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ozbiosciences转染试剂：FlyFectin™FF50500/FF51000/FF55000

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ozbiosciences转染试剂：FlyFectin™

简要描述：FlyFectin™ 转染试剂是一种基于TEE 技术的强大试剂 ，专为获得高效且可重复的昆虫细胞转染而设计。ozbiosciences转染试剂：FlyFectin™

详细介绍

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品牌 OZ Biosciences 供货周期 一个月
应用领域 医疗卫生,化工,生物产业,制药,综合

ozbiosciences转染试剂：FlyFectin™ 


FlyFectin™ 转染试剂是一种基于TEE 技术的强大试剂 ，专为获得高效且可重复的昆虫细胞转染而设计。它适用于所有类型核酸的递送。FlyFectin™可用于多种应用，包括使用杆状病毒表达系统生产重组蛋白。 

FlyFectin™已有效地用于多种昆虫细胞。 Ag55、Anso、Asd43、Bm5、Cl8、Cpp512、High5、IPBL-SF21、Kc167、Ld652、Mos20、S2、Sf9、SL-2、SL-3、SPC-SL52。 

 

  • 专门研究昆虫细胞

  • 非常适合使用杆状病毒表达系统生产重组蛋白。

  • 无毒

  • 血清兼容

  • 简单、即用且快速

 

尺寸：

  • 500 µL：使用 1 µg DNA 进行 125 次转染

  • 1000 µL：1 µg DNA 进行 250 次转染

  • 5 mL：使用 1 µg DNA 进行 500 次转染

 

储存：4°C 

运输条件：室温

FF50500：500微升

FF51000：1毫升

FF55000：5毫升

钙离子荧光探针Fura-FF, AM CAS 348079-12-9-AAT Bioquest荧光染料

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上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙离子荧光探针Fura-FF, AM CAS 348079-12-9价格 2823
产品规格

10×50 ug

产品货号

钙离子荧光探针Fura-FF, AM CAS 348079-12-9

产品参数
Ex (nm) 336 Em (nm) 505
分子量 1023.80 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

产品基本信息

产品名称：钙离子荧光探针Fura-FF, AM

储存条件：-15℃避光防潮

保质期：24个月

 

产品物理化学光谱特性

分子量：1023.80

溶剂：DMSO

激发波长(nm)：363

发射波长(nm)：512

 

Journal: Biochemical and biophysical research communications (2013): 361–367

钙离子荧光探针Fura-FF五钾盐 [Fura-2FF, pentapotassium salt] *CAS 192140-58-2*-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Fura-FF五钾盐 [Fura-2FF, pentapotassium salt] *CAS 192140-58-2*价格 2823
产品规格

10×50 ug

产品货号

钙离子荧光探针Fura-FF五钾盐 [Fura-2FF, pentapotassium salt] *CAS 192140-58-2*

产品参数
Ex (nm) 336 Em (nm) 505
分子量 853.94 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

钙离子荧光探针Fura-FF, 五钾盐是美国AAT Bioquest研发的用于钙通量测定的试剂，在比例钙指示剂中，常用的是Fura-2和Indo-1。Fura-2可激发，而Indo-1可发射。对于比率成像显微镜，Fura-2是优选的，在比率成像中，更改激发波长比发射波长更实际。结合Ca2 +时，Fura-2表现出吸收位移，可通过扫描300至400 nm之间的激发光谱来观察，同时检测〜510 nm处的发射。Fura-2钾盐是一种不可渗透细胞的荧光探针，用于按比例模式检测Ca2+。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供优质的钙离子荧光探针Fura-FF, 五钾盐。

点击查看光谱

钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

实验方案

操作步骤

1.使用钙指示剂AM Esters加载细胞：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。 AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。 但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。 它们应该用高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）重新配制。 DMSO储备溶液应在-20°C下干燥储存并避光。 在这些条件下，AM酯应稳定数月。

以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。 该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM AM酯原液。

b）在实验当天，将钙指示剂溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。使用0.02％Pluronic®F-127在您选择的缓冲液（如Hanks和Hepes缓冲液）中制备1至10μM的工作溶液。对于大多数细胞系，我们建议钙指示剂的浓度为4-5 uM。细胞加载所需指标的确切浓度必须根据经验确定。为避免因过载和潜在染料毒性引起的任何伪影，建议使用可产生足够信号强度的小探针浓度。

c）如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白，可以在细胞培养基中加入丙磺舒（1-2.5 mM）或磺吡酮（0.1-0.25 mM），以减少脱酯化指标的泄漏。在室温或37°C下用钙指示剂酯孵育细胞20分钟至1小时。

d）在HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如2.5mM丙磺舒，如果适用）中洗涤细胞1-2次以除去过量的探针。

e）在所需的Ex / Em波长下进行实验。

 

2.测量细胞内钙响应：

        为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用等式：[Ca]free = Kd[F – Fmin]/Fmax – F]

        其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。 解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca2 +结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显著。 细胞内指标的原位校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca 2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2 +水平。 说明书中的表1列出了一些钙试剂的Kd值供您参考。

 

参考文献

An essential role of NAD (P) H oxidase 2 in UVA-induced calcium oscillations in mast cells
Authors: Zhi Ying Li, Wen Yi Jiang, Zong Jie Cui
Journal: Photochemical & Photobiological Sciences (2015): 414–428

Lasting inhibition of receptor-mediated calcium oscillations in pancreatic acini by neutrophil respiratory burst–A novel mechanism for secretory blockade in acute pancreatitis?
Authors: Hui Yuan Liang, Zhi Min Song, Zong Jie Cui
Journal: Biochemical and biophysical research communications (2013): 361–367

 

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钙离子荧光探针Fura-2,五钾盐 Cat#21025
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钙离子荧光探针Rhod-FF三钾盐-AAT Bioquest荧光染料

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钙离子荧光探针Rhod-FF三钾盐价格 4245
产品规格

1 mg

产品货号

钙离子荧光探针Rhod-FF三钾盐

产品参数
Ex (nm) 553 Em (nm) 577
分子量 891.00 溶剂 Water
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

钙离子荧光探针Rhod-FF, 三钾盐是美国AAT Bioquest生产的钙离子荧光探针，钙测量对于许多生物学研究至关重要。在结合Ca2 +后显示光谱响应的荧光探针使研究人员能够使用荧光显微镜，流式细胞仪，荧光光谱和荧光酶标仪来研究细胞内游离Ca2 +浓度的变化。Rhod-FF对Ca2 +具有较低的结合亲和力，适用于10至200 uM的Ca2 +测量。像母体Rhod-2指示剂一样，Rhod-FF在不存在二价阳离子的情况下基本上是无荧光的，并且在结合Ca2+时显示出强的荧光增强，并且没有光谱偏移。金畔生物是AAT Bioquest 的中国代理商，为您提供优质的钙离子荧光探针Rhod-FF, 三钾盐。

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钙离子篇：时间轴式讲解应用于钙离子检测的探针

实验方案

钙指示剂AM Esters的使用

1.带有钙指示剂AM酯：

        AM酯是非极性酯，其易于穿过活细胞膜，并且通过活细胞内的细胞酯酶快速水解。AM酯广泛用于非侵入性地将各种极性荧光探针装载到活细胞中。但是，使用AM酯时必须小心，因为它们易于水解，特别是在溶液中。它们应在使用前重新配制成高质量的无水二甲基亚砜（DMSO）。DMSO储备溶液可以在-20℃下干燥储存并避光。在这些条件下，AM酯应稳定数月。以下是我们推荐的将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯加入活细胞的方案。该方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

a）在高质量无水DMSO中制备2至5 mM Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的储备溶液。

b）在实验当天，将Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM溶解在DMSO中或将等份的指示剂储备溶液解冻至室温。在Hanks和Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（0.04％Pluronic®F-127）中制备10至20μM的染料工作溶液。细胞加载所需指示剂的确切浓度必须凭经验确定。

注意：非离子型洗涤剂Pluronic®F-127有时用于增加Cal-520 AM，Cal-590 AM或Cal-630 AM酯的水溶性。

c）如果您的细胞（如CHO细胞）含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒（1-2 mM）加入染料工作溶液中（终浓度为0.5-1 mM）以减少渗漏去酯化指标。

d）将等体积的染料工作溶液（来自步骤b或c）加入细胞板中。

e）将染料加载板在细胞培养箱中孵育60至90分钟，然后在室温下将板孵育另外30分钟。

注意：孵育染料超过2小时可以为某些细胞系提供更好的信号强度。

f）用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒，如果适用）替换染料工作溶液，以去除多余的探针。

g）在Ex / Em = 490 / 525nm（对于Cal-520 AM），540 / 5000nm（对于Cal-590 AM）或600 / 640nm（对于Cal-630 AM）进行实验。

 

2.测量细胞内钙响应：

为了确定溶液的游离钙浓度或单波长钙指示剂的Kd，使用以下等式：

[Ca]free = Kd[F ─ Fmin]/Fmax ─ F]

其中F是实验钙水平下指示剂的荧光，Fmin是不存在钙时的荧光，Fmax是钙饱和探针的荧光。

        解离常数（Kd）是探针对钙的亲和力的量度。 与校准溶液相比，荧光指示剂的Ca结合和光谱性质在细胞环境中变化非常显着。 细胞内指标的原位反应校准通常产生显着高于体外测定的Kd值。 通过在离子载体如A-23187,4-溴A-23187和离子霉素存在下将加载的细胞暴露于受控的Ca2+缓冲液来进行原位校准。 或者，细胞透化剂如洋地黄皂苷或X-100可用于将指示剂暴露于细胞外培养基的受控Ca2+水平。

 

参考文献

Activation of mitochondrial transient receptor potential vanilloid 1 channel contributes to microglial migration
Authors: Takahito Miyake, Hisashi Shirakawa, Takayuki Nakagawa, Shuji Kaneko
Journal: Glia (2015): 1870–1882

ER stress in human hepatic cells treated with Efavirenz: mitochondria again
Authors: Nadezda Apostolova, Leysa J Gomez-Sucerquia, Fernando Alegre, Haryes A Funes, Victor M Victor, Maria D Barrachina, Ana Blas-Garcia, Juan V Esplugues
Journal: Journal of hepatology (2013): 780–789

 

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钙离子荧光探针Rhod-5N,三钾盐 Cat#21072
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钙离子荧光探针Rhod-FF, AM-AAT Bioquest荧光染料

发表于由

上海金畔生物科技有限公司代理AAT Bioquest荧光染料全线产品，欢迎访问AAT Bioquest荧光染料官网了解更多信息。
钙离子荧光探针Rhod-FF, AM价格 4245
产品规格

1 mg

产品货号

钙离子荧光探针Rhod-FF, AM

产品参数
Ex (nm) 553 Em (nm) 577
分子量 1145.90 溶剂 DMSO
存储条件 在零下15度以下保存, 避免光照
产品概述

钙测量对于许多生物学研究至关重要。结合 Ca2+ 后显示光谱响应的荧光探针使研究人员能够通过使用荧光显微镜、流式细胞术、荧光光谱和荧光酶标仪来研究细胞内游离 Ca2+ 浓度的变化。 Rhod-FF AM 具有细胞渗透性，在细胞内经酯酶水解后生成 Rhod-FF。 Rhod-FF 对 Ca2+ 的结合亲和力较低，适用于 10 至 200 uM 的 Ca2+ 测量。与Rhod-2 指示剂一样，Rhod-FF 在没有二价阳离子的情况下基本上不发出荧光，并且在结合 Ca2+ 时表现出荧光，且没有光谱偏移。

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适用仪器

荧光显微镜  
Ex: TRITC 滤波片组
Em： TRITC 滤波片组
推荐孔板: 黑色透明底板

 

荧光酶标仪  
Ex: 540 nm
Em： 590 nm
Cutoff： 570 nm
推荐孔板: 黑色透明底板
读取模式: 底读模式/可分液处理

 

溶解方案(溶剂以说明书为准)

  0.1 mg 0.5 mg 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 87.268 µL 436.338 µL 872.676 µL 4.363 mL 8.727 mL
5 mM 17.454 µL 87.268 µL 174.535 µL 872.676 µL 1.745 mL
10 mM 8.727 µL 43.634 µL 87.268 µL 436.338 µL 872.676 µL
实验方案

实验方案

储备溶液配制

在高质量无水 DMSO 中制备 2 至 5 mM Rhod-FF AM 储备溶液。

 

工作溶液配制

Rhod-FF AM工作溶液
1.实验当天，将 Rhod-FF AM 溶解在 DMSO 中或将指示剂储备溶液的等分试样解冻至室温。

2.在您选择的缓冲液（例如 Hanks 和 Hepes 缓冲液）中用 0.04% Pluronic® F-127 制备 2 至 20 µM Rhod-FF AM 工作溶液。对于大多数细胞系，建议终浓度为 4-5 μM 的 Rhod-FF AM。细胞加载所需指示剂的准确浓度必须根据经验确定。

注：非离子洗涤剂 Pluronic® F-127 有时用于增加 Rhod-FF AM 的水溶性。可以从金畔购买各种 Pluronic® F-127 解决方案。
注：如果您的细胞含有有机阴离子转运蛋白，可将丙磺舒 (1-2 mM) 添加到染料工作溶液中（孔中的最终浓度为 0.5-1 mM），以减少脱酯后探针的泄漏。各种 ReadiUse 丙磺舒产品，包括水溶性、钠盐和稳定溶液，均可从金畔购买。

 

操作步骤

以下是我们推荐的将AM酯加载到活细胞中的方案。本方案仅提供指南，实际应根据您的具体需求进行修改。

1.在生长培养基中培养细胞过夜。
2.第二天，将 1X Rhod-FF AM 工作溶液添加到细胞板中。
注意：如果您的化合物干扰血清，请在上样前用新鲜的 HHBS 缓冲液替换生长培养基。
3.将载有染料的板在细胞培养箱中于 37°C 下孵育 30 至 60 分钟。
注：孵育染料超过 1 小时可以提高某些细胞系的信号强度。
4.用HHBS或您选择的缓冲液（含有阴离子转运蛋白抑制剂，如1mM丙磺舒）代替染料工作溶液，以去除任何多余的探针。
5.根据需要添加刺激剂，并使用配备 Indo-1 滤光片组的荧光显微镜或包含可编程液体处理系统（如 FlexStation）的荧光酶标仪同时测量荧光

 

试剂应用文献

Activation of mitochondrial transient receptor potential vanilloid 1 channel contributes to microglial migration
Authors: Miyake, Takahito and Shirakawa, Hisashi and Nakagawa, Takayuki and Kaneko, Shuji
Journal: Glia (2015): 1870–1882
ER stress in human hepatic cells treated with Efavirenz: mitochondria again
Authors: Apostolova, Nadezda and Gomez-Sucerquia, Leysa J and Alegre, Fern and o , undefined and Funes, Haryes A and Victor, Victor M and Barrachina, Maria D and Blas-Garcia, Ana and Esplugues, Juan V
Journal: Journal of hepatology (2013): 780–789

 

参考文献

Ionic calcium determination in skim milk with molecular probes and front-face fluorescence spectroscopy: simple linear regression
Authors: Gangidi RR, Metzger LE.
Journal: J Dairy Sci (2006): 4105
 
Measurement of limestone biodeterioration using the Ca2+ binding fluorochrome Rhod-5N
Authors: McNamara CJ, Perry TDt, Bearce K, Hern and ez-Duque G, Mitchell R.
Journal: J Microbiol Methods (2005): 245