell culture reagent60-18-4


L-Tyrosine, cell culture reagent

简要描述:L-Tyrosine, cell culture reagent,产品型号:60-18-4。
同义词:β-对羟基苯丙氨酸;酪氨酸
分子式:C9H11NO3
分子量:181.191 克/摩尔
贝尔斯坦注册号:392441
EC编号:200-460-4
MDL 编号:MFCD00002606

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L-Tyrosine, cell culture reagent,产品型号:60-18-4

L-Tyrosine, cell culture reagent,描述:


L-酪氨酸用于细胞培养基,是 MEM 氨基酸溶液的成分。L-酪氨酸已用于从鸡空肠分离的上皮细胞中氨基酸转运系统 b0,+ 的细胞培养研究。

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L-Asparagine, anhydrous, cell culture reagent70-47-3


L-Asparagine, anhydrous, cell culture reagent

简要描述:L-Asparagine, anhydrous, cell culture reagent,产品型号:70-47-3。
同义词:(S)-2-氨基琥珀酸4-酰胺;L-天冬氨酸4-酰胺
分子式:C4H8N2O3
分子量:132.119 克/摩尔
贝尔斯坦注册号:1723527
EC编号:200-735-9
MDL 编号:MFCD00064401

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L-Asparagine, anhydrous, cell culture reagent,产品型号:70-47-3

L-Asparagine, anhydrous, cell culture reagent,描述:


L-Asparagine 用于细胞培养基,是 MEM 非必需氨基酸溶液的成分。L-Asparagine 已显示可增强培养的人结肠腺癌 Caco-2 细胞和培养的 IEC-6 肠上皮细胞中的鸟氨酸脱羧酶活性。在 L-天冬酰胺存在下,枯草芽孢杆菌的孢子萌发增加。以L-天冬酰胺为起始原料,通过手性合成制备了异恶唑啉RGD模拟血小板GPIIb/IIIa拮抗剂。L-天冬酰胺已被用于合成 4-azalysine 结构单元以应用于组合化学。

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关键应用

媒体组件 | 增强鸟氨酸脱羧酶活性| 增加孢子萌发

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DirectPCR Lysis Reagent (Cell)301-C


DirectPCR Lysis Reagent (Cell)

简要描述:DirectPCR Lysis Reagent (Cell) ,产品型号:301-C。
用于培养细胞
在 4℃ 下稳定长达 12 个月

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DirectPCR Lysis Reagent (Cell) ,产品型号:301-C。

DirectPCR Lysis Reagent (Cell) ,描述:

Viagen DirectPCR® DNA 提取系统是一种单管系统,用于从小鼠尾巴、耳塞、卵黄囊和培养细胞中快速制备 DNA。由 Viagen Biotech Inc. 的科学家开发的正在申请的成分允许生成的 DNA 提取物与用于基因分型的基因组 PCR 兼容。生物样品的粗提物与聚合酶链反应 (PCR) 等许多分子生物学级反应不相容,部分原因是粗提物中含有抑制剂。DirectPCR 试剂不仅介导生物样品的快速裂解,还含有抑制剂,可有效抑制粗裂解物对 PCR 扩增的抑制活性,同时最大限度地保持释放的基因组 DNA 的完整性。

简要程序
1. 在 DirectPCR® Lysis Reagent 中裂解尾部。
2. 85°C 孵育 45 分钟。
3. 使用 1 μl 裂解物进行 PCR 基因分型。

详细方案:  尾巴、耳朵、卵黄囊和培养细胞。

DirectPCR® 系统提供优于传统协议的优势,包括:
· 节省时间:更少的动手时间。用于 PCR 的粗尾裂解物!
· 省钱: 具有成本效益的反应
· 安全:无有机试剂。
· 环保: 减少浪费(有机试剂、试管、吸头等…)
· 可靠高效:几乎 100% 的成功率和高产量。

DirectPCR 裂解试剂(细胞)

301-C 50ml培养细胞

302-C 100ml培养细胞

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L-Arginine, Cell Culture Reagent74-79-3


L-Arginine, Cell Culture Reagent

简要描述:L-Arginine, Cell Culture Reagent,产品型号:74-79-3。
同义词:2-氨基-5-胍戊酸;(S)-2-氨基-5-胍基戊酸;精氨酸;R; (s)-2-氨基-5-[(氨基亚氨基甲基)氨基]戊酸
分子式:C6H14N4O2
分子量:174.204 克/摩尔
贝尔斯坦注册号:1725413
EC编号:200-811-1

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L-Arginine, Cell Culture Reagent,产品型号:74-79-3。

L-Arginine, Cell Culture Reagent,描述:

L-精氨酸在细胞培养中用作 MEM 氨基酸溶液的成分。

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N-Acetyl-L-cysteine, cell culture reagent616-91-1


N-Acetyl-L-cysteine, cell culture reagent

简要描述:N-Acetyl-L-cysteine, cell culture reagent,产品型号:616-91-1。
同义词:1-α-乙酰氨基-β-巯基丙酸;N-乙酰-L-半胱氨酸;N-乙酰基-3-巯基丙氨酸;
分子式:C5H9NO3S
分子量:163.191 克/摩尔
贝尔斯坦注册号:1724426
EC编号:210-498-3

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N-Acetyl-L-cysteine, cell culture reagent,产品型号:616-91-1。

N-Acetyl-L-cysteine, cell culture reagent,描述:

充当自由基清除剂并抑制可破坏细胞结构的活性氧的产生。它对谷胱甘肽的产生至关重要,谷胱甘肽是体内一种关键的抗氧化酶。它还被证明可诱导血管平滑肌细胞凋亡,表明这些细胞对氧化还原状态变化的反应不同于通常受抗氧化剂保护的其他组织。

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关键应用

粘液溶解剂



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L-Leucine, cell culture reagent61-90-5


L-Leucine, cell culture reagent

简要描述:L-Leucine, cell culture reagent,产品型号:61-90-5。
同义词:L-2-氨基-4-甲基戊酸;亮氨酸;升; α-氨基异己酸
分子式:C6H13NO2
分子量:131.175 克/摩尔
贝尔斯坦注册号:1721722
EC编号:200-522-0

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L-Leucine, cell culture reagent,产品型号:61-90-5。

L-Leucine, cell culture reagent,描述:

亮氨酸已被用作从古生物样本中回收 DNA 以进行 PCR 分析的分子标记。

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关键应用

分子标记 | 聚合酶链反应分析




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L-Methionine, cell culture reagent63-68-3


L-Methionine, cell culture reagent

简要描述:L-Methionine, cell culture reagent,产品型号:63-68-3。
同义词:(S)-2-Amino-4-(methylmercapto)butyric acid; L-2-氨基-4-(甲硫基)丁酸
分子式:C5H11NO2S
分子量:149.208 克/摩尔
贝尔斯坦登记号:1722294
EC编号:200-562-9

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L-Methionine, cell culture reagent,产品型号:63-68-3。

L-Methionine, cell culture reagent,描述:

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关键应用

预防肝功能损害的药物| 营养元素

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Cre reporter HEK293 Cell LineCRE01


Cre reporter HEK293 Cell Line

简要描述:Cre reporter HEK293 Cell Line,产品型号:CRE01。
收到后立即储存在液氮气相中。该产品按指示储存可稳定 6 个月。

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Cre reporter HEK293 Cell Line,产品型号:CRE01。

Cre reporter HEK293 Cell Line,描述:

ALSTEM 提供 Cre 重组酶报告基因 HEK293 细胞系 (CRE01)。该细胞系是通过转导携带人类 DNA 片段的慢病毒从 HEK293 细胞生成的,其中包含两个相同方向的 loxP 位点。当存在 Cre 重组酶时,loxP 位点两侧的基因组 DNA 被删除,导致通过 PCR 扩增出比野生型 DNA 更大的 DNA 片段。

  • 检测 Cre 重组酶活性的理想选择

Cre/LoxP 重组系统是一种多功能且强大的 DNA 操作工具,例如在细胞 DNA 的特定位点进行删除、插入、易位和倒位。该系统使用 Cre 重组酶重组一对 Lox 位点。根据 LoxP 位点的方向和距离,位于 LoxP 位点两侧的 DNA 可以被删除、反转或易位。

Cre 重组酶报告基因 HEK293 细胞系通过转导慢病毒衍生自 HEK293 细胞,该慢病毒携带人类基因组 DNA 片段,该片段包含在同一方向插入两个 loxP 位点(图 1A)。该细胞系作为检测 Cre 重组酶活性的灵敏报告基因非常有用。当用 Cre 表达质粒(pLenti-EF1-Cre-GFP-PGK-PURO,货号:CRE02)转染细胞时,插入在稳定细胞系中被删除,但在非转基因细胞或野生型细胞中没有。

输条件

干冰 – 隔夜运输

储存和稳定性

收到后立即储存在液氮气相中。该产品按指示储存可稳定 6 个月

质量控制

每个小瓶包含大约 1×10^6 个细胞,冷冻前存活率 >95%。每批细胞都经过冷冻保存恢复后的 Cre 活性、生长和活力测试,并且不含支原体和感受态慢病毒。

限制使用

仅供研究使用。不得用于诊断或治疗程序。



上海金畔生物科技有限公司

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